PRACTICA #12 MICOSIS SUBCUTANEAS OBJETIVO DE LA PRACTICA. Que el alumno compare las diferencias macro y microscópicas de los hongos y bacterias causantes de micosis subcutáneas. INTRODUCCION En las micosis subcutáneas el agente causal penetra por heridas. Las micosis de este tipo más conocidas en México son los micetomas, la esporotricosis y la cromomicosis. Cuando el agente etiológico es una bacteria actinomicetal, se le denomina actinomicetoma, por ejemplo: Nocardia brasiliensis, Nocardia asteroides, Actinomadura madurae, Actinomadura pelletieri, Streptomyces somaliensis. En México la mayoría de los micetomas son causados por bacterias, principalmente Nocardia. Cuando esta enfermedad es causada por hongos, se le denomina eumicetoma, por ejemplo: Madurella mycetomatis, Madurella grisea, Pyrenochaeta romeroi, Scedosporium apiospermum.. El Micetoma es un síndrome, que se caracteriza por localizarse inicialmente en el tejido subcutáneo y de evolución crónica. Clínicamente, se observa un aumento de volumen en la región afectada y la formación de fístulas, por las que drena un material seropurulento, conteniendo los "granos". Estos, contienen en su interior conglomerados de hifas del patógeno con aspecto de “bolas de estambre”. Diagnóstico del micetoma: - examen directo al microscopio de la secreción de una fístula que esté activa (la que cause prurito). Si está cerrada se abre con ayuda de una aguja de disección; el exudado se recoge con el asa para cultivo y para observación en un portaobjetos. Los “granos” fúngicos aunque son muy pequeños, pueden distinguirse a simple vista, a diferencia de los de actinomycetos que sólo se observarse bajo el microscopio. - biopsia de las lesiones e histopatología - cultivo de las lesiones o de un fragmento de biopsia La Esporotricosis es producida por el hongo Sporothrix schenckii, un hongo dimórfico, que afecta primordialmente la piel y los linfáticos, dando lesiones de aspecto gomoso y que rara vez profundiza. Diagnóstico de la esporotricosis: El cultivo de la lesión es el mejor método de diagnóstico, aunque la intradermorreacción con esporotricina es bastante específica. La Cromomicosis es causada principalmente por hongos "dematiáceos" (negros). En México son comunes Fonseca pedrosoi, Cladosporium y Phialophora verrucosa, produciendo nódulos verrucosos localizados preferentemente en miembros inferiores, expuestos a traumatismos. Diagnóstico de la Cromomicosis: - Examen directo al microscopio de escamas de las lesiones, entre porta y cubre con KOH, dejando reposar 30 min. - Cultivo de escamas en Sabouraud y micosel-agar, incubando 30-40 días a 28 C, hasta observar el desarrollo de las colonias. MATERIALES Y METODOS 1. Haga preparaciones entre porta y cubre con una gota de lactofenol, de los hongos causantes de micosis subcutáneas, utilizando cepas puras. De preferencia, se recomienda que el alumno reciba del profesor las preparaciones fijas de los hongos, para evitar el riesgo de la manipulación por los alumnos y contacto con las esporas de los hongos. Haga dibujos detallados del micelio y sus esporas observados al microscopio y compare con claves taxonómicas para la identificación. Complemente con la descripción de la morfología colonial de cada uno en el cultivo. 2. Tiña Actynomadura madurae y Nocardia brasiliensis con Gram y también con Ziehl-Neelsen . De preferencia, también en estos casos reciba preparaciones fijas. Haga dibujos, con sus colores correspondientes. 3. Compare la morfología colonial de las bacterias con la de los hongos. Describa las diferencias. Haga dibujos. 4. Haga observaciones al microscopio, de laminillas conteniendo cortes histológicos de tejidos infectados con estos hongos. RESULTADOS, DISCUSION Y CONCLUSIONES. Note las diferencias del micelio entre las bacterias actinomycetales y los hongos. Qué dificultades tuvo en las observaciones de los patógenos al microscopio, al comparar con los dibujos y fotografías de los libros de referencia. CUESTIONARIO 1. Que zonas de México son epidémiológicas de micetoma y de esporotricosis. 2. Que núcleos de la población en México serían los más expuestos a las micosis subcutáneas. 3. Cómo se caracterizan las células fumagoides en los hongos dematiáceos