AGAR CHOCOLATE SUPLEMENTADO Medio Agar Chocolate Suplementado INTRODUCCIÓN: El medio de CHOCOLATE preparado por MEDIBAC LAB es un medio permite el crecimiento de microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales, por ejemplo especies de Streptococcus, Haemophilus y Neisserias patógenas. COMPONENTES 1. Funda por 10 unidades 2. Inserto MATERIALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS: 1. Asas Bacteriológicas 2. Guantes Estériles 3. Tapa bocas 4. Estufa a 37°C 5. Mechero de Bunsen. METODOLOGÍA: Principio del método: El medio de cultivo es ampliamente nutritivo por la presencia de peptona, tripteína, extracto de levadura, extracto de corazón y almidón. El agregado de sangre y suplemento VITOX con solvente aporta nutrientes, vitaminas y minerales adicionales. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el agente solidificante. El agar GC Base para agar CHOCOLATE se prepara a partir del medio de cultivo deshidratado, materia prima producida por la casa OXOID y tiene la siguiente composición: g/ l Special peptone............................................15.0 Corn starch.....................................................1.0 g Sodium Chloride..............................................5.0 g Di-potassium hydrigen phosphate...................4.0 g Potassium hydrogen phosphate......................4.0 g Agar...............................................................10.0 g VITOX SUPPLEMENT (OXOID) REHYDRATION FLUID Distilled water……………….10.0ml Glucose……………………….1.0g VITOX Vitamin B12…………………..0.1mg Adenine SO4……………….10.0mg L- glutamine………………..100.0mg Guanine HCl…………………0.3mg p- Aminobenzoic acid………0.13mg L- cystine……………………..11.0mg NAD (Coenzyme I)……………2.5mg Cocarboxylase………………...1.0mg Ferric nitrate……………………0.2mg Thiamine HCl…………………0.03mg Cysteine HCl…………………..259.0mg PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS: La placa de agar Chocolate suplementado, de viene lista para ser utilizada. CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS: Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro, colocando las placas en posición invertida para evitar que el agua de condensación pueda caer sobre la superficie del medio, envueltas en su envase original, hasta justo antes de usarlas. Las placas pueden inocularse hasta su fecha de caducidad (ver la etiqueta en el paquete) e incubarse durante los períodos de incubación recomendados. Este producto debe manipularse con cuidado evitando movimientos bruscos o caídas que puedan resquebrajar la capa del medio. De acuerdo al estudio (Condiciones de Almacenamiento de los Medios) realizados por Medibac Lab. Los medios de cultivos preparados para su transportación tienen una tolerancia de hasta 24 horas con una temperatura de 2 a 35°C, una vez llegado a su destino final el mismo debe ser almacenado a una temperatura de 4 a 8°C. Fecha: 06/04/2015 Rev.01 Nota: El producto debe evitar temperaturas inferiores a -0°C para evitar congelación del medio, lo que ocasionaría el deterioro del mismo, y evitar temperaturas superiores a 35°C para que no produzca condensación interna en la placa lo que podría afectar la fidelidad de los resultados. Conservado en condiciones óptimas el medio es estable hasta la fecha de expiración señalada. PROCEDIMIENTO: Cualquier muestra clínica puede ser procesada en este medio 1- Con asa bacteriológica estéril trabajando siempre a la llama del mechero, tomar una mínima muestra. 2. Sembrar suavemente sobre la superficie tersa del medio por el procedimiento de agotamiento. 3. El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán del microorganismo que se quiera recuperar. En general se recomienda: Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 º C durante 18 a 24 horas. Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmósfera con 5 % de Co2, a 35-37 ºC durante 18-48 horas. 4. Al término de horas de incubación examinar el cultivo y determinar los estudios a seguir según las características de las colonias. CONTROL DE CALIDAD: El agar Chocolate suplementado tiene un estricto control de calidad a lo largo del proceso de producción. El producto final tiene un cuidadoso control para asegurar que cada lote llene las especificaciones del medio: Color, consistencia, tersura, esterilidad, pH. ASPECTOS FISICOS DEL MEDIO ESTADO Medio solido de color marrón, envasado en placa de petri. CUMPLE Color del medio solido Marron CUMPLE pH 7,0 a 7,5 7,2 La consistencia del medio debe ser ligeramente dura, para que permita la siembra de muestras sin romperse. CUMPLE Apariencia Consistencia 4 mm Volumen del medio 18cc que deben dar con una capa de 4 - 5 mm de agar en placa de petri. Tersura El medio debe ser completamente liso, no debe presentar rugosidad ni burbujas que dificulten la siembra. CUMPLE El medio antes de usarse debe encontrarse libre de cualquier crecimiento microbiano CUMPLE Esterilidad El desempeño del medio se controla mediante el cultivo de cepas control ATCC de: Streptococcus pyogenes 19615 Streptococcus pneumoniae 6305 Haemophilus influenzae 19418 Neisseria gonorrhoeae 19424 VALOR DE REFERENCIA: Este medio al usarse, debe ser estéril y permitir un desarrollo óptimo de las cepas de referencia. PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS: - Solamente para uso diagnóstico in vitro. uso profesional exclusivo. - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado. -No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto. - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y manipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad establecidas por el laboratorio. - Las características del producto pueden alterarse si no se conserva apropiadamente. - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del mismo según reglamentaciones vigentes. Laboratorio Fabricante: Medibac Química Responsable: Dra. Juana Cedeño Vélez. Fecha: 06/04/2015 Rev.01