Diagnóstico de infecciones gastrointestinales

Diagnóstico de las infecciones gastrointestinales
Dra. Silvia Hernáez Crespo, Servicio de Microbiología Clínica y Control de la Infección, Hospital
Universitario de Basurto (Bilbao)
BD-MAXTM es una plataforma de diagnóstico
molecular por PCR que actualmente dispone en el
mercado de diferentes equipos (kits) de diagnóstico
molecular. Asimismo es un sistema abierto donde
se pueden realizar técnicas de PCR caseras (in
house) de diagnóstico molecular.
El sistema automatiza la preparación de la
muestra,
la
lisis
de
los
microorganismos
Dra. Silvia Hernáez
investigados, la extracción, purificación y concentración del ADN, la rehidratación de
los reactivos, la amplificación de las secuencias diana y la detección mediante RTPCR. Todas las pruebas incluyen un control interno que se introduce desde la
extracción.
En el Servicio de Microbiología Clínica y Control de la Infección del Hospital
Universitario de Basurto (Bilbao) se ha probado el panel de bacterias entéricas (Enteric
Bacterial Panel, EBP) para realizar la detección cualitativa directa de patógenos
bacterianos entéricos, a partir de muestras de heces. Las dianas de las bacterias a
estudio se muestran en la figura siguiente:
BD
MAXTM
Prueba diagnóstica in vitro para realizar la detección
cualitativa directa de patógenos bacterianos entéricos a partir de
muestras de heces.
Patógenos incluidos:
i Salmonella spp. (gen SpaO)
ENTERIC
BACTERIAL
PANEL
(EBP)
ii Campylobacter spp.(C. jejuni y C. coli) (gen tuf)
iii Agentes causantes de “shigellosis”
iv E. coli enterohemorrágico (EHEC) productor de toxina Shiga
(genes stx, 1a, y sxt 2a)
V Control interno
Procedimiento diagnóstico
Asa de siembra 10 µl. + tubo de tampón de muestra BD MAX (SBT)
En este estudio preliminar se realizaron 62 determinaciones, observándose un
14,5% de inhibiciones, indicando que es muy importante realizar el inóculo de manera
adecuada. Se observó un 100% de concordancia de los resultados de PCR negativa
con los cultivos. Se han podido detectar procesos mixtos producidos por varias
bacterias a la vez.
Entre las conclusiones del estudio se pueden indicar:
-
Gran sensibilidad: presenta una detección muy superior de los patógenos que
estudia a los métodos tradicionales (cultivo, ELISA).
-
Especificidad: si bien en los estudios publicados en la literatura se demuestra
una gran especificidad, en nuestro estudio deberemos de ampliar el número de
muestras.
-
Ahorro de tiempo: esto llevará consigo la rapidez en tomar decisiones en la
gestión y tratamiento del enfermo agudo, incluyendo el uso de antibióticos y la
toma de las medidas necesarias para el control de la infección.
-
Facilidad en la realización de la técnica.
-
Necesidad de cultivo posterior de resultados positivos para la recuperación de
la cepa, y si fuera necesario realización de pruebas fenotípicas de tipificación y
antibiograma.
-
Falta la detección de otros posibles enteropatógenos como Yersinia,
Aeromonas, etc., lo que lleva consigo la necesidad de complementar la técnica
de biología molecular con placas adecuadas para su aislamiento y
caracterización.