INSTRUCCIONES DE USO Revisión 1 Ene 2013 AGAR CITRATO DE SIMMONS Agar Citrato Simmons presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1014 Agar Citrato Simmons presentación tubos 10 ml. Caja 20 unidades. Catálogo 4001 USO PREVISTO Agar Citrato Simmons está recomendado para la diferenciación de bacterias gran negativas mediante la utilización de citrato. FORMULA EN g/l Cloruro Sódico 5.00 Sulfato Magnésico 0.20 Citrato Sódico 2.00 Azul Bromotimol 0.08 Fosfato de Amonio Dihidrogenado 1.00 Agar Bacteriológico 15.00 Fosfato Dipotásico 1.00 Final pH 6.9 ± 0.2 a 25ºC PREPARACION Agar Citrato Simmons presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1014 (Medio deshidratado) Suspender 24.3 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y calentar agitando frecuentemente. Dejar hervir durante un minuto o hasta disolución completa. Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave a 121ºC durante 15 minutos. Dejar enfriar en posición inclinada (con 1-1.5 cm de profundidad en la base). Los tubos preparados deben almacenarse entre 2-8°C. El color del medio preparado es verde azulado El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar el medio. La presentación de Agar Citrato de Simmons tubos 10 ml. Caja 20 unidades. Catálogo 4001.(Medio preparado). Listo para su uso. PRINCIPIO Y APLICACIÓN AGAR CITRATO SIMMONS es utilizado para de diferenciación de bacterias gram negativas mediante la utilización de citrato. Es un medio formado por sales inorgánicas, en el que una sal de amonio es la única fuente de nitrógeno y el citrato es la única fuente de carbono. Está recomendado para la diferenciación de coliformes aisladas a partir de muestras clínicas. Es utilizado como parte de las reacciones IMVIC (siglas en ingles de Indol, Rojo de Metilo, Voges Proskauer, Citrato) El Sulfato de magnesio es cofactor de varias reacciones metabólicas. El Cloruro sódico mantiene el balance osmótico. El Fosfato dipotásico actúa como buffer. El Azul de bromotimol es el indicador de pH. El fosfato de amonio dihidrogenado es la única fuente de nitrógeno. El Citrato sódico la única fuente de carbono. El Agar bacteriológico es el agente solidificante. Los organismos capaces de utilizar el fosfato de amonio dihidrogenado y citrato sódico como únicas fuentes de nitrógeno y carbono, respectivamente, crecerán en este medio y producirán una reacción alcalina, detectada por el cambio de color del indicador de azul de bromotimol de color verde (neutro) a azul (alcalino). Escherichia coli, Shigella, no crecen en este medio. Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella utilizan el citrato y producen la típica coloración azul. 3 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com TIPO DE MUESTRAS Bacterias aisladas de heces. La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en Microbiología Clínica. PROCEDIMIENTO 1.- Inocular los agares inclinados con el crecimiento de un cultivo puro utilizando un inoculo diluido. 2.- Incubar todos los tubos a 35 ± 2°C durante 24-48en atmosfera aerobia. 3.- Lectura e interpretación de los resultados CONTROL MICROBIOLOGICO Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de células tipo, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 24 - 48 horas. Microorganismos Desarrollo Color Medio Bueno Inhibido Bueno Inhibido Bueno Bueno Azul Verde Azul Verde Azul Verde Enterobacter aerogenes ATCC 13048 Escherichia coli ATCC 25922 Salmonella enteritidis ATCC 13076 Shigella dysenteriae ATCC 13313 Salmonella typhimurium ATCC 14028 Salmonella typhi ATCC 19430 BIBLIOGRAFIA Simmons. J. Inf. Dis. 39:209, 1926. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. Eleventh Edition. APHA Inc. New York, 1960. Edwards & Ewing. Enterobacteriaceae. USPHS. Publications 743. Washington, 1972. Torregrosa and Ortiz, Pediatrics 59:35. 1961. ISO 10273. Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the detection of presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica Diagnostico in vitro Solo para uso profesional ISO Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com ALMACENAMIENTO Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación. Utilizable hasta la fecha de caducidad. 25ºC 2ºC Tubos preparados almacenar entre 2-8°C Utilizable hasta la fecha de caducidad. Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 4 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com