Búsqueda de Usos Alternativos de Própoleos en el Control Biológico de Hongos Fitopatógenos Sosa Lopez, Angela A. - Cabrera, María G. - Alvarez, Roberto E. - Verdun, Carolina E. Facultad de Ciencias Agrarias. UNNE. Sgto. Cabral 2131 - (3400) Corrientes - Argentina. E-Mail: avallejos@agr.unne.edu.ar ANTECEDENTES El propóleos se define como un conjunto de sustancias resinosas, gomosas y balsámicas, de consistencia viscosa, recogidas por las abejas (Apis melifera), de ciertas partes de especies vegetales, que transportan al interior de la misma modificándolas con ceras y secreciones salivares (Bianchi, E. 1996). En el interior de la colmena las abejas los utilizan para consolidar los componentes estructurales, tapar agujeros y para barnizar el interior de la colmena (incluidos los panales) con fines desinfectantes. (Bedascarrasbure et. al., 1999) Se han identificado mas de 160 compuestos, de los cuales un 50% son compuestos fenólicos, a los cuales se les atribuye acción farmacológica. Los principales fenoles identificados son: flavonoides, ácidos aromáticos y sus ésteres, aldehídos aromáticos, cumarinas, triglicéridos fenólicos. La composición de los propóleos depende básicamente de las fuentes vegetales donde se originaron y de la función especifica dentro de la colonia. Trabajos preliminares han encontrado mayor porcentaje de compuestos fenólicos en el propóleos que recubre los panales que en el destinado a reducir el ingreso a la colmena (Bedascarrasbure et. al., 1999 ). Investigaciones científicas develan las respuestas a muchos interrogantes acerca de los mecanismos de acción que explican sus propiedades cicatrizantes, estimulantes del sistema inmunológico y antimicrobiana, anticancerígena, etc. Lo anterior ha traído como consecuencia una creciente utilización de productos en base a propóleos como suplementos dietarios, en cosmetología, medicina veterinaria, etc. (Bedascarrasbure et. al. , 1999). En términos de acción farmacológica, los principales constituyentes del propóleos son los compuestos fenólicos. Estos se caracterizan por la presencia de al menos un grupo oxidrilo unido directamente a un anillo aromático. En la naturaleza podemos encontrar diversos tipos de compuestos fenólicos entre los que se pueden citar los ácidos fenólicos (benzoico, cafeico, ferúlico y cinámico) y los flavonoides. (Bedascarrasbure el. al. 1999 a ). Los flavonoides del propóleos se encuentran ampliamente distribuidos en el reino vegetal, en las plantas superiores y, especialmente, en aquellas con sistema vascular. Se encuentran en las partes aéreas de las plantas, en los capullos y hojas jóvenes. Son compuestos fenólicos, responsables de la coloración de numerosas flores y de ciertas frutas. Los flavonoides presentan no menos de 41 acciones farmacológicas, entre las que se destaca por su proyección terapéutica la acción que ejerce sobre la red capilar, disminuyendo su fragilidad y su permeabilidad. Algunos flavonoides presentes en los propóleos poseen una acción similar a la del ácido nicotínico, funcionando como sistema oxidorreductor reversible, en sinergia con el ácido ascórbico. Los flavonoides absorben radiación electromagnética en la zona UV - VIS y de esta forma representan una protección natural para las plantas contra la radiación UV del sol. Esto explica el efecto protector sobre la piel de ciertos preparados en base a propóleos. Por otra parte presentan una barrera química de defensa contra microorganismos: hongos, bacterias y virus (Asis 1985-1989). El interés en los flavonoides del propóleos se debe a que evidentemente ellos son parte responsable de la actividad fisiológica del mismo. Desde este punto de vista, en principio, los mas interesantes de identificar y cuantificar son: Quercitina, Kaempferol, Naringenina, Acacetina, Apigenina, Pinocembrina y Galangina. Actuando en forma sinérgica con los anteriores se encuentran los siguientes compuestos fenólicos: Acido cafeico, Acido ferúlico, Acido cinámicoGonzález Guerra, et al 1997). Estudios bacteriológicos in vivo e in vitro realizados en Rusia en 1975 y en Cuba en 1988 confirmaron la acción bacteriostática y bactericida sobre gérmenes gram positivos como estafilococo dorado y estreptococo betahemolítico, así como también sobre algunos gérmenes gram negativos. Los principales componentes responsables de las propiedades antibacterianas son los flavonoides (galangina y pinocembrina) y los derivados de los ácidos benzoico, ferúlico y cafeico. Por su acción antimicótica se han obtenido excelentes resultados en micosis cutáneas, bucales e incluso genitales causadas por Candida albicans. (González Guerra et al 19997) Su composición química es bastante compleja. Básicamente se compone de un 50-55% de resinas y bálsamos, 30-40% de cera de abeja, 5-10% de aceites esenciales o volátiles, 5% de polen y 5% de materiales diversos (orgánicos y minerales). Estos componentes extraídos por la abeja del reino vegetal son en gran medida responsables de las propiedades antimicrobiana, antimicótica, inmunomoduladora y antioxidante del propóleos (Propavko, S.A. et al 1980). Analizando estos antecedentes en otros campos de las ciencias, y no hallando referenciascon patógenos de plantas ornamentales, en el paías, se planteó la hipótesis de trabajo en la que se propuso como objetivo, determinar la acción fungicida de los propóleos en el control biológico de hongos fitopatógenos (Gonzalez Guerra et al 1997). MATERIALES Y MÉTODOS Desde principios de 1999 se trabajó con 14 muestras de propóleos provenientes del NEA; determinándose el índice de oxidación (Bianchi,1994); y las reacciones cualitativas ante los compuestos flavonoides (Normas Rusas, 1997). Se seleccionaron de acuerdo a estos parámetros 3 muestras de propóleos, proveniente de las provincias de: Corrientes, Chaco y Misiones (Fig. 1). Fig. 1. Muestras de propóleos seleccionadas para esta experiencia. En el laboratorio de fitopatología (UNNE), se ensayaron dos cepas de Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc., agente causal de las enfermedades llamadas comunmente“antracnosis” (Fig.2). Se realizaron aislamientos de cepas de C. gloeosporioides desde plantas enfermas de Syngonium phodofillum; Aglaonema spp., Dieffenbachia spp., Anthurium spp., Begonia spp., Codiaeum spp. , en medio agarizado APG, pH= 7. Se comprobó su patogenicidad inoculando experimentalmente estas especies (Fig.3). Para probar las propiedades antifúngicas del propóleos se hicieron pruebas in vitro en laboratorio; seleccionando dos de las cepas de C. Gloesporoides que se sembraron en el medio agarizado donde previamente se inoculó la resina. Para ello, las distintas muestras de propóleos procedentes de las tres provincias del NEA (Chaco,Corrientes, Misiones) se diluyeron al 1% en alcohol etílico de 96· G.L. y se conservaron en heladera durante tres días, agitándose periódicamente. De esas soluciones se tomaron alicuotas de 0,1; 0,2 y 0,4 ml que fueron sembradas en el medio agarizado según diseño tipo antibiograma. Se incubò en laboratorio bajo luz cercana al UV durante siete días, realizando observaciones diarias del desarrolllo fúngico. Fig.2. Colonia de Colletotrichum gloeosporioides patògeno utilizado en la experiencia. Fig 3.Sìntomas de antracnosis en Syngonium podophyllum causado por C. Gloeosporioides. DISCUSIÓN DE RESULTADOS De acuerdo a los resultados preliminares obtenidos de este estudio, el propóleos procedente de la provincia de Misiones, en las diluciones con que se trabajó (0,1, 0,2 y 0,4 ml), se comportó como más eficiente en el control del desarrollo fúngico, como se observa en la Fig. 4. Este resultado se opone a lo esperado al confortar el comportamiento de los hongos frente a la presencia de las resinas probadas, si tomamos en cuenta lo informado por J. Maidana (1998). Este investigador al no hallar diferencias en la calidad de propóleos, opina que no hay “propóleos malos”. La variabilidad en el comportamiento antifungoso de los propóleos en estudio, se debería a la mayor concentración de principios activos flavanoides de la resinas derivadas de la naturaleza de las diferentes especies vegetales que les dieron origen, resultado que coincide con lo expuesto por este investigador. De lo expresado, se infiere que las características del propóleos misionero, al poseer mayor poder de oxidación y presencia de compuestos flavonoides, (Maidana, J., 1998) actúa con un potencial antimicótico más elevado, abriendo así, la espectativa de su uso alternativo como controlador biológico de hongos fitopatógenos, como C. Gloesporoides, en el cultivo de ornamentales. Convendría continuar su ensayo con otras especies de hongos, para determinar su potencial como fungicida de amplio espectro puesto que se los podría usar como biocontrolador de otros patógenos de mayor peligro en la agricultura que los estudiados en este trabajo y probando por ejemplo distintas concentraciones. Convendría que los técnicos y agricultores tuvieran en cuenta usar los propóleos como alternativa válida en el biocontrol de hongos fitopatógenos, hipótesis potencialmente factible por lo observado por otros investigadores y utilizarlos con los hongos estudiados y otros diferentes. De este modo se potenciaría el control de fitopatógenos lo que significaría abrir nuevas espectativas de una agricultura creciente y sostenible, en armonía con el medio ambiente plenamente equilibrado y saludable. Fig. 4. Comportamiento de C. Gloeosporioides en presencia de propòleos de Misiones. CONCLUSIONES De los resultados preliminares de este trabajo, se concluye que el propóleo procedente de la provincia de Misiones; posee propiedades antifúngicas en las concentraciones estudiadas; que coinciden con los parámetros de mayor poder de oxidación, y de presencia de compuestos flavonoides, derivados de la diferentes especies vegetales de la región de origen de la resina. BIBLIOGRAFÍA 1. Asís, M. (1985) : ¨Los productos de las colmena¨. Ed. CIDA, La Habana, Cuba. 2. Asís, M. (1989): ¨Propóleos: el oro púrpura de las abejas¨. Ed. CIDA, La Habana, Cuba. 3. Bedascarrasbure, E. ; Maldonado L. ; Fierro Morales, W: ; Bracho , J. y Maidana J. (1999) a). 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Norma RST-RSFSR-317-77. 1997. ¨ Propóleos¨. 11. Propavko, S.A.; Sokolov, I. V. (1980): “Fuentes vegetales del propóleos”, en pchelovodstvo Nº 2. Pág. 28.