ESTUDIO ANATÓMICO E HISTOLÓGICO DEL APARATO REPRODUCTOR FEMENINO DE LA COCHINILLA DE JARDÍN Armadillidium vulgare (LATREILLE, 1804) María de los Ángeles Mora-Villa y Hortensia Montellano-Rosales. Laboratorio de Embriología, Departamento de Morfología, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, Instituto Politécnico Nacional., Prolongación de Carpio y Plan de Ayala, s/n. Colonia Casco de Santo Tomás, C.P. 11340 México, D.F. Tel. 57296300 Ext. 62390. angel_es_micamuso@hotmail.com. RESUMEN. Se estudió anatómica e histológicamente el aparato reproductor femenino de Armadillidium vulgare. Se trabajó con 18 hembras sacrificadas en julio, el material se fijó con formol al 10% durante 48 horas. Seis aparatos se tiñeron con la técnica verde luz para su estudio anatómico, en tanto que los 12 restantes se procesaron histológicamente con la técnica hematoxilinaeosina. Anatómicamente, los ovarios y oviductos dobles desembocan separadamente en su correspondiente gonoporo, los ovarios de forma sacular presentan tres cordones suspensorios; en su extremo posterior se comunican con el oviducto que continúa en una dilatación y finalmente cada oviducto desemboca en su gonoporo. Histológicamente los cordones suspensorios están constituidos por músculo estriado; los ovarios saculares presentan desarrollo folicular en la pared ovárica, observándose ovocitos esféricos con la vesícula germinal central, prominente nucléolo y los gránulos de vitelo están rodeados por una capa de células foliculares planas; la cámara incubadora cuenta con epitelio glandular. Palabras clave: Armadillidium vulgare, anatomía, histología, folículos. Anatomical and Histological Study of Female Reproductive Tract of Common Woodlouse Armadillidium vulgare (Latreille, 1804) ABSTRACT. We made anatomical and histological analysis of the female reproductive tract of common woodlouse Armadillidium vulgare. Eighteen females obtained in July were dissected. Reproductive tract was fixed in 10% formalin for 48 hours. Six tracts were stained with light green technique for anatomical study, while the remaining 12 were processed histologically with hematoxylin-eosin technique. Anatomical study shows that each ovary and their double oviduct lead to their corresponding gonopore separately. Saccular ovaries posesses three strands forming suspenders. At its posterior portion, ovaries communicate with the oviduct, which forms a dilatation; finally, each oviduct disembogues into a single gonopore. Histological analysis shows that suspensory cords are constituted of striated muscle; saccular ovaries present follicular development at level of ovarian wall. Spherical oocytes with central spherical germinal vesicle are shown. Oocytes have a prominent nucleolus. Yolk granules are surrounded by a layer of flat follicle cells; the incubator chamber shows glandular epithelium. Key words: Armadillidium vulgare, common woodlouse, anatomy, histology, follicles. Introducción Armadillidium vulgare es un crustáceo muy común de la mayoría de los suelos. Se denominan “bichos bolita” dado que como método de defensa usan la conglobación y con ello forman una estructura esferoidal (Saluso, 2000). Son dependientes de la humedad para establecer la mayor parte de su ciclo de vida, destacando la reproductiva y respiratoria (Gunn, 1993). La cochinilla de la humedad tiene reproducción sexual, son individuos dioicos. El macho tiene dos penes y la hembra tiene dos vaginas. El apareamiento de este invertebrado ocurre durante la noche, por lo que es difícil de ver. En algunas especies de cochinilla de la humedad, como Armadillidium vulgare el apareamiento está sincronizado entre los miembros de la colonia de modo que todos crían al mismo tiempo. La hembra coloca los huevos dentro de una estructura en forma de bolsillo llamada marsupio. Una hembra de A. vulgare puede depositar más de 200 huevos, la incubación dura entre tres y nueve semanas (Botanical, 2009). Anatómicamente se describe que las gónadas se encuentran en pares como se mencionó con anterioridad, sin embargo los espermiductos se abren al exterior en el segundo par de 1383 pleópodos; las hembras carecen del primer par de pleópodos y el segundo forma un opérculo que cubre el marsupio. Los oviductos forman en su parte final un receptáculo seminal donde el macho deposita los espermatozoides durante la cópula (Asturnatura, 2013). Estos crustáceos son muy útiles ya que son detritívoros, y de hecho mejoran la calidad del suelo, siempre que se les encuentre allí (Tripathi, 2006) citado en Phipps, E., (2009). Esta característica los hace útiles para la restauración de los suelos perturbados (Snyder, 2008) citado en Phipps, E., (2009), además recientemente han sido objeto para estudios genéticos y de metales pesados. Sin embargo suelen causar problemas en cultivos de interés comercial por lo que es importante conocer a profundidad el ciclo reproductivo de dichos organismos. Material y Método Se colectaron las cochinillas al azar en un jardín cuyas coordenadas son 19°36´45.2´´ Lat N y 99°04´48´´ Lon O +/- 2357 msnm. Se llevaron al laboratorio donde fueron sacrificados con acetato de etilo. Se extrajeron las gónadas colocándolas en formol al 10% para ser tratadas anatómica e histológicamente. Para la parte anatómica se realizó la técnica de Verde Luz para transparentar el tejido, para ello se coloca el reactivo con dicho nombre y posterior a ello el salicilato de metilo se fija seguido de cambios en xilol en una laminilla con capilares. Histológicamente se inicia con la colocación en Buin. Se deshidrata en alcoholes de diferentes graduaciones, luego se cambia a benzoato de metilo seguido de tolueno fenicado y se incluye en parafinas. Al término de dicho tiempo se incluyen en cubos de parafina para realizar cortes seriados de 6 micras usando fijador de Ruiter en una platina caliente. Se aplicó la técnica H-E, que consistió en desparafinar los cortes en cambios de xilol, luego se hidrataron en alcoholes, se hizo un cambio a agua destilada y se tiñó con Hematoxilina de Harris, se enjuagaron los cortes y se tiñó con Eosina. Para montarlos se debe deshidratar nuevamente con alcoholes y añadir xilol para poderse montar en resina sintética y etiquetarse. Finalmente se revisaron las laminillas en el microscopio óptico. Resultados y Discusión El estudio anatómico muestra que los ovarios y oviductos son estructuras pares e independientes las cuales desembocan separadamente en su correspondiente gonoporo, los ovarios de forma sacular poseen tres cordones suspensorios. En su extremo posterior, los ovarios se comunican con el oviducto que forma una dilatación; finalmente cada oviducto desemboca en su gonoporo (Fig. 1). El análisis histológico muestra que los cordones suspensorios están constituidos por músculo estriado (Fig. 2); en tanto que los ovarios saculares presentan desarrollo folicular a nivel de la pared ovárica. Se observan ovocitos esféricos con la vesícula germinal central. Los oocitos poseen un nucléolo prominente, mientras que los gránulos de vitelo están rodeados por una capa de células foliculares planas; finalmente se apreció que la cámara incubadora cuenta con epitelio glandular, el cual se piensa ayuda en la secreción de fluidos para mantener a las larvas en el marsupio (Fig. 3, A-F). 1384 O O C i Figura 1. Anatomía del aparato reproductor femenino. O. Ovario, Ci. Cámara incubadora A B Figura 2. Cortes histológicos de los cordones suspensorios. A. corte transversal de músculo estriado. Vista 100x. B Corte longitudinal de músculo estriado. Vista 100x. A B C D E F Figura. 3. Cortes histológicos de ovario. A. Corte transversal 40x. B. Desarrollo folicular 400x. C. Corte longitudinal 100x. D. Corte longitudinal de la pared ovárica. 400x. E. Corte longitudinal de la cámara incubadora 40x. F. Pared de la cámara incubadora 400x. 1385 Cabe aclarar que al tratarse de organismos con exoesqueleto, la copula sólo sucede durante el breve lapso de la intermuda de la hembra, por ello es probable la captura de solo individuos del sexo femenino (The Other Side, 2009). Conclusiones Anatómicamente se observó que las hembras de Armadillum vulgare, presentaron un par ovarios alargados que se continúan caudalmente con la cámara incubadora, las cuales se comunican al exterior independientemente. Histológicamente el ovario es sacular y el epitelio germinal constituye la pared ovárica, observándose que la maduración folicular es asincrónica por grupos y se lleva a cabo a lo largo del ovario. Literatura Citada Asturnatura, 2013. Isópodos. Sistemas corporales. Asturnatura DB, 204-2013: http://www.asturnatura.com/articulos/artropodos/isopodos.php (Accesada) Botanical-online. 2009. Como criar cochinillas de humedad. Botanical SL. El mundo de la naturaleza : http://www.botanical-online.com/animales/cochinilla.htm (Accesada) Gunn, D. 1993. The Humidity Reactions of the Woodlouse, Porcellio Scaber (Latreille). From the Zoology Department, University of Birmingham. 178:186 pp. Phipps, E. 2009. Preferencias de hábitat de los isópodos terrestres: un estudio de comparación de los sustratos húmedos y secos. Tennessee Technological University (TTU) Cookeville, Tennessee 38501 Saluso, M., Adriana. 2000. Bicho Bolita Plaga Emergente de Siembra. Laboratorio de Entomología Aplicada. Estación Experimental Paraná. Sitio de Producción Agropecuaria. 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