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Thermo Scientific™ Richard-Allan Scientific Chromaview® – Tinción avanzada
Reactivo de Schiff
Instrucciones de uso
El reactivo de Schiff de Thermo Scientific es un reactivo transparente e incoloro para usar como colorante para
carbohidratos, glicógeno, membranas basales y hongos. El reactivo de Schiff de Thermo Scientific está listo
para usar y no tiene que ser reconstituido.
Instrucciones de uso
• Seguir el procedimiento de operación estándar del laboratorio en particular para el procedimiento de tinción
específico con reactivo de Schiff (p. ej., tinción con Ácido Periódico Schiff – PAS, Azul de Alcián - Ácido
Periódico Schiff – tinción con Azul de Alcián-Ácido Periódico Schiff, etc.).
• Alternativamente, los protocolos de tinción que se recomiendan a continuación pueden usarse con el
reactivo de Schiff:
Protocolo de tinción estándar - Reacción del reactivo de Ácido Periódico Schiff (Tinción PAS)
1. Desparafinar e hidratar los cortes con agua desionizada.
2. Colocar los cortes en una solución de Ácido Periódico durante 5 minutos a temperatura ambiente.
3. Enjuagar los cortes con varios cambios de agua desionizada.
4. Teñir los cortes con reactivo de Schiff durante 15 minutos para lograr el contraste deseado.
5. Enjuagar los cortes con agua corriente tibia durante 10 minutos.
6. Teñir los cortes en Hematoxilina 1 durante 1 minuto para lograr el contraste deseado.
7. Enjuagar los cortes con agua desionizada durante 30 segundos
8. Colocar los cortes en un reactivo azul durante 1 minuto.
9. Enjuagar los cortes con agua desionizada durante 30 segundos
10. Deshidratar los cortes con dos cambios de alcohol absoluto durante 1 minuto cada uno.
11. Aclarar los cortes con tres cambios de reactivo aclarante durante 1 minuto cada uno y proceder al
montaje.
Protocolo de tinción estándar - Reacción del Ácido Periódico Schiff con Azul de Alcián (AA-PAS)
1. Desparafinar e hidratar con agua desionizada.
2. Colocar los portaobjetos en Solución de tinción de Azul de Alcián a pH 2,5 durante 30 minutos a
temperatura ambiente.
3. Enjuagar los cortes con varios cambios de agua desionizada.
4. Colocar los cortes en una solución de Ácido Periódico durante 5 minutos a temperatura ambiente.
5. Enjuagar los cortes con varios cambios de agua desionizada.
6. Teñir los cortes en reactivo de Schiff durante 15 minutos.
7. Enjuagar los cortes con agua corriente tibia durante 10 minutos.
8. Enjuagar los cortes con varios cambios de agua desionizada.
9. Tinción nuclear opcional:
a. Hematoxilina 7211 durante 1 minuto.
b. Enjuagar los cortes con varios cambios de agua desionizada.
c. Teñir los cortes con un reactivo azul durante 1 minuto.
d. Enjuagar los cortes con agua corriente durante 1 minuto.
10. Enjuagar los cortes con varios cambios de agua desionizada.
11. Deshidratar los cortes con dos cambios de alcohol absoluto durante 1 minuto cada uno.
12. Aclarar los cortes con tres cambios de reactivo aclarante durante 1 minuto cada uno y proceder
al montaje.
Análisis
Se recomienda enfáticamente almacenar el reactivo de Schiff bien tapado a 2-8 °C en el refrigerador del
laboratorio; esto asegura una estabilidad más duradera. Si se almacena inadecuadamente, el reactivo de Schiff
puede formar un precipitado blanco. En la mayoría de los casos, pequeñas cantidades de precipitado blanco
no serán un impedimento de la tinción. Sin embargo, cantidades mayores de precipitado blanco pueden tener
como consecuencia una reacción débil de la tinción con Schiff. La contaminación provocará la decoloración del
activo de Schiff; debe desecharse. El reactivo de Schiff es solo para uso “In Vitro”. Consulte las Hojas de datos de
seguridad de los materiales para conocer la Información de salud y seguridad. Todos los reactivos son estables
y no deben formar precipitados de aplicarse los parámetros de almacenamiento habituales. El reactivo de Schiff
debe desecharse después de su uso. Todos los colorantes utilizados en esta formulación están certificados por la
Biological Stain Commission.
Probable modo de acción
El ácido periódico oxida varias fracciones tisulares a aldehídos. El reactivo de Schiff se une al aldehído tisular
inducido a su forma leuco (incolora). El aclarado con agua elimina el ácido sulfurico y devuelve al reactivo de
Schiff su color rosado.
Referencias
1. Bancroft, J.D. y Stevens, A. Theory and Practice of Histological Techniques. Churchill Livingstone, New York, NY,
1977.
2. Sheehan, D.C. y Hrapchak, B.B. Theory and Practice of Histotechnology, 2nd Edition. Mosby, St. Louis, MO,
1980.
3. Thompson, C.C. Selected Histochemical and Histopathological Methods. Springfield, IL, 1966.
4. Lillie, R.D., H.J. Conn’s Biological Stains. Williams & Wilkins, Baltimore, MD,1972.
Información para pedidos
Producto Tamaño
Cant.
Reactivo de Schiff
500 ml
1
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