UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000 Estudios citogenéticos en peces de la familia Pimelodidae (Pisces, Siluriformes) de la cuenca del río Paraná, Argentina. Análisis cromosómico de dos especies de Luciopimelodinae Sánchez, Sebastián1 - Fenocchio, Alberto S.2 - Jorge, Lilian C.1 Instituto de Ictiología del Nordeste - Facultad de Ciencias Veterinarias - UNNE. Sargento Cabral 2139 - (3400) Corrientes - Argentina. E-mail: inicne@vet.unne.edu.ar 1) Cátedra de Genética y Biometría - Facultad de Ciencias Veterinarias - UNNE. 2) Cátedra de Citogenética General - Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales - UnaM. ANTECEDENTES La familia Pimelodidae (Eig. & Eig. 1889) representa un amplio grupo de Siluriformes, exclusivos de las aguas dulces desde Méjico a la Argentina, comprendiendo peces conocidos vulgarmente como bagres, surubíes y patíes (Ringuelet et al., 1967). En nuestro país se distribuyen ampliamente en la cuenca del Río de la Plata y representan una importante fuente de recursos pesqueros. Según Ringuelet et al. (1967) esta familia se distribuye en tres subfamilias: Sorubiminae (manduvés y surubíes), Luciopimelodinae (patíes) y Pimelodinae (bagres). Sin embargo, estudios recientes de sistemática filogenética proponen modificar esta clasificación dividiendo a los Pimelodidae en tres subfamilias diferentes: Pimelodinae, Rhamdiinae y Pseudopimelodinae, incluyendo al género Luciopimelodus Eig. & Eig. en la subfamilia Pimelodinae (Lundberg et al., 1988), en contraposición a su ubicación dentro de Luciopimelodinae, de acuerdo a la taxonomía tradicional (Ringuelet et al., 1967). Estudios posteriores a los antes mencionados, proponen un origen polifilético para la tradicional familia Pimelodidae (Lundberg et al., 1991; de Pinna, 1993), reconociendo tres linajes monofiléticos (Pimelodinae, Heptapterinae y Pseudopimelodinae), los que estarían más emparentados con otros grupos de Siluriformes que entre ellos mismos (de Pinna, 1998). Estudios citogenéticos realizados en Pimelodidae (según Ringuelet et al., 1967) muestran que la mayoría de las especies presentan 56 cromosomas como número diploide con variación entre 46 y 63, refiriéndose la mayoría de ellos a especies comprendidas en las subfamilias Sorubiminae y Pimelodinae (Dias, 1987; Oliveira et al., 1988; Fenocchio & Bertollo, 1992; Fenocchio, 1993; Martins Dos Santos, 1994; Souza et al., 1994; Vissotto et al., 1994a-1994b; Abumarca & Martins-Santos, 1996; Fenocchio et al., 1996; Shibatta & Dias, 1996; Swarça et al., 1996; Tambani Da Silva et al., 1996; Vissotto, et al., 1996; Sánchez et al., 1998). Por otro lado, en lo que a la subfamilia Luciopimelodinae se refiere, sólo existen datos citogenéticos para Luciopimelodus pati con 2n=50, un número cromosómico único en Pimelodidae que lo colocaría dentro de un grupo particular tal como lo propone la taxonomía tradicional (Fenocchio et al., 1996, Sánchez et al., 1998). Considerando los escasos antecedentes en cuanto a los aspectos citogenéticos en la familia Pimelodidae en general y en la subfamilia Luciopimelodinae en particular, se realizó el presente trabajo con el objeto de ampliar el número de ejemplares analizados de Luciopimelodus pati así como estudiar por primera vez ejemplares de Megalonema platanum (Luciopimelodinae), a efectos de obtener información adicional acerca de las características cromosómicas de este grupo de peces que pueda resultar de utilidad para futuros estudios filogenético-evolutivos. MATERIALES Y MÉTODOS Se analizaron siete ejemplares de Luciopimelodus pati (tres machos y dos hembras colectados en la ciudad de Corrientes y un macho y una hembra colectados en la ciudad de Ituzaingó) y tres ejemplares de Megalonema platanum (un macho y una hembra colectados en Yahapé, Corrientes, y 1 hembra colectada en Reconquista, Santa Fe). Las células metafásicas analizadas se obtuvieron a partir de las porciones cefálica y posterior del riñón mediante la aplicación de métodos directos para la obtención de suspenciones celulares (Foresti et al., 1993). UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000 Con dichas suspenciones se realizaron las preparaciones cromosómicas por goteo sobre portaobjetos desengrasados. Para la determinación del número cromosómico se realizó coloración convencional con Giemsa (10% en buffer fosfato) y se procedió al recuento de treinta metafases por ejemplar. Posteriormente se realizó coloración argéntica para evidenciar la localización de las regiones organizadoras de nucleolos según la técnica de Howell & Black (1980). Finalmente se realizó bandeo C con el objeto de detectar la presencia de regiones de heterocromatina constitutiva (Sumner et al., 1972). A partir de aquellas metafases de mejor calidad se realizaron microfotografías a partir de las que se midieron los cromosomas metafásicos y se clasificó a los cromosomas en Metacéntricos (M), Submetacéntricos (SM), Subtelocéntricos(ST) y Acrocéntricos (A) según los criterios de índice centromérico establecidos por Levan et al. (1964). DISCUSION DE RESULTADOS El análisis de los ejemplares de Luciopimelodus pati permitió determinar la existencia del mismo cariotipo descripto precedentemente, con 2n= 50 y regiones organizadoras de nucleolos localizadas en el brazo corto de cromosomas de tipo Acrocéntrico. La característica más destacable dentro del cariotipo de esta especie, es la gran diferencia de tamaño relativo que existe entre el primer par de cromosomas (M) y el resto del complemento, lo que sumado al número cromosómico que presenta podría utilizarse como un válido marcador para la especie. En esta especie no se obtuvieron resultados satisfactorios hasta el presente tras la aplicación de bandeo C. El análisis de Megalonema platanum también mostró resultados interesantes que permitirían diferenciar a esta especie del resto de los pimelódidos analizados hasta el presente. Así, se pudo comprobar que el número diploide modal para la especie sería igual a 54 cromosomas, el que aparece registrado por primera vez para la familia. Otra particularidad citogenética importante de esta especie se evidenció tras la aplicación de bandeo C, ya que se detectó la presencia de un importante bloque de heterocromatina constitutiva abarcando las regiones pericentromérica e intersticial del brazo corto en un par de cromosomas M-SM grande. De este modo, la combinación de las características número diploide y la localización de la heterocromatina constitutiva aparecen como marcadores citogenéticos que podrían resultar de utilidad en futuros relevamientos similares al presente. Las regiones organizadoras de nucleolos se observaron en el brazo corto de cromosomas Subtelocéntricos de tamaño intermedio. En ninguna de las dos especies se detectaron heteromorfismos cromosómicos relacionados con el sexo así como tampoco polimorfismos entre localidades de colecta. Tras el análisis comparativo de los datos recogidos en el presente estudio con los que se encuentran en la bibliografía, la primer característica a destacar es la reducción en el número diploide observada, aunque en diferente grado, en ambas especies. Esta particularidad detectada, podría indicar que dentro de los mecanismos que actuaron en la diferenciación cariotípica de estas especies, pudieron presentar mayor importancia aquellos que reducen el número total de cromosomas del complemento, como ser las fusiones. Dicha hipótesis podría apoyarse en la marcada diferencia de tamaño observada entre el primer par de cromosomas de Luciopimelodus pati y el resto del complemento, la que podría ser resultado de las fusiones de cromosomas de diferente par, originando como resultado un cromosoma de mayor tamaño al tiempo que se reduciría el número total de cromosomas. En el caso de Megalonema platanum no se observa ningún cromosoma que se distinga tan marcadamente del resto por su tamaño como en Luciopimelodus pati, aunque cabe destacar que en esta especie la reducción del número de cromosomas no es tan importante. Finalmente, debemos recordar que en esta especie la reducción del número diploide se acompaña con la aparición de un importante bloque de heterocromatina constitutiva en una posición no usual en las demás especies de Pimelodidae, hecho que podría reflejar la ocurrencia de algún rearreglo cromosómico de significativa importancia durante los procesos de diferenciación cariotípica y especiación. Si bien las hipótesis planteadas sólo podrán profundizarse mediante la aplicación de técnicas moleculares, cabe destacar finalmente que los resultados obtenidos tras el análisis citogenético en Megalonema platanum y Luciopimelodus pati, permitirían mantener a estas especies en un grupo común tal como lo plantean las clasificaciones taxonómicas tradicionales. UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000 AGRADECIMIENTOS El presente trabajo fue financiado por el Programa de Incentivos para la Investigación-SGCYT-UNNE. BIBLIOGRAFIA -ABUMARCA, M. & MARTINS-SANTOS, I.C. (1996). Caracterização cromossômica de duas espécies da família Pimelodidae (Pisces; Siluriformes). VI Simpósio de Citogenética Evolutiva e Aplicada de Peixes Neotropicas, p 73. -DÍAS, A.L. (1987). Análises citogenéticas de peixes da família Pimelodidae (Pisces, Siluriformes). Dissertaçâo de Mestrado. Universidade Federal de Sâo Carlos, S.P., Brasil. -FENOCCHIO, A.S. & BERTOLLO, L.A.C. 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