APOPTOSIS INDUCIDA POR CANNABINOIDES EN LAS CÉLULAS

 APOPTOSIS INDUCIDA POR CANNABINOIDES EN LAS CÉLULAS INMUNES COMO UN CAMINO HACIA LA INMUNOSUPRESIÓN REVISIÓN MCCR Los cannabinoides son un grupo de compuestos presentes en la planta de Cannabis Sativa. Ellos
median sus efectos fisiológicos y de comportamiento mediante la activación de los receptores de
cannabinoides específicos.
Los cannabinoides han demostrado que actúan como inmunosupresores potentes, agentes antiinflamatorios y se ha demostrado que tienen efectos beneficiosos en una amplia gama de
enfermedades inmunomediadas, tales como la esclerosis múltiple, la diabetes, el choque séptico, la
artritis reumatoide, y el asma alérgica.
El receptor de cannabinoides 1 (CB1) se expresa principalmente en las células del sistema nervioso
central, así como en la periferia y el receptor de cannabinoide 2 (CB2) se expresa
predominantemente en las células inmunes. Estudios realizados en nuestro laboratorio se han
centrado en los mecanismos de inducción de apoptosis por los cannabinoides naturales y sintéticos
a través de la activación de los receptores CB2.
En esta revisión, nos centraremos en los mecanismos apoptóticos de la inmunosupresión mediada
por los cannabinoides en las diferentes poblaciones de células inmunes y discutir cómo la activación
de CB2 proporciona una nueva modalidad terapéutica contra las enfermedades inflamatorias y
autoinmunes, así como tumores malignos del sistema inmune.
“El potencial terapéutico antiinflamatorio de los cannabinoides es evidente a partir de los
estudios discutidos en este artículo de revisión”
El mecanismo independiente del receptor de acción es evidente para los cannabinoides en algunas
poblaciones de células. Además de la utilización de los cannabinoides exógenos, en la manipulación
in vivo de los endocannabinoides también pueden ofrecer nuevas oportunidades de tratamiento
contra el cáncer y enfermedades autoinmunes.
2015
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RESUMEN ABSTRACTO Los cannabinoides son un grupo de compuestos presentes en la planta del cáñamo (Cannabis
sativa L.). Ellos median sus efectos fisiológicos y de comportamiento mediante la activación de los
receptores de cannabinoides específicos. Con el reciente descubrimiento de los receptores de
cannabinoides (CB1 y CB2) y el sistema endocannabinoide, la investigación en este campo se ha
ampliado de manera exponencial. Los cannabinoides se han demostrado que actúa como
inmunosupresores potentes y agentes anti-inflamatorios y se ha demostrado para mediar efectos
beneficiosos en una amplia gama de enfermedades inmunomediadas, tales como la esclerosis
múltiple, la diabetes, el choque séptico, la artritis reumatoide, y el asma alérgica. El receptor de
cannabinoides 1 (CB1) se expresa principalmente en las células del sistema nervioso central, así
como
en
la
periferia. En
contraste,
el
receptor
de
cannabinoide
2
(CB2)
se
expresa
predominantemente en las células inmunes. Los mecanismos precisos a través del cual los
cannabinoides median inmunosupresión sólo ahora está empezando a ser entendidos y se pueden
categorizar ampliamente en cuatro vías: la apoptosis, la inhibición de la proliferación, la supresión
de citoquinas y quimio quinas y la inducción de células T reguladoras (T regs). Estudios realizados en
nuestro laboratorio se han centrado en los mecanismos de inducción de apoptosis por los
cannabinoides naturales y sintéticos a través de la activación de los receptores CB2. En esta revisión,
nos centraremos en los mecanismos apoptóticos de la inmunosupresión mediada por los
cannabinoides en las diferentes poblaciones de células inmunes y discutir cómo la activación de CB2
proporciona una nueva modalidad terapéutica contra las enfermedades inflamatorias y
autoinmunes, así como tumores malignos del sistema inmune, sin ejercer la psicotrópica
desfavorable efectos.
INTRODUCCIÓN Los cannabinoides son un grupo de compuestos que se encuentran en la planta de
marihuana (Cannabis sativa L.). La marihuana ha sido utilizada tanto para fines recreativos y
medicinales desde hace varios siglos. Los cannabinoides se han demostrado ser eficaces en el
tratamiento de las náuseas y vómitos asociados con la quimioterapia del cáncer, anorexia y
caquexia se observa en pacientes con VIH / SIDA, así como el dolor neuropático, y la espasticidad en
esclerosis múltiple. Más recientemente, las propiedades anti-inflamatorias de los cannabinoides
están llamando la atención significativa. En los últimos 15 años, los estudios con los cannabinoides
marihuana llevaron al descubrimiento de los receptores de cannabinoides (CB1 y CB2) y sus ligados
endógenos, que forman lo que se conoce como el sistema endocannabinoide. CB1 se expresa en los
tejidos de tanto el sistema nervioso central (CNS) y la periferia, con una expresión predominante en
los nervios presinápticos.CB2, a veces referido como el “receptor cannabinoide periférico”, se
expresa principalmente en las células inmunitarias, pero también se puede encontrar en otros
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tejidos periféricos tales como la retina y en el SNC. El sistema endocannabinoide modula muchas
funciones, tales como el movimiento, la memoria, el apetito, la regulación de la temperatura
corporal, el dolor y las funciones inmunes. Los cannabinoides naturales y sintéticos se derivan de
plantas de marihuana, mientras que los endocannabinoides son metabolitos del ácido
araquidónico.
El mecanismo de la inmunosupresión por los cannabinoides ha sido investigado tanto in vitro como
en estudios in vivo; Sin embargo, aún quedan muchas preguntas. En general, se sabe que desde los
cannabinoides se unen a receptores CB1 y CB2, que ejercen sus efectos a través de la inhibición de
la actividad de la adenilato ciclasa; bloqueando de este modo la activación de AMPc estimulada por
forskolina. Este proceso conduce a la disminución de la actividad de la proteína quinasa A, y,
posteriormente, a menor unión de factores de transcripción a las secuencias de consenso de CRE, y
una disfunción en la producción de IL-2. En estudios de células NK, se demostró que cuando pre
tratados con THC, las células NK tenían un defecto en receptor IL-2 con la disminución de IL-2 sitios
de unión; Por lo tanto, la IL-2 de las células estimuladas eran incapaces de matar células EL-4
tumorales. Mostró que la disminución de la proliferación de timocitos por tratamiento de THC se
debe a la inhibición de Ca
2 +
estabilización dentro de la célula. Hay pocos informes también
muestran acciones independiente del receptor de cannabinoides, tales como en las células B y las
neuronas corticales de rata.
La apoptosis es el proceso de muerte celular programada que puede ser inducida por factores
intrínsecos, factores extrínsecos o ambos. Debido a que la apoptosis elimina las células dañadas,
dañinos y no deseados, es significativo en los procesos biológicos, incluyendo el desarrollo, la
morfogénesis y la homeostasis. Durante la apoptosis, muchos cambios morfológicos ocurren como
blebbing membrana, encogimiento celular, la fuga mitocondrias, y la fragmentación nuclear. Los
cambios moleculares subyacen a estos cambios morfológicos, y constituyen las dos vías diferentes
de la apoptosis: (1) la vía intrínseca – a través de las mitocondrias, y (2) de la vía extrínseca – a través
de los receptores de muerte. En pocas palabras, la ruta intrínseca se inicia por un desequilibrio en el
anti-apoptóticas y pro-apoptóticos miembros de la familia Bcl-2 de proteínas que regulan la
permeabilidad de la membrana mitocondrial. El desequilibrio hacia este último conduce a la
citocromo c fugas en el citosol. El citocromo c se combina con la procaspasa 9, ATP y Apaf-1 para
formar el apoptosoma. Los resultados apoptosoma en la formación de la caspasa activa 9, se
escinde la procaspasa 3 en la caspasa 3 activa, y conduce a la apoptosis. La vía extrínseca se activa
con la ligación de receptores de muerte tales como la familia del receptor del factor de necrosis
tumoral (es decir CD95), y los resultados en la formación del complejo de señalización para inducir
la muerte (DISC). Disco contiene caspasa 8 y caspasa 10 como las caspasas iniciadoras, y estas
caspasas activar la caspasa 3, lo que resulta en la apoptosis.
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Mientras que el fumar marihuana o la exposición a cannabinoides marihuana puede causar lesión
pulmonar, Delta9-etrahydrocannabinol (THC) en modelos experimentales se ha demostrado para
suprimir las funciones inmunes y aumentar la susceptibilidad a las infecciones. Estudios in
vitro revelaron que el THC puede ejercer un efecto directo sobre las células inmunes por la
inhibición de la proliferación de linfocitos en cultivo, aunque los mecanismos precisos sigue siendo
poco clara. En 1994, la anandamida, un ligando del receptor cannabinoide endógeno fue mostrado
para inducir la apoptosis en cultivos de linfocitos humanos. Este estudio también se extendió a
murino macrófagos y células T, mostrando que el tratamiento de THC de células inmunes cultivadas
activa la apoptosis a través de la regulación de la actividad de Bcl-2 y la caspasa. Si bien estos
estudios abren nuevas vías para investigar más a fondo la apoptosis como un mecanismo de
inmunotoxicidad en vivo inducida por el THC, no se realizaron estudios adicionales para demostrar
estos efectos in vivo. Una de las razones podría haber sido que la detección de la apoptosis in vivo es
difícil, ya que las células apoptóticas se borran rápidamente y eficientemente a través de la
fagocitosis. Estudios realizados en nuestro laboratorio establecieron este hecho mediante una serie
de medicamentos y productos químicos de los cuales 2, 3, 7, 8-tetraclorodibenzo-p-dioxina (TCDD) y
dexametasona. En estos estudios, hemos observado que si las células inmunes expuestas a un
producto químico apoptótica in vivo, se cultivanin vitro para un adicional de 12 a 24 h, exhiben
marcadas aumento en la apoptosis debido a su incapacidad para ser limpiado in vitro por los
fagocitos.
Por
ello,
realizó
una
investigación
sistemática
sobre
si
los
cannabinoides
inducen
apoptosis in vivo, utilizando ratones normales y demostró de manera concluyente que el THC y otros
cannabinoides hacen, lo que puede explicar la inmunotoxicidad in vivo. En estos estudios, hemos
demostrado que la administración de THC in vivo (10 mg / kg de peso corporal) redujo la celularidad
en el bazo y el timo, que afecta a varias poblaciones de células, tales como células T, células B y
macrófagos. La evidencia concluyente para la apoptosis no sólo vino de la observación de que las
células in vivo en expuestos fueron sometidos a la apoptosis espontánea mejorada in vitro, sino
también que la exposición de los ratones a un inhibidor de la caspasa cacerola antes de la
administración de THC bloqueado efectos apoptóticos de THC in vivo.
Además, extensos estudios in vitro demostraron que ingenuo esplenocitos o estimuladas por
mitógenos, la apoptosis se sometieron cuando se cultivan con el THC, medido por el ensayo de
TUNEL y tinción AnnexinV / PI. A una concentración más baja (10 mM) de THC sólo indujo AnnexinV
+ células, que es indicativo de células apoptóticas tempranas. En concentraciones más altas de THC
(es decir, 20 mM), los esplenocitos fueron tanto AnnexinV y PI positivo, que representan las células
necróticas finales de apoptosis, así como. Un hallazgo interesante fue que en los cultivos que habían
sido tratados con THC solo, y en ausencia de mitógeno, los niveles de apoptosis fueron mayores en
comparación con los observados en cultivos que contenía tanto THC y mitógeno. Estos resultados
sugieren que el THC puede afectar a los linfocitos a un grado mayor que los linfocitos activados.
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Además, se observó que los linfocitos activados regulan expresión de CB2, explicando de ese modo
disminución de la sensibilidad de los linfocitos activados a THC. El uso de los antagonistas de CB2
bloqueó la apoptosis inducida por el THC-en estas células, mientras que los antagonistas CB1 no
mostraron un efecto significativo. Estos datos indican que la apoptosis inducida por el THC-en
esplenocitos de una manera dependiente del receptor CB2. Se observaron resultados similares
cuando los experimentos se repitieron contimocitos.
El hecho de que la activación de CB2 desencadena la apoptosis en las células inmunes sugiere que
la orientación CB2 puede constituir un enfoque novedoso para el tratamiento de enfermedades
inflamatorias y autoinmunes. Dicho tratamiento no podría ejercer efectos psicotrópicos y puede
atacar selectivamente a las células inmunes. Para este fin, de nuestro laboratorio probado los
efectos de un agonista de CB2 sintética, JWH-015, en células T y B. Se observó que el JWH-015 en una
forma dependiente de la dosis no sólo inhibió la proliferación, sino también indujo apoptosis en
ingenuas y activada por esplenocitos y timocitos-. En este estudio, los resultados confirmaron que
tanto la vía del receptor de la muerte y la vía intrínseca estaban involucrados, porque la caspasa 8 y
caspasa 9 tratamientos inhibidores fueron capaces de bloquear la apoptosis inducida por JWH-015.
La administración in vivo de JWH-015 (150 mg / kg de peso corporal) inhibe la proliferación de
esplenocitos ex vivo, cuando son estimuladas con ConA. Además, JWH-015 disminuyó la respuesta
específica de antígeno en ratones que fueron expuestos a la entero toxina estafilocócica A,
determinado por disminución de la proliferación de-SEA sensible Vβ3 células + y T Vβ11 +.
Ácido ajulémico (Aja) es un metabolito del THC, y es un potente analgésico y agente antiinflamatorio. Aja pertenece a una clase de los cannabinoides llamados tetrahidrocannabinoles
carboxi. En los ensayos controlados de pacientes con dolor neuropático, Aja resultó tan eficaz como
la morfina y en ratas, redujo significativamente la severidad de la artritis inducida por adyuvante. Un
estudio investigó los efectos de Aja en linfocitos T de sangre periférica humana. Este estudio mostró
que Aja reduce la proliferación de células T por ~ 75%, y la apoptosis inducida de una manera
dependiente de la dosis (en 1, 3 y 10 mM). La incubación de las células con Aja (10 mM) durante 6 h
aumentó la caspasa 3 actividad 9 veces, y la fragmentación del ADN 2.471.3 veces. Había una gran
variedad en los efectos observados de Aja en las células T de donantes, y esto sugiere que las
células de cada donante tenían diferentes niveles de sensibilidad a la apoptosis inducida por Aja.
El sistema endocannabinoide también juega un papel durante los procesos de enfermedad. En la
sangre de los pacientes con shock séptico, aumento de 4 veces en la AEA y 2-AG se ha detectado, y
esto también se observó en la hipotensión inducida por LPS. El uso de antagonistas de CB1 en el
modelo hipotensión, aliviar los efectos de cannabinoides, que muestra que estos compuestos
contribuyeron con el grado de inflamación. Por otra parte, los compuestos WIN había funciones de
protección en el shock séptico, ya que disminuyeron la infiltración de linfocitos y la producción de
citoquinas inhibido. Una vez más, este ejemplo demuestra el papel bifásico de los cannabinoides en
general.
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SENSIBILIDAD DE LAS CÉLULAS B A LA APOPTOSIS INDUCIDA CANNABINOIDE-­‐ Las células B son las células productoras de anticuerpos del sistema inmunológico, y que expresan
la más alta cantidad de CB2 en su superficie celular. Varios informes han demostrado que los
cannabinoides tienen diferentes efectos sobre las células B tales como la disminución de la
proliferación celular y la producción de anticuerpos reducida. También se han realizado estudios
sobre las poblaciones de fumadores de marihuana, y los resultados de estos estudios varían de
manera significativa, debido a muchos factores, como la edad y los antecedentes genéticos de los
usuarios, la cantidad de marihuana que se consume, y la duración de su uso eran todas
diferentes. Algunos informes de estudios en humanos mostraron el número de células B reducidas
junto con la disminución de IgG e IgM, mientras que otros no mostraron ningún cambio en el
número de células B y el aumento de los niveles de IgE.
La actividad de los cannabinoides no se limita a la inmunosupresión, y las concentraciones
nanomolares de sintético (CP55, 940 y WIN55212-2) y (THC) cannabinoides naturales aumentar la
proliferación en las células B tonsilares humanos co-estimuladas con anticuerpos anti CD40 los
anticuerpos anti-Ig o. Argumentaron que este efecto de los cannabinoides es mediada a través del
receptor CB2 desde el bloqueo de los receptores CB1 con SR141716A no inhibió la proliferación. Los
investigadores mencionaron que también probaron los cannabinoides en el rango de 1-100μM, y
estas altas concentraciones indicadas inhibían la proliferación.
Un mecanismo independiente del receptor de la muerte celular inducida por el cannabinoide-se ha
demostrado en las células linfoblastoides B humanas cultivadas. Los investigadores demostraron
que el THC, cannabinol, y cannabidiol protegidos células linfoblastoides B humanas (5/2) de la
muerte de células privadas de suero a concentraciones submicromolares. Además, que ilustran que
la acción de los cannabinoides no se correlacionó con su afinidad de unión a los receptores CB1 y
CB2 y no había estereoselectividad, lo que sugiere una acción independiente del receptor de
cannabinoides. También llevaron a cabo experimentos con α-tocoferol, el isómero más potente de
la vitamina E antioxidante y con anhydroretinol retinoide, que induce la muerte celular oxidativa, ya
sea en la presencia o ausencia de THC. Sus resultados demostraron que al igual que el efecto de αtocoferol, y a diferencia de anhydroretinol retinoide, el THC era capaz de proteger 5/2 las células del
estrés oxidativo y la muerte celular.
APOPTOSIS INDUCIDA POR CANNABINOIDES EN LAS CÉLULAS PRESENTADORAS DE ANTÍGENO Las células dendríticas (DC) son las células presentadoras de antígenos más potentes y
especializadas del sistema inmune, y los cannabinoides han demostrado inducir la apoptosis en
estas células a través de receptores CB1 y CB2. THC (5 M o mayor) y la AEA (20 M) indujo apoptosis
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en células dendríticas óseas derivadas de la médula de C57BL / 6 ratones que fueron cultivadas en
medio libre de suero, a través del compromiso de ambos receptores. Se demostró que el
tratamiento de THC dio lugar a muchos cambios moleculares tales como la activación de las
caspasas 2, 8, y 9, la escisión de Oferta (una proteína Bcl2-familia), la liberación del citocromo c, una
disminución en el potencial de membrana mitocondrial, y un aumento en la fosforilación de Iκβα. Este estudio también demostró los efectos in vivo de la administración de THC, y mostró que hubo
una disminución en el número de esplénicos países en desarrollo, y en la expresión de MHCII en
países en desarrollo.
Los efectos inmunosupresores de THC en Legionella pneumophila (Lp) infectaron células dendríticas,
y se centró en la supresión inmune Th1. Sus resultados mostraron que la Lp carga in vitro en las
células dendríticas, y posterior administración a ratones dieron lugar a la inmunización. Sin
embargo, cuando las células dendríticas se trataron previamente con el THC, se suprime el potencial
de inmunización de células cargadas-Lp. Tratamiento de THC suprime la IL-12p40 producción por las
células dendríticas, así como inhibe la expresión de marcadores de maduración tales como MHCII,
CD86, y CD40. Los investigadores se preguntaron si esta disminución de citoquinas era debido al
aumento en la apoptosis de las células dendríticas por tratamiento de THC, y demostraron que 10
mM de THC no indujo la muerte celular en los países en desarrollo después de 24 h. Sus resultados
contradicen; Sin embargo, esto se puede atribuir a las diferencias en el diseño experimental. Por
ejemplo, et al. utilizado condiciones libres de suero con el fin de minimizar los efectos inhibitorios
de suero sobre la acción de cannabinoides, mientras que Lu et al. El suero utilizado en sus
condiciones de cultivo. Además, Do et al. utilizado países en desarrollo de la médula ósea de
ratones C57BL / 6 ratones, mientras que Lu et al. utilizados países en desarrollo de la médula ósea
de ratones Balb / c.
El efecto de Aja en las células precursoras de la osteoclastogénesis, que son los monocitos y
macrófagos, y en sí mismos los osteoclastos. Se utilizan células de médula ósea incubadas con
factor estimulante de macrófagos (M-CSF), y una línea celular de macrófagos de ratón como células
precursoras, y se añaden RANKL a las células precursoras con el fin de obtener células de
osteoclastos in vitro puros. En este estudio, demuestran que Aja indujo la apoptosis tanto en los
monocitos precursores y macrófagos, así como en los osteoclastos a concentraciones entre 15 y 30
mM.
EFECTO DE LOS CANNABINOIDES EN LAS CÉLULAS INMUNES MALIGNAS Estudios de nuestro laboratorio sugirieron por primera vez que la orientación de los receptores CB2
en cánceres de origen inmunitario puede constituir un enfoque novedoso para el tratamiento de
tales tumores malignos. En primer lugar, investigó la capacidad de los cannabinoides para inducir la
apoptosis en las células malignas de origen inmunológico incluyendo linfomas y leucemias. Se
demostró que la leucemia y líneas celulares de linfoma humanos tales como las células Jurkat y
Molt-4 expresan receptores CB2, pero expresan poco o nada de niveles significativos de CB1. Se
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encontró que estas células a ser susceptibles a la inducida por el THC, HU-210, la anandamida, y
JWH-015 la apoptosis. En el mismo estudio, se observó que la apoptosis también fue inducida por el
THC y la anandamida en células tumorales murinas, tales como EL-4 y LSA. La administración in
vivo de 3 y 5 mg / kg de peso corporal de THC también fue eficaz en matar EL-4 del tumor células
que se inyectaron en la cavidad peritoneal, y tras el tratamiento de THC, 25% de los ratones
sobrevivieron a la exposición del tumor. Células humanas de leucemia linfoblástica primarios
también se ensayaron para determinar su susceptibilidad a la apoptosis inducida por el THC-, y las
células tomadas a partir de dos donantes diferentes mostraron aumento de la apoptosis en los
tratamientos de THC en 5 M o mayores concentraciones. Otra observación por este estudio fue que
el suero interfiere con los efectos del THC; por lo tanto, en medio que contiene suero se necesitaban
10 M o mayores concentraciones para inducir la apoptosis; Sin embargo, en condiciones libres de
suero 3 M o más altas concentraciones eran suficientes para inducir un aumento significativo en la
apoptosis.
Está bien establecido que el THC induce la apoptosis en líneas celulares de leucemia Jurkat, y esto se
produce a través de tres mecanismos diferentes. El primer mecanismo, donde los investigadores
examinaron el efecto del THC en el tipo salvaje, así como en FADD deficiente, la caspasa 8 deficiente,
y la caspasa 9 células Jurkat deficientes. Su estudio demostró que la apoptosis inducida por el THCen las células Jurkat se produjo principalmente a través de la vía intrínseca incluyendo caspasa 9 de
activación, y la liberación de citocromo cen el citosol. Sin embargo, el grado de apoptosis en células
deficientes deficientes 8 y la caspasa FADD mostraron una disminución parcial, cuando se mide por
TUNEL. Tratamiento de THC de las células dio lugar a la activación de las caspasas 2, 8, 9, y 10 en ese
orden, y la escisión de la oferta se produjo 2 h después del tratamiento. En general, estos estudios
demostraron que la apoptosis inducida por el THC-se produjo a través de la diafonía entre las vías
extrínsecas e intrínsecas, con la vía intrínseca en el papel principal.
El segundo mecanismo propuesto surgió de un grupo de investigación en España, y en este estudio
en particular, los investigadores investigaron si la acumulación de ceramida está implicado en la
apoptosis inducida por el THC en células Jurkat. Ellos demostraron que al 2 mM tratamiento con
THC, los niveles de ceramida se incrementaron dentro de la célula.Ellos inhiben la síntesis de
ceramida con un inhibidor farmacológico o transfectaron las células con una forma dominante
negativa de la enzima que cataliza la producción de ceramida, y demostraron que esto condujo a la
disminución de los niveles de apoptosis en la presencia de THC. La apoptosis fue mediada a través
de la pérdida del potencial de membrana mitocondrial, la liberación del citocromo c, y la activación
de las caspasas. Cuando se usó un inhibidor de pan caspasa, se impidió la apoptosis pero todavía
era la pérdida del potencial de membrana de las mitocondrias. Por lo tanto, este estudio demostró
que el primer paso en la vía apoptótica fue la producción de ceramida, y que esto llevó a la pérdida
de potencial de membrana, y la activación de caspasas, respectivamente.
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Nuestros estudios han demostrado, además, que el THC interfiere con la vía de señalización de la
MAP quinasa, que desempeña un papel crítico en la apoptosis de células Jurkat.Específicamente, el
THC inhibe la vía MAPK / MEK / ERK señalización, lo que resultó en la translocación de Bad en las
mitocondrias, y, finalmente, la apoptosis. También se demostró que la apoptosis inducida por el
THC en células T Jurkat en una forma dependiente de la dosis, y el uso de CB1 y CB2 (SR141716
antagonistas y SR144528, respectivamente) disminuyó significativamente la cantidad de THC
inducida por la apoptosis. Se demostró que el tratamiento de THC dio lugar a la fosforilación
reducida de Raf-1, MEK1 / 2, y ERK1 / 2, sin ningún cambio en las proteínas totales, y que este
proceso era independiente de caspasas. Por otra parte, la interrupción de la vía de señalización Raf1/MEK/ERK/RSK, y no a la vía PI3K/Akt, jugó un papel en la desfosforilación y translocación de una
proteína de la familia Bcl-2, Bad, en la mitocondria. En este trabajo se arrojará más luz sobre el
mecanismo de la apoptosis inducida por el THC en líneas de células T leucémicas, y demostró que la
ligadura de los receptores CB1 y CB2 por THC dio lugar a: (1) la interrupción de una vía principal de
la supervivencia celular, (2) la translocación de Bad en la mitocondria, y (3) la apoptosis.
EFECTO DE LOS CANNABINOIDES SOBRE LAS CÉLULAS NO INMUNES Los cannabinoides afectan el destino celular en muchos otros tipos de células, tales como células
transformadas neurales, células de cáncer de mama, hepatocitos, y células de cáncer de
próstata. Como se discutió previamente, la presencia de los receptores de cannabinoides en la
superficie celular es un determinante clave de cómo los cannabinoides afectan a una población
celular determinada. Un estudio exploró los efectos del THC en líneas celulares de cáncer de mama
murinos y humanos, así como en un modelo in vivo de cáncer de mama en ratones. Los
investigadores demostraron que el ratón 4T1 carcinoma de mama, y líneas celulares de cáncer de
mama humano MCF-7 y MDA-MB-231 expresaron niveles bajos a indetectables de CB1 y CB2; por lo
tanto, fueron resistentes a la muerte celular inducida por el THC-. Además, este estudio demostró
que el THC creado un anfitrión-inmune comprometido, y ayudó en 4T1 el crecimiento del tumor y la
metástasis en ratones C57BL / 6 ratones. La inmunosupresión fue mediada a través del receptor
CB2, y un interruptor de citoquinas Th1 de citocinas de Th2 tales como IL-4 e IL-10 se produjo tras el
tratamiento de THC.
Los efectos apoptóticos de THC sobre las células de hepatocitos de ratón normales, BNL.CL.2, y
demostraron que estas células son resistentes a la apoptosis inducida por el THC-así.En este
estudio, los esplenocitos fueron utilizados como control positivo, y los investigadores mostraron que
las dosis que inducen la muerte celular en esplenocitos fueron incapaces de causar cualquier
cambio en la viabilidad celular en hepatocitos. Además, los investigadores recogieron los
sobrenadantes de cultivos de esplenocitos activados con ConA (CS) y se ensayaron la capacidad de
THC para proteger a los hepatocitos de la muerte celular inducida por CS. Ellos demostraron que el
THC disminuyó el porcentaje de células apoptóticas en una manera dependiente de la dosis. Estos
resultados están de acuerdo con un estudio que investigó el efecto de un agonista de CB2 de
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selección, HU-308, en el modelo de lesión por isquemia / reperfusión en ratones C57BL / 6, donde
establecieron que HU-308 suprimido la apoptosis en hepatocitos mide por la actividad de la caspasa
3 y ensayo de fragmentación de ADN.
Un estudio dirigido a los receptores cannabinoides para el tratamiento de melanoma en un modelo
de ratón. Ellos mostraron que las células de melanoma expresan receptores CB1 y CB2, y que la
activación del receptor por el THC y WIN-55 ,212-2 condujo a la inhibición del crecimiento celular de
melanoma tanto in vitro como in vivo. Además, demostraron que el THC y WIN-55 ,212-2 causó la
detención del ciclo celular en células de melanoma a través de la inhibición de Akt y
hipofosforilación de la proteína supresora de tumores, el retinoblastoma (Rb).
CONCLUSIÓN Los cannabinoides se han aprobado en algunos países para el tratamiento de la quimioterapia
inducida por náuseas y vómitos, y los ensayos clínicos demuestran la eficacia de los cannabinoides
‘en la inhibición del dolor y la estimulación del apetito. Potencial terapéutico antiinflamatorio de los
cannabinoides es también evidente a partir de los estudios discutidos en este artículo de revisión. A
las concentraciones óptimas, los cannabinoides no inducen la apoptosis en células inmunes, el alivio
de las respuestas inflamatorias y proteger al huésped de la inflamación aguda y crónica. El efecto
acumulativo de los cannabinoides en todas las poblaciones de células del sistema inmune puede ser
beneficioso, cuando hay una necesidad de supresión inmune. Por ejemplo, en pacientes con
enfermedades autoinmunes tales como la esclerosis múltiple, la artritis y el lupus, o en aquellos con
choque séptico, donde la enfermedad es causada por las células inmunes activadas, apuntando a
las células inmunes a través de los agonistas de CB2 pueden desencadenar la apoptosis y actuar
como anti-inflamatoria la terapia. CB2 seleccionar agonistas no son psicoactivo y porque CB2 se
expresa principalmente en células inmunes, el uso de agonistas de CB2 podría proporcionar una
nueva modalidad terapéutica contra las enfermedades autoinmunes e inflamatorias. Claramente, se
necesita más investigación para validar estos estudios en humanos mediante ensayos clínicos. Sin
embargo, en otros casos, como en los pacientes con cáncer de mama en el que los receptores
cannabinoides no pueden ser expresados por las células cancerosas, los cannabinoides pueden
empeorar la enfermedad, debido a que el sistema inmunológico se debilita, y las células de cáncer
de mama son resistentes a la inducida por cannabinoides la apoptosis. Por lo tanto, es crítico para
equilibrar los efectos inmunosupresores con las propiedades contra el cáncer, que requieren
estudios de dosis-respuesta cuidado en estos resultados clínicos. En general, existe un papel
bifásica para los cannabinoides, y depende de tres factores principales: (1) el tipo de cannabinoide,
(2) la dosis de cannabinoides, y (3) el tipo de célula que el cannabinoide actúa en. El grado de
expresión del receptor de cannabinoides puede jugar un papel en algunos casos; Sin embargo, el
mecanismo independiente del receptor de acción es evidente para los cannabinoides en algunas
poblaciones
de
células. Además
de
la
utilización
de
los
cannabinoides
exógenos, en la
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tratamiento contra el cáncer y enfermedades autoinmunes.
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INFORMACIÓN MCCRID: ARKMCCR-00133
PUBMED ID: 19457575
PMCID: PMC3005548
Nombre Original: Cannabinoid-induced apoptosis in immune cells as a pathway to
immunosuppression. 2015
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