VI JORNADA DE FORMACIÓN INTERHOSPITALARIA DEL LABORATORIO CLÍNICO 4. ANAs EN ENFERMEDADES REUMÁTICAS CARLOS HIERRO DELGADO R II. BIOQUÍMICA CLÍNICA ANTICUERPOS FRENTE AL NÚCLEO DEFINICIÓN SON ANTICUERPOS DIRIGIDOS PARTICULAS SUBCELULARES INCLUYENDO ESTRUCTURAS CONTRA COMPONENTES LOCALIZADAS NUCLEOLARES, PROTEÍNAS NUCLEARES NO HISTONAS. EN EL DE NUCLEO, NUCLEOSOMAS, ALGORITMO DE TRABAJO SOSPECHA DE LES O DE OTRA ENFERMEDAD REUMÁTICA SCREENING ANA ELISA POSITIVO IFI Anti DNAds NEGATIVO ENA INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA INFORME DE IFI POSITIVO/NEGATIVO PATRÓN FLUORESCENCIA INTENSIDAD/TÍTULO NEGATIVO < 1/40 POSITIVO A BAJO TÍTULO 1/40 a 1/160 POSITIVO > 1/160 PATRÓN HOMOGÉNEO dsDNA Histonas Nucleosoma LES (Lupus Eritematoso Sistémico) LE Inducido por Drogas PATRÓN PERIFÉRICO dsDNA Lámina nuclear LES (Lupus Eritematoso Sistémico) Hepatopatía autoinmunitaria PATRÓN MOTEADO SS-A, SS-B Sm RNP Esclerodermia Enfermedad mixta del tejido conectivo (EMTC) Síndrome de Sjögren PATRÓN NUCLEOLAR PM-Scl Slc-70 RNA Pol Polimiositis Esclerodermia Artritis reumatoide S. de Sjögren PATRÓN CENTRÓMERICO Proteínas centroméricas Síndrome de CREST Cirrosis Biliar Primaria (CBP) PATRÓN APARATO DE GOLGI Aparato de Golgi LES (Lupus Eritematoso Sistémico) S. de Sjögren PATRÓN PCNA Factor auxiliar de la ADN polimerasa LES (Lupus Eritematoso Sistémico) PATRÓN MITOCONDRIAL Mitocondria Cirrosis Biliar Primaria (CBP) UTILIDAD CLÍNICA MUY ÚTIL PARA DIAGNOSIS LES INDUCIDO POR DROGAS HEPATITIS AUTOINMUNE EMTC LES ESCLERODERMA ÚTIL PARA DIAGNOSIS Sdr. SJÖGREN POLIMIOSITIS/DERMATOMIOSITIS ÚTIL MONITORIZACIÓN Y PROGNOSIS ARTRITIS CRÓNICA JUVENIL FENOMENO DE RAYNAUD ANA+ ~100 % ~100 % ~100 % 95-100 % 60-80 % 40-70% 30-80% 20-50% 20-60% ANTI-DNA DEFINICIÓN ANTICUERPOS DIRIGIDOS DESOXIRRIBONUCLEICO CONTRA (DNA). LA PUEDEN MOLÉCULA DIVIDIRSE DE EN ÁCIDO DOS CATEGORIAS: LOS QUE REACCIONAN CON EL DNA DESNATURALIZADO (ssDNA) , SE DIRIGEN CONTRA NUCLEÓSIDOS Y NUCLEÓTIDOS QUE QUEDAN EXPUESTOS AL SEPARARSE LAS DOS CADENAS DE DNA. LOS QUE REACCIONAN CON EL DNA NATIVO DE DOBLE CADENA (dsDNA), DIRIGIDOS CONTRA LA ESTRUCTURA NATURAL EN DOBLE HÉLICE. DETECCIÓN DE ANTI-DNAds ENSAYO DE FARR (Radiactividad) Específico INMUNOFLUORESCENCIA (Crithidia luciliae; sólo diagnóstico) Específico ELISA Sensible ANTI-DNAds Y LES DIAGNÓSTICO SENSIBILIDAD: 57% ESPECIFICIDAD: 97% SU PRESENCIA APOYA LOS DATOS CLÍNICOS EN EL DIAGNÓSTICO SU AUSENCIA NO EXCLUYE LES ANTICUERPOS ANTIANTÍGENOS EXTRAÍBLES DEL NÚCLEO (ENAs) DEFINICIÓN ENA SON ANTICUERPOS DIRIGIDOS CONTRA PROTEÍNAS NUCLEARES NO HISTONAS QUE PUEDEN EXTRAERSE DEL NÚCLEO CON SOLUCIONES SALINAS DE BAJA FUERZA IÓNICA; DENTRO DE ELLOS ESTÁN LOS DIRIGIDOS CONTRA PROTEÍNAS ASOCIADAS AL ADN (ANTI-CENTRÓMERO, ANTI-LÁMINAS NUCLEARES, ANTI-Scl-70) Y PROTEÍNAS ASOCIADAS AL ARN (ANTI-Sm, ANTI-U1-Rnp, ANTIRo/SS-A, ANTI-La/SS-B Y ANTI-Jo1) MÉTODOS DE DETERMINACIÓN ENZIMOINMUNOANÁLISIS CONTRAINMUNOELECTROFORÉSIS IMMUNOBLOTTING SS-A/Ro ANTI SS-A/Ro ANTI SS-B/La SS-B/La S. SJÖGREN 40-80% LES 30-50% S. SJÖGREN 60% LES 5-10% SCL-70 Scl-70 ESCLERODERMIA 70% S. SJÖGREN 30% LES 25% S. DE CREST 10% JO-1 Jo-1 POLIMIOSITIS 35-40% DERMATOMIOSITIS 25% SM Sm LES ESPECIFICO SENSIBLE ESCLERODERMIA TITULOS U1RNP U1RNP EMTC TITULOS NO anti-Sm ESPECIFICO LES SI anti_Sm POLIMIOSITIS ☺ PRONÓSTICO PROTEÍNA P RIBOSOMAL PROTEÍNA P RIBOSOMAL LES ESPECÍFICO CENTRÓMERO CENTRÓMERO S. de CREST 95% ESCLERODERMIA 40% UTILIDAD CLÍNICA ENAs LES S. SJÖGREN POLIMIOSITIS DERMATOMIOSITIS Sm Ro/SS-A PROTEÍNA P RIBOSOMAL Ro/SS-A La/SS-B Jo-1 ESCLERÓSIS SISTÉMICA Scl-70 CENTRÓMERO EMTC U1snRNP