Tercera circular II -- Reunión de Biotecnología Aplicada a Plantas Medicinales y Aromáticas 2 al 4 de Diciembre de 2009 Salón Auditórium de la subsede CEPROCOR Ministerio de Ciencia y Tecnología Sta Maria de Punilla Córdoba, Capital, Argentina ORGANIZAN: REDBIO Argentina Asociación Civil Y MINISTERIO DE CIENCIA Y TECNOLOGIA DE CORDOBA Comité Organizador: o o o o o o o o o o o o Presidente: Dra. Marta Goleniowski, Ceprocor. Minist. de C y T. de Córdoba. Lic. Sandra Sharry, REDBIO Argentina Asociación Civil Dr. Alejandro Escandón. REDBIO Argentina Asociación Civil Dra Patricia Marconi. Instituto de CyT Dr. C. Milstein-CONICET M.Sc Cecilia Rivas, Docente Invetigador- INFIVE, Universidad Nacional de La Plata. Dr. Juan José Cantero, Minist. de C y T. de Córdoba. Dra. Guillermina Bongiovanni, Universidad Nacional de Comahue. Dr Rafael Borneo, Ceprocor. Minist. de C y T. de Córdoba. Dr Elio Soria, Universidad Nacional de Córdoba. Dr María I. Isla, Universidad Nacional de Tucumán. Dra. Lucía Díaz, Universidad Nacional de Tucumán. M.Sc Lorena Palacio. Ceprocor. Minist. de C y T. de Córdoba. Comité Científico: o o o o o o o Dr. Robert Verpoorte, Division of Pharmacognosy, Section Metabolomics, Institute Biology Leiden, Leiden University, Leiden, The Netherlands. Dr. Juan Izquierdo, Ex Oficial Regional FAO. Dra. Rosa Cusido, Universidad de Barcelona, España. Dra Ana M. Giulietti , UBA-CONICET. Argentina. Dra. A. Pomilio, PRALIB-CONICET-CONICET. Dr. Luis Mroginski, IBONE, UNNE-CONICET. Dr. Gabino Garrido Garrido. Universidad Católica del Norte, Antofagasta, Chile. Inscripción Privados y público en general Socio REDBIO (cuota al día) (s/cuota al día) Socio REDBIO 15/7/2009 400 200 250 100 15/9/2009 450 250 300 200 15/11/2009 500 300 350 250 (Estudiante) Estudiantes Estudiantes de grado 150 50 150 75 200 100 Presentando: 1) Recibo correspondiente cuota 2009. 2) Nota avalada por director de tesis. 3) Libreta Universitaria vigente. Comprobante De Pago Inscripción II REUNION DE BIOTECNOLOGÍA DATOS BANCARIOS Banco de Córdoba Cuenta Corriente N° 0300097/07 Sucursal 917 (Nueva Cordoba - Estrada 141) CBU 0200917301000030009779 CUIT 30-71040409-3 DATOS DEL INSCRIPTO Nombre y Apellido:...................................................................................................... DNI:.............................................................................................................................. DATOS PARA LA FACTURACIÓN Nombre:........................................................................................................................ Domicilio:..................................................................................................................... C.U.I.T:……………………………………………………………………………….. Una vez depositado enviar la boleta de depósito por fax al 0351 – 434 2731 int. 141 o al mail confirmaciondepago@cba.gov.ar así confirmamos el mismo y se emite el recibo respectivo. Incorporar comprobante de pago Comprobante De Pago Inscripción FORMA DE PAGO DESDE EL EXTRANJERO TRANSFERENCIA BANCARIA EL MONTO TRANSFERIDO DEBE SER DE 200 DOLARES Para efectuar una transferencia desde el exterior al Banco de la Provincia de Cordoba S.A. la misma deberá contar con los siguientes datos: Beneficiary´s Bank: (field 57 A) Banco de Córdoba S.A. CHIPS UID 015639 SWIFT Code: CORDARBA Beneficiary: (field 59) Titular: Ministerio de Ciencia y Tecnología de la Provincia de Córdoba Banco de Córdoba Sucursal Nueva Córdoba 917 Cuenta Corriente N° 0300097/07 CBU 0200917301000030009779 CUIT: 30-71040409-3 Para transferencias en divisa EUROS- EUR nuestro Banco Corresponsal operativo es el COMMERZBANK A.G., de ALEMANIA y para la divisa DOLARES USA -USD nuestros Bancos Corresponsales operativos son AMERICAN EXPRESS BANK y THE BANK OF NEW YORK, ambos en NEW YORK, USA. Los gastos bancarios son por cuenta del depositante y deberán ser pagados independientemente de la cuota de inscripción ENVÍO DE RESÚMENES (Libro de Resúmenes) Los resúmenes serán recibidos hasta el 15/10/2009, según las siguientes especificaciones: Máximo de 250 palabras. Configuración de página: margen izquierdo: 3 cm, margen derecho: 2,5 cm. Tipografía: arial. Título: font 16 (escritura normal). A un espacio: autores (font 14) Apellido/s y siglas. A un espacio, dirección de cada uno, incluido el email (font 12). A un espacio texto (font 11). Se recibirán también trabajos “in extenso” que serán publicados en la revista con referato internacional Molecular Medicine Chemistry. Se adjunta modelo Análisis cuali y cuantitativo de los flavonoides presentes en Passiflora caerulea L. cultivada in vitro vs P. caerulea planta madre Silvia Aquila1, Paula Conforti2, Etile D. Spegazzini1, Silvia L. Debenedetti1,María Guillermina Volonté2 Cátedra de Farmacognosia – LABRAM. 2Cátedra de Control de Calidad de Medicamentos. Facultad de Ciencias Exactas. UNLP. Calle 47 y 115 s/n La Plata (CP 1900) E-mail: sdebenedetti@biol.unlp.edu.ar 1 Introducción: Varias especies de Passiflora (Passifloraceae) han sido tradicionalmente usadas para el tratamiento de la ansiedad, insominio y estados nerviosos (Brasseur y Angenot, 1984), siendo P. incarnata la especie europea con mayor difusión por su uso medicinal. En Argentina Pasiflora caerulea L. conocida como “pasionaria”, “pasionaria azul”, “flor de la pasión”, es una planta trepadora que crece especialmente en las provincias del noroeste, Mesopotamia, Córdoba y Buenos Aires (en la ribera del Río de la Plata). Las partes aéreas de esta especie son usadas en la medicina popular con los mismos fines que las otras especies de Passiflora en estados de ansiedad, tensión nerviosa e insomnio. Forma parte de la composición de numerosos medicamentos fitoterápicos ya sea como droga vegetal entera, en polvo, tinturas o extractos y se encuentra en la composición de una preparación farmacéutica patentada en Europa para el tratamiento de la ansiedad o la depresión (Yutaka et al, 2005). Actualmente se recolectan ejemplares silvestres de esta especie, sin embargo la necesidad de obtener materias primas de calidad conveniente y en cantidad suficiente, evitando la recolección indiscriminada, ha provocado la domesticación de esta especie a través de la técnica de cultivo in vitro (Gattuso et al, 2003). El presente trabajo se encuentra dirigido a evaluar cuali y cuantitativamente el contenido en flavonoides, de los extractos metanólicos de las partes aéreas de P. caerulea obtenida por cultivo in vitro, en comparación con la planta madre de la cual se obtuvo el tejido. Los principales compuestos bioactivos descriptos para el género son derivados de flavonoides, como los C-glicósidos de apigenina y lutelina (vitexina, isovitexina, homoorientina, vitexina-2”-ramnósido, entre otros), constituyendo la mejor opción como marcadores de calidad (Simony et al, 2005) Metodología: Material vegetal Las partes aéreas de Pasiflora caerulea L. (Passifloraceae) de la planta madre (Pm) y de la planta cultivada in vitro (Piv) (Severin et al., 2003) fueron recolectadas en el mismo tiempo (durante el período vegetativo) por la Dra. Susana Gattuso de la Cátedra de Botánica de la Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas de la UNR, secadas y remitidas para su análisis. Análisis cualitativo por TLC y HPLC Preparación de la muestra: 5g de partes aéreas secas y pulverizadas de las plantas de ambos orígenes (planta madre y cultivo in-vitro) se calientan a reflujo con 50 ml de metanol (MeOH) durante 10 minutos. Se enfría y se filtra. Los extractos se concentran en evaporador rotatorio a un volumen final de 5 ml. FE: Sílica gel 60 F254; FM: Acetato de etilo: ác. acético: ác. fórmico: agua (100:11:11:26) Soluciones Muestras: -Extracto MeOH de P. caerulea (Pm). -Extracto MeOH de P. caerulea (Piv) Soluciónes de Referencia: Isovitexina, Vitexina, Homoorientina, Isoquercitrina, Vitexina-2’’-O-ramnósido, en MeOH. Siembra: 20 µl de cada uno de los extractos en bandas de 1 cm. Revelado: Reactivo de Productos Naturales (RPN-PG) HPLC (Aquila et al, 2005) Tratamiento de la muestra: previo al análisis por HPLC se realiza una dilución 1:16 de cada extracto en la fase móvil utilizada. Se filtra por membrana de nylon de 0,45 µm y se inyecta por triplicado en el cromatógrafo. Columna: RP– 18 (250 x 4 mm, 5µm); Fase Móvil: Agua: tetrahidrofurano: 2propanol: acetonitrilo (88:8:1,6:2,4) con 0,05% de ácido fosfórico en la fase acuosa. pH=2,8 Flujo: 1 ml/min; Temperatura: 25C; Volumen de inyección: 20 µl; Detección UV: 336 nm; Parámetro de integración: Area Estándares utilizados: Los estándares fueron adquiridos en Extrasynthese y diluidos en Fase móvil para su inyección en HPLC Isovitexina: solución al 20 µg/ml Vitexina-2’’-ramnósido: solución al 30 µg/ml Vitexina: solución al 20 µg/ml TLC (Aquila et al, 2005) Homoorientina: solución al 22,5 µg/ml Isoquercitrina: solución al 35 µg/ml Análisis cuantitativo por espectrofotometría El análisis cuantitativo de los flavonoides totales presentes en los extractos de P. caerulea Pm y Piv fue realizado por espectrofotometría UV siguiendo la técnica de análisis de Pasiflora incarnata que figura en la European Pharmacopoea 2005 y calculados como isovitexina. La extracción del material vegetal y las valoraciones fueron realizadas por duplicado de manera de tener cuatro datos para cada una de las muestras de P. caerulea. No se observan cambios cualitativos en el perfil de ambas muestras. Solo se aprecia una diferencia en la cantidad total de flavonoides a favor de P. caerulea cultivo in vitro, verificable por los valores de atenuación con los cuales se realizó la corrida cromatográfica. La valoración espectrofotométrica de flavonoides totales con valores promedio entre 4-5%, corrobora dicha observación. Se debería continuar con los estudios de variación estacional del contenido de flavonoides totales (cuali y cuantitativo) de manera de fijar una época de recolección apropiada donde el contenido de flavonoides sea máximo. Bibliografía: Resultados y Discusión: La evaluación cualitativa de los flavonoides presentes en el extracto MeOH de ambos extractos fue realizada por comparación de los Rf y tr obtenidos en el análisis por TLC y HPLC, respectivamente. Los flavonoides homoorientina, isovitexina y vitexina-2”ramnósido pudieron ser identificados en ambos extractos por comparación con los estándares, junto con otros compuestos que no fueron identificados. Aquila S., et al. (2005). V Reunión de la Sociedad Latinoamerican de Fotoquímica. Nov. 2005. Brasseur, T. y Angenot L (1984) J. Pharm. Belg. 39: 15-22 Gattuso S, et al. (2003). J. of Tropical Medicinal Plants. 4(2): 249- 256. Severin C., et al. (2003 J. of Tropical Medicinal Plants 4(1): 97-102. Simony D., et al. (2005) J. of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 37: 399–403 Yutaka M, et al (2005). Takeda Chemical Industries Ltd. Patent JP2005272342 (European Patent Office). Agradecimientos: Los autores agradecen a la Beca y subsidio PICT- 11987 de ANCYPT Official languages: English Spanish One author of each abstract must be registered. Idiomas: Castellano e Inglés Deberá haber un inscripto por cada resumen enviado. Se deberá optar por una de las siguientes áreas temáticas: Etnobotánica Biotecnología Productos Naturales Producción de Aromáticas y Medicinales