Segunda circular - Foro Argentino de Biotecnología.

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Tercera circular
II -- Reunión de Biotecnología Aplicada a Plantas
Medicinales y Aromáticas
2 al 4 de Diciembre de 2009
Salón Auditórium de la subsede CEPROCOR
Ministerio de Ciencia y Tecnología
Sta Maria de Punilla
Córdoba, Capital, Argentina
ORGANIZAN:
REDBIO Argentina Asociación Civil Y MINISTERIO
DE CIENCIA Y TECNOLOGIA DE CORDOBA
Comité Organizador:
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Presidente: Dra. Marta Goleniowski, Ceprocor. Minist. de C y T. de
Córdoba.
Lic. Sandra Sharry, REDBIO Argentina Asociación Civil
Dr. Alejandro Escandón. REDBIO Argentina Asociación Civil
Dra Patricia Marconi. Instituto de CyT Dr. C. Milstein-CONICET
M.Sc Cecilia Rivas, Docente Invetigador- INFIVE, Universidad Nacional
de La Plata.
Dr. Juan José Cantero, Minist. de C y T. de Córdoba.
Dra. Guillermina Bongiovanni, Universidad Nacional de Comahue.
Dr Rafael Borneo, Ceprocor. Minist. de C y T. de Córdoba.
Dr Elio Soria, Universidad Nacional de Córdoba.
Dr María I. Isla, Universidad Nacional de Tucumán.
Dra. Lucía Díaz, Universidad Nacional de Tucumán.
M.Sc Lorena Palacio. Ceprocor. Minist. de C y T. de Córdoba.
Comité Científico:
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Dr. Robert Verpoorte, Division of Pharmacognosy, Section
Metabolomics, Institute Biology Leiden, Leiden University, Leiden, The
Netherlands.
Dr. Juan Izquierdo, Ex Oficial Regional FAO.
Dra. Rosa Cusido, Universidad de Barcelona, España.
Dra Ana M. Giulietti , UBA-CONICET. Argentina.
Dra. A. Pomilio, PRALIB-CONICET-CONICET.
Dr. Luis Mroginski, IBONE, UNNE-CONICET.
Dr. Gabino Garrido Garrido. Universidad Católica del Norte,
Antofagasta, Chile.
Inscripción
Privados y público en general
Socio REDBIO (cuota al día)
(s/cuota al día)
Socio REDBIO
15/7/2009
400
200
250
100
15/9/2009
450
250
300
200
15/11/2009
500
300
350
250
(Estudiante)
Estudiantes
Estudiantes de grado
150
50
150
75
200
100
Presentando:
1) Recibo correspondiente cuota 2009.
2) Nota avalada por director de tesis.
3) Libreta Universitaria vigente.
Comprobante De Pago Inscripción
II REUNION DE BIOTECNOLOGÍA
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Cuenta Corriente
N° 0300097/07
Sucursal 917 (Nueva Cordoba - Estrada 141)
CBU 0200917301000030009779
CUIT 30-71040409-3
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Nombre y Apellido:......................................................................................................
DNI:..............................................................................................................................
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Nombre:........................................................................................................................
Domicilio:.....................................................................................................................
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Una vez depositado enviar la boleta de depósito por fax al 0351 – 434 2731 int. 141 o al
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respectivo.
Incorporar comprobante de pago
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deberá contar con los siguientes datos:
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Beneficiary:
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Titular: Ministerio de Ciencia y Tecnología de la Provincia de Córdoba
Banco de Córdoba
Sucursal Nueva Córdoba 917
Cuenta Corriente N° 0300097/07
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BANK OF NEW YORK, ambos en NEW YORK, USA.
Los gastos bancarios son por cuenta del depositante y deberán ser pagados
independientemente de la cuota de inscripción
ENVÍO DE RESÚMENES (Libro de Resúmenes)
Los resúmenes serán recibidos hasta el 15/10/2009, según
las siguientes especificaciones:
Máximo de 250 palabras.
Configuración de página: margen izquierdo: 3 cm,
margen derecho: 2,5 cm.
Tipografía: arial.
Título: font 16 (escritura normal). A un espacio:
autores (font 14) Apellido/s y siglas. A un espacio,
dirección de cada uno, incluido el email (font 12). A
un espacio texto (font 11).
Se recibirán también trabajos “in extenso” que serán
publicados en la revista con referato internacional
Molecular Medicine Chemistry. Se adjunta modelo
Análisis cuali y cuantitativo de los flavonoides presentes
en Passiflora caerulea L. cultivada in vitro vs P. caerulea
planta madre
Silvia Aquila1, Paula Conforti2, Etile D. Spegazzini1, Silvia L.
Debenedetti1,María Guillermina Volonté2
Cátedra de Farmacognosia – LABRAM. 2Cátedra de Control de Calidad de
Medicamentos. Facultad de Ciencias Exactas. UNLP. Calle 47 y 115 s/n La Plata (CP
1900) E-mail: sdebenedetti@biol.unlp.edu.ar
1
Introducción:
Varias
especies
de
Passiflora (Passifloraceae) han sido
tradicionalmente usadas para el tratamiento
de la ansiedad, insominio y estados
nerviosos (Brasseur y Angenot, 1984),
siendo P. incarnata la especie europea con
mayor difusión por su uso medicinal. En
Argentina Pasiflora caerulea L. conocida
como “pasionaria”, “pasionaria azul”, “flor
de la pasión”, es una planta trepadora que
crece especialmente en las provincias del
noroeste, Mesopotamia, Córdoba y Buenos
Aires (en la ribera del Río de la Plata). Las
partes aéreas de esta especie son usadas en
la medicina popular con los mismos fines
que las otras especies de Passiflora en
estados de ansiedad, tensión nerviosa e
insomnio. Forma parte de la composición
de numerosos medicamentos fitoterápicos
ya sea como droga vegetal entera, en polvo,
tinturas o extractos y se encuentra en la
composición
de
una
preparación
farmacéutica patentada en Europa para el
tratamiento de la ansiedad o la depresión
(Yutaka et al, 2005).
Actualmente se recolectan ejemplares
silvestres de esta especie, sin embargo la
necesidad de obtener materias primas de
calidad conveniente y en cantidad
suficiente,
evitando
la
recolección
indiscriminada,
ha
provocado
la
domesticación de esta especie a través de la
técnica de cultivo in vitro (Gattuso et al,
2003). El presente trabajo se encuentra
dirigido a evaluar cuali y cuantitativamente
el contenido en flavonoides, de los
extractos metanólicos de las partes aéreas
de P. caerulea obtenida por cultivo in vitro,
en comparación con la planta madre de la
cual se obtuvo el tejido.
Los principales compuestos bioactivos
descriptos para el género son derivados de
flavonoides, como los C-glicósidos de
apigenina y lutelina (vitexina, isovitexina,
homoorientina,
vitexina-2”-ramnósido,
entre otros), constituyendo la mejor opción
como marcadores de calidad (Simony et al,
2005)
Metodología:
Material vegetal
Las partes aéreas de Pasiflora caerulea L.
(Passifloraceae) de la planta madre (Pm) y
de la planta cultivada in vitro (Piv) (Severin
et al., 2003) fueron recolectadas en el
mismo tiempo (durante el período
vegetativo) por la Dra. Susana Gattuso de la
Cátedra de Botánica de la Facultad de
Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas de la
UNR, secadas y remitidas para su análisis.
Análisis cualitativo por TLC y HPLC
Preparación de la muestra: 5g de partes
aéreas secas y pulverizadas de las plantas
de ambos orígenes (planta madre y cultivo
in-vitro) se calientan a reflujo con 50 ml de
metanol (MeOH) durante 10 minutos. Se
enfría y se filtra. Los extractos se
concentran en evaporador rotatorio a un
volumen final de 5 ml.
FE: Sílica gel 60 F254; FM: Acetato de
etilo: ác. acético: ác. fórmico: agua
(100:11:11:26)
Soluciones Muestras:
-Extracto MeOH de P. caerulea (Pm).
-Extracto MeOH de P. caerulea (Piv)
Soluciónes de Referencia: Isovitexina,
Vitexina, Homoorientina, Isoquercitrina,
Vitexina-2’’-O-ramnósido, en MeOH.
Siembra: 20 µl de cada uno de los extractos
en bandas de 1 cm.
Revelado: Reactivo de Productos Naturales
(RPN-PG)
HPLC (Aquila et al, 2005)
Tratamiento de la muestra: previo al
análisis por HPLC se realiza una dilución
1:16 de cada extracto en la fase móvil
utilizada. Se filtra por membrana de nylon
de 0,45 µm y se inyecta por triplicado en el
cromatógrafo.
Columna: RP– 18 (250 x 4 mm, 5µm);
Fase Móvil: Agua: tetrahidrofurano: 2propanol: acetonitrilo (88:8:1,6:2,4) con
0,05% de ácido fosfórico en la fase acuosa.
pH=2,8
Flujo: 1 ml/min; Temperatura: 25C;
Volumen de inyección: 20 µl; Detección
UV: 336 nm; Parámetro de integración:
Area
Estándares utilizados:
Los estándares fueron adquiridos en
Extrasynthese y diluidos en Fase móvil
para su inyección en HPLC
Isovitexina: solución al 20 µg/ml
Vitexina-2’’-ramnósido: solución al 30
µg/ml
Vitexina: solución al 20 µg/ml
TLC (Aquila et al, 2005)
Homoorientina: solución al 22,5 µg/ml
Isoquercitrina: solución al 35 µg/ml
Análisis cuantitativo por espectrofotometría
El análisis cuantitativo de los flavonoides
totales presentes en los extractos de P.
caerulea Pm y Piv fue realizado por
espectrofotometría UV siguiendo la técnica
de análisis de Pasiflora incarnata que
figura en la European Pharmacopoea 2005
y calculados como isovitexina. La
extracción del material vegetal y las
valoraciones
fueron
realizadas
por
duplicado de manera de tener cuatro datos
para cada una de las muestras de P.
caerulea.
No se observan cambios cualitativos en el
perfil de ambas muestras. Solo se aprecia
una diferencia en la cantidad total de
flavonoides a favor de P. caerulea cultivo
in vitro, verificable por los valores de
atenuación con los cuales se realizó la
corrida cromatográfica. La valoración
espectrofotométrica de flavonoides totales
con valores promedio entre 4-5%,
corrobora dicha observación.
Se debería continuar con los estudios de
variación estacional del contenido de
flavonoides totales (cuali y cuantitativo) de
manera de fijar una época de recolección
apropiada donde el contenido de
flavonoides sea máximo.
Bibliografía:
Resultados y Discusión:
La evaluación cualitativa de los flavonoides
presentes en el extracto MeOH de ambos
extractos fue realizada por comparación de
los Rf y tr obtenidos en el análisis por TLC
y HPLC, respectivamente. Los flavonoides
homoorientina, isovitexina y vitexina-2”ramnósido pudieron ser identificados en
ambos extractos por comparación con los
estándares, junto con otros compuestos que
no fueron identificados.
Aquila S., et al. (2005). V Reunión de la
Sociedad Latinoamerican de Fotoquímica.
Nov. 2005.
Brasseur, T. y Angenot L (1984) J. Pharm.
Belg. 39: 15-22
Gattuso S, et al. (2003). J. of Tropical
Medicinal Plants. 4(2): 249- 256.
Severin C., et al. (2003 J. of Tropical
Medicinal Plants 4(1): 97-102.
Simony D., et al. (2005) J. of
Pharmaceutical and Biomedical Analysis
37: 399–403
Yutaka M, et al (2005). Takeda Chemical
Industries Ltd. Patent JP2005272342
(European Patent Office).
Agradecimientos:
Los autores agradecen a la Beca y subsidio
PICT- 11987 de ANCYPT
Official languages: English Spanish One author of
each abstract must be registered.
Idiomas: Castellano e Inglés
Deberá haber un inscripto por cada resumen
enviado. Se deberá optar por una de las siguientes
áreas temáticas:
Etnobotánica
Biotecnología
Productos Naturales
Producción de Aromáticas y
Medicinales
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