HEMOGLOBINA Solución DRABKIN Método


HEMOGLOBINA Solución DRABKIN
Código
Presentación
02939
1 x 1000 ml
Método CIANOMETAHEMOGLOBINA
Para determinación de Hemoglobina en Sangre
PRINCIPIO
CALCULO
La hemoglobina (Hb) presente en la muestra, en presencia de
ferricianuro, se oxida a hemiglobina (Hi, también llamada
metahemoglobina) que, a su vez, se combina con iones cianuro a
pH 7,2 convirtiéndose en cianuro de hemiglobina (HiCN o
cianmetahemoglobina).
Todos los hemocromógenos, a
excepción de la sulfohemoglobina, reaccionan completamente en
3 minutos y la lectura se efectúa a 540nm.
FACTOR =
Absorbancia Patrón
Hemoglobina (g/dl)= Factor x Abs. Muestra
CONTENIDOS
VALORES DE REFERENCIA
Hombres:
12.5 a 17.5 g/dl
Mujeres :
11.5 a 15.5 g/dl
REACTIVO
Reactivo para Hemoglobina SOLUCION DRABKIN
Potasio Ferricianuro
Potasio Cianuro
Buffer y estabilizantes
0.6mM
0.7mM
cs
CARACTERISTICAS DE DESEMPEÑO
LINEARIDAD
La reacción es lineal hasta 25 g/dl. Para valores superiores, se debe
reprocesar con la mitad del volumen de muestra y el resultado obtenido se
multiplica por dos (2).
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS
•
•
•
•
Conservado entre 15°C y 30°C y protegido de la luz , estable
hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
El reactivo tiene componentes tóxicos, evite el contacto con
la piel, ojos y/o ropa. El reactivo contiene cianuro.
No mezcle con ácidos.
No use el reactivo si su color es diferente al amarillo o si es
turbia o decolorada.
MATERIALES
ADICIONALES
SUMINISTRADOS
•
•
•
•
REQUERIDOS
Concentración Patrón _______
NO
REPETITIVIDAD
Concentración media
8.9 g/dl
18.2 g/dl
N
25
25
DE
0.9
1.2
CV%
1.1
1.4
REPRODUCIBILIDAD
Concentración media
9 g/dl
13 g/dl
N
25
25
DE
0.8
1.1
CV%
1.0
1.3
EXACTITUD
Análisis de la regresión lineal obtenido con muestras de suero analizadas
con el presente método y otro método similar se hallo un coeficiente de
correlación (r) igual a 0.992 con una ecuación de regresión lineal
y=0.985x+0.09 (n=27, Rango 8.9-12.6 g/dl).
Patrón HEMOGLOBINA..
Espectrofotómetro o foto colorímetro de filtros capaz de medir
absorbancia a 546nm.
Pipetas automáticas.
Cronometro y/o timer.
INTERFERENCIAS
Sustancias que causen turbidez pueden elevar falsamente el valor de
Hemoglobina. Esto incluye los lipidos, proteinas plasmaticas anormales
(macroglobulinemia) y hemolisis.
Para una lista completa de los
medicamentos y sustancias que pueden interferir en la determinación de
10
hemoglobina consulte Young, et al.
MUESTRA
Sangre Total
a) Recolección: obtener sangre anticoagulada.
b) Aditivos: deben emplearse anticoagulantes concentrados
o anticoagulantes equilibrados y desecados.(citrato, EDTA o
oxalato).
c) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
contenido hemoglobínico de la sangre es estable hasta una
semana en refrigerador (2-10oC). No congelar.
BIBLIOGRAFIA
1.
Stadie, W.C., J. Biol. Chem., 41:237, (1920)
2.
Drabkin, D.L., Austin, J.H., J. Biol. Chem., 112:51, (1935).
3.
Crosby, W.H., et al, U.S. Armed Forces Med J., 5:693, (1954).
4.
Crosby, W.H., et al, Blood, 12:1132, (1957).
5.
Eilers, R.J., Am. J. Clin. Pathol., 47:212, (1967).
6.
Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 2nd ed., W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.411, (1976).
7.
Henry, R.F., et al, Principles and Technics in Clinical Chemistry, 2nd Ed., Harper & Row, Hagerstown, MD, pp.
1128:1135, (1974).
8.
Green, P., et al, Am. J. Clin. Path., 32:216, (1959).
9.
Van Kampen, E.J., et al, Clin. Chem. Acta, 6:538, (1961).
10.
Young, D.S., et al, Clin. Chem., 21:1D, (1975).
11.
Wolf, P.L., Practical Clinical Hematology, John Wiley & Sons, NY, p. 144, (1973).
PROCEDIMIENTO
Índice de Símbolos
Tome 3 tubos de ensayo y proceda así:
BLANCO
MUESTRA
5.0 ml
5.0 ml
Reactivo
Hemoglobina
0.02 ml
Sangre Total
Patrón
PATRÓN
5.0 ml
Producto para
diagnóstico
in-Vitro
Referencia o
Código
Pruebas
por Kit
Para usar
consulte las
instrucciones
Precaución
Consultar las
instrucciones
Fabricante
Número de Lote
Fecha de
Caducidad
Fecha de
Fabricación
Limite de
Temperatura
Riesgo Biológico
0.02 ml
Agite bien, espere 5 minutos y mida la absorbancia de la muestra
a 540 nm o filtro verde (500 a 540) llevando el aparato a cero con
blanco de reactivo. Obtenga el valor en g/dl de la muestra,
utilizando la calibración (curva o factor) preparada con el patrón
de hemoglobina.
ESPECIALIDADES DIAGNOSTICAS IHR Ltda.
PBX: +(2) 552 5444 / Calle 7 A No. 45-07 Santiago de Cali - Colombia
e-mail: servicioalcliente@ihrdiagnostica.com
www.ihrdiagnostica.com
1/1
2006-11v2.0