Frecuencia de Virus Papiloma Humano (HPV) de alto y bajo riesgo

Frecuencia de Virus Papiloma Humano (HPV) de alto y bajo riesgo
entre mujeres jóvenes de Resistencia y Corrientes
Deluca, Gerardo D. - Alonso, José M. - Lucero, Horacio
Departamento de Biología Molecular - Instituto de Medicina Regional - UNNE.
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ANTECEDENTES
La infección en el hombre por el virus papiloma es muy común y puede afectar tanto a la piel como las mucosas
oral y genital. En la piel son causantes de las afecciones comunmente conocidas como verrugas y en el tracto
anogenital es causante de lesiones benignas como el condiloma acuminado aunque también de otras como el
cáncer de cervix 1, 2.
El cáncer de cérvix es la segunda o tercer causa más común de cáncer en las mujeres en todo el mundo. Sin
embargo en algunos países en vías de desarrollo, entre los que se incluye la Argentina, el cáncer cervical ocupa
el primer lugar 3, 4
Está perfectamente reconocida la asociación existente entre esta patología y la infección persistente por ciertos
genotipos del virus papiloma humano (HPV) 5
El HPV infecta las células germinales de los epitelios, a las cuales llega a través de microlesiones o abrasiones.
La infección puede ser transciente o persistente; en las persistentes, sucede que en algún momento el virus se
integra al genoma celular, transformando la infección en un factor de riesgo para el desarrollo de un carcinoma 6,
7, 8
, mientras que en una infección transciente (virus no integrado), incluso con genotipos de alto riesgo, no hay
peligro de desarrollar una patología maligna 9.
De todos los productos codificados por el genoma del HPV, los que se encontraron asociados a transformación
celular fueron los correspondientes a los genes E6 y E7 de la región temprana 10, 11. Estos genes codifican para
proteinas multifactoriales que interfieren con el crecimiento celular (proteínas E6 y E7 respectivamente).
Los distintos tipos de HPV asociados a lesiones genitales están divididos en grupos de acuerdo a la frecuencia
con que se asocian a tumores malignos y a su potencial oncogénico presumido. Las verrugas genitales exofíticas
(condiloma acuminado) contienen por lo general genoma de los tipos virales HPV-6 y HPV-11, raramente
encontrados en cánceres y por ello designados como tipos de “bajo riesgo”. El grupo de alto riesgo incluye a los
tipos HPV-16, HPV-18, HPV-31, HPV-33 y HPV-45, siendo el HPV-16 el de mayor responsabilidad 12, 7.
Numerosos estudios han enfocado su atención sobre los cofactores y los factores del huésped que incrementan el
riesgo de las infecciones por HPV y las lesiones asociadas. Algunos factores estudiados incluyen el habito de
fumar, el uso oral de hormonas contraceptivas, el número de partos, edad temprana de inicio sexual, número de
parejas sexuales, uso de vitaminas como los carotenoides, vitamina C y acido fólico, etc 13, 14, 15, 16, 17. Otro factor
que se ha encontrado asociado es la coinfección con otras enfermedades de transmisión sexual como ser el
herpes simples, HIV y chlamydia trachomatis 18, 19.
La citología, la histología y la colposcopía son las técnicas clásicas utilizadas desde hace muchos años en la
exploración ginecológica. El PAP si bien es el más accesible por facilidad y economía, presenta un elevado
porcentaje de falsos negativos (entre un 10 y un 30%). La colposcopía resulta rápida y accesible y permite
observar lesiones clínicas o subclínicas como “compatibles” con infección viral pero no detecta una infección no
productiva. La histología también es un método accesible y tiene la ventaja de poder observar el efecto citopático
viral, aunque da muchos falsos negativos y solo detecta infección productiva 20.
Actualmente están en auge las técnicas de biología molecular para la detección y genotipificación del HPV, de
las cuales la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es la más utilizada 21. Es muy sensible y específica,
puede tipificar los genotipos existentes es capaz de detectar nuevos tipos virales y subtipos y esto es significativo
en la predicción y pronóstico de las lesiones genitales. Estas técnicas de diagnóstivo virológico deben ser
utilizadas conjuntamente con las técnicas clásicas de la exploración ginecológica, porque de ninguna manera las
reemplaza, sino que las complementa.
Los estudios realizados hasta ahora en Argentina muestran información muy interesante acerca de prevalencia e
incidencia 1, 2, 22. En el Norte argentino se han realizado hasta el momento pocos estudios sobre HPV y cáncer de
cérvix, a pesar de ser una de las regiones de más alta incidencia del país. Podemos mencionar el trabajo sobre
tipificación de virus papiloma humano en lesiones cervivales por PCR-hibridación realizado en Corrientes 23 y un
estudio de prevalencia realizado en Misiones y áreas de influencia 4.
El presente es un informe preliminar de las primeras 27 muestras que se han procesado en el laboratorio de
Biología Molecular del Instituto de Medicina Regional. Si bien el número de muestras estudiadas es
relativamente bajo lo que no permite por el momento establecer conclusiones válidas para la población en
estudio, se analizan para estos primeros datos algunas tendencias epidemiológicas.
MATERIALES Y METODOS
La detección y tipificación del virus papiloma humano en células o tejidos se efectuó mediante amplificación por
PCR de un fragmento genómico y posterior análisis por restricción enzimática (RFLP)
Productos utilizados en la presente técnica:
• Primers consenso My09 y My11.
• Enzimas de restricción Bam HI, DdeI, Hae III, HinfI, PstI y RsaI
• Control positivo: DNA de la línea celular CaSki que contiene integrado genoma de HPV-16
Material de muestra
Los materiales de estudio consistieron en:
• Células obtenidas por cepillado cervico-vaginal de las lesiones observadas en el tracto genital.
• Tejido fresco de biopsia obtenido para estudios histológicos
Fuentes del material estudiado
• Material recibido del Servicio de Ginecología del Hospital Vidal de la ciudad de Corrientes.
• Material cedido por distintos centros ginecológicos privados de las ciudades de Resistencia y Corrientes.
Para el estudio de los factores de riesgo asociados a la infección por HPV se confeccionó una ficha
epidemiológica.
Criterios de selección
1) Se estudiaron mujeres que presentaban lesiones intraepiteliales escamosas de bajo grado (LG-SIL) y de alto
grado (HG-SIL), 2) mujeres que presentaron células escamosas atípicas de significado indeterminado (ASCUS),
3)mujeres que presentaron cáncer invasor, de acuerdo a la clasificación de Bethesda.
RESULTADOS
Se llevan estudiadas al momento 27 muestras (24 cepillados y 3 biopsias cervicales) distribuidos de la siguiente
manera:
Ciudad
Corrientes
Resistencia
Distribución por origen de muestra
origen
Centros ginecológicos privados
Hospital Vidal (servicio de ginecología)
Centros ginecológicos privados
total
N°
4
10
13
27
De las 27 muestras estudiadas, se encontró presencia de HPV en 15 (55%) casos. Los genotipos identificados, se
presentan en la siguiente tabla:
Distribución por genotipo de las muestras positivas
Genotipo
N° casos
No determinado
9
MM4
1
6b
1
33
2
52
1
16
1
58
1
Coinfecciones de dos o más genotipos
Asociación
N° casos
15-58
1
6b-33
1
Asociaciónes indeterminadas
4
total
6
DISCUSION
La alta frecuencia de infección por HPV reportada en el norte argentino en publicaciones previas no es de
extrañar teniendo en cuenta el elevado número de casos de cáncer de cérix que se presentan.
Teniendo en cuenta la información procesada hasta el momento, podemos decir que se confirma la alta
frecuencia esperada, con un 55,5% de casos positivos entre mujeres que presentan algún tipo de alteración
ginecológica de las ya mencionadas y también que se observa una edad promedio muy temprana para estas
infecciones. Si bien esto puede ser considerado no significativo, no lo es el hecho de que la mayoría presente ya
a temprana edad alteraciones citológicas de tipo L-SIL, H-SIL y ASCUS, que generalmente están descriptas en
casos de infección por HPV luego de los 30 años. Además, es llamativo el número elevado de coinfecciones
virales que se pudieron observar (6/15), lo cual podría ser una característica local, aunque ciertamente es
necesario un mayor número de muestras para generar una conclusión valedera. Nueve muestras presentaron un
genotipo indeterminado, y esto se debe en parte a la presencia de un gran número de coinfecciones virales, las
cuales en ocasiones resultan difíciles de ser analizadas por la metodología empleada en el presente estudio (PCRRFLP). En los casos en que sí se ha podido llegar a la identificación del genotipo, la gran mayoría resultó ser de
alto o mediano riesgo (HPVs-33-16-58-52).
En este estudio también se intenta obtener un perfil local de los cofactores asociados a la infección por HPV,
teniendo en cuenta la edad, el hábito de fumar, el número de parejas, el consumo de anticonceptivos orales, edad
de inicio sexual lo cual se obtiene a partir de la confección de una ficha epidemiológica del paciente. No
obstante, dado que el número de casos estudiados es relativamente bajo no se puede por el momento adelantar
conclusiones al respecto.
Por último, fundamentamos la importancia de este trabajo en la necesidad de recabar mayor información local, lo
cual generaría un beneficio tanto para la comunidad médica como para los entes encargados de la prevención.
Así también, la continuidad de este tipo de trabajos genera una mayor concientización sobre un problema,
sumamente relevante y que sin embargo no termina de tomar relieve en la sociedad. Esto es aún más grave si se
tiene en cuenta que la prevención el arma fundamental para disminuir la incidencia del cáncer de cérvix.
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