9 Rev biomed 1997; 8:9-13. Transmisión natural de rotavirus entre humanos y animales. Gerardo G. Polanco-Marín, Manuel Baeza-Bacab, Javier Cámara-Mejía, Marilyn Puerto-Solís, María del R. González-Losa, Fernando I. Puerto. Laboratorio de Virología, Centro de Investigaciones Regionales, "Dr. Hideyo Noguchi", Universidad Autónoma de Yucatán, Mérida, Yucatán, México. RESUMEN. Introducción. Los rotavirus son la causa más común de diarrea infecciosa aguda, tanto en humanos como en animales jóvenes. Se ha reportado, sin poderse demostrar, que los rotavirus de animales pueden infectar al hombre, lo que hace suponer una posible transmisión interespecies. Motivados por lo anterior realizamos un estudio de transmisión de la infección entre humanos y animales. Material y métodos. Se estudiaron siete pacientes con diarrea por rotavirus en la población de Sinanché, Yucatán, de nivel socioeconómico bajo y que convivían con animales. En ambos, humanos y animales, se recolectó una muestra de materia fecal cada semana hasta que la prueba del paciente resultó negativa, las cuales, fueron procesadas por medio de ELISA. A los casos positivos se les realizó electroforesis en gel de poliacrilamida para visualizar los patrones electroforéticos del RNA viral. Cuando el patrón electroforético del paciente y de alguno de sus animales resultó semejante, se realizó una coelectroforesis para demostrar que se trataba del mismo virus. Resultados. Con la técnica de ELISA se encontraron once animales con rotavirus del grupo A, pero, solamente uno de ellos tuvo patrón electroforético compatible con este agente, el cual fue semejante al que presentó su caso índice, confirmando por coelectroforesis que se trataba del mismo agente. Presentado en el XX Congreso Anual de la Asociación Mexicana de Infectología y Microbiología Clínica, efectuado en la Ciudad de Mérida, Yucatán del 8 al 11 de noviembre de 1995. Solicitud de sobretiros: Q.F.B. Gerardo G. Polanco-Marín, Laboratorio de Virología, Centro de Investigaciones Regionales "Dr. Hideyo Noguchi", Ave. Itzáes No. 490 por calle 59, Mérida, Yucatán, México, C.P. 97,000. Teléfono : (99) 24-64-12. Recibido el 29/Julio/1996. Aceptado para publicación el 8/Enero/1996. Vo. 8/No. 1/Enero-Marzo, 1997 10 GG Polanco-Marín, M Baeza-Bacab, J Cámara-Mejía y col. Discusión. La presencia de rotavirus en los animales nos hace suponer que ocurrió una infección interespecies, aunque, solamente en un caso se pudo demostrar que la cepa infectante era la misma en el humano y el animal. Palabras clave: rotavirus, diarrea, transmisión interespecies. SUMMARY. Natural transmission of rotavirus between humans and animals. Introduction. Rotaviruses are the most common cause of acute infectious diarrhea in human beings and in young animals. It has been reported but not demonstrated that animals' rotaviruses could infect human beings suggesting a possible interspecies transmission. Based on these data we decided to carry out a study to detect rotavirus transmission between human beings and animals. Material & Methods. Seven patients with diarrhea from a low social economic level were studied, all of whom lived with animals in Sinanche, Yucatan. A faecal sample was taken every week until the laboratory tests were negative. The samples were processed by ELISA. The electrophoretic patterns of RNA segments were determined in positive samples by poliacrilamide electrophoresis. A coelectrophoresis was performed when electrophoresis patterns from patients and animals were similar. Results. Eleven animals with rotavirus from A group were found by ELISA technique, but, just one of them had an electrophoretic pattern compatible to this virus, this was confirmed by coelectrophoresis that it was the same virus. Discussion. The presence of rotavirus in animals made assume that an interspecies infection had been taking place, even though we could only demonstrate that strain infectant was the same in human beings and animals in one case. Revista Biomédica Key words: rotavirus, diarrhea, interspecies transmission. INTRODUCCION. Los rotavirus del grupo A son los principales agentes de la diarrea infecciosa aguda (DIA), tanto en los niños como en los animales jóvenes (perros, gatos, cerdos, caballos, vacas, monos, gallinas, pavos y palomas) (1-7). Con base en las características antigénicas presentes en la proteína VP6 de la cápside interna se pueden clasificar en: a) grupos de la A a la G, de los cuales, los tres primeros se han reportado en humanos y animales, mientras que de la D a la G solo se han detectado en animales; y b) subgrupos denominados I y II, de los cuales el I se ha encontrado tanto en humanos como en animales y se asocia con un patrón electroforético corto, en tanto que el subgrupo II sólo se presenta en humanos y se asocia con un patrón electroforético largo (2). El genoma de este virus está constituido por 11 segmentos de RNA de doble cadena. Cada segmento representa un gen que codifica una de las proteínas estructurales y no estructurales del virus. Estos segmentos se puede separar por medio de electroforesis en gel de poliacrilamida con tinción de nitrato de plata, observando patrones electroforéticos característicos de RV (3-5). A pesar que los humanos y los animales pueden infectarse con RV de los grupos A, B y C, es poco probable que las cepas que infectan a los animales también puedan infectar a los humanos (3). Sin embargo, en las epidemias de diarrea por RV que se presentaron en Australia, EE.UU., Israel, Japón, Thailandia y Brasil entre 1974 y 1993, caracterizadas por manifestaciones clínicas severas, en niños menores de 5 años de edad, se encontró que algunas de las cepas infectantes tuvieron una homología >90% con cepas provenientes de gatos, perros, cerdos, vacas y caballos (12-17). La presencia de RV de animales en estas epidemias presupone que la transmisión interespecies de este agente está ocurriendo de manera natural y pudiera 11 Transmisión de rotavirus entre especies. estar participando en forma importante en la evolución de los RV (18). Sin embargo, la transmisión de una especie a otra no se ha podido comprobar en la naturaleza, lo que nos motivó a realizar el seguimiento de un grupo de individuos con diarrea por rotavirus, buscando la posible transmisión de la infección entre humanos y sus animales. MATERIAL Y METODO. Procedimiento. A los pacientes que acudieron a consultar por diarrea aguda de menos de tres días de evolución entre enero de 1994 y diciembre de 1995 a la Clínica del I.M.S.S.-Solidaridad de Sinanché, Yucatán, se les recolectó una muestra de materia fecal para diagnóstico de rotavirus por medio de Ensayo Inmunoenzimático (Elisa) (19). El paciente con prueba positiva y que habitaba en una vivienda con piso de tierra, sin baño ni agua potable y que convivía con animales domésticos y peridomésticos, se le denominó "caso índice" y se le recolectó una muestra de materia fecal cada semana para demostrar la presencia de RV, hasta que la prueba resultó negativa o sea, hasta que dejó de excretar el virus. A los animales que convivían con el caso índice, se les recolectó una muestra de materia fecal en el momento del diagnóstico de la diarrea por RV y posteriormente cada siete días hasta una semana después de que el paciente dejó de eliminar el virus. Procesamiento de la muestra. Las muestras de materia fecal, de humanos y animales, fueron procesadas por medio de un Elisa comercial que utiliza anticuerpos monoclonales contra RV del grupo A (DAKO A/S, Dinamarca). A los casos positivos por Elisa se les realizó electroforesis en gel de poliacrilamida con tinción de nitrato de plata (Gepa) para visualizar los patrones electroforéticos del RNA viral (20). Cuando el patrón electroforético del caso índice y de alguno de sus animales resultó semejante, se llevó a cabo una coelectroforesis de ambas muestras, con la finalidad de demostrar que se trataba del mismo virus. RESULTADOS. Se estudiaron 44 pacientes con diarrea aguda, encontrando 10 positivos a rotavirus (23%), de los cuales 7 cumplieron con los criterios de inclusión. En cinco de las siete viviendas se detectó cuando menos un animal con rotavirus: gallina, pato, pavo, paloma, becerro, cerdo y perro ; y no se identificó este agente en: torcazas, gansos, chivos, carneros y gatos (cuadro 1). En total se detectaron once animales positivos a RV del grupo Cuadro 1. Casos de diarrea por rotavirus y resultados de ELISA y electroforesis en gel de poliacrilamida de los animales estudiados. ANIMALES Casos 1 2 3 4 5 Elisa + Gallina Becerro, pato, pavo, gallina, paloma Perro, pavo Perro Pavo, perro Electroforesis + Gallina Elisa Perro, gato, carnero Ganso, cerdo, chivo, perro Gallina, pavo Gallina, pato Vo. 8/No. 1/Enero-Marzo, 1997 12 GG Polanco-Marín, M Baeza-Bacab, J Cámara-Mejía y col. A por medio de la técnica de Elisa, sin embargo, solamente uno de ellos presentó patrón electroforético compatible con este agente. Además, el patrón que presentó este animal fue semejante al que se observó en su caso índice (figura 1), los cuales se describen a continuación. Descripción de los casos. Un paciente del sexo femenino de 60 años de edad acudió a consultar por presentar evacuaciones diarreicas líquidas, en número de ocho en 24 horas, abundantes, con vómito pero sin deshidratación. Se le recolectó una muestra de materia fecal, la cual fue positiva a rotavirus del grupo A. Posteriormente se recolectaron las muestras de materia fecal a sus animales (becerro, patos, gansos, gallinas, palomas, pavos, cerdos, chivo y perros), detectándose una semana después en una muestra de materia fecal de gallina la presencia de rotavirus del grupo A, la cual persistió positiva la semana siguiente. A las dos muestras positivas, humano y animal, se les realizó Gepa observando un patrón electroforético semejante, por lo cual se realizó coelectroforesis encontrando un solo patrón (figura 1). DISCUSION. La presencia de rotavirus en los animales do- mésticos y peridomésticos en los domicilios de los pacientes con diarrea aguda por rotavirus nos permite suponer que ocurrió una infección interespecies, aunque, solamente en un caso se pudo demostrar que la cepa infectante era la misma en el humano y el animal. En los otros animales que tenían prueba de Elisa positiva a RV del grupo A no fue posible detectar la presencia del virus por medio de Gepa probablemente porque tenían una infección asintomática y por ello excreción viral de baja cantidad, lo que impidió detectar el RV con esta técnica. Aparentemente la transmisión de la infección fue del humano al animal, ya que en el momento de identificar RV en el paciente, el animal era negativo, pero una semana después se identificó este virus en la muestra de materia fecal. Varios informes han señalado la posible transmisión de la infección entre especies diferentes. Este trabajo también apoya el concepto de transmisión de la infección de RV de una especie a otra. REFERENCIAS. 1.- Eastes MK, Cohen J. Rotavirues gene structure and function. Microbiol Rev 1989; 53:410-449. 2.- Eastes MK, Graham DV, Petrie BL. Antigenic structure of rotaviruses. En Van Regemortel MHV, Neurath Ar, eds. Inmunochemistry of viruses. Amsterdan: Elsevier 1985: 389-405. 3.- Saif LJ, Theil KW. Antigenically distint rotaviruses of human and animal origin. En Tzipori S, ed. Infectious diarrhea in the young, strategies for control in humans and animals. Amsterdan: Elsevier, 1985: 208-214. 4.- Nakagomi OT, Nakagomi K, Akatami, Ikegami N. Identification of rotavirus genegroups by RNA hibridization. Moll Cell Probes 1989; 3:251261. Figura 1.- Se presenta un gel de poliacrilamida con tinción de nitrato de plata, observando en el primer carril (P) un control positivo a rotavirus, en el segundo (H) la muestra de caso índice, en el cuarto (A) la muestra de la gallina y en el tercero (Co) la coelectroforesis de ambas muestras. Revista Biomédica 5.- Matsui SM, Mackow ER, Matsuno S, Paul PS, Greenberg HB. Sequence analisis of gene 11 equivalents from "short" and super short strains of rotaviruses. J Virol 1990; 64:120124. 6.- Nakagomi O, Nakagomi T. Genetic diversity among mamalian rotaviruses in relation to interspecies transmission 13 Transmisión de rotavirus entre especies. of rotavirus. Arch Virol 1991; 120:43-55. 7.- Eastes MK, Mason BB, Crawford S, Cohen J. Cloning and nucleotides sequence of the simian rotavirus gene 6 that codes for the major inner capsid protein. 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