Análisis de HbA1c en Presencia de Variantes.

Co
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n
Análisis de HbA1c
en Presencia de
Hemoglobinas Variantes
al
de
lL
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rio
Cl
ínEloísa
Urrechaga, PhD
i
c
Consultor en
Clínicos
oAnálisis
20
eloisa.urrechagaigartua@osakidetza.eus
1435N 3 W
Co
Controvertida molécula……..
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Una modificación post-traducción
glicación
de una proteína
Hemoglobina
en un tejido
sangre
se relaciona con una enfermedad Diabetes Mellitus
al
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Cl
ín
ico
20
15
su síntesis se produce como si el sistema fuera
inerte
HbA1c
C una molécula única
on
gr
es
oN
ac
ion
 Eritrocitos mantienen un metabolismo residual
 Glucosa penetra en la célula por difusión facilitada
al
 La glicación de Hb es un proceso espontáneo no
mediado por enzimas y acumulativo
deEs proporcional a la glucemia media
y lotros factores
La
la vida media de los eritrocitos
bo cinética de la reacción
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Cl
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co
20
15
Co
ng
Medicina basada en al Evidencia
gold standard control metabólico DM
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cio
n
DCCT Study Group. The effect of intensive treatment of diabetes on
the development and progression of long-term complications in insulindependent diabetes
mellitus: the Diabetes Control and Complications Trial
N Eng J Med 1993; 329: 977–986
al
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lL
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or
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rio
Cl
ín
ico
20
UK Prospective Diabetes Study Group. UKPDS 33: intensive blood glucose control with
sulphonylureas or insulin compared with conventional treatment and risk of complications in
patients with Type 2 diabetes
Lancet 1998; 352 : 837–853
15
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Hemoglobinas
on
gr Familia de moléculas
es  Fisiológicas
o NPatológicas
ac químicamente
 Modificadas
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CA1c
Hb
y otras Hemoglobinas:
o
ng y oportunidad
amenaza
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Amenaza pero Oportunidad
n
al
Hb variantes
d
Oportunidad HbA2
el
La
Amenaza
otras Hb químicamente modificadas
Detección de portadores
de β talasemia
bo
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15
CDurante
la vida embrionaria, fetal y post-natal
ovarios
ng son los genes que codifican las diferentes globinas
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yz ya ya
Na
Cr.16
cio
nHbaPortland HbF 80-90%
HbA
HbA
Hb Grower-1 y -2
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el a g
z e
a e
z g
a d
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La
a e
z g
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tor0.5% 2.5% 97%
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o CPost-natal
Embrional
Fetal
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Cr.11
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G g Ag
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= Pseudo (y) genes sin expresión
Fuente: presentación Prof P C Giordano
2
1
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2
1
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3’
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2
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2
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2
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2
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2
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2
2
2
2
2
Co
Hb modificadas químicamente
ng
Interferencia analítica es el error sistemático producido por una sustancia distinta de la que se pretende medir en
un procedimiento analítico
Hb modificadas químicamente son potencialmente interferentes debido a la separación incompleta de HbA1c
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lL
• HbA1c lábil esta formada por la unión inestable de
glucosa al grupo amino N-terminal de las cadenas β
(aldimina)
La mayoría libera rápidamente la glucosa volviendo
al estado no glicado, tras la reagrupación de
Amadori se forma la cetoamina estable
ab
or
La carbamilación de forma muy acentuada en
pacientes con función renal reducida y niveles
elevados de urea en suero
ato
rio
Cl
ín
La acetilación in vivo del grupo N-terminal de las
cadenas de globina tiene lugar en pacientes
alcohólicos, mujeres embarazadas y en pacientes
con altas dosis de aspirina
La acetilación tiene lugar principalmente en las
cadenas γ (HbF)
ico
Imagen tomada de presentación Sr M. Castellet. Sebia
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15
Co
ng
Diabetes y hemoglobinopatías
Las Hemoglobinopatías es la enfermedad autosómoca recesiva más prevalente en el mundo
7 % de la población mundial son portadores de genes de Hb mutados
Cada año nacen más de medio millón de niños afectados
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World Health Organization 2008
IDF 2010
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Clβ 6 Glu → Lys
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Hb D
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→ Gln
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Lys
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Hb C
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Sistemas
Co analíticos basados en
la separación
n de Hbs
Normal
HbX
gr
es
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A1c/A0 A1c/A0 + A1c
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a
ld
e
Aglic + Xglic / Anoglic + Xnoglic l
La
bo
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Sacks D, Clin Chem 2003; 49(8): 1245-7
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C que interferencia analítica: metodológica + biológica
Más
on
gr
es con la medida de HbA1c
Factores que interfieren
o modificadas
La presencia de Hbs
químicamente, variantes genéticas o Hb F elevada pueden
N
afectar a la exactitud de a
la cuantificación de HbA1c
ciode HbA1c varía dependiendo del tipo de Hb variante y del
El efecto final sobre el valor
na
método utilizado
ld
Factores que afectan a la interpretacióne
de los resultados de HbA1c
l L y/o acorte su vida media va a rendir valores
Cualquier condición que afecte a los eritrocitos
ab
falsamente bajos
or cuenta, pero otros factores pasan
Sangrados y hemólisis suelen ser tenidos en
ato
desapercibidos en nuestra práctica diaria
rio
o
Las Hbs variantes reducen la vida media de los eritrocitos
Cl
í seai equivalente
o
No hay evidencia de que la cinética de la reacción de glicaciónn
co
a la de Hb A0
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Hb
Vida media
RBC (días)
HbA
120
HbS
93
HbC
87
HbD
115
HbE
?
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Prevalencia de Diabetes Mellitus en regiones donde las Hb variantes son más habituales
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Rhea JM et al. Impact of Hemoglobin variants on HbA1c interpretation: Do we assume too
much? Med Lab Obser 2012; 6: 8-14
Co
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s2015;
Clin Chem & Lab Med
o N53 (9):e207-e210.
ac
Indirect
that the glycation rate in
ioevidence
Hb S, C, D,nand
al E is the same as in Hb A
d
el is more complicated
Hb J and G interpretation
La
In fact no definite conclusions
bocan be made
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15
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al
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Año
Determinaciones
HbA1c
2002
18461
2003
20505
2004
23960
2005
27036
2006
29984
2007
31306
ab 2008
or
a2009
tor
2010 io
2011
2012
2013
2014
32826
35806
Cl
ín
39667
ico
40447
20
43944
15
46627
48035
Co
Hb variante/Talasemia
Número de pacientes
ng
618
Beta talasemia
re
173
so
Hb AS
Na 128
cio 44
Hb Lepore
na30
Hb AC
ld
Alfa talasemia
COMARCA INTERIOR DE VIZCAYA
Delta beta talasemia
13
Hb AD
9
Hb AE
4
Hb AJ
2
Hb Shelby
1
Hb SC
1
Hb X
1
1024
Area que comprende el Este de Vizcaya y
el Norte de Alava
el
La
300000 habitantes nivel socioeconómico
medio, divididos entre medio rural y
pequeñas villas de 10000-30000
habitantes
hay datos oficiales de la prevalencia de
bNo
hemoglobinopatías
en el País Vasco
or
ato
Se considera un área “libre de Hbpatías”
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Cl
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……….
co en el período
Nuestra experiencia
2002-septiembre
202015 ……….
15
2002
C Una propuesta audaz
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Nuestra rutina diaria
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Menasoft
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HA8160 vs HA8180V
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Incidental detection of haemoglobin (Hb) variants during high performance liquid chromatography (HPLC)
analysis of HbA1c: is it time for a standardised approach to reporting?
J. Reeve et al Ir J Med Sci 2015; 184(2):353-5
ng
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BACK GROUND:
Haemoglobin (Hb) variants are genetic variations in the globin genes that code for an abnormal globin protein
structure. The prevalence of Hb variants has increased in Ireland due to the number of emigrants from Africa
and Southeast Asia. The rate of incidentally detected Hb variants, in laboratories employing HPLC to measure
HbA1c, has increased in parallel. The presence of a Hb variant can compromise HbA1cmeasurement and
interpretation. In such cases, HbA1c cannot be used to diagnose diabetes or to assess concordance with
glycaemic targets.
AIM:
To establish the number of incidentally identified Hb variants during 10 months of routine HbA1c analysis, and
the percentage of HbA1c reports alerting the requesting clinician to the presence of a Hb variant.
METHODS:
The laboratory database was interrogated to extract all records of HbA1c requests and incidentally identified Hb
variants from March to December 2012.
RESULTS:
A total of 32,636 HbA1c analyses were performed during the evaluation period. Seventy-three Hb variants were
identified in a total of 46 patients. In 32.6 % (15 of 46) the haemoglobinopathy status was known prior to
testing and 97 % of HbA1c reports communicated the presence of the Hb variant to the requesting clinician.
CONCLUSION :
Hb variants may invalidate the results of HbA1c analysis and could result in a missed diagnosis or a
misdiagnosis of diabetes or mismanagement of a patient with diabetes mellitus. It is, therefore, imperative
that a comment alerting the requesting clinician to the presence of the Hb variant is appended to the HbA1c
result.
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