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Investigación original / Original research
Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina
y pirimetamina según la respuesta
terapéutica antimalárica, en dos municipios
de Antioquia, Colombia
Jaime Carmona,1 Adriana Pabón,1 Diana Márquez,2
Carlos López,3 Gladys Morales 4 y Silvia Blair 1
1
Forma de citar
Carmona J, Pabón A, Márquez D, López C, Morales G, Blair S. Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina según la respuesta terapéutica antimalárica, en dos municipios de Antioquia,
Colombia. Rev Panam Salud Publica. 2005;18(2):75–83.
RESUMEN
Problema. Se ha observado un aumento constante del índice de fracaso terapéutico de la combinación sulfadoxina-pirimetamina (SDX-PIR) en el tratamiento de la malaria por Plasmodium
falciparum sin complicaciones.
Objetivo. Cuantificar, mediante cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC), las concentraciones sanguíneas de SDX-PIR en pacientes con buena respuesta clínica y sin respuesta al
tratamiento.
Métodos. En 2002 se llevó a cabo un estudio experimental con asignación aleatoria y sin anonimato para evaluar el tratamiento con la combinación SDX-PIR en una población de 79 pacientes de
dos municipios del departamento de Antioquia en Colombia (Turbo: 45; Zaragoza: 34), de uno y
otro sexo y de 1 a 60 años de edad, con malaria por Plasmodium falciparum sin complicaciones
y una densidad de parasitemia de 500 a 50 000 anillos/μL. El tratamiento consistió en una sola
dosis, administrada bajo supervisión médica, de SDX (25 mg/kg) y PIR (1,25 mg/kg) combinadas
en comprimidos (500 mg y 25 mg de SDX y PIR, respectivamente) y se realizó seguimiento clínico
y parasitológico por 21 días. Las concentraciones de SDX y PIR se midieron dos horas después de
la administración del medicamento y el día del fracaso terapéutico en los casos en que se produjo.
Resultados. A las 2 horas de haberse administrado el medicamento la concentración sanguínea mediana de SDX fue de 136,6 µmol/L en los pacientes que mostraron respuesta clínica adecuada y de 103,4 μmol/L en quienes no respondieron al tratamiento (P = 0,13). La mediana de
PIR fue 848,4 y 786,1 nmol/L en pacientes con respuesta clínica adecuada y fracaso terapéutico,
respectivamente (P = 0,40). Las concentraciones tampoco mostraron diferencia significativa entre
los casos de fracaso temprano y tardío. La correlación lineal entre las concentraciones de SDX y
PIR fue cercana a cero (r = 0,13).
Discusión y conclusiones. Con respecto a 1998, el fracaso del tratamiento con la combinación SDX-PIR aumentó de 13% a 22% en Turbo y de 9% a 26% en Zaragoza. La falta de respuesta en 2002 no pudo explicarse por concentraciones (menores) de los medicamentos en sangre.
Palabras clave
Malaria falciparum, antimaláricos, sulfadoxina, pirimetamina, cromatografía líquida de alta presión.
Grupo Malaria, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia. Toda correspondencia deberá dirigirse a: Silvia Blair, Calle 62 # 52-59, Torre 1, Piso
6. Laboratorio 610, Sede de Investigación Universitaria (SIU), Universidad de Antioquia, Medellín,
2
Colombia. Fax: 57 (4) 2106487. Correo electrónico:
sblair@catios.udea.edu.co
Facultad de Química Farmacéutica, Universidad
de Antioquia, Medellín, Colombia.
Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 18(2), 2005
3
4
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia.
Universidad de Medellín, Colombia.
75
Investigación original
La combinación de sulfadoxina
(N1-[5,6-dimetoxi-4-pirimidinil]sulfanilamida) con pirimetamina (2,4diamino-5[5-clorofenil]-6-etilpiridina)
se emplea para el tratamiento de la
malaria por Plasmodium falciparum sin
complicaciones. Su acción se explica
por el bloqueo sucesivo de dos enzimas plasmodiales que participan en la
biosíntesis del ácido fólico. Específicamente, su condición de análogos
estructurales y antagonistas competitivos del ácido paraaminobenzoico
(PABA) les da la capacidad de impedir
que el parásito utilice el PABA en la
síntesis de ácido fólico. La sulfadoxina
es un inhibidor competitivo de la enzima dihidropteroato sintetasa, que incorpora el PABA en el ácido dihidropteroico para formar un compuesto que
con participación del glutamato forma
el ácido dihidrofólico. Este, por acción
de la enzima dihidrofolato reductasa,
se reduce a ácido tetrahidrofólico. Esta
última enzima es inhibida por la pirimetamina (1–3).
La sulfadoxina (SDX) y la pirimetamina (PIR) se combinan a razón de
20 a 1 en los comprimidos formulados
para el tratamiento antimalárico; la
SDX tiene actividad antimalárica contra las cuatro especies de plasmodios
que afectan al ser humano. Sin embargo, en algunas zonas endémicas,
especialmente en el Sudeste Asiático y
en América del Sur, existen cepas de
P. falciparum resistentes a esta combinación (4–14). Estudios realizados en
Colombia para evaluar su eficacia terapéutica contra P. falciparum mostraron
fracaso terapéutico en proporciones de
9 a 13% en el departamento de Antioquia y de 3 a 6% en la costa del Pacífico, entre los años 1997 y 1999 (15–21).
Tales resultados son preocupantes,
porque la cloroquina (CQ), fármaco de
primera línea en los esquemas de tratamiento antimalárico, mostró fracaso
terapéutico en 67 a 97% de los casos en
1998 (15–18, 22–25).
El presente estudio da cuenta de la
estimación de la eficacia terapéutica y
las concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina el día del ingreso al estudio (o día cero) y el día del
fracaso (cuando se presentó), en 79 pacientes con malaria por P. falciparum
76
Carmona et al. • Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina en el tratamiento antimalárico
residentes de los dos municipios con
malaria endémica mencionados. En el
período de 1996 a 2000, el municipio
de Turbo, situado en el Urabá antioqueño, presentaba un índice parasitario anual (IPA) promedio de 40 por
1 000 habitantes; para el 2001 registraba 2 203 casos por P. vivax y 1 094
por P. falciparum. En ese mismo periodo (1996–2000), el otro municipio,
Zaragoza, situado en el Bajo Cauca antioqueño, presentaba un IPA promedio de 156 por 1 000 habitantes; para
2001 registraba 306 casos por P. vivax y
160 casos por P. falciparum (26).
MATERIALES Y MÉTODOS
Tipo de estudio
En 2002 se realizó un estudio experimental en el que cada paciente con
malaria por P. falciparum sin complicaciones se sometió a tratamiento con
uno de tres esquemas (CQ, SDX-PIR,
CQ + SDX-PIR), asignado de forma
aleatoria. El diseño no fue ciego, ya
que el médico que asignó el tratamiento fue el mismo que evaluó la respuesta terapéutica.
Población de referencia
La conforman los pacientes con malaria por P. falciparum sin complicaciones y ambulatorios, de uno u otro sexo
y de 1 ó más años de edad, residentes
en los municipios mencionados (en la
zona urbana o en la rural) que consultaron por propia iniciativa a algún
puesto de diagnóstico de malaria.
Estos puestos, administrados por la
dirección local de salud de cada municipio, con el apoyo financiero de la Dirección Seccional de Salud de Antioquia, realizan labores de diagnóstico,
tratamiento y prevención de las enfermedades trasmitidas por vectores.
Dado que en todos los municipios la
atención de la malaria es financiada
por el Estado, la presente investigación se acogió a este beneficio, además
de obtener cobertura económica completa de la atención hospitalaria de los
pacientes que la requirieran, ya fuera
por complicaciones de la enfermedad
o por el tratamiento recibido.
Diseño y cálculo de la muestra
Para calcular el tamaño de la muestra se aplicó la fórmula:
N ⫻ Z2 ⫻ p(1 – p)
n=
[N ⫻ e2] + [Z2 ⫻ p(1 – p)]
donde:
n
= tamaño muestral calculado
N
= población de pacientes con
malaria por P. falciparum, que
consultan al puesto de malaria
Z
= nivel de confianza, que se fija
en 95%, lo que supone un
error alfa (nivel de significación) de 5%
p
= proporción esperada de ocurrencia del fracaso terapéutico
1 – p = complemento de p
e
= error de muestreo, definido
aquí en 12%.
Para calcular el tamaño de la muestra de cada municipio (Turbo y Zaragoza) se empleó la información sobre
frecuencia de malaria por P. falciparum
correspondiente a 1999 (27), los datos
conocidos acera de la frecuencia de
fracaso terapéutico en los dos lugares
(15, 17) y los valores de Z y de e ya indicados. De esa manera, se completó la
siguiente información:
N
Z
595
1,96
466
1,96
p
1–p
e
n
Medicamento
y lugar
0,13 0,87 12% 29
SDX-PIR
en Turbo
0,09 0,91 12% 21 SDX-PIR
en Zaragoza
Según lo anterior, el tamaño de las
muestras de Turbo y Zaragoza fue de
21 y 29, respectivamente. Al final, se
incluyeron 45 pacientes en Turbo y 34
en Zaragoza.
Aspectos éticos
A cada paciente con malaria por
P. falciparum se le informó del estudio,
sus objetivos, riesgos y beneficios. Una
Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 18(2), 2005
Carmona et al. • Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina en el tratamiento antimalárico
vez aceptada su participación (o la de
su hijo) y cumplidos los criterios de inclusión, se obtuvo la firma de una carta
de consentimiento fundamentado que
cumplía con los requisitos establecidos
por el Comité de Ética de la Universidad de Antioquia.
Criterios de inclusión,
exclusión y retiro
Se incluyeron todos los pacientes
con malaria que satisfacían los criterios del protocolo estándar de evaluación de la respuesta terapéutica a los
antimaláricos de la OMS/OPS de 1998
(28, 29) y que además tuvieran facilidad de regresar a las evaluaciones de
seguimiento.
Diagnóstico parasitológico
El diagnóstico de malaria se realizó
mediante examen de gota gruesa, que
se efectuó con objetivo de 100⫻ (aumento de 1 000 veces), y el diagnóstico
se basó en el estudio de 200 campos
microscópicos. La parasitemia se calculó con base en 200 leucocitos y un estándar de 8 000 leucocitos/μL y se expresó en anillos/μL (30). El examen de
gota gruesa se consideró negativo
cuando no se detectó ninguna forma
asexual en 200 campos microscópicos.
Tratamiento antimalárico
Se usaron comprimidos de 500 mg
de SDX y 25 mg de PIR producidos
por Laboratorios Eron, S. A., de La
Habana, Cuba, y suministrados al estudio por el Ministerio de Salud de
Colombia por conducto de la Dirección Seccional de Salud de Antioquia.
El producto suministrado a los pacientes llevó la clave de identificación
de lote “sul 50600606”; la gestión y la
conservación de los certificados de calidad de los medicamentos son funciones del Ministerio de Protección Social
de Colombia. La SDX-PIR se administró a razón de 25 mg/kg de SDX
por 1,25 mg/kg de PIR y se suministró
en una sola toma, todo conforme
a las disposiciones del Ministerio de
Salud de Colombia; el investigador
administró el medicamento a cada paciente, acompañado con agua. El tratamiento se supervisó durante la primera media hora; en caso de vómito
se repitió la dosis completa. Si el
paciente vomitaba nuevamente se retiraba del estudio y se remitía al hospital municipal para atención hospitalaria. El último día de seguimiento
(día 21) se administró a todos los pacientes primaquina (0,75 mg/kg en
dosis única). El tratamiento de rescate
en los sujetos que presentaron fracaso
terapéutico consistió en sulfato de quinina (comprimidos de 300 mg, 10 mg/
Kg cada 8 horas), más clindamicina
(cápsulas de 300 mg, 5 mg/Kg) cada 6
horas durante tres y cinco días, respectivamente, como lo indica el esquema oficial de tratamiento de la
malaria del Ministerio de Protección
Social de Colombia.
Evaluación in vivo de la respuesta
terapéutica
El día del ingreso (día 0) se obtuvo
una muestra de sangre para examen
de gota gruesa y frotis de sangre periférica; luego se suministró el tratamiento correspondiente. Para evaluar
la eficacia terapéutica de los antimaláricos se aplicó el protocolo estándar de
la Organización Panamericana de la
Salud (OPS) 98 (28, 29). La evaluación
se realizó mediante seguimiento clínico durante un período de 21 días,
que fue menor en los pacientes que no
respondieron al tratamiento. Se efectuaron visitas de control clínico y parasitológico al cabo de 1, 2, 3, 7, 14 y
21 días de haberse iniciado el tratamiento, para evaluar la eventual aparición de signos o síntomas de enfermedad malárica activa o de complicación
de la enfermedad.
Clasificación de la respuesta
terapéutica
La respuesta se clasificó de acuerdo
con el protocolo OPS 98 (29), que evalúa la respuesta clínica y parasitológica de la siguiente manera:
Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 18(2), 2005
Investigación original
Fracaso terapéutico precoz (FTP):
• Signos de peligro o malaria grave
los días 1, 2 ó 3.
• Parasitemia al día 2 mayor que al
día 0.
• Parasitemia al día 3 igual o mayor
de 25% del recuento del día 0.
Fracaso terapéutico tardío (FTT):
• Signos de peligro o malaria grave después del día 3, junto con parasitemia.
• Regreso del paciente entre los días 4
y 21, por deterioro clínico aunado a
parasitemia.
• Presencia de parasitemia por P. falciparum en los días 7, 14 ó 21.
Respuesta clínica adecuada (RCA):
• El paciente no presenta ningún criterio de fracaso terapéutico temprano
o tardío y el examen de gota gruesa
se mantiene negativo entre el día 4 y
la última visita de control, el día 21.
Procesamiento de la muestra de
sangre para medir la concentración
de sulfadoxina y pirimetamina
Para medir la concentración sanguínea de SDX y de PIR, a las dos horas
postratamiento y en el momento del
fracaso (cuando se presentó) se realizó
punción capilar en el dedo de la mano
y con ayuda de una micropipeta Gilson® se extrajeron con precisión 100 μL
de sangre. La muestra se depositó en
papel de filtro Whatman del número 3
y se dejó secar a temperatura ambiental
por 30 minutos, sin exposición a la luz;
después, el papel con la muestra se introdujo en bolsas de plástico resellables
y se guardó a 4 °C. La muestra se obtuvo por triplicado.
Para medir la concentración sanguínea de SDX y PIR en el papel de filtro
se empleó el método propuesto por
Green et al. (31), que utiliza cromatografía de líquidos de alta resolución
(high-resolution liquid chromatography,
HPLC) con columna en fase inversa y
detector de luz ultravioleta (UV).
Luego, el papel de filtro con la muestra se cortó en pequeños trozos, que se
introdujeron en un tubo de polipropileno para microcentrífuga (tubo de Eppendorf) de 2 mL. Luego se añadieron
250 mL de ácido clorhídrico (0,1 M) y
77
Investigación original
750 mL de acetonitrilo. Las muestras se
centrifugaron a 14 000 revoluciones
por minuto durante 15 minutos y, una
vez separada la fase orgánica, se les
añadió 1 mL de tampón (amortiguador) fosfato de potasio a un pH de 5,6
y se sometieron por 2 minutos a ultrasonido. Después de este tratamiento se
añadieron 2,5 mL de cloroformo y la
preparación se mezcló en un sistema
de remolino (vortex), se dejó en reposo
y la fase clorofórmica se separó por
evaporación. El residuo seco se disolvió con 1 mL de fase móvil, se filtró con
membrana de nailon con poro de 0,45
µm de diámetro y se inyectaron 20 µL
en el cromatógrafo de líquidos con una
columna de HPLC LiChroCART® 125-4
con cartucho LiChrospher® de 100 RP18 (5 μm), provista de guardacolumnas
LiChroCART® 4-4® de 100 RP-18 (5
μm). Como fase móvil se utilizó una
mezcla 50:50 de acetonitrilo y fosfato
de potasio, que se hizo correr a una velocidad de 0,7 mL/min, con longitud
de onda de 272 nm durante 0 a 3 minutos y de 287 nm por 3 a 8 minutos.
Para calcular la concentración de
SDX y de PIR en las muestras de cada
paciente se comparó el área obtenida
con el patrón (estándar) (SDX y PIR)
después de haber establecido una
curva de calibración con análisis de regresión (modelo lineal: Y = a + bX). En
el caso de la sulfadoxina, el área fue
igual a 715,508 + 97,762 ⫻ concentración, el coeficiente de correlación de
0,996, r2 de 99,147 y el error estándar
de la estimación de 1 019,63. En el de la
pirimetamina, el área fue igual a 1,010 +
0,066 ⫻ concentración, el coeficiente
de correlación de 0,997 y el error estándar de la estimación de 0,533.
Análisis estadístico
Se ingresaron los datos en una base
construida con el programa EpiInfo
6,04, con el cual se validaron y procesaron. Se calcularon medidas estadísticas de resumen de tendencia central,
dispersión, asimetría y curtosis. Los
gráficos se construyeron con Statgraphics Plus 7.1. Como prueba de ajuste de
los datos a la distribución normal se
usó la de Kolmogorov-Smirnov, conte-
78
Carmona et al. • Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina en el tratamiento antimalárico
nida en el programa Statgraphics Plus
7.1. Mediante una prueba de ji al cuadrado se evaluó la asociación entre la
respuesta terapéutica (respuesta clínica adecuada, fracaso temprano, fracaso tardío) y el nivel endémico de malaria (alto y bajo) de cada municipio
(Turbo y Zaragoza).
Con la prueba de Kruskal y Wallis
(K-W) se compararon las medianas de
las concentraciones de cada fármaco
(SDX y PIR) en cada grupo de respuesta terapéutica, tanto a las 2 horas
de administrado el medicamento SDXPIR como en el momento de detectar el
fracaso terapéutico.
Con la prueba de Wilcoxon para mediciones repetidas se compararon las
medianas de las concentraciones de
cada medicamento los días cero y
de fracaso del tratamiento (cuando lo
hubo). Siempre se consideró significativo un valor P menor de 5% (P < 0,05).
RESULTADOS
Se evaluó la eficacia terapéutica de la
combinación SDX-PIR en 79 pacientes
con malaria por P. falciparum, 45 en el
municipio de Turbo y 34 en el de Zaragoza. Las causas de exclusión y de retiro se muestran en el cuadro 1. El municipio de Turbo presentó un índice de
fracaso terapéutico de 22% (10/45), con
igual proporción de FTP y FTT, 11%
(n = 5). El municipio de Zaragoza tuvo
26% (9/34) de fracaso con la SDX, 21%
(n = 7) de forma precoz y 6% (n = 2) de
forma tardía. De 79 personas en quienes se evaluó la respuesta terapéutica,
en 76 se logró realizar la medición de
las concentraciones sanguíneas de SDX
y de PIR a las dos horas de administrado el tratamiento; de ellas, 42 pertenecían a Turbo y 34 a Zaragoza. En 15
pacientes del total de 18 que tuvieron
fracaso terapéutico la concentración del
medicamento se midió también en el
momento de registrarse este.
La prueba de ajuste de los datos a la
distribución normal indica que la distribución de SDX puede considerarse
estadísticamente normal. Con respecto
a la PIR, 15 pacientes presentan un valor
inferior al límite de detección (5,99
nmol/L), lo que apunta a una distribución bimodal; no obstante, al suprimirlos del análisis, la curva se torna normal
(figuras 1 a 4). En el cuadro 2 se observa
que, en el caso de la SDX, los 76 valores
presentan un promedio aritmético y
una mediana iguales (129 μmol/L),
mientras que la moda es un poco menor
(105,1 μmol/L). La tendencia a la dispersión es relativamente escasa, a juzgar por los valores de la desviación estándar (64,5 μmol/L) y particularmente
del coeficiente de variación (50%). La
asimetría y la curtosis son casi nulas. De
CUADRO 1. Causas de exclusión y retiro de los pacientes con malaria. Turbo y Zaragoza,
Antioquia, Colombia, 2002
Número de pacientes/ municipio
Causa
Turbo
Criterio de exclusión
Antecedentes de alergias a medicamentos antimaláricos
No vivir en la zona de estudio
Vómito persistente (> dos veces en las últimas 24 horas)
Haber recibido antibióticos en la última semana
Coluria, oliguria, anuria o deshidratación intensa
Presencia de enfermedad concomitante que interfiriera
con la evolución clínica del cuadro de malaria
Recuento de parásitos inferior a 500 anillos/μL
Presencia de esquizontes
Criterio de retiro
Inasistencia a las consultas de control en algún día del
tratamiento antimalárico
Inasitencia a 3 consultas de control durante el seguimiento.
Total
Zaragoza
–
1
4
1
–
4
–
2
1
1
Plasmodium vivax (4) Plasmodium
Dengue (1)
vivax (4)
Infección respiratoria (1)
1
1
1
–
6
–
2
5
19
21
Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 18(2), 2005
Carmona et al. • Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina en el tratamiento antimalárico
FIGURA 1. Distribución de la concentración de sulfadoxina en sangre. (DE, desviación
estándar). Turbo y Zaragoza, Antioquia, Colombia, 2002
14
12
Frecuencia
10
8
6
4
DE = 64,29
2
Media = 128,7
N = 76,00
0
0,0
40,0
80,0
120,0
160,0
200,0
240,0
280,0
20,0
60,0
100,0
140,0
180,0
220,0
260,0
µmol/L de sulfadoxina
FIGURA 2. Sulfadoxina en sangre según la respuesta terapéutica. (RCA, respuesta clínica
adecuada; FTP, fracaso terapéutico precoz; FTT, fracaso terapéutico tardío). Turbo y
Zaragoza, Antioquia, Colombia, 2002
300
250
µmol/L de sulfadoxina
la misma forma la PIR tiene un promedio aritmético y una mediana casi iguales (844,0 nmol/L y 830,3 nmol/L). La
moda fue de 184,2 nmol/L al suprimir
los 15 valores que estuvieron debajo del
límite de detección. La dispersión es
moderada (desviación estándar de 354,2
nmol/L y coeficiente de variación de
41,9 %). La asimetría es escasa y la curtosis está dentro del intervalo normal.
En el cuadro 3 se resumen los valores
estadísticos de las concentraciones sanguíneas de SDX y PIR por respuesta terapéutica. Los pacientes con respuesta
clínica adecuada presentaron una mediana de 136,6 μmol/L para SDX, en
comparación con 103,4 μmol/L en los
pacientes en quienes el tratamiento fracasó (P = 0,130). La mediana de las concentraciones sanguíneas de PIR de los
pacientes que tuvieron respuesta adecuada fue de 848,4 nmol/L, en comparación con 786,1 nmol/L en los que tuvieron fracaso (P = 0,402). Con ninguno
de los dos medicamentos se advierte
una diferencia significativa y tampoco
se aprecia al comparar las medianas de
las concentraciones sanguíneas de SDX
y PIR según el tipo de respuesta terapéutica en tres grupos (respuesta clínica adecuada, fracaso temprano y fracaso tardío; P = 0,105 con SDX y P =
0,308 con PIR).
En el cuadro 4 se encuentran las concentraciones sanguíneas de SDX y PIR
de los días cero y de fracaso terapéutico
en las personas que no respondieron. En
el fracaso temprano, las medianas de las
concentraciones de SDX son prácticamente iguales los días cero y de fracaso.
La concentración de PIR observada el
día del fracaso es 14% menor que la del
día cero, pero sin diferencia estadísticamente significativa. En el fracaso tardío,
la concentración de SDX del día del fracaso es 64% más baja que la del día cero
(p = 0,063). La concentración de PIR fue
35% más baja el día del fracaso que el
día cero. De las 15 personas en quienes
se evaluó la concentración de los dos
medicamentos, cuatro de ellas presentaron valores inferiores al límite de detección (5,99 nmol/L), uno con fracaso
temprano y tres con fracaso tardío.
Entre las 18 personas que tuvieron
fracaso terapéutico, este fue temprano
en 11: dos pacientes el primer día, tres el
Investigación original
200
150
100
50
0
N
11
FTP
7
FTT
58
RCA
Respuesta terapéutica
segundo y seis (55%) el tercer día de seguimiento, y tardío en siete: uno el día
7, dos el día 14 y cuatro (57%) el día 21.
Cuando la respuesta terapéutica a la
SDX-PIR se analizó en función de otras
Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 18(2), 2005
variables, como el municipio, la zona
de residencia (cabecera o periferia), la
edad, el sexo y el grupo étnico, tampoco se encontraron diferencias estadísticamente significativas.
79
Investigación original
Carmona et al. • Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina en el tratamiento antimalárico
FIGURA 3. Distribución de la concentración de pirimetamina en sangre. (DE, desviación estándar). Turbo y Zaragoza, Antioquia, Colombia, 2002
10
Frecuencia
8
6
4
2
DE = 354,19
Media = 844,0
N = 61,00
0
0
0
0 0
0
0
0
0
0
0 0
0
0
0
0
0, 0,
0, 0,
0, 0,
0, 0,
0, 0,
0, 0,
0,
0, 0 ,
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160
nmol/L de pirimetamina
FIGURA 4. Pirimetamina en sangre según respuesta terapéutica (FTP, fracaso terapéutico
precoz; FTT, fracaso terapéutico tardío; RCA, respuesta clínica adecuada). Turbo y
Zaragoza, Antioquia, Colombia, 2002
1 800
1 600
nmol/L de pirimetamina
1400
1 200
1 000
800
600
400
200
0
N
10
FTP
5
FTT
46
RCA
Respuesta terapéutica
DISCUSIÓN
La frecuencia del fracaso terapéutico
con SDX-PIR (22% en Turbo y 26% en
Zaragoza) es alta y alcanza el límite de
80
25% adoptado por la OPS para determinar la interrupción del uso del medicamento. Este hecho se suma a la falla de
la cloroquina, que supera un índice de
90% en ambos lugares, hecho que mo-
tivó el retiro del esquema para el tratamiento de la malaria por P. falciparum
en el departamento de Antioquia.
En ambos municipios estudiados el
fracaso terapéutico de SDX-PIR no se
explica por deficiencia de la concentración sanguínea del medicamento,
como lo demuestra la observación, a
las dos horas de su administración, de
concentraciones sanguíneas estadísticamente similares en los grupos de
buena respuesta terapéutica y de fracaso. Tales concentraciones, por otra
parte, parecen adecuadas para el tratamiento de la malaria sin complicaciones originada por P. falciparum, según
se deduce de dos argumentos:
a) tales concentraciones se produjeron
después de una dosis estándar de
SDX-PIR (25 y 1,25 mg/kg, respectivamente), recomendada por la
OPS (protocolo de 1998) y que permite lograr una curación clínica y
parasitológica en 90% de los enfermos cuando el parásito es sensible
(no resistente), tal como lo hallamos
en 1998 en Turbo y Zaragoza, donde
hubo una respuesta terapéutica
adecuada en 91% y 87% de los pacientes (17, 18). Se deduce, entonces, que la resistencia de P. falciparum a SDX-PIR ha aumentado en
esos dos lugares;
b) las concentraciones sanguíneas observadas de SDX (129 µmol/L) y
PIR (830,3 nmol/L), medidas en
los pacientes con malaria dos horas
después de administrado el medicamento, están cercanas a las concentraciones máximas (cmáx) señaladas por otros autores en personas
sanas (203,7 ± 34,8 µmol/L para
SDX y 860,5 ± 261,4 nmol/L para
PIR), valores alcanzados en tiempos
máximos (tmáx) de 3,7 ± 1,7 horas
y 4,2 ± 2,7 horas, respectivamente,
usando una dosis única de 500 mg
de SDX y 25 mg de PIR (32). Estas
concentraciones observadas por los
autores antes de los tmáx indican
que la absorción de los fármacos
ocurrió sin dificultad y que las concentraciones serían adecuadas.
No conocemos cuáles son las concentraciones parasiticidas mínimas in vivo de
Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 18(2), 2005
Carmona et al. • Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina en el tratamiento antimalárico
CUADRO 2. Valores estadísticos de las concentraciones sanguíneas de sulfadoxina (SDX)
(µmolg/L) y de pirimetamina (PIR) (nmol/L)
Día 0 (2 horas)
Variable
SDX
Medidas de tendencia central
Tamaño de la muestra
Promedio
Mediana
Moda
Medidas de dispersión
Varianza
Desviación estándar
Valor mínimo
Valor máximo
Recorrido
Cuartil 1
Cuartil 2
Cuartil 3
Intervalo intercuartílico
Coeficiente de variación
Medidas de asimetría y curtosis
Asimetría
Curtosis
Día de falla
PIR
SDX
PIR
76,0
128,6
129,9
105,1
61
844,0
830,3
184,2
15,0
78,0
45,8
121,5
11,0
630,1
487,3
225,2
4 133,6
64,5
6,4
278,8
272,3
88,3
129,9
170,2
81,9
50,13
125 448,0
354,2
184,2
1 554,9
1 370,7
558,5
830,3
991,2
525,1
41,9
3 556,5
59,6
3,9
176,6
172,7
28,4
45,8
137,3
108,9
76,45
1 800 191,7
431,8
225,2
1 623,6
1 398,5
295,1
487,3
450,7
557,7
68,5
–0,1
–0,5
0,245
–0,711
0,3
–1,6
1,45
1,76
SDX y PIR, lo que impide comparar con
ellas nuestros datos. Entendemos que
concentraciones como las informadas
por Weidekamm et al. en 1982 (32) son
parasiticidas y que las observadas en
nuestros pacientes también lo son,
según se deduce del hecho de que la mayoría se curaron y de que muy probablemente la falta de cura depende más
de la resistencia parasitaria que de concentraciones sanguíneas insuficientes.
Se ha observado que se consiguen
concentraciones parasiticidas de SDX-
PIR con dosis orales únicas de apenas
2,14 y 0,11 mg/kg, respectivamente,
las cuales curaron a 69% de los niños
enfermos en Gabón (33). En Tanzania,
en escolares asintomáticos con parasitemia por P. falciparum tratados con
100%, 50% y 25% de la dosis estándar
de SDX-PIR, seguidos por 28 a 42 días,
se logró la eliminación de los parásitos
en la totalidad de los casos y en los tres
grupos (34), lo que demostraría una
alta eficacia antiplasmodial de la combinación SDX-PIR, aun en dosis muy
Investigación original
bajas, como 6,25 y 0,312 mg/kg, que es
una cuarta parte de la dosis estándar.
En 10 de estos niños, tratados con la
dosis estándar de SDX-PIR (25 y 1,25
mg/kg), se midieron las concentraciones de SDX en sangre y plasma. La
cantidad resultante fue mayor en
plasma (razón sangre:plasma = 0,72) y
la mediana en sangre, de 303 μmol/L,
el primer día postratamiento. Los mismos autores informaron concentraciones inhibidoras mínimas (CIM) in
vitro de SDX y PIR, en el caso de P. falciparum, de 5 µmol/L y 62 nmol/L,
respectivamente (34). Conviene anotar
que esas dosis bajas de SDX-PIR, en
comparación con la estándar, parecen
seleccionar cepas de P. falciparum resistentes a la combinación, según observó
el mismo grupo de investigadores en
esos mismos niños (35). De acuerdo
con Spencer et al. (1986) (36), en Malindi, Kenia, los aislamientos de P. falciparum que responden adecuadamente in vivo a la PIR también son
muy sensibles in vitro, mientras que
los resistentes in vivo también lo son
in vitro: los primeros tuvieron una
CIM igual a o menor de 100 nmol/L,
comparada con más de 299 nmol/L en
los resistentes.
Por último, debe anotarse que la
ausencia de una diferencia estadísticamente significativa entre los promedios o las medianas de SDX y PIR de
los grupos de respuesta terapéutica
podría deberse en parte al pequeño
tamaño del grupo que no respondió
CUADRO 3. Valores estadísticos de las concentraciones sanguíneas de sulfadoxina (SDX) y pirimetamina (PIR) según la respuesta terapéutica
Sulfadoxina (μmolg/L)
Pirimetamina (nmol/L)
Xa
Meb
DEc
IC95%d
P (K-W)e
X
Me
DE
IC95%
P (K-W)
Tipo de respuesta terapéutica
Fracaso terapéutico (n =18)
Respuesta adecuada (n = 58)
108,6
135,0
103,4
136,6
69,6
61,9
(39,3–178,2)
(73,2–196,9)
783,3
863,7
786,1
848,4
387,6
344,8
(395,7–1 170,9)
(518,7–1 208,5)
0,402
0,130
Tipo de respuesta
Fracaso temprano (n = 11)
Fracaso tardío (n = 7)
Respuesta adecuada (n = 58)
126,3
80,9
135,0
105,1
75,7
136,6
74,4
54,8
61,9
(76,4–176,3 )
(30,3–131,3)
(118,6–151,2)
0,105
700,0
950,1
863,7
679,7
899,9
848,2
372,3
401,7
34,1
(433,7–966,5)
(451,–1 449,1)
(966,2–223,5)
0,308
a X,
promedio de las concentraciones sanguíneas de SDX y PIR.
Me, mediana de las concentraciones sanguíneas de SDX y PIR.
c DE, desviación estándar.
d IC95%, Intervalo de confianza del 95%.
e P (K-W), valor P asociado a la prueba de Kruskal y Wallis.
b
Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 18(2), 2005
81
Investigación original
Carmona et al. • Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina en el tratamiento antimalárico
CUADRO 4. Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina (SDX) (µmolg/L) y pirimetamina
(PIR) (nmol/L) en el día cero y en el día del fracaso terapéutico
Fracaso terapéutico temprano (FTP)a
Fármaco
Mec
DEd
Mínimo
SDX, día cero
SDX, día de falla
PIR, día cero
PIR, día de falla
126,3
120,9
721,4
620,0
74,4
49,3
438,7
491,8
15,5
15,5
184,2
225,2
Máximo
234,6
176,6
1 525,5
1 623,6
Fracaso terapéutico tardío (FTT)b
Me
DE
Mínimo
Máximo
80,9
29,0
1 001,6
647,8
54,5
15,1
444,3
369,9
459,2
295,1
459,2
295,1
161,5
45,8
1 524,3
1 158,0
a FTP:
prueba de Wilcoxon; P = 0,735 SDX; P = 0,866 PIR.
prueba de Wilcoxon; P = 0,063 SDX; P = 0,465 PIR.
ME = mediana.
d DE = desviación estándar.
b FTT:
c
(18 sujetos: 11 con fracaso temprano y
7 con fracaso tardío). No deja de llamar la atención que 136,6 µmol/L de
SDX (grupo con buena respuesta) no
difieran de 103,4 μmol/L (fracaso) ni
de 75,7 μmol/L (fracaso tardío). En
efecto, si se conservan los mismos pro-
medios y varianzas y el tamaño de este
grupo se incrementa a 40 personas, la
diferencia entre los valores ya es significativa. Lo mismo sucede al comparar
tres grupos (respuesta clínica adecuada, fracaso temprano, fracaso tardío): al disponer de 20 personas en
cada grupo, la diferencia se vuelve
significativa. Por este motivo, se trata
de un tema que requiere aun mayor
investigación.
Agradecimientos. El programa de
control de vectores de la Dirección Seccional de Salud de Antioquia de la
Gobernación de Antioquia (Colombia)
financió este proyecto. Los autores
desean agradecer a Armando Galeano,
Director de Salud Pública de Antioquia
(Colombia); a las bacteriólogas Tania Álvarez y Alexandra Ríos y a los médicos
Patricia Rocha y Juan Gabriel Piñeros,
integrantes del Grupo Malaria, la evaluación de la respuesta terapéutica y la
obtención de las muestras. Los autores
también agradecen al personal de los
hospitales de ambos municipios, y especialmente a los pacientes de Turbo y Zaragoza, su participación en este estudio.
REFERENCIAS
1. Tracy JW, Webster LT Jr. Drugs used in the
chemotherapy of protozoal infections. En:
Hardman JG, Limbird LE, eds. Goodman &
Gilman. The Pharmacological Basis of Therapeutics. 10th ed. New York: McGraw-Hill;
2001. Pp. 1080–2.
2. Mandell G, Bennett JE, Dolin R, eds. Mandell,
Douglas and Bennett. Principles and Practice
of Infectious Diseases. 5th ed. Vol 1. Philadelphia: Churchill Livingstone; 2000.
3. Petri WA Jr. Antimicrobial agents. Sulfonamides, trimetoprim-sulfamethoxazole, quinolones and agents for urinary infections. En:
Hardman JG, Limbird LE, eds. Goodman &
Gilman. The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10ª ed. New York: McGraw-Hill;
2001;1171–6.
4. Heizmann P, Fernex M, Leimer R, ReberLiske R, Stohler H. Plasmodium falciparum resistant to mefloquine plus sulfadoxine/
pyrimethamine. Lancet. 1986;1(8477):377.
5. Malin AS, Hall AP. Falciparum malaria
resistant to quinine and pyrimethaminesulfadoxine successfully treated with mefloquine. Br Med J. 1990;300(6733):1175.
6. Ronn AM, Msangeni HA, Mhina J, Wernsdorfer WH, Bygbjerg IC. High level of resistance
of Plasmodium falciparum to sulfadoxinepyrimethamine in children in Tanzania. Trans
R Soc Trop Med Hyg. 1996;90(2):179–81.
7. Onyiorah E, van Hensbroek MB, Jah MS,
Greenwood B. Early clinical failures after
pyrimethamine-sulfadoxine treatment of uncomplicated falciparum malaria. Trans R Soc
Trop Med Hyg. 1990;90(3):307–8.
8. Sowunmi A, Oduola AM, Ogundahunsi
OA, Salako LA. Comparative efficacy of
chloroquine plus chlorpheniramine and
pyrimethamine/sulfadoxine in acute uncom-
82
9.
10.
11.
12.
13.
14.
plicated falciparum malaria in Nigerian children. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1998;92(1):
77–81.
Van Dillen J, Custers M, Wensink A, Wouters
B, van Voorthuizen T, Voorn W, et al. A comparison of amodiaquine and sulfadoxinepyrimethamine as first-line treatment of falciparum malaria in Kenya: 1. Trans R Soc Trop
Med Hyg. 1999;93(2):185–8.
Deloron P, Mayombo J, Le Cardinal A, MezuiMe-Ndong J, Bruzi-Baert C, Lekoulou F,
Elissa N. Sulfadoxine-pyrimethamine for the
treatment of Plasmodium falciparum malaria in
Gabonese children. Trans R Soc Trop Med
Hyg. 2000;94(2):188–90.
Nwanyanwu OC, Ziba C, MacHeso A,
Kazembe P. Efficacy of sulphadoxinepyrimethamine for acute uncomplicated malaria due to Plasmodium falciparum in Malawian children under five years old. Trop Med
Int Health. 2000;5(5):355–8.
Von Seidlein L, Milligan P, Pinder M, Bojang
K, Anyalebechi C, Gosling R, et al. Efficacy of
artesunate plus pyrimethamine-sulphadoxine
for uncomplicated malaria in Gambian children: a double-blind, randomised, controlled
trial. Lancet. 2000;355(9201):352–7. Erratum
in: Lancet. 2000;355(9220):2080.
Staedke SG, Kamya MR, Dorsey G, Gasasira
A, Ndeezi G, Charlebois ED, et al. Amodiaquine, sulfadoxine/pyrimethamine, and
combination therapy for treatment of uncomplicated falciparum malaria in Kampala,
Uganda: a randomised trial. Lancet. 2001;
358(9279):368–74.
Tjitra E, Suprianto S, Currie BJ, Morris PS,
Saunders JR, Anstey NM. Therapy of uncomplicated falciparum malaria: a randomized trial comparing artesunate plus
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
sulfadoxine-pyrimethamine versus sulfadoxinepyrimethamine alone in Irian Jaya, Indonesia.
Am J Trop Med Hyg. 2001;65(4): 309–17.
Blair S, Lacharme L, Carmona J, Tobón A. Resistencia del Plasmodium falciparum a los antimaláricos en Urabá y Bajo Cauca Antioqueño,
1998. Rev Epidemiol Antioquia. 1999;24(3-4):
207–15.
Blair S. Resistencia a los antimaláricos. En:
Carmona-Fonseca J. Tópicos de infectología.
Medellín: Universidad de Antioquia, 1999;
81–91.
Blair S, Lacharme-Lora L, Carmona-Fonseca J.
Resistance of Plasmodium falciparum to antimalarial drugs in Zaragoza (Antioquia, Colombia), 1998. Mem Inst Oswaldo Cruz. (Rio
de Janeiro) 2002;97(3):401–6.
Blair S, Lacharme L, Carmona J, Tobón A. Resistencia del Plasmodium falciparum a tres fármacos antimaláricos en Turbo (Antioquia,
Colombia), 1998. Rev Panam Salud Publica.
2001;9(1):23–9.
Espinal CA, Uribe LM, Eslava A, Rodríguez
ME. Resistencia del P. falciparum a la combinación sulfadoxina-pirimetamina. Descripción de los primeros tres casos en Colombia.
Biomedica. 1981;1(4):213–7.
Botero D, Restrepo M, Montoya A. Prospective double-blind trial of two different
doses of mefloquine plus pyrimethaminesulfadoxine compared with pyrimethaminesulfadoxine alone in the treatment of P. falciparum malaria. Bull World Health Organ.
1985;63:731–7.
Soto J, Martínez R, Fonschiffrey G, Dember J.
Efficacy of Fansidar for acute uncomplicated
malaria due to Plasmodium falciparum in
Colombia. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1995;
89(3):306.
Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 18(2), 2005
Carmona et al. • Concentraciones sanguíneas de sulfadoxina y pirimetamina en el tratamiento antimalárico
22. Blair S. Resistencia de P. falciparum a drogas
en Colombia. Biomédica. 1986;6(3-4):95–100.
23. Osorio LE, Giraldo LE, Grajales LF, Arriaga
AL, Andrade AL, Ruebush TK 2nd, et al. Assessment of therapeutic response of Plasmodium falciparum to chloroquine and sulfadoxinepyrimethamine in an area of low malaria
transmission in Colombia. Am J Trop Med
Hyg. 1999;61(6):968–72.
24. Osorio LE, Giraldo LE, Grajales LF, Barat LM,
Córdoba F, Arriaga AL, et al. Evaluación in
vivo de la resistencia de Plasmodium falciparum a cloroquina y sulfa/pirimetamina en
Quibdó, Chocó. Biomedica. 1997; 17(supl. 2):
201–2.
25. López YL, Arroyabe A, Salazar A. Evaluación
de la resistencia in vivo a los medicamentos
antimaláricos. El Bagre, Antioquia, 1998. Rev
Epidemiol Antioquia. 1999;24(3-4):181–94.
26. Ministerio de Salud de Colombia, Dirección
General de Salud Pública, Grupo de Vigilancia en Salud Pública. Casos y tasa de incidencia de malaria por municipio según especie.
Santa Fe de Bogotá: Minsalud; 2001.
27. Sierra ML, Vélez LM, Castañeda AM, Galeano
LA, Molina AL, Tabares Z, et al. Diagnóstico
de la situación de salud en Antioquia. Rev
Epidemiol Antioquia. 2000;25(1-3):129–32.
28. López-Antuñano FJ, Schmunis G, eds. Diagnóstico de malaria. Washington, D.C.: Organi-
ABSTRACT
Blood levels of sulfadoxine
and pyrimethamine, according
to the malaria-treatment
response, in two
municipalities of
Antioquia, Colombia
Keywords
29.
30.
31.
32.
33.
zación Panamericana de la Salud, 1988. (Publicación Científica 512).
Organización Panamericana de la Salud.
Evaluación de la eficacia terapéutica de los
medicamentos para el tratamiento del paludismo por Plasmodium falciparum sin complicaciones en las Américas. Washington, D.C.:
OPS; 1998. (Documento OPS/HCP/HCT/
113/98).
Colombia, Ministerio de Salud. Guía de atención clínica para el diagnóstico y tratamiento
de la malaria. Santa Fe de Bogotá; Minsalud;
1999.
Green M, Mount D, Netty H. Highperfomance liquid cromatographic assay for
the simultaneous determination of sulfadoxine and pyrimethamine from whole blood
dried onto filter paper. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2002;767(1):
159–62
Weidekamm E, Plozza-Nottebrock H, Forgo I,
Dubach UC. Plasma concentrations in pyrimethamine and sulfadoxine and evaluation of
pharmacokinetic data by computerized curve
fitting. Bull World Health Organ. 1982;60(1):
115–22.
Lell B, Lehman LG, Schmidt-Ott JR, Sturchler D, Handschin J, Kremsner PG. Malaria chemotherapy trial at a minimal effective dose of mefloquine/sulfadoxine/
Investigación original
pyrimethamine compared with equivalent
doses of sulfadoxine/pyrimethamine or mefloquine alone. Am J Trop Med Hyg. 1998;
58(5):619–24.
34. Hellgren U, Kihamia CM, Bergqvist Y, Lebbad M, Premji Z, Rombo L. Standard and reduced doses of sulfadoxine-pyrimethamine
for treatment of Plasmodium falciparum in Tanzania, with determination of drug concentrations and susceptibility in vitro. Trans R Soc
Trop Med Hyg. 1990;84(4):469–72.
35. Kun JF, Lehman LG, Lell B, Schmidt-Ott R,
Kremsner PG. Low-dose treatment with
sulfadoxine/pyrimethamine combinations
selects for drug-resistant Plasmodium falciparum strains. Antimicrob Agents Chemother.
1999;43(9):2205–8.
36. Spencer HC, Watkins WW, Sixsmith DG,
Koech DK. Response of Plasmodium falciparum
to dihydrofolate reductase inhibitors in Malindi, Kenya. Trans R Soc Trop Med Hyg.
1986;80(2):201–13.
Manuscrito recibido el 2 de septiembre de 2004. Aceptado para publicación, tras revisión, el 29 de marzo de
2005.
Problem. There has been a constant increase in the level of therapeutic failure of the
sulfadoxine-pyrimethamine (SP) combination for treating uncomplicated Plasmodium
falciparum malaria.
Objective. To use high-performance liquid chromatography to quantify blood levels
of SP in patients with good clinical response and in patients who did not respond to
treatment.
Methods. This experimental study was carried out in 2002 in Turbo and Zaragoza,
two municipalities in the department of Antioquia in Colombia. There were 79 patients
(45 in Turbo and 34 in Zaragoza), including both men and women, who ranged in age
from 1 year to 60 years. All the patients had uncomplicated Plasmodium falciparum
malaria, with a parasite density of 500 to 50 000 parasites/μL. The patients were each
randomly assigned to a treatment group. The treatment groups were not blinded; the
physician who provided the medication also evaluated the therapeutic response. The
treatment consisted of a single combination dose of sulfadoxine (25 mg/kg) and
pyrimethamine (1.25 mg/kg) in tablets (500 mg of sulfadoxine and 25 mg of
pyrimethamine). Clinical-parasitological follow-up was carried out for 21 days. Blood
levels of sulfadoxine and pyrimethamine were measured two hours after the treatment
was given and also the day of treatment failure, if that occurred.
Results. Two hours after the treatment was given, the median blood level of sulfadoxine was 136.6 µmol/L in the patients who later showed a good clinical response,
and it was 103.4 μmol/L among those who did not respond to treatment (P = 0.13).
The medians for pyrimethamine were 848.4 nmol/L in patients with a good clinical
response and 786.1 nmol/L in patients with treatment failure (P = 0.40). There were
no significant differences in drug levels between the early-failure cases and the latefailure cases. The linear correlation between the blood levels of sulfadoxine and pyrimethamine was close to zero (r = 0.13).
Conclusions. Between 1998 and 2002, treatment failure with the SP combination increased from 13% to 22% in Turbo, and from 9% to 26% in Zaragoza. The lack of response
in 2002 could not be explained by lower blood levels of the medications.
Malaria, falciparum; antimalarials; sulfadoxine; pyrimethamine; chromatography,
high pressure liquid.
Rev Panam Salud Publica/Pan Am J Public Health 18(2), 2005
83