UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE YUCATÁN FACULTAD DE QUÍMICA MÉTODOS ÓPTICOS, ELECTROQUÍMICOS Y CROMATOGRAFICOS Q.F.B. Alfredo Araujo León Salón 1 16:00 – 18:00 hrs Actividad 5 Berzunza Rosalía Huesca Sergio Polanco Esteban Ramírez Solis Javier Cuarto semestre Licenciatura en químico farmacéutico biólogo MÉRIDA YUCATÁN A 22 DE MAYO DE 2014 Reconocimiento de la instrumentación de un HPLC-DAD Agilent Technologies 1200 series Este sistema de la serie DAD HPLC Agilent 1200 se compone de los elementos que se enumeran a continuación; todo en excelente estado. Tenga en cuenta que el inyector automático es nuevo en su caja original. Este sistema incluye: Agilent G1379B Degasser JP63704939 Agilent G1312A 1200 Bin Pump DE63055999 Agilent G1315B 1200 DAD DE60555220 Agilent G1329A 1200 ALS DE64763548 Agilent G1330B1200 ALS Therm DE60556897 Tray Cromatógrafo de Líquidos de Alta Resolución Marca / Modelo Agilent Technologies, 1200 Aplicaciones La cromatografía de líquidos tiene especial aplicación en áreas como la farmacéutica y ciencias de la vida, para la separación e identificación de compuestos. Descripción La cromatografía es una técnica para separar mezclas en sus componentes individuales para que puedan ser identificados y cuantificados. En cromatografía líquida (LC), un líquido en movimiento (fase móvil) lleva la muestra a través de una fase estacionaria (el soporte sólido encontrado dentro de una columna de LC). Los componentes de la muestra se separan en base a sus diferencias de afinidad con la fase estacionaria. La LC es adecuada para el análisis de moléculas no volátiles y térmicamente sensibles, incluyendo compuestos de alto peso molecular como proteínas. Además, puede ser una herramienta útil para purificar moléculas pequeñas y macromoléculas derivadas de síntesis química o procesos naturales. Cada equipo de cromatografía líquida generalmente incluye los siguientes componentes claves: un sistema de bombeo para el manejo de los solventes, un inyector de muestra, una columna o columnas, detectores y un sistema de manejo de datos. Diferentes tipos de bombas, inyectores, columnas, detectores y colectores de fracciones se utilizan conjuntamente en diversas configuraciones, basadas en las necesidades de la muestra. Cromatografia de HPLC Una parte fundamental de los cromatógrafos de HPLC es la bomba. Las bombas para HPLC deben cumplir ciertos requisitos fundamentales: - Deben - producir Deben presiones mantener - Deben generar intervalos - Deben permitir un control el de y estables flujo caudales hasta libre de de flujo reproducibilidad 6000 (0,1 del psi. pulsaciones a flujo 10 de ml/min) solvente - Sus componentes deben ser resistentes a la corrosión Las bombas que se usan en HPLC se pueden clasificar según su funcionamiento y diseño en: Mecánicas: recíprocantes y de desplazamiento continuo Neumáticas Aplicaciones Campos de Aplicación de HPLC Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides, analgésicos Bioquímica: Aminoácidos, proteínas, carbohidratos, lípidos Productos de alimentación: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas, aditivos Productos de la industria química: Aromáticos condensados, tensoactivos, propulsores, colorantes Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB Química forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcóticos Medicina clínica: Ácidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina, estrógenos. Algunas aplicaciones importantes de la HPLC preparativa Separación y purificación de metabolitos Separación y purificación de los metabolitos de las drogas procedentes de muestras de orina Purificación y separación de enantiómeros Purificación de compuestos naturales Purificación y caracterización de enzimas y proteínas Equipos HPLC analítico 1200 Series de Agilent Technologies Bomba cuaternaria G1311 Detector de longitud de onda variable G1314B Detector de diodo y de longitud de onda variable G1315D Detector de índice de refracción G1362A Detector de fluorescencia G1321A HPLC preparativo 1200 Series de Agilent Technologies Dos Bombas preparativas G1361A Detector de diodo y de longitud de onda variable G1315D Muestreador automático G1329A Colector de fracciones G1364B