DETERMINACIÓN DE GRASA CRUDA O EXTRACTO ETÉREO (EE) MEDIANTE EL USO DEL EXTRACTOR DE GRASA CRUDA VELP SCIENTÍFICA Metodología: 1.- Preparar los vasos a peso constante (de preferencia por duplicado) y proceder a pesarlos. 2.- ABRIR LA LLAVE DEL AGUA 3.- Pesar aproximadamente 2-3 gramos de muestra en un papel (por duplicado) y colocarlos dentro del dedal de celulosa (limpio), taparlos con algodón y colocarles su anillo. Colocar los dedales en el extractor de grasa. 4.- Poner 200 mL aproximadamente de éter de petróleo a cada vaso, programar el aparato (vea primero las instrucciones) y proceder a colocar la muestra (vea las instrucciones) y a la extracción de grasa. Pasos a seguir para el uso del Extractor de Grasa Cruda VELP SCIENTÍFICA 1.- ANTES DE PONER A FUNCIONAR EL EXTRACTOR DE GRASA SE DEBE ABRIR LA LLAVE DEL AGUA SITUADA EN LA PARTE POSTERIOR DEL APARATO. Programación de los Tiempos del cada Plato 2.- Al encender el extractor aparece en la pantalla P01. 3.- Al oprimir el botón SET parpadeará P el cual nos indica el número de plato comenzando de izquierda a derecha. El número de plato se selecciona con las flechas ↑ (para avanzar de 1 a 2, de 2 a 3 y así sucesivamente), ↓ (para disminuir) según el caso. PROGRAMAR TEMPERATURA, RECUPERACIÓN (R). INMERSIÓN (1), LAVADO (W) Y *Si el solvente a usar es éter de petróleo se programa de 125 a 130°C (verificar en la tabla de solventes que tiene escrita el aparato). Si el solvente a usar es hexano se programa a 120°C 4.- Una vez seleccionado el número de plato (P01) se oprime la flecha de aceptar (enter) y aparecerá en la pantalla la temperatura en el que estaba programada en los análisis anteriores. Se procede entonces a programar la temperatura que deseamos con las flechas ↓↑. Una vez realizado lo anterior se oprime la tecla de aceptar (enter) para proceder a programar Inmersión. 5.- La Inmersión (I) está dada en minutos y se programa de igual forma como se programo la temperatura (con las flechas). En este caso la inmersión será de 60 minutos. Se oprime el botón de aceptar (enter) para proseguir a la fase de Lavado (W). 6.- Lavado (W), dado por minutos y es el tiempo en que el dedal con la muestra se lavará. Se programa con las flechas ↑↓. Para este caso será de 90 minutos. Se oprime el botón aceptar (enter) para proseguir a la fase de Recuperación. 7.- La Recuperación (R) también está dada en minutos, y es el tiempo que tarda en recuperarse el éter de petróleo. En este caso serán 15 minutos. Se programa de igual forma que para el lavado. 8.- Se pulsa el botón de aceptar (enter) y aparece en la pantalla P01. Ahora presione el botón SET para programar el segundo plato. En la pantalla parpadeará P. Se selecciona el plato número 2 con la flecha ↑ y se procede a programar de la misma manera como se hizo anteriormente. Al terminar de programar el plato se pulsa el botón SET. Se repite el procedimiento para cada cambio de plato. COLOCACIÓN DE LAS MUESTRAS Siempre se deberá tomar en cuenta abrir la llave del agua del extractor de grasa antes de proceder a realizar cualquier otro paso. En caso de que haga mucho calor en el laboratorio se deberá colocar hielo en la manguera del extractor. 1.- Se deben tener listos los vasos a peso constante y sacarlos del desecador con pinzas o guantes de nitrilo o látex (nuestras manos tienen grasa que contamina a la muestra). Se marcan los vasos o si ya están marcados se anotará el número de los mismos en la bitácora. Los vasos se pesan. 2.- En un papel se pesan aproximadamente 2 gramos de la muestra. 3.- Se coloca la muestra en un dedal manejado con pinzas o guantes y se le pone algodón en la parte superior así como un anillo. 4.- Se coloca el dedal en el extractor: Para este propósito se baja palanca que posee una bola negra pequeña y se coloca ahí debajo el dedal. El aparato tiene un imán para que se fije ahí el anillo del dedal. 5.- A cada vaso se le agrega éter de petróleo hasta la mitad (aproximadamente 60 mL de éter) (sin embargo se debe vigilar todo el tiempo que el éter no se evapore, hay que estar quitando el vaso y agregarle éter hasta la mitad, por lo que cada vaso requerirá en total más o menos 200 mL de éter de petróleo). 6.- Los vasos se colocan en los platos del extractor. 7.- Se baja la palanca con la bola negra grande situada en el extremo inferior izquierdo del aparato y se coloca el vaso (con el nivel de éter hasta la mitad del mismo) hasta que atore y se procede a levantar la palanca. 8.- Se procede a bajar la palanca con la bola negra pequeña y queda sumergido el dedal en el éter. 9.- Se ponen las llaves de los tubos del aparato en posición abierta (vertical, esto es muy importante, no se debe olvidar). 10.- Se oprime START. 11.- En el momento en que cambie de fase el aparato de inmersión a lavado sonará una alarma que indica dicho cambio y para que deje de sonar se presiona el botón de aceptar (enter). Los dedales se ponen en lavado, dejando todavía las llaves de los tubos abiertas. 12.- En el momento en que cambie de fase el aparato de lavado a recuperación sonará una segunda vez la alarma. Para que deje de sonar se presiona el botón de aceptar (enter) y ahora sí se cierran las llaves de los tubos (se colocan en posición horizontal). 13.- Al terminar el tiempo programado para la recuperación del éter sonará la alarma y aparecerá en la pantalla el mensaje END. En ese momento se presiona el botón STOP para que la alarma deje de sonar. 14.- Se procede a apagar el aparato. 15.- Los vasos son llevados al horno de secado a una temperatura de 100°C. Posteriormente se sacan y se dejan en el desecador hasta que estén a peso constante. Enseguida los vasos son pesados y, por educación, se lavan con agua hirviendo y jabón. 16.- Los dedales se llevan a la campana de 10-15 minutos, luego se llevan al horno por 20-25 minutos para que las muestras se sequen y se guarden, ya que éstas servirán para la determinación de nitrógeno en proteína o fibra cruda. 17.- Si se pudo recuperar éter, éste se coloca en un frasco etiquetado como “éter recuperado” y se guarda aparte. 18.- La fórmula para determinar el contenido de grasa es la siguiente: %Grasa E.E. = (Peso del vaso con grasa – Peso del vaso a peso constante) X 100 Peso de muestra inicial