File - Ciencia Interactiva Siglo 21

LABORATORIO N°1
EXTRACCIÓN DEL ADN DE GUISANTES (Pisum sativum)
Prof. José Abel Ríos
OBJETIVO DE APRENDIZAJE:
1. Extraer ADN de guisantes (Pisum sativum).
2. Interpretar los resultados obtenidos del desarrollo de la experiencia de
laboratorio.
INTRODUCCIÓN
El ácido desoxirribonucelico, frecuentemente abreviado como ADN, es un
tipo de ácido nucleico, una macromolécula que forma parte de todas las
células. Contiene la información genética con las intrucciones para el
desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos y algunos virus,
siendo el responsable de la transmisión hereditaria. El ADN es el componente
químico fundamental de los cromosomas y el material que constituye los
genes.
MATERIALES
Guisantes
Jugo de limón, piña o ablandador de carne
Licuadora o Batidora
Alcohol etílico al 90%
Sal de mesa
Tubos de ensayo
Agua fría
Varilla de vidrio y algodón
Detergente lavavajillas líquido
Vaso químico, colador
PROCEDIMIENTO
1. Con la ayuda de una batidora o licuadora hay que conseguir un batido
de guisantes (usa el doble de agua fría que de guisantes: 100 ml de
guisante/ 200 ml de agua).
2. Vierte el batido a través de un colador en un vaso de precipitados.
3. Añade media cucharadita de sal común. Mezclar bien.
4. Añade 30 ml de detergente lavavajilla (un par de cucharadas soperas),
mezcla bien y deja reposar 5 minutos.
5. Reparte la mezcla en tubos de ensayo. No lo llenes más de un tercio de
su capacidad.
6. Añade a los tubos un pellizco de enzimas (ablandador de carne, jugo de
limón o piña, incluso puede emplearse líquido limpiador de lentes de
contacto).
7. Inclina los tubos de ensayo y vierte alcohol frío en ellos dejándolo
resbalar lentamente por la pared lateral hasta tener partes iguales de
alcohol y de la mezcla.
8. Cuando se hayan formado grumos en la parte superior del tubo
introduce el varilla de vidrio y extrae la masa filamentosa de ADN.
9. El ADN aparece en la interfase alcohol-filtrado como grumos blancos.
Introducir una varilla de vidrio o un palillo hasta justo la separación
entre el alcohol y el triturado y girar suavemente la varilla mientras se
extrae. Así se le irán pegando miles de fibras de ADN (Nota: Realmente
son fibras de ADN Y FRAGMENTOS DE arn; en una separación
profesional se añaden enzimas que impiden que el ARN se una al
ADN).
10.
Dibujen los pasos fundamentales de la experiencia en su bitácora
de laboratorio con sus respectivas explicaciones.
11.
Entregue oportunamente su informe de laboratorio a la Profesora
asistente Jennifer Carrión.
RECOGER Y LIMPIAR todo el material, dejar el laboratorio limpio.
ANÁLISIS Y DISCUSIÓN
1. ¿Para qué se utiliza el detergente y la sal de mesa (Cloruro de sodio,
NaCl).
2. ¿Qué componente aporta el jugo de piña o ablandador de carne y cuál es
su utilidad?
3. ¿Qué es una enzima?
4. ¿Por qué se incorpora finalmente el alcohol etílico muy frío al medio?
5. Describe el ADN que has extraído de las células de guisantes ¿Por qué
se forman los grumos de ADN?
6. Realice un dibujo de la acción del detergente sobre las células.
7. Investigue y explique brevemente en que consiste la electroforesis.