/ X J n i v e r s i d a d F a c u l t a d Focnttoti tStt Xatapa, V e r a c r u z a n a d e H i o a n d l i s i s B*oan6list* Ver. Autorizacion de Impresion ( 6 ) C. Q. C. FRANCISCO SOUS PAEZ t * DIRECTOR (A) DE LA FACULTAD DE BIOANAUSIS UNIDADDECI U . ENCIAS DE LA SALUD PRESENTS Despues de haber revisado ei Proyecto de Trabajo Recepcional, en la modalidad de: " MONOGRAFIA " intitulado Diagnostico citologico de lesion escamosa intraepitelial cervical Realizado por: HILDA GONZALEZ AGUILAR fHago de su conocimiento que estoy de acuerdo en su contenido cientffico, por lo cual NO TENGOINCONVENIENTE EN AUTORIZAR SU IMPRESION. ATENTAMENTE "Lis de Veracruz, Arte, Ciencia, Luz" ' Xalapa, Ver,' a 29 de enero de 2007. Q. C. ELI: Q. C. L E T I C L ^ O M E R O ORTIZ cretario _ O S O U S PAEZ Vocal Y / N O T A t Esta" Autorizacion de Impresion (forma 6) debl incluirse como primcrapagina de manera invariable dentro del trabajo final impreso y encuadernado. n—i— hfi •—nirm—m i r> 11 < l 2.1.1.5. El meato uretral 2.1.1.6. Introito 2.1.2. Genitales internos 2.1.2.1. La vagina 2.1.2.2. El utero 2.1.2.3. Las trompasde Falopio 2.1.2.4. Los ovarios 2.2. Citologia del Cervix Uterino 2.2.1. Citologia del epitelio piano estratificado 2.2.2. Citologia del epitelio cilindrico simple 2.2.3. Citologia de la zona de transformacion de los epitelios del Cervix Uterino Capitulo 3 NOMENCLATURA DE LA LESION ESCAMOSA INTRAEPITELIAL CERVICAL 3.1 Antecedentes Historicos 3.2. Clasificacion de Papanicolaou 3.3. Clasificacion de la OMS 3.4. Clasificacion de Richart 3.5. Sistema Bethesda 3.5.1. Nomenclatura de las lesiones cervicales Bethesda 2001. 3.5.1.1. Negativo para lesiones intraepiteliales o cancer. 3.5.1.2. Anomalias de las celulas epiteliales. 3.5.1.2.1 Anomalias de las Celulas Epiteliales en Celulas Escamosas 3.5.1.2.1.1. Celulas escamosas atipicas. 3.5.1.2.1.2. Lesiones intraepiteliales escamosas (SIL). 3.5.1.2.1.3. Carcinoma de celulas escamosas. 3.5.1.2.2. Anomalias de las Celulas Epiteliales en Celulas Glandulares. 3.5.1.2.2.1. Celulas glandulares atipicas (AGC). 3.5.1.2.2.2. Adenocarcinoma endocervical in situ (AIS). 3.5.1.2.2.3. Adenocarcinoma endocervical. 3.5.1.2.2.4. Adenocarcinoma endometrial. 3.5.1.2.2.5. Adenocarcinoma extrauterine. 3.5.1.3. Otras neoplasias malignas. 3.6. Factores de riesgo para la lesion del cervix uterino Capitulo 4 DIAGNOSTICO CITOL6GICO 4.1. Generalidades 4.2. Alteraciones celulares inflamatorias 4.2.1. A S C y A G C 4.3. Alteraciones celulares anormales 4.3.1 Alteraciones producidas por el Virus de Papiloma Humano VPH 4.3.2. Displasia Leve, Neoplasia Intraepitelial Cervical 1 (NIC I), Lesion Escamosa Intraepitelial de Bajo Grado (LEI BG) 4.3.3. Displasia Moderada, Neoplasia Intraepitelial Cervical 2 (NIC II), Lesion Escamosa Intraepitelial de Alto Grado (LEI AG) 38 38 38 39 39 39 39 39 40 43 44 45 46 47 47 48 49 50 50 50 51 51 51 52 53 53 53 54 54 54 54 57 63 64 65 66 66 66 67 67 4.3.4. Displasia Severa, Neoplasia Intraepitelial Cervical 3 (NIC III), Lesion Escamosa Intraepitelial de Alto Grado (LEI AG) Capitulo 5 TRATAMIENTO 5.1. Metodos Conservadores 5.1.1. Crioterapia 5.1.2. Laser 5.1.3. Escision con Asa Electroquirurgica 5.2. Metodos Radicales 5.2.1. Conization 5.2.2. Histerectomia Capitulo 6 CASOS CLINICOS CON CORRELACION DIAGNOSTICA 6.1 Casos Clinicos con Correlation Diagnostica (Citologia Colposcopia - Histologia) 6.2. Caso I (Displasia Leve mas I.V.P.H.). 6.3. Caso II (Displasia Leve mas I.V.P.H.) 6.4. Caso III (Displasia Moderada mas I.V.P.H.). 6.5. Caso IV (Displasia Moderada mas I.V.P.H.). 6.6. Caso V (Displasia Severa mas I.V.P.H.) 6.7. Caso VI (Carcinoma In Situ) 6.8. Conclusion de los Casos Clinicos de Estudio. 7. BIBLIOGRAFIA 68 71 72 72 73 73 73 73 74 76 77 78 80 82 85 87 89 91 92 I. INTRODUCCION La Citopatologia es la parte de la Anatomia Patologica que, mediante diversos procedimientos, estudia las alteraciones morfologicas de las celulas desprendidas libremente de los epitelios de revestimiento o extraidas de distintas zonas del cuerpo humano. (1) Sus antecedentes historicos se remontan a los trabajos de Virchow que, siguiendo la teoria celular sobre el origen de la vida, localizaba en estos elementos las lesiones que caracterizan a la enfermedad. No fue, sin embargo, hasta la decada de los anos 20 cuando, a partir de la observation de celulas descamadas del epitelio vaginal de la rata, George Papanicolaou correlaciono sus hallazgos morfologicos con el estado hormonal del animal. Posteriormente, la Citopatologia paso de la investigation en el laboratorio a la practica clinica, inicialmente ginecologica, ampliando su utilidad al diagnostico de las neoplasias de cuello uterino y sus lesiones precursoras, a traves de la observation en frotis vaginales de los cambios displasicos que caracterizan a estas neoplasias. (1) La principal causa de muerte en Mexico en mujeres es debido a cancer cervicouterino (CaCu), pudiendose presentar de los 17 a los 70 anos de edad, coincidiendo con la etapa mas productiva de la mujer. Como se pude apreciar en la Grafica 1. (27) DEFUNCIONES 1100 1000 900 800 600 500 400 200 100 10-24 Anos 25-34 AAos 35-44 Anos 45-54 Anos 55-64 Anos 65-74 Anos 75 o mas • TOTAL CaCU Grafica 1. Total de Defunciones de CaCu por Rango de Edad en 2005. (27) En Mexico cada 2 horas fallece una mujer por CaCu y anualmente se presentan mas de 4000 muertes. Ver Grafica 2. (27) DEFUNCIONES 5,000 4,500 4,000 3,500 3,000 - 2,500 - 2,000 - 1,500 - 1,000 500 - 01990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 • TOTAL CaCU Grafica 2. Total de Defunciones de CaCu por Ano en Mexico (27) Los reportes para el Estado de Veracruz son de una mujer fallecida por esta causa cada 20 horas; de tal forma que al final del dia mueren en el pais 12 mujeres por CaCu y una de ellas es veracruzana. (11) En nuestro pais esta enfermedad constituye la primera causa de muerte por cancer en la mujer. En el ambito mundial el carcinoma de cuello uterino es la segunda causa de morbilidad y mortalidad. (11) Los costos por los decesos de estas mujeres equivalen a sumas considerables para el pais en gastos por tratamientos, que oscilan desde los $68,000 y hasta $140,000 por paciente con CaCu (CECan-SESVER, 2006); asi como costos por indemnizaciones y dias laborales perdidos. Aunado a esto, el numero de familias que se ven afectadas sufren consecuencias de tipo social, educativo, psicologicofamiliar principalmente los menores al quedar en la orfandad. (3) Estas consecuencias pudieran mitigarse e incluso prevenirse, ya que alrededor del 76% de los casos son diagnosticados en etapas avanzadas, con la realization del diagnostico oportuno de cancer cervicouterino, conocido como prueba de Papanicolaou. (11) r En la actualidad, el desarrollo de la Citopatologfa se ha beneficiado de la utilizacion, a gran escala, de la puncion con aguja fina, la continua ampliation de esta modalidad a diferentes territorios organicos, y su empleo dirigido a traves de la vision ecografica o mediante tomografia computarizada, que han posibilitado el acceso a las zonas mas profundas del organismo. De esta forma, se ha conseguido introducir los estudios citologicos practicamente en todas las especialidades clinicas. (1) De Igual modo, la progresiva utilizacion de los metodos inmunocitoquimicos como complemento diagnostico sobre las muestras citologicas esta aumentando el porcentaje de tumores correctamente clasificados mediante este tipo de tecnicas, y, asimismo, el reciente desarrollo de los metodos de biologia molecular (esencialmente la reaccion en cadena de la polimerasa y la hibridacion in situ) facilita la identificacion de diversos agentes infecciosos desencadenantes de las lesiones citopatologicas (papilomavirus, citomegalovirus, etc.). (1) II. JUSTIFICACION El cancer cervico uterino tiene una evolution bien identificada, con la presencia de lesiones precursoras denominadas «displasias» las cuales se clasifican en leves, moderadas y severas segun la gravedad de las alteraciones. Estudios previos han demostrado que el tiempo que transcurre entre una displasia leve hasta el cancer invasor es de 10 a 20 anos, lo cual permite a traves de la detection temprana interrumpir el curso de la enfermedad. *10) Es importante hacer notar que no todas las displasias evolucionan a cancer, se estima que el 35% regresan espontaneamente, 20% se mantienen en forma estacionaria y el 45% progresan a cancer. (10) Hasta el momenta no es posible identificar los casos que progresaran a cancer y cuales regresaran, por tanto es obligado realizar el seguimiento y control en la totalidad de los casos. (10) De acuerdo a la information estadfstica, la edad promedio en que se detectan las displasias mas frecuentemente es: leve de 25 a 30 anos, moderada de 30 a 35 anos y severa de 35 a 45 anos. (10) Con relation a la detection de casos positivos, el cancer «in situ» es mas frecuente de 35 a 45 anos, el microinvasor de los 45 a 50 anos, y el invasor de los 50 anos en adelante. (10) Con respecto a los sintomas y signos presentes en la enfermedad, en los casos de displasias y canceres iniciales (in situ y microinvasor) suelen no dar sintomatologia, la unica forma de ser diagnosticados es mediante el estudio citologico.(} En virtud de lo anterior, las habilidades y destrezas empleadas por el Qufmico Clinico en la realization del diagnostico citologico deben provenir de una formation suficiente donde la documentation utilizada a su vez, debe ser precisa, adecuada y actualizada. La elaboration de una monografia que cumpla con estas condiciones justifica la realization de este trabajo, el cual pretende describir la lesion escamosa intraepitelial cervical y la importancia de su interpretation oportuna como enfermedad preinvasora, partiendo de una revision bibliografica y de reportes experimentales especializados, con la finalidad de ayudar en el adecuado diagnostico citologico. J III. OBJETIVOS General. Fundamentar la interpretation del citodiagnostico de la lesion escamosa intraepitelial cervical. Espetificos. Identificar los criterios citologicos para establecer el diagnostico de: • • • • Displasia leve Displasia moderada Displasia severa Carcinoma in situ CAPITULO 1 CITOPATOLOGIA La citopatologia tiene por objeto interpretar las lesiones presentes sobre celulas aisladas, descamadas libremente de las superficies epiteliales o, extraidas de diferentes regiones organicas por medio de procedimientos clinicos diversos. El Ci.Dx debe ser concebido y practicado como una subespecialidad de la Anatomia Patologica, y su principal ventaja sobre la biopsia (obtencion de pequena portion de tejido para su estudio histopatologico) es la posibilidad de realizar un muestreo de la lesion mucho mas amplio y reiterado, de manera que permite hacer un seguimiento dinamico de la conducta biologica de las lesiones. Desde el punto de vista tecnico, el Ci.Dx es simple, rapido, poco agresivo y de bajo costo, lo que permite identificar rapidamente la mayor parte de las lesiones, sobre todo las de caracter tumoral o preneoplasico, siendo este hecho trascendental para poder estudiar a grandes poblaciones de riesgo. La calidad del Ci.Dx depende tanto de la manera de proceder con respecto a la obtencion, el extendido, la fijacion y el envio de las muestras, como del procesado e interpretation de las mismas en el laboratorio. (1) 1.2. Tipos de muestras en citopatologia exfoliativa. La citopatologia exfoliativa tiene por objeto identificar las celulas del cuerpo humano desprendidas de la epidermis, los epitelios que revisten estructuras organicas abiertas al exterior, y el mesotelio que tapiza las cavidades corporales (pleura, peritoneo, articulaciones, espacio raquideo). De forma generica, las celulas pueden obtenerse: (1) a) Por exfoliation forzada, mediante frotamiento o raspado con diversos instrumentos en la epidermis y los epitelios que son continuation de la misma. (1) b) Aprovechando los Ifquidos que transportan los elementos descamados de forma espontanea (esputo, orina, etc.). (1) c) Mediante instrumentos de exploration o puncion, que extraen el componente liquido con celulas en suspension procedente de zonas organicas internas (tracto respiratorio, tubo gastrointestinal, cavidades serosas). De esta manera, los territorios organicos que con mayor frecuencia se estudian mediante citopatologia exfoliativa son: -Aparato genital femenino. -Arbol respiratorio. -Aparato digestivo. -Vias urinarias y prostata. -Piel -Cavidades organicas: peritoneal, pleural, pericardica, raquidea y articular. (1) Para el caso que nos ocupa se abordara lo referente al cervix uterino. 1.3. Procesamiento general del material citologico cervico vaginal en consultorio. La calidad de una preparation citologica depende, tanto del proceder clinico acerca de la obtencion y realization del extendido, como del envio de las muestras y su ulterior procesamiento en el laboratorio. (1) Para una correcta obtencion de las muestras, se requiere contar con suficiente habilidad y experiencia, ademas de con un instrumental adecuado. (10) En este sentido, los instrumentos utilizados para la toma de muestra en citologia cervico vaginal suelen ser sencillos, y consisten en escobillones (citobrush), hisopos de algodon, espatulas tipo Ayre, espejo vaginal y guantes. Dentro del material necesario se requiere portaobjeto, lapiz marcador de grafito o diamante (segun sea esmerilada la laminilla o no), mesa de exploration y fuente de luz (lampara de chicote o linterna). (10) 1.3.1. Toma de muestra. Para garantizar una adecuada atencion a la usuaria se deben tener en cuenta: • • • • • • La orientation y consejeria El consentimiento informado de la usuaria La disponibilidad de insumos y equipo necesario y ubicacion del mismo considerando la necesidad del tomador de muestra. La capacidad tecnica del prestador del servicio, y La calidez en la prestation del servicio. La medicion del tiempo y movimientos resulta indispensable en los procesos de toma extendido y fijacion. (10) 1.3.1.1. Preparativos para la toma de muestra. Atencion y entrevista de la usuaria. Es conveniente atender a la usuaria en presencia de otra persona, siempre con cortesia y pleno respeto. (10) Se le debe informar que el procedimiento es sencillo, dura solo unos minutos y que no tiene riesgos; asi mismo, realizar el interrogatorio, registrar la information en la Hoja de Solicitud y Reporte de Resultados de Citologia Cervical, con precision y claridad, siguiendo el instructivo para su llenado; y mencionarle la importancia de acudir a la entrega de resultados y el cumplimiento de las indicaciones que se le den. (10) Cuando en el interrogatorio percibimos uno o mas factores de riesgo, es nuestra obligation ampliar nuestro interrogatorio e informar a la usuaria como puede controlar los factores de riesgo detectados. (10) Se debe hacer enfasis en: • • • Higiene Genital. Atencion de infecciones en ella y su pareja. Alimentation basada en vitamina A, C, E y folatos. (10) Preparation del material y equipo Antes de atender a la usuaria, verificar el material y equipo que se utilizara, constatando que este completo y esterilizado, o desinfectado en caso de no disponer de un autoclave. (10 ' Rotulado de la laminilla. Rotular antes de tomar la muestra, apoyandose en una superficie plana y fija; tomar el lapiz con fuerza y deslizarlo para marcar firme y claramente en el tercio superior de la laminilla las iniciales de apellidos y de nombre (s) de la usuaria, fecha de toma y numero de citologia. Antes de extender la muestra, verificar que la laminilla este libre de polvo, grasa u otro material, aun cuando en ese momento 1.3.1.2. Colocacion de la usuaria en posicion ginecologica. Una vez preparada la usuaria invitarla a subir a la mesa de exploration y auxiliarla para adoptar la posicion ginecologica. En el caso de no disponer de este mueble, puede usarse una mesa o la cama. Recostar a la usuaria en la orilla, haciendo que flexione ambas piernas con las rodillas y talones juntos, acercandolas a los gluteos y enseguida separar las rodillas para exponer la region genital. (10) Usar un campo o sabana limpia para cubrirla de preferencia hasta las rodillas y enfocar la fuente de luz al area genital. Ver Figura 2. (10) Colocacion de guantes. Colocarse los guantes en ambas manos y mantenerlos hasta retirar el espejo y evitar el exceso de talco, cuidando que no caiga sobre la laminilla recuerde que debera tomar la laminilla solo por el tercio de la identification y/o bordes de la laminilla. (10) Colocacion del espejo vaginal. Se debe evitar el empleo de lubricantes, aceites y jalea previa a la colocacion del espejo, ya que ocasiona que las celulas se cubran por una capa, lo que impide la interpretation citologica. De ocurrir la toma sera clasificada como inadecuada. (10) Tomar el espejo esteril o desinfectado, colocarlo en la palma de la mano con las valvas cerradas, entre los dedos indice y medio. El cuerpo del espejo se sujeta con los dedos anular y menique. Con los dedos indice y pulgar de la mano contraria, separar loS labios menores y visualizar el vestibulo vaginal. Ver Figura 3. Figura 3. Colocacion del Espejo Vaginal (10) Con las valvas cerradas, introducir suavemente el espejo formando un angulo de 45 grados o en forma vertical 90 grados con relation al piso de la vagina. En ese momento se pide a la usuaria que puje, avanzando a la el tercio medio de la vagina, girarlo presionando la palanca que abre la valva superior con el dedo pulgar de la mano que sostiene el espejo; para abrir las valvas introducirlo un poco mas hasta localizar el cervix sin lastimarlo, ya localizado, se fijan las valvas para que no se deslicen. Ver Figura 4. (10) Figura 4. Localization del cuello cervical (10) En paciente climaterica, menopausica o postmenopausica se recomienda lubricar el espejo con solution fisiologica para humedecer la mucosa vaginal e introducirlo con mayor facilidad. Al observar el cuello uterino debe hacerse la busqueda intencionada de lesiones como laceraciones o desgarros ocurridos en el parto y algunas irregularidades provocadas por procesos patologicos; cuando presenta inflamacion el cuello uterino se torna rojo violaceo, despulido y sangra ocasionalmente con el race del espejo vaginal en infecciones cronicas con edema; en la formation de quistes glandulares se observa una deformation del cuello uterino y alargamiento en el prolapso acentuado. Es importante mencionar que antes de la toma de la muestra, no se debe realizar exploration por palpation de la vagina y cuello uterino. En caso de existir secretion o sangre excesiva se recomienda limpiar el cuello con una gasa seca hisopo antes de tomar la muestra y desecharla cuidando de no tocar el epitelio del cuello ya que de no hacerlo seria una muestra inadecuada. Aspectos del cervix La figura siguiente muestra algunos aspectos representatives del cervix al ser observado a traves del espejo vaginal. Ver Figura 5. (10) CANCER NORMAL >il(is§ll iBlk NIC ALTO GRADO NIC BAJO GRADO Figura 5. Aspectos del cervix (10) 1.3.1.3. Tecnica para la toma de la muestra. Toma con la espatula de Ayre La muestra del cuello uterino con la espatula de Ayre modificada se realiza tomando una muestra suficiente del exoc^rvix y otra del endocervix. Ver Figura 6. (10) ^ Bl i • ,6, [Xlfi: iXOSl Figura 6. Espatula de Ayre (10) Introducir la espatula de Ayre por el extremo bifurcado y colocarla en el orificio cervical. Girar a la derecha 360° haciendo una ligera presion para obtener muestra de todo el epitelio exocervical. Prestar atencion especial en recorrer el perimetro del orificio cervical cuando presenta forma irregular. Retirar la espatula y volver a introducirla por el extremo conico para la toma del endocervix. Ver Figura 7. (10) Toma endocervical. introducir la espatula por la parte en forma conica en el orificio del canal cervical, hacer una ligera presion deslizandola y girando a la izquierda 360°. Ver Figura 8. Esta tecnica en particular puede sufrir modificaciones de acuerdo a las variaciones que adopta el cuello uterino, que esta siendo examinado y de la localization de la zona de transformation. Por ejemplo usando la espatula de Ayre como se ilustra en las imagenes A, B y C, es la tecnica satisfactoria para tomar una buena muestra, pero no seria satisfactoria en el tipo de cuello post-tratamiento o cuello retraido como se observa en la imagen D. Ver Figura 9 . ( ) Figura 9. Toma de muestra con espatula de Ayre de acuerdo al tipo de cuello y a la localization de la zona de transformation. (10) Toma con cepillo endocervical o hisopo. La toma con cepillo endocervical o con hisopo de algodon no absorbente, esta indicada para tomar muestras en mujeres climatericas, menopausicas o postmenopausicas y adolescentes, se debe tener cuidado en abarcar la zona de transformation. Se introduce el cepillo o hisopo con suavidad, en el orificio cervical realizando un giro a la derecha y se retira para el extendido. Ver Figura 10. (10) Figura 10. Toma de muestra con cepillo endocervical o hisopo (10) Usando el cepillo endocervical o hisopo se deben tomar en cuenta la tecnica descrita, y considerar que si la muestra es tomada de la zona de transformation como se ve en la figura (A), la muestra sera satisfactoria; si la zona de transformation esta reducida o extensamente evertida (figura B y C), la calidad de la muestra sera dudosa; cuando la zona de transformation se encuentra retraida hacia el canal endocervical (figura D), la calidad de la muestra sera insatisfactoria. (10) El area negra corresponde al epitelio escamoso maduro, el area rayada es la zona de transformation y el area con puntilleo es la zona endocervical original. (10) (A) Zona de transformation, (B) zona de transformation evertida, (C) ampliamente evertida, (D) zona postmenopausica (retraida) o postratamiento. Ver Figura 11. <10) s* Figura 11. Toma de muestra con cepillo endocervical en diferentes presentaciones de la zona de transformation. (10) Cuando el cuello presenta una zona de transformation pequena como muestra la imagen siguiente, las tecnicas con espatula de Ayre modificada o con cepillo endocervical proporcionaran una muestra satisfactoria. Ver Figura 12. (10) Figura 12. Toma de muestra en zona de transformation pequena (10) Cuando la zona de transformation esta expuesta extensamente, como se ilustra, la espatula de Ayre se ajustara al contorno de esta zona, la tecnica proporcionara una muestra satisfactoria y representativa. Con el uso del cepillo endocervical se obtendra una muestra dudosa por escasas celulas de la zona de transformation, aunque se obtengan abundantes celulas endocervicales. Ver Figura 13 (10) Figura 13. Toma de muestra en zona de transformation extensa (10) En el caso donde la zona de transformation se encuentra muy retrafda hacia el interior del canal endocervical como se ve en la siguiente figura, no es posible tomar una muestra adecuada con la espatula de Ayre o el cepillo endocervical, por esta razon es recomendable el uso de un hisopo de algodon no absorbente humedecido en solution fisiologica o agua esteril. Ver Figura 14 (10) Figura 14. Toma de muestra en zona de transformation retraida (10) Si la paciente esta histerectomizada, se procedera a tomar una muestra del fondo del saco vaginal o cupula, con el lado bifurcado de la espatula. Ver Figura 15. (10) Figura 15. Toma de muestra en paciente histerectomizada (10) 1.3.2. Extension. El material obtenido puede extenderse directamente sobre un porta objetos. (1) La extension de la muestra sobre el portaobjetos la realiza el personal que extrae la misma. (1) El material no se dispone al azar sobre el porta objetos. Para ello, el porta objetos esta marcado en uno de sus extremos, con el fin de colocar alii una etiqueta informadora de las muestras; siguiendo esta referenda, estas se disponen de forma que el exudado vaginal sea el mas proximo a la etiqueta, a continuation se extiende la muestra del exocervix, y por ultimo y en el extremo mas alejado, la de endocervix, Ver Figura 16. (1) Figura 16. Portaobjetos con triple toma de muestra (2) Actualmente se realiza unicamente dos tomas, de exocervix y endocervix, las cuales se extienden en el portaobjetos de forma longitudinal y continua, delgada y uniforme, (10) como se muestra en la Figura 17. Lo anterior debido a que ya no se determina la information hormonal de la paciente, por medio de citologia. Se prefiere tomar primero la toma exocervical y realizar seguidamente la segunda toma endocervical. (10) Se recomienda que cada laboratorio defina con los especialistas clinicos cual es la disposition del extendido que prefiere. (1) Figura 17. Portaobjetos con doble toma de muestra que se utiliza actualmente (2) 1.3.3. Fijacion. Las citologias ginecologicas se envian extendidas. (1) Generalmente, la confection de las extensiones para citopatologia ginecologica la realiza, en la consulta ginecologica, el propio especialista o el personal de enfermeria, por lo que la fijacion alii practicada es la definitiva, empleando habitualmente un citospray o de preferencia alcohol de 96° (1), por 30 minutos como minimo (10). Ver Figura 18. Es importante que las celulas se fijen en un tiempo de 5 segundos inmediato al extendido, para evitar que se sequen, debido a que se alteran las caracteristicas celulares. (10) Figura 18. Fijacion de la muestra en Alcohol de 96° (11) 1.3.4. Hoja de informacion clinica. Todo material enviado para estudio citopatologico debe ir acompanado de informacion clinica sobre el paciente y la enfermedad objeto de estudio, preferentemente en forma de un impreso normalizado de petition citologica. En esta hoja es obligado incluir, entre otros, los siguientes datos: centra y servicio de procedencia; medico que solicita el estudio y personal auxiliar responsable del envio y reception ulterior del informe; nombre, direction, sexo y edad del paciente; origen del material (simbolos); metodo de obtencion; resumen de la historia clinica; sugerencia diagnostica; tratamientos realizados y estudios citologicos o anatomopatologicos previos. A continuation se presenta un formato tipo de este registro, Ver Figura 19. (1) 1.3.5. Envio y transportacion de la muestra. Colocar la laminilla muestra en una cartera, bolsa de papel, plastico o envolverla con papel estraza y engraparla a la hoja de solicitud y reporte de resultados en la parte superior izquierda de la misma, no usar tela adhesiva ni diurex para pegarla o identificarla. (10) Anotar en la hoja los estudios con los siguientes datos; jurisdiction sanitaria, unidad que envia, No. progresivo para cada muestra, nombre de la usuaria, edad y fecha de la toma; el listado debera engraparse junto con las solicitudes de estudio citologico, para colocarlas posteriormente en el maletin de transporte de muestras hacia la jurisdiction sanitaria y/o laboratorio de citologia. (10) Las muestras deberan enviarse con una periodicidad no mayor de 7 dias. (10) La entrega de resultados a las usuarias en un plazo no mayor de 21 dias. (10) HOJA DE INFORMACION CLINICA soncrruD ce e: tuo*> c i t w s t o i o s »:•: ejIEMTRO DE PPCCECE ' ICIi msTirucK'ri; OEPABTABEHTO: HEOK-: CH ' K IT.-HTE: I fKHA OETOWA OE MUeSTf.A: sMGScTOJ CEL PACUEUTE HOBS RE I eo.'.o: r~~I era: mscQ rat • OIRECCtti; f REutiai 06 Heroee,cutio: TEE I FOHO: £ St)06f,E»ei». DJAMOSTCA: | esTUDeserroioG cos © ahatooo wosioo cos m»ect KBSUITABO OJTEHIOO EM SSTOBK-S fBETOO: IJORKBI Ml HATBR4 IL C<E ESTUDD QAMBATO GEHITAl FEHEH I O CAVWADBS (3K AMcfJAS t PE . Of MAOR? I •fEfrroHE'i pneuRAi QAMIWTO OOKSTHO •«»s UBH I Am»0 , TPROSTATA • p e r b a r b c a •m •R ' TICUUP 0*WS CtM i ICOS OEl BATEBIAl BWtOO; •irararOTSCTr Figura 19. Hoja de Informacion Clinica (3) 1.3.6. Entrega de Resultados y Seguimiento de Casos. Los resultados de cada estudio realizado a toda mujer sometida a la detection de CACU, sera obligatorio para el prestador del servicio anexar el original del formato de solicitud de estudio citologico cervical al expediente de cada usuaria asi como registrarlo en la Cartilla National de Salud de la Mujer, si es analfabeta la informacion se proporcionara ademas de forma verbal.<10) Las pacientes con diagnostico de displasias moderadas, severas y cancer deben canalizarse a la clinica de displasias, o al centra oncologico, para su estudio colposcopico y biopsia dirigida para su confirmation y tratamiento. (10) 1.4. Procesamiento general del material citologico cervico vaginal en laboratorio. En el laboratorio, las muestras para examen microscopico son tenidas, lo que consiste en aplicar diversas combinaciones de sustancias colorantes a las extensiones previamente fijadas. El metodo recomendable y mas utilizado en citologia exfoliativa cervico vaginal es el de Papanicolaou. Comprende un colorante que pone de manifiesto la cromatina nuclear y otras sustancias que tienen afinidad tintorial por los componentes del citoplasma, que se describe a continuation. (1) 1.4.1. Tincion de Papanicolaou. Introducida por Papanicolaou en 1925, utiliza la hematoxilina como colorante nuclear y diversas mezclas de colorantes citoplasmicos, como el naranja G, la eosina, el verde luz SF y el pardo Bismark. Este hecho le proporciona una gran cromaticidad y transparencia, permitiendo la diferenciacion de los finos detalles citologicos sobre los que se basa el diagnostico. (1) Estos reactivos se obtienen de forma comercial. Hematoxilina La mas utilizada es la hematoxilina de Harris sin acidificar con acido acetico, aunque se pueden emplear otras soluciones (hematoxilina de Gill, hematoxilina de Lillie-Mayer, etc.). Es el colorante de las estructuras nucleares a las que proporciona un color azul oscuro. La coloration rosada, rojiza o anaranjada que obtienen los nucleolos no se debe a la hematoxilina, sino a la tincion selectiva que proporciona la eosina, utilizada como colorante citoplasmico. (1) Naranja G Junto con la solution EA, que se menciona posteriormente, constituye el colorante del citoplasma. Aunque la preparation de la solution puede realizarse en el laboratorio, se encuentra comercializada bajo el nombre OG-6; tine de color naranja los citoplasmas celulares que contienen queratina como, por ejemplo, las celulas de carcinoma epidermoide. (1) Soluciones de eosina alcoholica (EA) Ademas de este colorante, contiene cantidades variables de verde luz y pardo Bismark. (1) Comercialmente se encuentran ya diluidas constituyendo las mezclas EA-36, EA50 y EA-65, que si bien proporcionan buenos resultados para cualquier tipo de muestra, en determinadas situaciones es recomendable la election de alguna formula en particular. Este es el caso de las muestras ginecologicas (con frecuencia gruesas), donde es preferible emplear EA-50, ya que al contener la mitad de verde claro que las otras formulas (colorante al 0,05 % frente al 0, 1 % de las restantes), no colorea tan intensamente el fondo de la preparation. Ademas, el empleo de esta mezcla facilita la distincion entre adenocarcinoma de endocervix (citoplasmas rosaceos) y adenocarcinoma endometrial (citoplasmas azulados). (1) Recomendaciones a tener en cuenta: -Filtrar el alcohol de 96 ° y el xileno, si se observan sobrenadantes. -Filtrar la hematoxilina diariamente. -Cambiar, cada 100 extensiones, los colorantes. -Renovar una vez por semana todas las soluciones. -Lavar con agua destilada las cubetas de tincion. Dejarlas secar al aire. -Escurrir y secar en papel de filtro las extensiones antes de pasar a la solution siguiente. -Cambiar diariamente el agua destilada. (1) Aunque este procedimiento esta disenado para realizarse manualmente, actualmente existen multiples sistemas automaticos de coloration que simplifican el metodo, aunque los resultados son siempre algo inferiores a los de la tincion manual. Sin embargo y debido al gran volumen de trabajo existente en los laboratories de citologia, este tipo de sistemas se ha impuesto progresivamente. A continuation se presenta la tecnica de tincion de Papanicolaou: (1) Soluciones A. Hematoxilina de Harris no acidificada (Tincion Nuclear). B. Solution de naranja G al 0,5 en alcohol etilico al 95 % (Solution comercial OG-6) (Tincion Citoplasmica). C. Solution comercial EA 50. (Tincion citoplasmica) D. Solution de decoloration: en citologias ginecologicas y de abundante material que retienen mucho colorante debe utilizarse un bano de acido clorhidrico al 0,5 % en alcohol de 96° que elimina la tincion de hematoxilina. Modo de operar Las extensiones ya fijadas se pasan a: 1. Caja de Alcohol 96°: 10 inmersiones. 2. Caja de Agua corriente: 10 inmersiones. 3. Caja de Agua destilada: 10 inmersiones. 4. Caja de Hematoxilina de Harris: 4 minutos. 5. Caja de Agua corriente: 10 inmersiones lentas. 6. Caja de Acido clorhidrico al 0.5 % + Alcohol al 96°, 2 inmersiones. 7. Caja de Agua Destilada: 10 inmersiones lentas. 8. Observation en microscopio para evaluar el efecto de la primera tincion. 9. 3 Cajas de Alcohol 96°: 10 inmersiones sucesivas rapidas en cada una. 10. Caja de Solution de naranja OG6: 1 a 1,5 minutos (segun la antiguedad del colorante). 11. Tres Cajas de Alcohol 96°: 10 inmersiones sucesivas rapidas. No dejar los portaobjetos en ellas durante largos periodos de tiempo. 12. Observation en microscopio para evaluar el efecto de la segunda tincion. 13. Caja de Solution EA 50: 30 segundos. 14. Caja Alcohol 96°: 10 inmersiones sucesivas rapidas. No dejar los portaobjetos en ella durante largos -Nucleos: azul -Citoplasmas: de verde a periodos de tiempo. naranja - rojizo 15. Tres Cajas de Alcohol absoluto: 10 -Citoplasmas dependiendo de: inmersiones cada una. • Celulas secretoras o de epitelio 16. Cinco Cajas de Xileno: 10 de revestimento inmersiones en cada una. Dejar en el monoestratificado: verde suave. ultimo bano, para realizar el montaje • Celulas de epitelio de enseguida. revestimiento poliestratificado 17. Montaje: eliminar el exceso de mucoso: de verde suave a rosa. xileno y, sin dejar que se formen • Celulas queratinizadas: rojo burbujas, montar en resina sintetica. anaranjado. Tecnica de Tincion de Papanicolaou. (21) En la Figura 20 se presenta un diagrama para la ejecucion de la Tecnica anterior. t;<>rf icnlf Agua distijjcio J= oexAhMhot etiI(co Agua Af.ti'i 0.5% de aetdo clorhifir ico 88* Alcohol ct >Iico HairatoxiIina 98X Alcohol et i I k:o < f \ «K Alcohol Btifico \ Izl. 86* AI colio 1 efilico f \ L G 7 k a 7 L/ 100* Alcohol ctilieo zlZJ/ y fl s IZ: f'S* Atcohol ct iI(co 1A S0 "y \y~X\y~xz xileno Figura 20. Diagrama de la Tecnica de Tincion de Papanicolaou. (11) La muestra citologica en la practica ginecologica habitual se obtiene del cuello uterino de la union escamocolumnar y del fondo de saco posterior de la vagina para diagnostico oncologico y de pared lateral de la vagina para diagnostico hormonal. Con este procedimiento se obtienen fundamentalmente celulas exfoliadas del epitelio piano cervicovaginal y del epitelio cilindrico endocervical, en ocasiones tambien se encuentran celulas endometriales y, excepcionalmente, celulas del epitelio de la trompa y del ovario, Ademas pueden encontrarse eritrocitos, celulas inflamatorias, microorganismos y elementos de contamination, Ver Figura 21. ( 6 ) . 4 ••• . < O V.. > . o t* . <y o <3 o. Figura 21.Tincion de Papanicolaou de un extendido cervico vaginal. (1) 1.4.2. Causas de Tincion de Papanicolaou defectuosa. Para esta misma tecnica se tiene identificadas las principales causas de tincion de defectuosa, mismas explican a continuation. a) La tincion del nucleo es tenue (Figura 22). Posibles causas Liquido de tincion deficiente. Sequedad antes de la fijacion. Tiempo insuficiente para la fijacion. Tiempo insuficiente para la tincion del nucleo. Deterioro de la hematoxilina por dilution. Exceso de decoloration con alcohol de acido clorhidrico. Blanqueado por el cloro del agua de la Have. Mezcla con el liquido de citospray para la fijacion. (11) % / • * 0 o. Figura 22(11) b) La tincion del nucleo. es *fuerte y la estructura del nucleo queda ambigua (Figura 23). Posibles causas: Uso' de alcohol de alta concentration (etanol al 100,%) en laffijacion de la rriuestra. Excesb de tiempo para la tincion del nucleo. Falta de decoloration con acido clorhidrico. (11) .• c) Tincion defectuosa del citoplasma (tenue) (Figura 24). Posibles causas: Colorantes deficientes. Deterioro del colorante por dilution. Tiempo insuficiente de tincion. Deshidratacion y aclaramiento inadecuado.(11) d) Tincion inadecuada del citoplasma (oscura) (Figura 25). Posibles causas: Exceso del tiempo de tincion. Concentration de los colorantes.(11) e) La tincion inadecuada del citoplasma. Rosado - naranja tenue (Figura 26). Posibles causas: Sequedad antes de la fijacion. Tiempo Insuficiente para la fijacion. Deficiencia del colorante de EA-50. (11) Figura 26 (11) f) Falta de transparencia (Figura 27). Posibles causas Deshidratacion inadecuada el alcohol esta mezclado con agua. Aclaracion (xilol de baja pureza). Material inadecuado para el montaje. no es transparente(11) Figura 27 (11) g) Deshidratacion Deshidratar bien con alcohol de 96° - alcohol absoluto. Si no se hace bien la deshidratacion, las laminillas se vuelven color blanquecino y no se logra obtener una muestra adecuada. Los colorantes tienden a disolverse en el agua o en alcohol, y esta es la causa de la decoloration celular.<11) 1.5. Aspectos basicos sobre interpretacion de las extensiones citologicas. Una adecuada interpretacion de las preparaciones citologicas requiere, en primer lugar, la puesta a punto del microscopio y una detenida lectura de los datos aportados en la correspondiente hoja de informacion clinica. Una vez que la extension se encuentra sobre la platina del microscopio, se precede a identificar el origen de la muestra, cuando no se encuentra consignado. ( } Despues de haber comprobado que la muestra esta procesada de forma correcta y es valida para el diagnostico, debe examinarse el porta objetos detenidamente y en toda su extension. El sentido de desplazamiento aconsejable es el vertical mas que el horizontal (Ver Figura 28.), aunque se ha senalado que causa mayor fatiga visual. En algunas ocasiones, se aconseja seguir el sentido en que se ha hecho la extension. (1) ilm. - > * < t-<* j Figura 28. Esquema de la sistematica de observation a seguir en el estudio de una preparation citologica (1) Las lentes recomendables son oculares de amplia vision (x 10, x 12,5 6 x 1 5 aumentos) y objetivos x 10, cambiando progresivamente al x 20, x 40, etc., cuando haya que matizar detalles de las celulas o del fondo. (1) Los hallazgos de interes se deben senalar para poder localizarlos facilmente con posterioridad. Para ello se utiliza un objetivo, lupa y lapiz corriente o rotulador, o bien los objetivos marcadores especiales para ello, recientemente comercializados. De esta forma, debe evaluarse: -Aspecto general del extendido, incluyendo la sustancia de fondo y la disposition de las celulas (agrupadas, aisladas). -Cada celula en conjunto; es decir, su tamano, forma y coloration. -La estructura, color, cantidad y relation del citoplasma respecto al nucleo. -El nucleo: numero, forma, tamano, caracteres de su membrana, situation y relation con el nucleolo. -El nucleolo indicando su numero, tamano, forma y coloration. (1) 1.6. Organizacion general de una seccion de citopatologia. Dependera de las tareas a realizar (asistencial, docente, o investigadora, o todas ellas) asi como de los medios disponibles, de forma que pueden distinguirse dos tipos de secciones de Citopatologia: a) Las dedicadas exclusivamente al citodiagnostico (labor asistencial), y que son propias de pequenos hospitales y centros de salud; y b) Los servicios de Citopatologia orientados a actividades multiples (asistencial, docente e investigadora), por lo que suelen estar ubicados en grandes instituciones (hospitales de ambito regional, facultades de medicina, centres oncologicos, institutos de investigation). 1.6.1. Distribucion de espacios fi'sicos. Los medios materiales imprescindibles pueden distribuirse en laboratories (unidades fisicas) de unos 24 m 2 de extension, con una superficie de poyata de 10 x 0.75 m, en la que se situan los siguientes instrumentos: microscopios, estufa, centrifuga, citocentrifuga, balanza de precision, fregadero y baterias de fijacion y coloration bajo campana de extraction de gases. Esta unidad basica seria idonea para un volumen de trabajo entorno a 10 000 citologias anuales, y estaria complementada con 1,5 unidades fisicas para secretaria y administration y otras dos unidades para almacen y archivos ademas de 0,5 - 1 unidades para despachos. (1) 1.6.2. Medios humanos necesarios. Medicos o citopatologos, que son especialistas en Anatomfa Patologica con formation citologica y clinica complementaria. Citotecnologos o auxiliares de laboratorio con formation basica de tecnicos especialistas y complementaria en citopatologia para realizar labores de muestreo. (1) Personal administrativo. La proportion idonea de personal para una section de citopatologia de pequeno tamano es de: un citopatologo por cada tres a cinco citotecnologos y una o dos personas para secretaria y servicios. Los servicios de citopatologia suelen requerir personal adicional calificado para docencia e investigation. (1) 1.6.3. Funciones de los citotecnologos. En la actualidad, y debido a la falta de regulation especifica de la profesion de citotecnologo, las funciones de este personal se encuentran sometidas a discusion, de forma que en las secciones de citopatologia pueden encontrarse tanto tecnicos especialistas como diplomados en enfermeria realizando dichas funciones. En el primer caso, estas personas tienen asignado ademas, el registro, procesamiento, coloration y archivado de las extensiones, mientras que en el segundo actuan como citotecnologos puros, cuya funcion primordial es la interpretation de los extendidos a traves de un examen microscopico bajo la supervision del citopatologo. En cualquier caso, este trabajo debe ser realizado con las debidas garantias de formation previa dado que un porcentaje elevado de casos (85-90 %) de los extendidos cervicovaginales en mujeres asintomaticas no suele ser revisado por el citopatologo, si el citotecnologo los considera negativos. Otras tareas relativas a la labor asistencial que tambien son competencia del citotecnologo son la preparation psiquica al paciente y la preparation del campo para la realization de punciones-aspiraciones con aguja fina (PAAF), asi como de los materiales necesarios para la obtencion del aspirado y la tincion rapida y permanente de los mismos. (1) 1.7. Control de Calidad en Citologia Cervico Vaginal. Se basa en promover estandares de calidad en citologia cervical y en asegurar a los profesionales de salud, a los compradores de servicios y a las pacientes, altos niveles de calidad tecnica en este campo. (25) La citologia cervicovaginal, como procedimiento de tamizaje en los programas de detection de carcinoma cervicouterino, ha demostrado ampliamente su eficacia al disminuir las tasas de mortalidad por esta neoplasia. Sin embargo, persiste el problema de los falsos negativos, que pueden originar un numero considerable de errores. En Mexico, la frecuencia de falsos negativos ha sido reportada tan alta como 35% en algunos estudios. (26) Una de las principales preocupaciones del personal de salud involucrado en esta area es tratar de minimizar estos errores; para ello se han implementado diferentes practicas de control de calidad interno en los laboratorios de citologia, que a continuation se describen. (26) 1.7.1. Revision del 10% de los casos negativos. En Estados Unidos se ha establecido de manera obligatoria en todos los laboratorios el metodo de revision de un 10% de los casos negativos, seleccionado aleatoriamente. Este metodo no ha demostrado ser tan util como se esperaba, por lo que esta cayendo en desuso e incluso se ha sugerido su abandono, pues solo podrla estar causando una falsa sensation de seguridad. (26) 1.7.2. Revision rapida del 100 % de los casos negativos. En el Reino Unido el control de calidad interno se Neva a cabo mediante la revision rapida y partial de todas las muestras interpretadas inicialmente como negativas; consiste en una re-revision durante 30 a 120 segundos para identificar aquellas muestras que pueden contener celulas anormales que no hayan sido reconocidas en la revision habitual previa. Se ha demostrado que mediante esta tecnica la proportion de positivos adicionales encontrados es mayor que la identificada mediante la revision de solo el 10%. (26) 1.7.3. "Prescreening" o pre-revision. Es una variante de la revisibn rapida que consiste en la evaluation rapida de todo el material antes de que se efectue la lectura habitual. Con esta modalidad de revision rapida, se somete a evaluation el 100%, es decir la totalidad de los casos. Esta tecnica ha mostrado ser tan util como la revision rapida, antes mencionada. (26) Consiste en la revision por el patologo del total de casos positivos diarios detectados por los citotecnologos del laboratorio. 1.7.5. Correlacion citohistologica. La mejor practica de control de calidad es la correlacion citohistologica; sin embargo, una limitante consiste en el manejo de gran cantidad de datos que se debia llevar a cabo de forma manual, al no existir registros computarizados que permitieran una busqueda y correlacion de forma rapida. Actualmente se cuenta con esta posibilidad, pero existe baja concordancia intra e interobservador en el diagnostico histologico, procedimiento que tampoco esta libre de errores, por lo que no siempre es un estandar de oro ideal. (26) 1.7.6. Control de Calidad Externo. El esquema de Garantfa de Calidad Externa (GCE) para la el diagnostico citologico ha sido introducido en los Estados Unidos en 1968 y en el Reino Unido en 1988. Desde entonces este esquema ha estado funcionando con excelente resultados. (25) El Esquema GCE se basa en un examen llamado Test de Competencia y en los paises donde esta funcionando sirve para asegurar a los compradores de servicios de citologia exfoliativa, que estan comprando un servicio de muy alta calidad. Estos compradores de servicios tienen el derecho de saber si en cualquier momento los estandares de calidad en ese laboratorio se deterioran. (25) Este esquema es reconocido a nivel internacional como una manera de demostrar competencia en el diagnostico citologico, aunque los examenes, los resultados y la evaluation de los resultados necesitan ser interpretados con mucha atencion. El esquema tiene como objetivo principal ofrecer la posibilidad, a cada laboratorio de citologia, de conocer el nivel de su desempeno en comparacion a los otros laboratories en el pais y si la calidad de su trabajo no es la esperada, involucrarse en un proceso de mejora continua hasta alcanzar niveles optimos. (25) Los objetivos especificos del esquema de GCE son los siguientes: 1. Promover uniformidad en la nomenclature y en los criterios de diagnostico; 2. Identificar aspectos en que la capacitacion continua puede ser de beneficio; 3. Asegurar altos niveles de rendimiento del personal de laboratorio y elevar su autoestima; 4. Brindar confiabilidad a proveedores, compradores y usuarias de los servicios. (25) El GCE basicamente consiste en un Test de Competencia (Proficincy Testing) donde todo el personal que lee laminas en un laboratorio (tecnicos, citologos, patologos) tiene que examinar 10 laminas durante un perlodo de una hora y media y llenar una hoja estandar de resultados por cada lamina. El diagnostico de las laminas ha sido anteriormente aprobado por un Comite de Expertos constituido por patologos y citologos peruanos, pero para las personas que toman el test las laminas son totalmente anonimas. El test se hace bajo la supervision de un facilitador que tambien se encarga de corregir las hojas de resultados y entregar los resultados personalmente a cada individuo participante y una copia al jefe de laboratorio. Los resultados individuales son estrictamente confidenciales, pero en base a estos se obtiene un nivel del desempeno de cada laboratorio. Estos si pueden compararse, aun anonimamente si se desea. Una ronda de Test de Competencia se considera terminada cuando todo el personal de todos los laboratorios ha lefdo 40 laminas bajo supervision de la facilitadora. Solamente entonces se puede hacer una evaluation del rendimiento de un laboratorio o de un individuo. En caso que se identifiquen individuos que estan sobre-(o sub) diagnosticando, el Comite de Expertos aconseja medidas correctivas. Lo ideal serla que estos individuos hagan su diagnostico bajo la supervision de un experto citotecnologo o un patologo hasta que puedan mostrar haber alcanzado niveles optimos de rendimiento en la lectura de citologia. (25) Cada examen consiste en la lectura de 20 laminas a lo largo de dos secciones (dos dlas, una hora y media por cada section). Los examenes se llevan a cabo dos veces al ano, de tal forma que cada ano se completa una ronda del Test de Competencia y se entregan las certificaciones. (25) Es importante subrayar que el Test de Competencia, por si mismo, no es una prueba definitiva para determinar el nivel de calidad de un laboratorio. Sus resultados tienen que ser complementados con la evaluation del desempeno diario de los profesionales y tecnicos que participan en la lectura de citologia. *25) El Test de Competencia tiene una naturaleza voluntaria. La participation en este esquema es a traves de una invitation del Comite de Expertos en conjunto con la Sociedad Peruana de Citologia, pero los laboratorios que quieran participar y que no han sido invitados pueden presentar su solicitud al Comite. Se establece que una vez que el laboratorio decide participar en el Test de Competencia tiene que respetar las "reglas de participation" que el Comite de Expertos ha delineado. (2 ) El esquema GCE esta abierto a la participation tanto del sector publico como del sector privado y del seguro social. El objetivo es alcanzar el mayor numero de laboratorios posible para asegurar que esten asegurando a los usuarios de servicio niveles de calidad optimos y disminuir el numero de resultados falsos positivos y negativos. (25) Se entrega un certificado de Garantia de Calidad Externa para el Diagnostico Citologico a los laboratorios que superen la prueba del Test de Competencia. Dicho certificado tendra una validez de un ano, hasta que la prueba se repita y se obtengan nuevos resultados. Esto permite monitorear periodicamente la calidad de cada laboratorio y tambien garantizar a los usuarios de los servicios de citologia exfoliativa conocer la calidad del trabajo de cada laboratorio. (25) Cada laboratorio que identifique problemas en el desempeno de su personal tendra que tomar medidas correctivas para que se alcancen los niveles optimos. El Comite de Expertos apoyara con sugerencias de distintos tipos a los laboratorios que no aprueben el Test, pero la responsabilidad final corresponde al laboratorio. CAPITULO 2 CITOLOGIA DEL CERVIX UTERINO Y SU COMPARATIVA HISTOLOGICA Los genitales de la mujer se agrupan para su estudio en externos e internos. A continuation se describen someramente. (5) 2.1.1. Genitales externos. A los genitales externos femeninos, que trataremos en este capltulo, se les da globalmente el nombre de vulva, Ver Figura 29. (5) Figura 29. Genitales Externos (5) 2.1.1.1. La vulva. Esta compuesta por las siguientes formaciones: los labios mayores, los labios menores, el clitoris, el meato uretral y el orificio vaginal. (5) 2.1.1.2. Los labios mayores. Los labios mayores o externos, son dos pliegues de piel que protegen la vulva y que se recubren de vello desde la pubertad. Se parecen al escroto masculino en su funcion de protection, pero se diferencian en que no se unen en la parte central y en que estan formados por tejidos grasos con una gran circulation sanguinea. (5) 2.1.1.3. Los labios menores. Tambien llamados ninfas, constituyen dos pliegues cutaneos mas pequenos que los labios mayores y se localizan en la parte interior de estos. Los labios menores envuelven el orificio de la vagina y el meato uretral. (5) 2.1.1.4. El clitoris. Se encuentra situado en la parte superior de la vulva, por debajo de los labios mayores y entre los repliegues de los labios menores. Se trata de un organo erectil del tamano de un guisante, con una estructura muy parecida a la del pene, pues esta formado por un tejido esponjoso y abundantes terminaciones nerviosas. Asimismo, tiene un glande cubierto por un prepucio. (5) 2.1.1.5. El meato uretral. Es el pequeno orificio donde termina la uretra y por el que sale la orina. Se localiza entre el clitoris y el orificio vaginal. (5) 2.1.1.6. Introito. Es la puerta de entrada de la vagina. A cada lado del orificio vaginal hay situada una glandula -glandula de Bartholino- que lubrica la vagina. (5) 2.1.2. Genitales internos. . Esta compuesto por la vagina, el utero o matrfe, las trompas de Falopio y los ovarios. Todos estos organos son necesarios para llevar a cabo la compleja tarea de la fecundation. Tambien existe el conducto de la uretra, que no interviene en el proceso de reproduction pero que su orificio de salida se encuentra en los genitales. Se presentan las Figuras 30 y 31, como referenda. (5) •Ovarii ••ited©"'OUCBo ufei-lfM' ~:%»§frftt I Figura 30. Genitales Internos Utero (5) Trompa de Falopio Vagina Figura 31. Genitales Internos (5) Se trata de un conducto de unos diez centimetres de largo que comunica la cavidad uterina con la vulva. Los tabiques de la vagina son irregulares y muy elasticos. En el interior del canal vaginal se produce un liquido conocido como flujo vaginal que, en condiciones normales, debe ser inodoro e incoloro; contiene flora bacteriana normal llamada bacilos de Doderlein, destinada a combatir las posibles infecciones. (5) 2.1.2.2. El utero. El utero o matriz es el organo femenino en el que se desarrolla el Ovulo fecundado durante el embarazo. Su estructura muscular forma una cavidad en forma de pera con la base hacia arriba. Esta recubierto por una mucosa llamada endometrio que aumenta de tamano durante la ovulation. El utero se comunica con las trompas de Falopio por la parte superior y con la vagina por la inferior (cuello del utero o cervix). ( * 2.1.2.3. Las trompas de Falopio. Son dos conductos con una forma mas o menos cilindrica, situados uno a cada lado de la base de la matriz, que conectan los ovarios con el utero. En las trompas es donde puede producirse la fecundation si los espermatozoides se encuentran con el ovulo. (5) 2.1.2.4. Los ovarios. Estan situados encima del utero, con el que se comunican a traves de las trompas de Falopio, Siempre se dice que se parecen a una almendra por la forma y el tamano. Estas son las glandulas sexuales femeninas encargadas de producir ovulos y hormonas (estrogenos y progesterona, principalmente), a partir de la pubertad y hasta la menopausia, se dedicaran a liberar un ovulo maduro, ovulation cada treinta dias aproximadamente. El ovulo es el elemento germinal femenino capaz de ser fecundado por el espermatozoide, se diferencia de este en que es mucho mas grande y lento.(5> 2.2. Citologia del Cervix Uterino. En el cervix uterino se encuentran dos tipos de epitelios, que se clasifican de acuerdo a su ubicacion, siendo estos epitelios los siguientes. a) Epitelio piano estratificado, ubicado en el exocervix. b) Epitelio cilindrico simple, ubicado en el endocervix. El epitelio piano estratificado se compone de celulas escamosas, en tanto que el epitelio cilindrico simple de celulas cilindricas. Existe un tercer tipo de celulas, en el punto de transition de ambos epitelios, llamadas celulas de metaplasia. anterior se detalla en los siguientes puntos. Ver Figuras 32 y 33. Lo Utero Cuello uterine 4 „ Vagina I Exocef. ix | Epitelio pJana estratificado) Eodoeervix fEpiteliocihndrics stmpte) j Celulas escamosas j Celulas de metaplasia Celulas cilindricas Figuras 32 y 33 Tipos de epitelio de Cervix Uterino y Celulas de los mismos. 2.2.1. Citologia del epitelio piano estratificado. El epitelio que reviste la vagina y portion vaginal del cuello uterino de la mujer sexualmente madura es un epitelio piano estratificado, llamado tambien epitelio escamoso o epitelio pavimentoso. Mide aproximadamente 0,2 mm de espesor y esta formado por estratos histologicamente bien diferenciables: (6) a. Estrato superficial. El estrato superficial consta de varias capas de celulas aplanadas grandes, de forma poligonal, de citoplasma delgado y claro, sin puentes intercelulares y con nucleo picnotico central. b. Estrato intermedio. El estrato intermedio tambien presenta puentes intercelulares (estrato espinoso superficial) y esta formado, por numerosas capas de celulas aplanadas, con citoplasma rico en glucogeno, nucleos relativamente pequenos, centrales y vesiculosos. (6) c. Estrato profundo. El estrato profundo esta compuesto de varias capas de celulas redondeadas o poliedricas, de nucleo central, citoplasma grueso, con puentes intercelulares (celulas parabasales) y por una sola capa de celulas de tipo cilindrico dispuestas en empalizada sobre la membrana basal. Las celulas germinativas o basales (aquellas cuya funcion es producir celulas de la especie) son redondas u ovaladas, con nucleo grande, ovalado y central, que ocupa gran parte de la celula. El proceso de regeneration del epitelio se efectua a partir de esta capa celular, el resto de los estratos representan etapas del proceso de maduracion y diferenciacion celular para, finalmente, descamarse en la superficie, Ver Figura 34. (6) ' hi! - OlilU • I'.'jJlifciS OjiuUlS pji-ah.i-wiiC'S y ii-aalt"; ...jr, rirtc-. ^ 1- : ••-•• .... J «... 1 • rt * ' ••. -i - c. fe - ft <•• "i i. -, ':• ' : ^ ^ > . A v j. « : s - :•< : <• c r .:- < ' • <. ft ' • . > < • - .1/ Ail;;. >> % cior fvo-mvMl •».:?!', «s <• r hi);.. 1 > > 1 < if 1 moi'i^ - • hor. ! o 1 , it KM 1 V 1 u. b.i Figura 34. Estructura del Epitelio Cervicovaginal (4) El epitelio piano tiene la capacidad de exfoliar diversos tipos celulares segun el grado de maduracion alcanzado. Habitualmente las celulas que se exfolian provienen de los estratos superiores, a menos que existan ulceras o que la muestra se tome con excesiva energia. Los tipos celulares del epitelio escamoso que se reconocen en el extendido citologico son los siguientes: (6) a. Celulas superficiales Las celulas exfoliadas del estrato superficial miden 40 a 60 micras de diametro. Son aplanadas, delgadas, de contorno generalmente poligonal. La mayorla de ellas tienen citoplasma eosinofilo, pero puede ser cianofilo. El nucleo es central, circular y pequeno, mide menos de 6 micras de diametro. Es picnotico, denso, homogeneo y no se reconoce en el estructura cromatlnica, Ver Figura 35. (6) Figura 35. Celula Superficial (4) Las celulas exfoliadas del estrato intermedio son del mismo tamano o ligeramente menores que las superficiales. Tienen forma redondeada o poligonal, algunas con el borde plegado, el citoplasma es algo mas grueso que el de las celulas superficiales, generalmente basofilo, pudiendo ser eosinofilo. El nucleo es central, redondo y mide alrededor de 8 micras; la cromatina nuclear tiene disposition reticular. (6) Existen algunas variedades de celulas intermedias. Las celulas intermedias superficiales son mas grandes y poligonales que las celulas intermedias profundas, que tienen un contorno mas ovalado. Las celulas naviculares presentan dos extremos aguzados que le confieren la forma de un bote; por su contenido de glucogeno, su citoplasma puede aparecer vacio y el nucleo desplazado hacia un borde, Ver Figura 36. (6) Figura 36. Celula Intermedia (4) Celulas parabasals En el frotis normal de una mujer en edad fertil no constituyen mas del 5% de las celulas exfoliadas del epitelio estratificado. Miden 15 a 25 micras, son generalmente redondeadas, con citoplasma grueso cianofilo. El nucleo es central, redondo o eliptico, con un diametro mayor que el de las celulas intermedias; la cromatina se dispone en forma de finos granulos, Ver Figura 37. (6) Figura 37. Celulas Parabasales (4) Estas celulas provienen de una sola capa basal y no aparecen en los raspados ordinarios, a menos que haya hiperplasia basocelular. El citoplasma es escaso y muy basofilo, y el nucleo relativamente grande e hipercromatico. (22) 2.2.2. Citologia del epitelio cilindrico simple. La mucosa endocervical esta revestida por epitelio cilindrico simple, que tiene entre otras la funcion muco secretora. Estas celulas cilindricas pueden descamarse aisladamente o en grupos. Las celulas aisladas observadas de perfil, presentan el nucleo cerca de uno de los extremos que corresponde al polo basal. En este extremo se reduce el diametro de la celula a manera de un tallo. El nucleo es redondo u ovalado, con la cromatina granular fina y dispersa, Ver Figura 38. ( 6 ) • t * * * jV m * 1 t' %% * * * « 4 * , *« Figura 38. Celulas Endocervicales Aisladas (4) Cuando las celulas endocervicales descamadas en grupos se observan desde el polo superior, presentan un aspecto semejante a un panal de abejas, porque muestran su borde citoplasmatico nitido, de forma hexagonal; cuando se observan lateralmente presentan un caracteristico aspecto en "empalizada", Ver Figura 39. Figura 39. Celulas Endocervicales en "empalizada" (4) 2.2.3. Citologia de la zona de transformacion de los epitelios del Cervix Uterino. La zona entre epitelio original escamoso y el endocervical se denomina Zona de Transformacion, sitio donde se van a originar la gran mayoria de los carcinomas escamosos, de ahl que sea fundamental tomar de aqui suficiente numero de celulas. Hay que tener en cuenta que la localization de la zona de transformacion cambia gradualmente segun la edad, avanzando cada vez mas hacia endocervix. Durante la edad reproductiva esta zona es distal al orificio cervical, por lo que es facil obtener muestra. En la menopausia, en cambio, aparecen en el canal endocervical, siendo dificil obtener material representative, Ver Figura 40. ( 8 ) Zona de Transformadin De esta zona se desprende un tipo de celula diferente, llamada celula de metaplasia, que es la sustitucion del epitelio glandular endocervical por otro de tipo escamoso en respuesta a diversos estimulos (pH, endocrinos, trauma, inflamacion, etc.), Ver Figura 41. (8) Figura 41. Celulas de Metaplasia (9) CAPITULO 3 NOMENCLATURA DE LA LESION ESCAMOSA INTRAEPITELIAL CERVICAL La historia de la patologla cervical podemos dividirla en 2 grandes periodos, el primero que termina en la decada de los anos 70 y el segundo, que comienza a principios de la decada de los 80. (7) En el primer periodo, el diagnostico de la patologla cervical se basaba en tres pilares fundamentales: La citologia como metodo de rastreo, la colposcopla como instrumento que dirige la biopsia y la Anatomla Patologica como diagnostico definitivo. (7) La gran difusion de esta metodologia de detection y el aumento de los centros dedicados al diagnostico de la patologla preneoplasica del cuello uterino, trajo como consecuencia una disminucion del carcinoma invasor. El fervor del diagnostico precoz, fundamentalmente en los palses occidentales, logro disminuir los indices de mortalidad por carcinoma invasor a un tercio de lo que eran hace 50 anos. Pese a esta disminucion, existen palses donde el cancer de cuello uterino representa actualmente mas de la mitad de todos los carcinomas de la mujer. (7) El segundo periodo, comienza a principios de los anos 80 con la aparicion en escena de los virus del Herpes Simple y del Papiloma Humano (VPH) como oncogenos de relevancia. Observamos que a la metodologia exploratoria clasica se le agregan los estudios de inmunomarcacion y tipificacion viral. (7) Para cualquiera de los periodos senalados, uno de los aspectos mas crlticos ha sido la comunicacion de los hallazgos del Citopatologo, de la valoracion de la citologia, y su interpretacion por el Ginecologo, la que se debe desarrollar en terminos no ambiguos y con una buena relevancia clinica. Esto, origino que a traves del tiempo se hayan utilizado una gran gama terminologica, en ocasiones confusas, que da nombres diferentes a una misma lesion o lo que es peor, pero mas raro, denominar con igual nombre a lesiones diferentes. (7) Por ello, considerando este aspecto de la comunicacion, revisaremos de forma general la evolution de la nomenclatura de las lesiones cervicales, asi como los elementos en los que se basa el Citopatologo para brindar su informacion. (7) Cuando revisamos la literatura international, comprobamos que son utilizadas varias clasificaciones de las lesiones cervicales (LC) y en ocasiones mas de una en un mismo estudio, situation que crea confusiones sobre todo en los mas jovenes. (7) Haciendo un recuento historico vemos como fue Cullen, en 1900, el primero en describir las celulas neoplasias limitadas al epitelio del cervix, y dos decadas despues, en Nueva York, Rubin introdujo la denomination de Cancer Incipiente, para nominar la transformation neoplasica confinada al epitelio. Dos anos despues, Schottlander y Kermauner, en Berlin, utilizan el termino Carcinoma Temprano para designar los cambios que se apreciaban en el epitelio adyacente al Carcinoma Invasor Temprano. Transcurren 20 anos, hasta que Broders introduce el termino Carcinoma In Situ (CIS), considerandose el estadio mas precoz al cancer invasor de celulas del cuelo uterino. Definido mas tarde como "un epitelio que tiene caracteristicas histologicas y citologicas propias del carcinoma, pero esta limitado al epitelio ecto y/o endocervical". Se utilizaron otros nombres, pero perduro el senalado por Broders, a pesar de que el no hizo referenda a la localizacion cervical. (7) 3.2. Clasificacion de Papanicolaou. Fue Papanicolaou, en 1928, quien establece la PRIMERA propuesta de nomenclatura de las LC, la cual fue utilizada por muchos anos. Describe cinco grados en el diagnostico citologico, que se indican en la Tabla 1. (7) CLASE I: CLASE II: CLASE III: CLASE IV: CLASE V: Extendidos normales o ausencia de celulas atipicas o anormales. Extendidos con celulas con alteraciones inflamatorias. Comprende los extendidos con celulas atipicas sugestivas, pero no conclusivas de malignidad. Citologlas fuertemente sugestivas de malignidad. Citologlas conclusivas de malignidad. Tabla 1. Clasificacion de Papanicolaou (7) Cuando se realizaban grandes pesquisas se resumla la clasificacion como se presenta en la Tabla 2 . ( ) CLASE I y II: CLASE III: CLASE IV y V: Extendido Negativo. Extendido Sospechoso. Extendido Positivo. Tabla 2. Clasificacion de Papanicolaou para grandes pesquisas (7) 3.3. Clasificacion de la OMS. Algunos anos despues, segun algunos, Reagan acuno el termino de Displasia. Segun Lacruz Pelea, fue el mismo Papanicolaou, que gracias al desarrollo de la Citologia y al uso de las biopsias, introduce los terminos de Displasia y Discariosis al observarse cambios menos severos y que se definen como: "Todo epitelio escamoso situado sobre la superficie o en las glandulas, que muestra alteraciones en la diferenciacion sin alcanzar el grado de perturbacion que caracteriza al carcinoma in Situ". No obstante, no es hasta el Primer Congreso de Citologia, celebrado en 1961, que se toma el acuerdo para el uso de la terminologla de las tres LC mayores: Carcinoma Invasor, CIS y Displasias. Estas ultimas divididas en tres grados: Leve, Moderadas y Severas. Esta clasificacion fue asumida por la Organizacion Mundial de la Salud. (7) Al correlacionar las dos clasificaciones, queda como se presenta en al Tabla 3. Sistema Papanicolaou CLASE I: CLASE II: O.M.S. NORMAL NORMAL f CLASE III: DISPLASIA I CLASE IV: CLASE V: LEVE MODERADA SEVERA CIS CANCER INVASOR Tabla 3. Correlacion de Clasificaciones Papanicolaou - O.M.S. (7) Esta Clasificacion era utilizada para material citologico e histologico, pero presento dos problemas: 1. Desacuerdo a cuando una lesion debia ser considerada Displasia Grave o CIS. 2. Muchos asurman que las Displasias y el CIS eran lesiones distintas e independientes, con potencial diferente de malignidad, por lo que las Displasias no requerian tratamiento. (7) Koss en 1963, hace el planteamiento que la displasia grave y el CIS debian superponerse. (7) Clasificar separadamente la displasia y el CIS fue progresivamente considerandose arbitrario, sobre la base de los resultados de algunos estudios de seguimiento de las mujeres con esas lesiones. Se observo que algunos casos de displasia retrocedian, algunos persistian y otros progresaban a CIS. Se observo una correlacion directa entre progresion y grado histologico. Estas observaciones condujeron al concepto de un solo proceso morbido continuo en el que el epitelio normal evoluciona a lesiones epiteliales precursoras y a cancer invasor: Sobre la base de dichas observaciones, en 1968 se introdujo el termino de Neoplasia Intraepitelial Cervical. (7) 3.4. Clasificacion de Richard. Richard en 1966 lanza su clasificacion de Neoplasia Intraepitelial Cervical (NIC), donde se le reconocen tres grados, incluyendo en el tres la Displasia Severa y el CIS de la clasificacion anterior 15. Tenia una ventaja sobre las anteriores, al defender el criterio que las Displasias y el CIS constituyen dos estadios de una misma enfermedad, denominada NIC, y que su diferencia fundamental es cuantitativa y no cualitativa. (7) Estableciendo una comparacion de lo que hemos visto hasta ahora, tenemos la Tabla 4. ( 7 ) Sistema Papanicolaou CLASE I: CLASE II: O.M.S. NORMAL NORMAL CLASE III: DISPLASIA CLASE IV: CLASE V: CIS CANCER INVASOR Richard LEVE MODERADA SEVERA NIC I NIC II NIC III o CIS Tabla 4. Correlation de Clasificaciones Papanicolaou - O.M.S. - Richard (7) Esta ultima clasificacion ha sido utilizada por mas de 30 anos y se ha considerado bastante adecuada. (7) Hacia finales de los anos 70, Meissels y Elbe, observaron que la mayoria de las infecciones ginecologicas por VPH son subclinicas y que se reconocen por citologlas anormales con la presencia de coilocitosis, disqueratocitos, anfofilia, hipercromasia y binucleacion; y que su distincion con los procesos displasicos se superponlan. En esos anos fueron reconociendose cada vez mas alteraciones anatomopatologicas, como la atlpia coilocltica o condilomatosa asociada con la infection por VPH. Basados en estos hechos, varias publicaciones comenzaron a plantear baja seguridad diagnostica. (7) 3.5. Sistema Bethesda. En 1988, el Instituto Nacional del Cancer de los EE.UU. convoco un seminario para proponer un nuevo esquema de presentation de los resultados de la citologia cervical. (7) Las recomendaciones hechas entonces y su revision en un segundo seminario celebrado en 1991 fueron denominadas Sistema Bethesda (TBS). La caracteristica principal del TBS fue la creation del termino "LESION INTRAEPITELIAL ESCAMOSA" (LIE), con dos grados: lesiones de bajo grado (LLIE) y lesiones de alto grado (H-LIE). La clasificacion TBS combina los cambios condilomatosos pianos (VPH) y la NIC de bajo grado (NIC 1) en la L-LIE, mientras la H-LIE abarca los NIC mas avanzados, NIC 2 y NIC 3. Se empleo el termino LESION para recalcar que los cambios morfologicos en los cuales se basa un diagnostico no necesariamente significan proceso neoplasico. (7) El TBS fue disenado para la notification citologica, pero sirve tambien para comunicar resultados histopatologicos. Se utiliza sobre todo en America del Norte. Podemos apreciar que esta clasificacion no posee las CINCO CLASES de ~ anicolau, ni las tres de Richard. Al correlacionarlas todas, obtenemos la Tabla Papanicolaou CLASE I: CLASE II: CLASE III: O.M.S. NORMAL NORMAL DISPLASIA Richard r LEVE \ MODERADA I SEVERA Bethesda — — — — NIC I NIC II NIC III o CIS L-SILO H-SLI H-SLI CLASE IV: CIS CLASE V: C. INVASOR (*): Se agrega el VPH Tabla 5. Correlacion de Clasificaciones Papanicolaou - O.M.S. - Richard Bethesda { i ) — — — — Esta ultima clasificacion ha sido modificada en dos ocasiones, la ultima en el ano 2001, quedando de la siguiente forma: 3.5.1. Nomenclatura de las lesiones cervicales Bethesda 2001. Las categorias generates son: • • • Negativo a lesiones intraepiteliales o cancer. Anomalias de las celulas epiteliales. Otras neoplasias malignas. A continuation se detallan: (11) 3.5.1.1. Negativo para lesiones intraepiteliales o cancer. Esta primera categoria significa que no se detectaron signos de cancer, cambios precancerosos ni alguna otra anomalia significativa. Algunas muestras en esta categoria resultan ser completamente normales. Es posible que se detecten otros hallazgos que no tengan que ver con el cancer del cuello uterino, como indicios de infecciones del sistema reproductor (por ejemplo, hongos, herpes y tricomonas). En algunos casos tambien pudiera haber indicios de cambios celulares reactivos, que son la reaction de las celulas del cuello uterino a las infecciones u otras irritaciones. (11) 3.5.1.2. Anomalias de las celulas epiteliales. La segunda categoria TBS, anomalias de las celulas epiteliales, significa que las celulas de la membrana que recubre el cuello uterino muestran cambios que pudieran ser indicativos de cancer o de alguna condition precancerosa. Esta categoria se divide en varios grupos para las celulas escamosas y las celulas glandulares. (11) 3.5.1.2.1 Anomalias de las Celulas Epiteliales en Celulas Escamosas Las anomalias de las celulas epiteliales para las celulas escamosas se llaman: 3.5.1.2.1.1. Celulas escamosas atipicas. Este termino se utiliza cuando no es posible determinar (segun la apariencia de las celulas bajo el microscopio) si la causa de las celulas anormales es una infection, otro tipo de irritation (ASC-US) o alguna condition precancerosa. La prueba de Papanicolaou por lo general se repite despues de varios meses, o se pueden recomendar otros examenes, tales como una colposcopia (explicada mas adelante) y una biopsia, dependiendo de los antecedentes de la paciente y de los resultados de las pruebas de Papanicolaou anteriores y si se sospecha una lesion intraepitelial escamosa de alto grado (ASC-H). La mayoria de los doctores recomiendan que se haga una prueba de HPV en estos casos. Si esto muestra que no hay HPV, entonces solo se necesita hacer el seguimiento usual. Si muestra HPV, se recomienda una colposcopia. (11) Criterios citologicos de Celulas escamosas atipicas. • • • • Agrandamiento nuclear dos y media a tres veces el tamano del nucleo de una celula escamosa intermedia, con un ligero incremento en la relation nucleo/citoplasma. Variation del tamano y formas de los nucleos, con eventual binucleacion. Leve hipercromasia, aunque la cromatina es uniforme y granular. Los bordes nucleares usualmente son lisos o regulares, aunque pueden observarse eventuales irregularidades.(23) 3.5.1.2.1.2. Lesiones intraepiteliales escamosas (SIL). Estas anormalidades se dividen en SIL de bajo grado y SIL de alto grado. El termino «alto grado» incluye el NIC II y NIC III de la clasificacion de Richard, y el termino «bajo grado» el NIC I y las alteraciones celulares producidas por papilomavirus (VPH). Todos los pacientes deben hacerse una colposcopia. Las SIL de alto grado tienen una tendencia menor a desaparecer sin tratamiento que las SIL de bajo grado y tienen una tendencia mayor a convertirse en cancer si no se tratan. No obstante, todas las SIL se pueden curar con tratamiento y esto evita que se conviertan en cancer. La determination de si se necesita tratamiento se basa en pruebas y examenes adicionales (mencionados mas adelante). (11) Criterios Citologicos de Lesiones Intraepiteliales Escamosas de Bajo Grado. • Las celulas aparecen agrupadas o en forma aislada. • • • • • • • • Las anormalidades nucleares generalmente se observan en celulas superficiales o maduras. Hay agrandamiento nuclear por lo menos tres veces el tamano del nucleo de una celula normal intermedia, dando como resultado un incremento en la relation nucleo/citoplasma. Moderada variation en tamanos y formas de los nucleos. Con frecuencia se observa binucleacion o multinucleacion. Hay hipercromasia, con cromatina uniformemente distribuida. El nucleolo esta raramente presente. La membrana nuclear muestra leves irregularidades o es poco distinguible. En los casos de VPH se encuentran cavitation perinuclear y las alteraciones nucleares antes mencionadas. (23) Criterios Citologicos de Lesiones Intraepiteliales Escamosas de Alto Grado. • • • • • • • Las celulas epiteliales se agrupan en forma de mantos, en forma sincicial o aisladas. Marcado agrandamiento nuclear semejante a las lesiones de bajo grado, pero hay una disminucion del area citoplasmatica, Trayendo como consecuencia un incremento mayor en la relation nucleo/citoplasma. En general el tamano celular en las H-SIL es menor que en las L-SIL. Hay marcada hipercromasia y la cromatina es granular, gruesa y de distribution irregular. El nucleolo esta generalmente ausente. Los bordes nucleares son irregulares. (23) 3.5.1.2.1.3. Carcinoma de celulas escamosas. Este resultado de la citologia indica si una mujer tiene mayores probabilidades de contraer un cancer invasivo de celulas escamosas. Antes de que los doctores recomienden tratamientos como radioterapia, quimioterapia o cirugia radical, se hacen pruebas adicionales para corroborar el diagnostico. (11) Criterios Citologicos de Carcinoma de celulas escamosas no queratinizante. • • • Celulas atipicas que se agrupan en forma sincicial o aisladas. Las celulas tienen las caracteristicas de H-SIL pero ademas contienen prominente macronucleolo y marcada irregularidad de la cromatina con grumos que alternan con areas mas tiaras. Usualmente se acompanan de un fondo de material necrotico y restos hematicos (diatesis tumoral). (23) Criterios Citologicos de Carcinoma de celulas escamosas queratinizantes • Las celulas se presentan aisladas o formando agregados. • • • • • Hay marcada variation de las formas y tamanos celulares y con frecuencia el citoplasma es denso de color naranja. El nucleo tambien varia en tamano y configuration La cromatina es gruesa, granular e irregularmente distribuida. El macronucleolo no se observa, a diferencia de la forma no queratinizante. Puede observarse diatesis tumoral. (23) 3.5.1.2.2. Anomalias de las Celulas Epiteliales en Celulas Glandulares. El Sistema Bethesda tambien describe las anomalias de las celulas epiteliales para las celulas glandulares. Los canceres de las celulas glandulares se reportan como adenocarcinomas. En algunos casos, el patologo que examina las celulas puede indicar si el adenocarcinoma comenzo en el endocervix, en el endometrio (la parte superior del utero) o en alguna otra parte del cuerpo. Cuando las celulas glandulares tienen caracteristicas que impiden que se pueda tomar una decision clara con respecto a si son cancerosas, el termino que se usa es celulas glandulares atipicas (AGC). Generalmente se le hacen mas pruebas a la paciente para ver si el resultado de la citologia de su cuello uterino muestra celulas glandulares atipicas. (11) 3.5.1.2.2.1. Celulas glandulares atipicas (AGC). Son celulas endometriales, endocervicales o glandulares no especificas, que muestran atipia nuclear que excede aquellos observados por reaction o reparation, aunque carecen de las inequivocas caracteristicas de adenocarcinoma. Criterios Citologicos de Celulas glandulares atipicas. • Celulas que se agrupan conformando cinco a diez celulas por grupo. • Hay escaso agrandamiento nuclear. • Hay escasa hipercromasia. • Los nucleolos pueden estar presentes y son pequefios. • Los bordes celulares estan bien definidos. • Comparando con las celulas endocervicales, estas celulas tienen escaso citoplasma y ocasionalmente vacuolado.<23) 3.5.1.2.2.2. Adenocarcinoma endocervical in situ (AIS). Neoplasia maligna compuesta por celulas de tipo endocervical. Criterios Citologicos de Adenocarcinoma endocervical in situ. • Pueden observarse celulas aisladas, en racimos, cumulos o mantos en 2 dimensiones. • Nucleo con marcada hipercromasia, y la cromatina muestra distribution irregular que alterna con areas mas tiaras. • Macronucleolo puede estar presente. • • Puede haber diatesis tumoral. El citoplasma usualmente toma la forma de columna con coloration eosinofllica o cianofilica. • Pueden coexistir con celulas escamosas atipicas. (23) 3.5.1.2.2.3. Adenocarcinoma endocervical. Neoplasia maligna compuesta por celulas de tipo endocervical.<11) Criterios Citologicos de Adenocarcinoma endocervical. • Ayuda caracteres arquitecturales, y poco, las celulas aisladas. • Rosetas, empalizada, papilas, micronucleolos. (23) 3.5.1.2.2.4. Adenocarcinoma endometrial. Neoplasia maligna compuesta por celulas de tipo endometrial. Criterios Citologicos Adenocarcinoma endometrial. • Tlpicamente las de celulas se muestran aisladas o en grupos laxos pequenos. • En las formas bien diferenciadas el nucleo puede estar escasamente aumentado de tamano, puede ser mayor de acuerdo al incremento del grado del tumor. • Hay variation del tamano nuclear y perdida de la polaridad. • En los grados mas altos del tumor, el nucleo muestra moderada hipercromasia, distribution irregular de la cromatina y presencia de zonas mas tiaras. • El nucleolo esta presente y es mayor cuanto mas se incrementa el grado del tumor. • El citoplasma es tlpicamente escaso, cianofllico y a menudo vacuolado. (23) 3.5.1.2.2.5. Adenocarcinoma extrauterino. Presencia de celulas diagnosticas de adenocarcinoma que tienen fondo limpio y transparente, lo que es inusual para tumores cervico uterinos, debe entonces sospecharse de una neoplasia extrauterina.(11> 3.5.1.3. Otras neoplasias malignas. Estas formas poco comunes de cancer, tales como el melanoma maligno, los sarcomas y los linfomas. Comparados con los carcinomas de celulas escamosas y los adenocarcinomas, estos canceres afectan muy raras veces al cuello uterino. (11) Lo anterior se pude resumir en la siguiente manera: \ o Negativo para lesiones intraepiteliales o cancer: o Anomalias celulares epiteliales x EN CELULAS ESCAMOSAS >Celulas escamosas atipicas - de significado indeterminado (ASC-US) - no puede excluirse H-SIL (ASC-H) >Lesion intraepitelial escamosa de bajo grado (L-SIL) - displasia leve (NIC I) -VPH >Lesion intraepitelial escamosa de alto grado (H -SIL) - displasia moderada y severa (NIC II y NIC III) - con caracteristicas sugestivas de invasion (si se sospecha invasion) >Carcinoma celulas escamosas x EN CELULAS GLANDULARES >Celulas glandulares atipicas (AGC) - endocervicales - endometriales - glandulares Adenocarcinoma endocervical in situ (AIS) Adenocarcinoma - endocervical - endometrial - extrauterine o Otras Neoplasias Malignas (24) En este sistema se incluye un apartado que indica la existencia de las siguientes condiciones de la muestra: Muestra satisfactoria. Las muestras satisfactorias son aquellas que cubren los siguientes requisitos: • • • • Hoja de solicitud y resultados de la citologia cervical debidamente registrada. Laminilla correctamente etiquetada o rotulada. Informacion clinica relevante (edad, fecha de la ultima menstruation, uso de hormonales). Numero de celulas escamosas bien conservadas que puedan verse facilmente y que cubran mas del 10% de la superficie de la laminilla. • Presencia de celulas del endocervix o de la zona de transformacion (en pacientes con cervix). (10) Nota • El material satisfactorio de la zona de transformacion debe contener por lo menos dos conglomerados de celulas endocervicales y/o celulas de metaplasia bien conservadas, cada conglomerado de no menos de cinco celulas. Esta definition aplica a mujeres premenopausicas o postmenopausicas con cervix, excepto en el caso de atrofia marcada en la cual las celulas de metaplasia y las endocervicales no se pueden distinguir de las celulas de aspecto parabasal. ( ) Muestra satisfactoria pero limitada. Las muestras satisfactorias pero limitadas son aquellas que cubren los siguientes requisitos: • • • • Hoja de solicitud y reporte de resultados parcialmente requisitada. Falta de datos clinicos. Muestra parcialmente obscurecida por sangre, inflamacion, areas gruesas, pobre fijacion, artefacto de desecacion, contaminantes que imposibilitan ver el 50 o 70% de las celulas epiteliales. Ausencia de celulas endocervicales y de la zona de transformacion. (10) Muestra no satisfactoria o inadecuada. Las muestras no satisfactorias o inadecuadas son aquellas que cubren los siguientes requisitos: • • • • Falta de informacion de la paciente, laminilla que este fragmentada y no puede ser reparada. Escasas o insuficientes celulas epiteliales escamosas, cubriendo menos del 10% de la superficie de la laminilla. Sangre, celulas caracteristicas de inflamacion, muestra gruesa en la laminilla, pobre fijacion, secado al aire sin fijar, artefactos, contaminantes, que imposibilitan la interpretation en 75% o mas de las celulas epiteliales. Sin embargo si se detectan celulas anormales, las muestras nunca deberan clasificarse como inadecuadas, debiendo ser consideradas satisfactoriamente pero limitadas.(10) En cuanto al Sistema TBS para el reporte diagnostico citologico se reconoce que: 1. Proporciona una efectiva comunicacion entre el citologo y el medico. 2. Facilita la correlacion Citologica - Histopatologica. 3. Facilita la investigation epidemiologica, biologica y patologica de la enfermedad cervical. 4. Proporciona datos para analisis estadisticos y comparaciones nacionales e internacionales. (7) Hemos visto la evolution de la Nomenclatura de las LC, recientemente en el sector salud se plantea utilizar la Clasificacion de Bethesda, por considerarla mas completa. En la actualidad se emplea la establecida por la O.M.S. (Displasia: leve, moderada, grave; carcinoma in situ y carcinoma invasor.) (7) 3.6. Factores de riesgo para la lesion del cervix uterino. Los Factores de Riesgo, son considerados como las diversas circunstancias, acciones, actividades, habitos que contribuyen a producir un dano a nivel del tejido cervicouterino. Los factores de riesgo considerados de importancia son: a. b. c. d. e. f. g. h. i. Infection con virus del papiloma humano Conducta Sexual. (16) Numero de Gestaciones Numero de Abortos / legrados Uso de Anticonceptivos Antecedentes Familiares Tabaquismo Medidas Higienicas Alimentation j. Condition socioeconomica baja (6)(12)(13) Estos factores se detallan a continuation: a. Infeccion con virus del papiloma humano: El factor de riesgo mas importante para el cancer del cuello uterino es la infeccion con el virus del papiloma humano (VPH). Los VPH son un grupo de mas de 100 tipos de virus llamados papilomavirus porque algunos de ellos pueden causar lesiones (verrugas, o papilomas), los cuales son tumores no cancerosos (benignos). Ciertos tipos, sin embargo, causan cancer del cuello uterino. A estos se les conoce como tipos de VPH de "alto riesgo" e incluye los tipos 16, 18, 31, 33 y 45, entre otros. Alrededor de dos tercios de todos los canceres de cuello uterino son causados por VPH 16 y 18. (12) Otros tipos de VPH causan diferentes tipos de tales lesiones (papilomas) en distintas partes del cuerpo. Algunos tipos causan papilomas comunes en las manos y los pies. Otros tipos tienden a causar papilomas en los labios o la lengua. Los diferentes tipos de VPH genitales pueden causar papilomas que pueden aparecer en o alrededor de los organos genitales femeninos y masculinos, as! como el area del ano. Estos tipos de VPH se transmiten de una persona a otra durante el contacto sexual de piel a piel, incluyendo el sexo vaginal, anal, y posiblemente sexo oral. (12) En la Tabla 6 se resumen los tipos de VPH y su asociacion con las principales enfermedades. Enfermedad VPH frecuentes VPH menos frecuentes VERRUGAS Verruga plantar 1,2 4, 6 , 3 Verruga comun 1, 2, 7, 10 3, 4, 26**, 26, 27, 28, 29, 41, 57, 65 Verruga plana 3, 10 27**, 38,41, 49** CONDILOMAS 6, 11 30, 42-44, 45*, 51*, 54, 55, 70 NEOPLASIA INTRAPITELIAL DEL TRACTO GENITAL INFERIOR 30*, 34, 39*, 40, 53, 57, 59, 62, 64, YANO 66*, 67-69 Bajo grado 6, 11 16*, 18*, 31*, 33*, 35*, 42-44, 45*, 51*, 52* Alto grado 16*, 18* 6, 11, 31*, 33*, 35*, 39*, 42-44, 45*, 51*, 52*, 56*, 58*, 66* CANCER DE CERVIX 16*, 18* 31*, 33*, 35*, 39*, 45*, 51*, 52*, 56*, 58*, 66* PAPULOSIS BOWENOIDE 16* 31*, 34, 39*, 42, 45 16*, 18* 31*, 33*, 35*, 39*, 45*, 51*, 52*, 56*, 58*, 66* CANCER DE PENE, VULVA, VAGINA, CANAL ANAL OTROS CANCERES Cancer de piel escamoso y basocelular 2, 3, 5*, 8*, 9, 10 12, 14*, 15, 17*, 19, 20*, 21-25, 36, 37, 38*, 47, 50 Cancer de amigdala y orofaringe 16* Cancer periungueal y conjuntival 16* 31,33 OTRAS ENFERMEDADES Enfermedad verruciforme 2, 3, 5*, 8*, 9, 10 12, 14*, 15, 17*, 19, 20*, 21-25, 36, 37, 38*, 47, 50 Papilomatosis respiratoria recurrente 6, 11 Papilomas conjuntivales 6,11,16* ** Frecuentes en pacientes inmunodeprimidos. * Tipos con alto potencial oncogenico. 32 Tabla 6.Tipos de VPH y su asociacion con las principales enfermedades (17) Cuando el virus del papiloma humano ocurre en la piel de los organos genitales externos y del area anal, a menudo pueden causar verrugas genitales protuberantes. Estas pueden ser poco visibles o extenderse varias pulgadas. El termino medico para las verrugas genitales es condiloma acuminado. La mayoria de las verrugas genitales se debe a dos tipos de virus del papiloma humano: VPH 6 y 11. Solo en raros casos se convierten estos en cancer del cuello uterino, por lo que se les llama tipos de "bajo riesgo". Otros tipos de VPH de transmision sexual han sido asociados con el cancer genital o anal, tanto en hombres como en mujeres. (12) De acuerdo a los datos conocidos del condiloma en genitales externos, hay un periodo de incubacion de aproximadamente 1 a 8 meses; puede o no producir una lesion en cervix, vagina o vulva. Si no se realiza un Papanicolaou en esta etapa puede pasar inadvertida en el cervix o la vagina. La lesion puede remitir espontaneamente, persistir por un tiempo prolongado y despues desaparecer, o bien, progresar a cancer invasor despues de un tiempo variable; esto puede ocurrir despues de varios anos de persistencia de la enfermedad. (15) La infeccion por virus del papiloma humano se clasifica como: • • • • Infeccion latente Infeccion subclinica Infeccion clinica (15) Infeccion latente: Solamente puede demostrarse mediante tecnicas de biologia molecular para la detection de genoma viral, tales como Southern Blot, Hibridacion, o PCR (Reaction en Cadena de Polimerasa). No hay alteration morfologica detectable a simple vista o mediante algun procedimiento de amplification optica (citologia, histopatologia o colposcopia). Las celulas son de aspecto normal. Ocurre en aproximadamente del 5 al 20 % de la poblacion femenina en edad reproductiva. No hay tratamiento posible y unicamente puede proponerse vigilancia (control citologico mediante la prueba de Papanicolaou). ( } Las pruebas de Southern Blot, Hibridacion, o PCR no son de rutina, dado los costos elevados para su realization, por lo que el sector salud no las ofrece y no se detallan en el presente trabajo por escapar del alcance del mismo; aunque para informacion se puede consultar "Hibridacion (biologia molecular)" http://es.Wikipedia.org. • Infeccion subclinica: Se demuestra alteration morfologica (lesion displasica premaligna o cancer) mediante citologia, histopatologia o colposcopia. Ocurre en aproximadamente el 3 a 5 % de las mujeres en edad reproductiva. Es detectable mediante los procedimientos convencionales (prueba de Papanicolaou, biopsia y colposcopia) y es tratable con los procedimientos que se describen mas adelante en esta monografla (tratamiento). La mayorla de las displasias y condilomas del cervix pertenecen a este grupo. (15) • Infeccion clinica: Hay alteration morfologica visible a simple vista (p.e. condiloma acuminado). Representa la minorla de las manifestaciones de infeccion por VPH y ocurre en aproximadamente el 1 % de la poblacion adulta, principalmente en genitales externos. (15) Actualmente no hay cura o tratamiento para la infeccion con el virus del papiloma humano. Muchas mujeres contraeran el VPH, pero muy pocas contraeran cancer del cuello uterino. Por lo general, la infeccion podria desaparecer sin tratamiento, ya que su sistema inmunologico ha tenido exito en la lucha contra el virus. Sin embargo, en el futuro este problema puede desaparecer debido a que se han estado desarrollando vacunas para prevenir la infeccion con el VPH. Actualmente existe una vacuna aprobada por la FDA que protege contra los tipos de VPH 16,18, 6 y 11, aunque otras vacunas estan en desarrollo. (12) La mayoria de las mujeres infectadas por VPH no desarrollan cancer cervicouterino; se estima que aproximadamente el 5 al 10 % de las mujeres con VPH desarrollaran cancer invasor si no son tratadas. Este es el factor que tiene mayor valor predictivo para el desarrollo de cancer cervical. (15) Por lo general, la infeccion con VPH no causa slntomas. Sin embargo, los papilomas y las alteraciones citopaticas de celulas causados por el VPH pueden ser tratados eficazmente. (12) Los cambios precancerosos en el cuello uterino se diagnostican cuando se encuentran celulas anormales en la prueba de Papanicolaou (Pap) o una biopsia (obtencion de pequena portion de tejido para su estudio histopatologico). La infeccion con virus del papiloma humano causa cambios en las celulas del cuello uterino, que se pueden reconocer en la prueba de Papanicolaou. Ahora se dispone de pruebas nuevas que pueden identificar los VPH al encontrar su ADN en las celulas. Si esta presente un tipo de VPH de alto riesgo, realizaran una colposcopia (observation microscopica de los epitelios del cervix, la vagina, la vulva y la region perianal) y consideraran realizar tratamiento. (12) Ciertos tipos de conductas sexuales aumentan el riesgo de una mujer de contraer una infeccion con virus del papiloma humano: • • • • Tener Tener Tener Tener relaciones sexuales a temprana edad. muchas parejas sexuales. una pareja que ha tenido muchas parejas sexuales. sexo con hombres que no hayan sido circuncidados. (12) La infeccion con VPH ocurre principalmente en las mujeres jovenes. Se cree que los hombres sin circuncidar tienen mas probabilidad de adquirir el virus. El VPH puede estar presente por muchos anos sin causar slntomas (etapa latente), y la infeccion con VPH no siempre causa papilomas u otros slntomas (manifestation clinica); por lo tanto, puede estar la paciente infectada con VPH y transmitirlo sin saberlo. Algunos estudios recientes indican que los condones no protegen completamente contra el VPH, ya que este virus se puede transmitir de persona a persona a traves del contacto con la piel de cualquier area del cuerpo afectada por el VPH, como la piel de los genitales o el area anal no cubierta por el condon. La ausencia de verrugas visibles no se puede usar para decidir si es necesario tomar precaution, ya que el VPH se puede transmitir a otra persona incluso cuando no hay papilomas visibles u otros slntomas. (12) Aunque los condones no protegen completamente contra VPH, continua siendo importante usar los condones para protegerse contra el sida y otras enfermedades de transmision sexual que se contagian a traves de ciertos fluidos del cuerpo.(12) CAPITULO 4 DIAGNOSTICO CITOLOGICO Figura 43. Coilocito(4) Figura 44. Disqueratosis (11) Estas alteraciones celulares o dano citopatico se pueden encontrar en las siguientes alteraciones, ya que derivan de una infection de VPH que es la causa mas comun para el desarrollo de la lesion escamosa intraepitelial cervical. 4.3.2. Displasia Leve, Neoplasia Intraepitelial Cervical 1 (NIC I), Lesion Escamosa Intraepitelial de Bajo Grado (LEI BG). Las celulas exfoliadas de una displasia leve corresponden a celulas poligonales de tipo intermedio o superficial, con nucleo levemente aumentado de tamano y discreto aumento de la relation nucleo-citoplasma. Generalmente el nucleo ocupa menos de 1/3 del area celular. Existe leve variation del tamano y forma de los nucleos, algunos de los cuales pierden su contorno perfectamente redondo u ovalado al ser observados al microscopio de luz. El nucleo es hipercromatico, con la cromatina dispuesta en forma reticular o finamente granular, Ver Figura 45. ( 6 ) Figura 45. Displasia Leve (4) 4.3.3. Displasia Moderada, Neoplasia Intraepitelial Cervical 2 (NIC II), Lesion Escamosa Intraepitelial de Alto Grado (LEI AG). En el extendido obtenido de una displasia moderada las celulas corresponden en general a celulas intermedias profundas, con mayor variation en la forma celular. Algunas celulas son poligonales u ovaladas. Tambien se pueden encontrar celulas fusadas y de formas bizarras. La variation en la forma y tamano de los nucleos y la alteration de la relation nucleo-citoplasma es mayor que en la displasia leve. Existe mayor hipercromatismo, pero la cromatina aun se dispone en granulos finos uniformes. Nucleolos ausentes. En la actualidad los cambios citopaticos producidos por la infeccion por VPH son considerados dentro de este grupo, Ver Figura 46.(6> Figura 46. Displasia Moderada (4) 4.3.4. Displasia Severa, Neoplasia Intraepitelial Cervical 3 (NIC III), Lesion Escamosa Intraepitelial de Alto Grado (LEI AG). Las alteraciones descritas son mas marcadas en la displasia avanzada, en la que se observan numerosas celulas de tipo parabasal, siendo posible reconocer celulas poligonales y aun, en ocasiones, celulas aplanadas queratinizadas de citoplasma anaranjado, signo de que persiste tendencia a la diferenciacion del epitelio. La relation nucleo/citoplasma es mayor a 2/3. Puede haber nucleolos eosinofilicos, aunque generalmente estan oscurecidos por la cromatina densa, Ver Figura 47. (6) Ver Figura 47. Displasia Severa. (4) Carcinoma in situ. (CIS), o NIC 3 o LEI AG, es una lesion tumoral en el otro extremo del espectro donde encontramos a las displasias o lesiones precursoras del carcinoma del cervix, ya discutidas.(6> Su caracterlstica morfologica mas notoria es el reemplazo casi total del epitelio por celulas de carcinoma que hipertrofian o deforman este epitelio ocasionando proyecciones hacia el estroma sin romper la membrana basal, es decir con borde bien definido entre el epitelio tumoral y el estroma que lo rodea. Un fenomeno semejante ocurre en el epitelio glandular. La lesion puede ser unifocal o multifocal y estara localizada en el 90% de los casos en el area escamocolumnar o zona T de transition de epitelios, Ver Figura 48. { 6 ) Figura 48. Carcinoma In-situ. (4) En su conducta biologica esta lesion es irreversible y las pacientes as! diagnosticadas tienen un riesgo mas alto que en las lesiones de menor grado de desarrollar un carcinoma invasor y en menor tiempo en la secuencia de cambios del epitelio. (6) En la figura siguiente se resume el proceso de formation de la lesion escamosa cervical, Ver Figura 49. ( 6 ) ESCAMAS SUPERFICIALES SUPERFICIALES EOSINOFItAS INTERMEDiAS INTERMEDIAS / PARABASALES \ BASALES I W->' I BASALES & U NUCLEO BIUOBULADO 1NDIFERENCIADAS i \ x 1 XnS&J V/ cm® 0 y I T&X O. SEVEB^ ° ^ c / * / CRECIMIENTO NUCLEAR MULTINUCLEACION / I k ^ & m & m / C R E C I M I E N T O CELULAR INVASORAS •CT "BASALES vSl? pRE INVASORAS HALO PERINUCLEAR CELULAS CON PERDIDA DE RELACION N/C Figura 49. Patologla del Cervix Uterino en el epitelio escamoso. Grados de lesion y tipos de Celulas (10) Extrapolando la citologia anteriormente descrita a la histologia para hacer su comparativa en el epitelio tenemos que la displasia leve es la afectacion de 1/3 del grosor del epitelio piano estratificado, la displasia moderada es la afectacion de 2/3 de tal grosor, y la displasia severa/carcinoma in situ es la afectacion de la totalidad del grosor epitelial, como se demuestra en la Figura 50. (8) ;toaJo: grado SIL alio grado Celulas superficiales Celulas intermedias I Celulas parabasales Celulas basales Figura 50. Comparativa Histologica de la Afectacion del Epitelio Piano Estratificado (8) CAPITULO 5 TRATAMIENTO 5.1. Metodos Conservadores. 5.1.1. Crioterapia. Consiste en la elimination de las celulas anormales por congelamiento, Ver Figura 51. (17) Utero Tejido ' anormal Cuello uterino Vagina Figura 51. Lesion en cervix. Destruye el epitelio superficial del cuello al cristalizar el agua intracelular (-20° a 30°), la tecnica mas eficaz es el metodo de congelation, descongelacion y congelation, loarandose una esfera de 5 mm mas alia del borde de la sonda, Ver Figura 52 y 53.<18) Gas de nitrogeno comprimido fluye por una criosonda y enfria el metal al punto de congelar y destruir el tejido cervical anormal Utero ryv Criosonda' ir, Gas de nitrogeno -comprimido Cuello uterino visto por el especulo, con la paciente en posici6r> de litotorn fa Figura 52 y 53. Crioterapia Vagina Sonda de criocirugia (20) Las tasas de curacion se relacionan con el grado de la lesion y con el tamano de esta; las que cubren casi todo el exocervix fracaso de 42%, lesiones de menos de 1 cm fracaso de 7%. (18) Se indica para NIC I, lesion pequena, localization solo exocervical, legrado endocervical negativo, y sin compromiso de glandulas endocervicales por biopsia. (18) 5.1.2. Laser. Consiste en el uso de un haz de luz intensa para eliminar celulas anormales. (17) Se puede hacer un cono tan bueno como el quirurgico o electroquirurgico. Se emplea cuando se ha descartado lesion maligna, puede verse toda la lesion, y legrado endocervical es negativo.(18) Se controla de manera precisa la profundidad y la amplitud de la destruction mediante vision directa por colposcopia. Recuperation rapida. (18) 5.1.3. Escision con Asa Electroquirurgica. La escision con Asa electroquirurgica (LEEP, Loop Electrosurgical Excision Procedure siglas en ingles) usa una corriente electrica que pasa por un aro de alambre delgado, el cual sirve como cuchilla, Ver Figura 54. ( * Figura 54. Procedimiento de escision con Asa electroquirurgica (20) La escision no debe realizarse antes de identificar una lesion que requiera tratamiento. La tasa de recurrencia de las NIC con este procedimiento es de 4%.(18) 5.2. Metodos Radicales. 5.2.1. Conizacion. •O Consiste en la extraction de un pedazo de tejido en forma de cono en el lugar donde se encuentra la anormalidad. Se emplea para biopsias, pero tambien para el tratamiento de canceres tempranos del cuello uterino, Ver Figura 55. (17) Figura 55. Conization Tiene la ventaja de cancer invasivo. (18) ofrecer tejido para (20) valoracion posterior para descartar Esta indicada para pacientes con lesion de alto grado segun examen de Papanicolaou bajo las siguientes condiciones: • • • No se pueden visualizar los llmites de la lesion durante la colposcopia, cuando no se observa la lesion escamocolumnar, Los datos histopatologicos del legrado son positivos para NIC II o III, Cuando se sospecha microinvasion con base en los resultados de biopsia , colposcopia o citologia, y Cuando el colposcopista es incapaz de descartar Ca invasivo. (18) 5.2.2. Histerectomia. Actualmente se considera demasiado radical para el tratamiento de las NIC, Ver Figura 56 y 57. (18) Cancer de utero Total Figura 56. Cancer Cervicouterino (20) Figura 57. Histerectomia (20) Existen situaciones en que se considera valido este procedimiento, tales como microinvasion, NIC en los limites del cono quirurgico, otros problemas ginecologicos que requieran histerectomia, y fobia al cancer. (18) CAPITULO 6 CASOS CLINICOS CON CORRELACION DIAGNOSTICA 6.1 Casos Clinicos con Correlacion Diagnostica (Citologia - Colposcopia Histologia). A continuation se presentan seis casos clinicos de estudio y que muestran la secuencia completa de correlacion diagnostica en la prueba de Papanicolaou positiva (Citologia - Colposcopia - Histologia). Para integrar estos casos se realizo una investigation de campo en el Centra Estatal de Cancerologia. En lo que respecta al Diagnostico Citologico, fue llevado a cabo por la presentante de este trabajo. El Diagnostico Colposcopico e Histologico fue realizado por parte del personal medico especializado de dicho centra. Cabe senalar que el diagnostico citologico es confirmado por el medico anatomopatologo en turno. 1) DATOS CLINICOS: DATOS DEL PACIENTE: PACIENTE: MJPA JURISDICClON: V EDAD: 45 ANOS EXPLORACION FISICA: CfzRVIX SANO ANTECEDENTES GINECO-OBSTETRICOS: MENARCA: 12 ANOS F.U.R.: 23/12/05 I.V.S.A.: 14 ANOS PAREJAS: 2 G II P 0 C II A a P.F S.C.B. D.O.C. FRECUENCIA: 1 . VEZ 2) DATOS DE LA MUESTRA CITOLOGICA NUMERO CITOLOGICO: CV-8028/06 FECHADETOMA: 16/01/06 FECHA DX.CITOL.: INSTRUMENTO DE TOMA: ESPATULA DE AYRE. PARAMETROS DE CALIDAD DE LA MUESTRA TOMA: ADECUADA (METAPLASIA). EXTENDIDO: LONGITUDINAL. FIJACI6N: ADECUADA (BUENA PRESERVACI6N CELULAR). TINCI6N: ADECUADA (BUEN CONTRASTE). 3) CITOLOGIA ' ' - • • 0 07/02/06 - CELULAS EPITELIALES ESCAMOSAS SUPERFICIALES QUE PRESENTAN DISQUERATOSIS (QUERATINIZACI6N CITOPLASMICA). i • 4 Q. 'jiMI-R EN ACERCAMIENTO SE OBSERVA QUE EXISTE PERDIDA DE LA RELACI6N NUCLEO/CITOPLASMA DONDE EL CRECIMIENTO NUCLEAR ES DE 1/3 DEL AREA CELULAR. EL NUCLEO ES REDONDO HIPERCROMATICO. DIAGNOSTICO CITOLOGICO: DISPLASIA LEVE MAS I.V.P.H. A OVAL E .M DESCRIPCI6N COLPOSC6PICA: CERVIX EUTR6FICO, COLPOSCOPIA SATISFACTORIA, ZONA DE TRANSFORMACI6N ANORMAL POR EPITELIO ACETOBLANCO TENUE Y MOSAICO FINO PERIORIFICIARIO, EN EL RADIO DE LAS 12 SE OBSERVA UNA AREA PEQUENA DE EPITELIO ACETOBLANCO DENSO. DIAGNOSTICO COLPOSCOPICO: NIC MAS I.V.P.H. 5) BIOPSIA •v.? ' » s. / » ^ v .~ . •5 « $ r\ t** *« DIAGNOSTICO HISTOPATOLOGICO: BIOPSIA: RESULTADO DE CONO: ti v % » » M s * G 11 * DISPLASIA LEVE MAS DATOS DE INFECCION POR EL VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO NO SE REALIZ6 1) DATOS CLINICOS: DATOS DEL PACIENTE: PACIENTE: SPJ JURISDICCION: V EDAD: 33 ANOS EXPLORACION FISICA: CERVICITIS ANTECEDENTES GINECO-OBSTETRICOS: MENARCA: 13 ANOS F.U.R.: 10/11/05 I.V.S.A: 17 ANOS PAREJAS: 1 G V P III (3 II A 0 P.F O.T.B. D.O.C. FRECUENCIA: SUBSECUENTE 2) DATOS DE LA MUESTRA CITOLOGICA NUMERO CITOLOGICO: CV-53342-05 FECHA DETOMA: 19/11/05 FECHA DX.CITOL.: INSTRUMENTO DE TOMA: ESPATULA DE AYRE. PARAMETROS DE CALIDAD DE LA MUESTRA TOMA: ADECUADA (METAPLASIA). EXTENDIDO: LONGITUDINAL FIJACION: SEQUEDAD LEVE. TINCION: ADECUADA. 25/11/05 3) CITOLOGIA CELULAS EPITELIALES ESCAMOSAS SUPERFICIALES CON PERDIDA DE LA RELACION NUCLEO/CITOPLASMA DONDE EL CRECIMIENTO NUCLEAR ES DE 1/3 DEL AREA CELULAR. LOS NUCLEOS SON REDONDOS A OVAL CON MEMBRANA REGULAR E HIPERCROMATICOS DONDE SE APRECIA GRANULOS FINOS DE CROMATINA. CITOPLASMA DE CELULAS SUPERFICIALES QUERATINIZADO DISCRETA COILOCITOSIS. * DIAGNOSTICO CITOLOGICO: OBSERVACION: N6TESE NUCLEOS VESICULOSOS HIPERCROMATICOS CON TERMINACI6N EN "PICO". DISPLASIA LEVE MAS I.V.P.H. 4) COLPOSCOPIA DESCRIPCI6N COLPOSC6PICA: CERVIX EUTR0FICO, ZONA DE EPITELIO ACETOBLANCO. DIAGNOSTICO COLPOSCOPICO: TRANSFORMACI6N ANORMAL, POR NIC-II. MAS I.V.P.H 5) BIOPSIA ** f * < • 9, .' I ' •• i f m v „ /• o ' / •C-'.' \ *- -V« V, < • V " •i v.:-'' •VJT>- j - V- - -.pi* i'4. r. 1 e DIAGNOSTICO HISTOPATOLOGICO: BIOPSIA: RESULTADO DE CONO.: - K» * . fjfjl>'* • *-• - ^JCtf * - •* * - iu- 3 * - j- , • . — - DISPLASIA LEVE MAS I.V.P.H. DISPLASIA MODERADA MAS I.V.P.H. 1) DATOS CLINICOS: DATOS DEL PACIENTE: PACIENTE: SGGJ JURISDICClON: V EDAD: 46 ANOS EXPLORACION FISICA: CERVIX SANO ANTECEDENTES GINECO-OBSTETRICOS: MENARCA: 13 ANOS F.U.R.: 20/11/05 I.V.S.A.: 25 ANOS PAREJAS: 1 G III P III C 0 A a P.F O.T.B. D.O.C. FRECUENCIA: 1 . VEZ 2) DATOS DE LA MUESTRA CITOLOGICA NUMERO CITOL6GICO: CV-51255-05 FECHADETOMA: 30/11/05 FECHA DX.CITOL.: INSTRUMENTO DE TOMA: CITOBRUSH. PARAMETROS DE CALIDAD DE LA MUESTRA TOMA: ADECUADA (METAPLASIA). EXTENDIDO: LONGITUDINAL. FIJACION: ADECUADA (BUENA PRESERVAClON CELULAR). TINCION: ADECUADA (BUEN CONTRASTE). 0 27/12/05 3) CITOLOGIA GRUPO DE CELULAS EPITELIALES ESCAMOSAS SUPERFICIALES E INTERMEDIAS QUE PRESENTAN QUERATINIZAClON CITOPLASMICA (DISQUERATOSIS). SE LOCALIZA UN GRUPO CELULAR EN EL QUE SOLO PUEDE VALORARSE UNA SOLA CELULA INTEGRA. ESTA ES INTERMEDIA DISPLASICA. EN EL FONDO ERITROCITOS. ENCONTRAMOS EN ACERCAMIENTO ENCOTRAMOS QUE ESTA CEzLULA INTERMEDIA PRESENTA PERDIDA DE LA RELAClON NUCLEO/CITOPLASMA; DONDE EL NUCLEO TIENE UN CRECIMIENTO DE 2/3 DEL AREA CELULAR. LA CROMATINA ES HIPERCROMATICA. • ••j *'W1P # * •^Hk DIAGNOSTICO CITOLOGICO: DISPLASIA MODERADA MAS I.V.P.H. 4) COLPOSCOPIA DESCRIPCI6N COLPOSCOPICA: CERVIX EUTR6FICO, COLPOSCOPIA SATISFACTORIA, ZONA DE TRANSFORMACION ANORMAL POR EPITELIO ACETOBLANCO TENUE EN LOS RADIOS DE LAS 8, 9-10 Y DE 1 A 2. DIAGNOSTICO COLPOSCOPICO: NIC MAS I.V.P.H. < ^ W HI* t M ' J t * a. i ,V n i • i .. H , *£ ^ ** 1 y / DIAGNOSTICO HISTOPATOLOGICO: BIOPSIA: RESULTADO DE CONO: DISPLASIA MODERADA MAS DATOS DE I.V.P.H. DISPLASIA MODERADA, BORDES Y LECHO QUIRURGICOS LIBRES DE LESI6N 1) DATOS CLINICOS: DATOS DEL PACIENTE: PACIENTE: THL JURISDICCION: V EDAD: 40 ANOS EXPLORACION FISICA: CERVIX SANO ANTECEDENTES GINECO-OBSTETRICOS: MENARCA: 14 ANOS F.U.R.: 04/11/05 I.V.S.A.: 18 ANOS PAREJAS: 2 G II P II C 0 A a P.F D.I.U. D.O.C. FRECUENCIA: , 1 . VEZ 2) DATOS DE LA MUESTRA CITOLOGICA NUMERO CITOLOGICO: CV-51694-05 FECHADETOMA: 14/11/05 FECHA DX.CITOL.: INSTRUMENTO DE TOMA: CITOBRUSH. PARAMETROS DE CALIDAD DE LA MUESTRA TOMA: ADECUADA (METAPLASIA). EXTENDIDO: LONGITUDINAL. FIJACION: ADECUADA (BUENA PRESERVACI6N CELULAR). TINCION: ADECUADA (BUEN CONTRASTE). 0 21/11/05 3) CITOLOGIA GRUPO DE 4 CELULAS ESCAMOSAS INTERMEDIAS PEQUENAS QUE PRESENTAN PERDIDA DE LA RELACION NUCLEO/CITOPLASMA DONDE EL NUCLEO TIENE UN CRECIMIENTO DE 2/3 DEL VOLUMEN CELULAR. SE . OBSERVA DISQUERATOSIS (QUERATINIZACION CITOPLASMICA). SE LOCALIZAN CELULAS INTERMEDIAS DISPLASICAS. LAS QUE PRESENTAN MAYOR ALTERAClON ESTAN A LA DERECHA CON CITOPLASMA CIANOFILO. EL NUCLEO ES REDONDO Y OVAL CON HIPERCROMASIA. DIAGNOSTICO CITOLOGICO: DISPLASIA MODERADA MAS I.V.P.H. DESCRIPClON COLPOSCOPICA: CERVIX EUTROFICO, COLPOSCOPIA SATISFACTORIA, ZONA DE TRANSFORMAClON ANORMAL POR EPITELIO ACETOBLANCO TENUE PERIORIFICIARIO Y DENSO EN EL RADIO DE 2- 3. DIAGNOSTICO COLPOSCOPICO: NIC MAS I.V.P.H. 5) BIOPSIA 1 t't-i v'C • • i "t • * • * 4 ' • - v'. -S..,;>..'• /V- *«„'' — v. ~ < - » ^ o it v I" * '.'* • "s. • ^ C5 % "> { . . y „ „ *. . % W1 DIAGNOSTICO HISTOPATOLOGICO: BIOPSIA: RESULTADO DE CONO: I ;• t> * * ;; . v ' ^ >, O „ <• DISPLASIA SEVERA MAS I.V.P.H. DISPLASIA SEVERA MAS I.V.P.H. BORDES Y LECHO QUIRURGICOS LIBRES DE LESION 1) DATOS CLINICOS: DATOS DEL PACIENTE: V PACIENTE: GFP JURISDICClON: EDAD: 48 ANOS EXPLORACION FISICA CERVIX SANO ANTECEDENTES GINECO-OBSTETRICOS: I.V.S.A.: 17 ANOS MENARCA: 12 ANOS F.U.R.: 30/11/04 PAREJAS: 2 G IV P IV C 0 A a P.F NO REFIERE D.O.C. FRECUENCIA: 1 . VEZ 2) DATOS DE LA MUESTRA CITOLOGICA NUMERO CITOLOGICO: CV-7060/06 FECHA DE TOMA: 11/01/06 FECHA DX.CITOL.: INSTRUMENTO DE TOMA: ESPATULA DE AYRE. PARAMETROS DE CALIDAD DE LA MUESTRA TOMA: ADECUADA (METAPLASIA). EXTENDIDO: LONGITUDINAL. FIJACION: ADECUADA (BUENA PRESERVAClON CELULAR). TINCION: ADECUADA (BUEN CONTRASTE). 0 02/02/06 3) CITOLOGIA CELULAS ESCAMOSAS PROFUNDAS ALTERADAS CON CITOPLASMA CIAN0FILO. SE ENCUENTRA CELULAR DISQUERATOSIS. ESTE MISMO TIPO PRESENTANDO EN ACERCAMIENTO SE ENCUENTRA QUE TALES CELULAS PRESENTAN PERDIDA DE LA RELACION NUCLEO/CITOPLASMA DONDE EL CRECIMIENTO NUCLEAR ES MAYOR DE 2/3 DEL AREA CELULAR. EL NUCLEO ES REDONDO DE MEMBRANA NUCLEAR REGULAR Y EVIDENTEMENTE HIPERCROMATICO. DIAGNOSTICO CITOLOGICO: DISPLASIA SEVERA MAS I.V.P.H. 4 I' t •I ' i i V • K; / % ? 3 0 r * DESCRIPClON COLPOSCOPICA: ClzRVIX EUTROFICO, COLPOSCOPIA SATISFACTORIA, ZONA DE TRANSFORMAClON ANORMAL POR EPITELIO ACETOBLANCO TENUE Y MOSAICO FINO EN UNION ESCAMOCOLUMNAR Y SOBRE TEJIDO GLANDULAR EN LABIO POSTERIOR. EVERSION GLANDULAR SEVERA DIAGNOSTICO COLPOSCOPICO: NIC MAS I.V.P.H. 5) BIOPSIA » Ui t* u>v . " *i T« " : c* / ' * * • * * 'i 6 i A . % - 1 . * , , . A. « " * . ' r* •* * f •> a • * DIAGNOSTICO HISTOPATOLOGICO: BIOPSIA: RESULTADO DE CONO: DISPLASIA SEVERA MAS DATOS DE INFECCION POR EL VIRUS DE PAPILOMA HUMANO CARCINOMA EPIDERMOIDE IN SITU, BORDES SUPERFICIALES Y PROFUNDOS CON LESION 1) DATOS CLINICOS: DATOS DEL PACIENTE: PACIENTE: MHTF JURISDICClON: V EDAD: 71 ANOS EXPLORACION FISICA: CERVIX SANO ANTECEDENTES GINECO-OBSTETRICOS: MENARCA: 15 ANOS F.U.R.: 01/01/80 I.V.S.A.: 24 ANOS PAREJAS: 1 G XIII P X C 0 A a P.F NO REFIERE D.O.C. FRECUENCIA: 1 . VEZ. 2) DATOS DE LA MUESTRA CITOLOGICA NUMERO CITOLOGICO: CV- 30452-05 FECHA DE TOMA: 09/09/05 FECHA DX.CITOL.: INSTRUMENTO DE TOMA: ESPATULA DE AYRE. PARAMETROS DE CALIDAD DE LA MUESTRA TOMA: ADECUADA (METAPLASIA). EXTENDIDO: LONGITUDINAL. FIJACION: ADECUADA (BUENA PRESERVAClON CELULAR). TINCION: ADECUADA (BUEN CONTRASTE). 3) CITOLOGIA _ ~ III 31/05/05 _ IMAGEN CELULAR DE ATROFIA (CELULAS PROFUNDAS). SE VALORA LA CELULA CON MAYOR ALTERAClON UBICADA ABAJO. ES UNA CELULA PROFUNDA CON PEzRDIDA DE LA RELAClON NUCLEO/CITOPLASMA DONDE EL NUCLEO OCUPA MAS DE 2/3 DEL AREA CELULAR Y ES HIPERCROMATICO. SE LOCALIZAN ClzLULAS ALTERADAS ENTREMEZCLADAS CON CELULARIDAD DE ASPECTO BENIGNO. LAS PRIMERAS SON CELULAS PROFUNDAS MALIGNAS. EL NUCLEO TOCA LA MEMBRANA DEL ESCASO CTOPLASMA. LA CROMATINA ES COM PACTA. DIAGNOSTICO CITOLOGICO: CARCINOMA IN SITU DESCRIPCION C0LP0SC6PICA: CERVIX ATR6FICO, COLPOSCOPIA NO SATISFACTORIA, EPITELIO ACETOBLANCO DENSO, VASOS AUMENTADOS DE CALIBRE, ATROFIA EPITELIAL SEVERA. DIAGNOSTICO COLPOSCOPICO: NIC MAS I.V.P.H., ATROFIA DIAGNOSTICO HISTOPATOLOGICO: BIOPSIA: RESULTADO DE CONO: CARCINOMA EPIDERMOIDE IN SITU CARCINOMA EPIDERMOIDE IN SITU BORDES Y LECHO QUIRURGICOS CON LESION Como conclusion de los seis casos clinicos de estudio expuestos en la presente monografia, se puede comentar que existe correlacion diagnostica cito-colpohistologica en cada uno de ellos, lo que pone de manifiesto que los profesionales involucrados en dichos diagnosticos fueron asertivos en ellos, y cumplieron con el control de calidad aplicado. 7. BIBLIOGRAFIA Bibliografia 1 Viguer J. M. y Garcia del M. R. (1995). : "Laboratorio y Atlas de Citologia cervical". 1a edition. Interamericana/McGraw-Hill. Madrid. 2 Extendido de toma de muestra cervicovaginal de paciente de la Secretaria de Salud, Xalapa, Veracruz, Mexico, 2005 3 Creado ex profeso para este documento. 4 Nauth F. H. (2005). "Citodiagnostico Ginecologico". Panamericana. 1a edition. 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