HORTICULTURA Contenido en vitamina C de siete variedades tradicionales de pimiento de la Región de Murcia. ! E. Sánchez 1, P. Flores 1, A. Rodriguez-Burruezo 2, J. Gomariz 1, F. Navarro 1, J. Costa 1, M. S. Catala1 1 IMIDA. C/mayor s/n, La Alberca, (Murcia). 2 COMAV. Camino de Vera s/n (Valencia). Palabras clave: ácido ascórbico, Capsicum annuum, HPLC-MS/MS, antioxidantes, calidad nutricional. ! Resumen El pimiento (Capsicum annuum L.) es una fuente importante de vitaminas y precursores de las mismas. En particular, es una de las hortalizas con mayor contenido en vitamina C, fundamentalmente en forma de ácido ascórbico, uno de los compuestos antioxidantes más importantes de los productos vegetales. En este trabajo se estudia el contenido en vitamina C de siete variedades de pimiento tradicionales murcianas. El cultivo se realizó al aire libre en la localidad del Chaparral (Murcia) y las muestras de fruto se recolectaron en los dos estados de maduración en los que habitualmente son consumidos, una vez alcanzado el tamaño final: verde y rojo turgente. El análisis de vitamina C, medido como la suma de ácido áscorbico y dehidroascórbico, se realizó mediante cromatografía líquida de alta resolución acoplada a un detector de masas de triple cuadrupolo (HPLC-MS/MS). Los resultados obtenidos muestran diferencias en el contenido de vitamina C entre las distintas variedades. En estado inmaduro, la variedad con menor concentración fue Grueso de Murcia, con 143 mg/100 g de peso fresco y la de mayor fue Costal, con 302 mg/100 g de peso fresco. En el estado de maduración rojo turgente, el contenido en vitamina C varió entre 213 y 446 mg/100 g de peso fresco de las variedades Grueso de Murcia y Ñora respectivamente. En general, independientemente de la variedad estudiada, la concentración de vitamina C fue significativamente superior en los pimientos maduros respecto a los pimientos en estado inmaduro. INTRODUCCIÓN En la Región de Murcia el cultivo de pimiento, tanto al aire libre como bajo invernadero, tiene una gran importancia económica, habiéndose seleccionado una serie de variedades locales, adaptadas a diferentes usos y que difieren ampliamente en forma, tamaño, sabor y color. Los pimientos son una buena fuente de muchos nutrientes esenciales, entre los que destacan la vitamina C, provitamina A, E, P (citrina), B1 (tiamina), B2 (riboflavina) y B2 (niacina) y ya Hartwell en el año 1971 mencionaba una lista con 14 referencias en donde el pimiento había sido citado como agente terapéutico +)#$ ACTAS DE HORTICULTURA Nº 60 para el cáncer. Los pimientos son una fuente extremadamente rica en vitamina C, fundamentalmente en forma de ácido ascórbico, uno de los compuestos antioxidantes más importantes de los productos vegetales. Un pimiento puede contener seis veces más vitamina C que una naranja (Bosland and Votava, 2000) y dicho contenido suele variar entre 46 y 243 mg/100 g de peso fresco (Wimalasiri and Wills, 1983; NisperosCarriedos M.O. et al., 1992; Lee Y. et al 1995), por lo que se supone que los frutos de muchas de las variedades de pimiento son suficientes para cubrir las necesidades diarias de un adulto RDA (Recommended Dietary Allowances = 60 mg por día). En la actualidad y debido a que el consumidor europeo es cada vez más exigente en términos de cualidades organolépticas y de calidad nutritiva, el contenido en componentes bioactivos en general y de vitamina C en particular cobra gran importancia a la hora de evaluar la calidad del pimiento. Diversos autores señalan que la concentración de ácido ascórbico de los pimientos varía ampliamente, influyendo en este fenómeno: el método de cultivo, el clima, el estado de madurez y sobre todo las variedades utilizadas. En el presente estudio y con objeto de valorar el contenido en vitamina C, así como la influencia que ejerce el estado de madurez del fruto en el mismo, se planteó un ensayo con siete de las variedades más representativas, entre las que tradicionalmente son cultivadas en la Región de Murcia. MATERIAL Y MÉTODOS Las variedades tradicionales de pimiento estudiadas fueron: Ñora, Costal, Negral, Mazarronero, Huertanico, Grueso de Murcia y Trompa de Vaca. El cultivo se llevó a cabo al aire libre en la finca la Hacienda que posee el IMIDA en la localidad del Chaparral (Cehegín) según las costumbres de la zona. El diseño experimental fue de bloques al azar con 4 repeticiones de 20 plantas en cada una. Se tomaron aleatoriamente 20 frutos de cada repetición, para realizar una caracterización morfológica de cada variedad, utilizando los descriptores editados por el IPGRI (Tabla 1). Para el análisis de vitamina C, se recolectaron aleatoriamente 40 frutos de cada repetición, en los estados en los que habitualmente son consumidos: verde y maduro. Los frutos se lavaron y secaron, se eliminaron las semillas y se trocearon, mezclando todos los frutos de una misma repetición. Inmediatamente, una porción de cada muestra (500 g) fue congelada y triturada con N2 líquido. La extracción de vitamina C se realizó con EDTA 0.05% (w/v) y 1,4-Dithio-DL-threitol (Fluka, Steinheim, Switzerland). La determinación se realizó siguiendo la metodología descrita por Fenoll et al. (2011) en un cromatógrafo líquido Agilent Serie 1200 (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA) equipado con una columna Prontosil C18 y utilizando como fase móvil ácido fórmico 0.2% (v/v). Se utilizó un detector espectrómetro de masas triple cuadrupolo Agilent G6410A, equipado con fuente de ionización electrospray (ESI) operando en modo negativo. Las transiciones utilizadas para la identificación y cuantificación de la vitamina C fueron: 175(143 (cuantificadora) y 175(71 (cualificadora). RESULTADOS Y DISCUSIÓN El análisis de la varianza mostró un efecto significativo del estado de maduración (p< 0.001) y de la variedad (p< 0.001) sobre la concentración de vitamina C en pimiento. Dicha concentración fue, de media, un 26% menor en pimiento verde que la encontrada en estado maduro. Estos resultados están en concordancia con los obtenidos por Flores et al. (2009) al analizar otras variedades de pimiento. ANOVA detectó una interacción significativa (p<0.05) entre los dos factores estudiados (estado de maduración y variedad). En la Figura 1 se muestra el efecto de dicha interacción +)%$ HORTICULTURA sobre el contenido de vitamina C. Negral fue la variedad en la que se observó menos diferencia entre el contenido de vitamina C de los frutos en estado de maduración verde (300 mg/100 g PF) y los frutos maduros (314 mg/100g PF). Estos resultados pueden estar relacionados con la mutación cl (clorophyll retainer) que presenta dicha variedad, caracterizada por la inhibición de la degradación de la clorofila durante la maduración del fruto, lo que origina que el fruto tenga un color marrón en la madurez. Entre las variedades estudiadas, Negral, Ñora y Costal, que son variedades destinadas a la elaboración de pimentón, fueron las que mostraron concentraciones mayores de vitamina C, superando como media los 268 mg/100 g PF en estado verde y 314 mg/100 g PF en estado maduro. En particular, la variedad Ñora alcanzó en estado maduro un valor de 446 mg/100 g PF, superando los resultados obtenidos por otros autores en diferentes variedades de pimiento (Wimalasiri and Wills, 1983; NisperosCarriedos et al., 1992; Lee et al., 1995). Los resultados obtenidos para las variedades destinadas a pimentón pueden ser debidos a un efecto de concentración, como resultado del carácter hidrosoluble de la vitamina C y del mayor contenido en materia seca de dichas variedades (Nuez et al.,1996). Por lo tanto, estas variedades pueden ser consideradas un material valioso en posteriores trabajos de mejora de calidad, para incrementar el contenido en vitamina C de los frutos de pimiento. Agradecimientos El presente experimento ha sido través del Proyecto INIA RTA2010-00038-C03-03 parcialmente financiado a Referencias Bosland, P.W. and Votava, E.J. 2000. Peppers: Vegetable and Spice capsicums. CABI plublishing, New York. Fenoll, J., Martinez A., Hellín P. and Flores P. 2011. Simultaneous determination of ascorbic and dehydroascorbic acids in vegetables and fruits by liquid chromatography with tandem-mass spectrometry. Food Chemistry 127, 340-344. Flores, P., Hellin,P., Lacasa, A., López, A. and Fenoll J. 2009. Pepper antioxidant composition as affected by organic, low-input and soilless cultivation. Journal of the Science of Food and Agriculture 89, 2267-2274. Lee, Y., Howard, L.R. and Villalon, B. 1995. Flavonoids and antioxidant activity of fresh pepper (Capsicum annuum) cultivars. Journal of Food Science 60, 473-476. Nisperos-Carriedos, M.O. Bluslig, B.S. and Shaw, P.E.1992. Simultaneous detection of dehydroascorbic, ascorbic and some organic acids in fruits and vegetables by HPLC. Journal of Agricultural and Food Chemistry 40, 1127-1130. Nuez, F., Gil, R. y Costa, J. 1996. El cultivo de pimientos, chiles y ajies. Mundipresnsa Osuna-García, J.A., Wall, M.M. and Waddell, C.A.1998. Endogenous levels of tocophenols and ascorbic acid during fruit repening of New Mexican-type chile (Capsicum annuum L.) cltivars. Journal of Agricultural and Food Chemistry 46, 5093-5096. Wilmalasiri, P. and Wills, R.B.H. 1983 Simultaneous analisis of ascorbic acid and in fruits and vegetables by high-performance liquid chromatography. Journal of Chromatography 256, 368-371. +)&$ ACTAS DE HORTICULTURA Nº 60 Tabla 1. Caracterización morfológica, siguiendo los descriptores del IPGRI, de las variedades de pimiento murciano estudiadas en dos estados de maduración (inmaduro y maduro). Los valores son medias ± SE (n=4). Ñ C N T.V M. H. G.M Peso (g) 24,46±0, 15,43±0, 19,88±0. 195,95± 81,44±3, 36,53±1, 201,95± Longitu Anchur Espes Secció d or n a (mm) (mm) carne trans31,17±0, 47,10±1, 3,21±0 2 134,21± 19,21±0, 1,83±0 1 35,76±1, 41,90±0, 2,76±0 2 152,18± 78,27±1, 3,60±0 5 140,04± 46,36±1, 2,82±0 5 113,09± 34,02±0, 2,65±0 5 123,98± 81,29±5, 5,19±0 5 Ñ C N T.V M. H. G.M . 25,10±1, 20,37±0, 76 23,40±0, 97 225,29± 73,3 115,56± 16,6 66,99±1 4,55 208,27± 34,3 32,73±0, 124,0±3 0,61 37,95±1, 04 153,11± 11,1 126,82± 5,04 130,11± 2,18 134,68± 5,77 MADUROS INMADUROS Variedad 46,59±0, 24,67±6, 80 43,50±0, 99 86,35±6, 20 53,77±5, 12 45,59±4, 17 77,22±6, 46 3,03±0 1,97±0 ,38 2,53±0 ,16 4,51±0 ,11 3,14±0 ,15 3,02±0 ,11 5,13±0 ,38 2 1 2 5 5 5 5 Secci ón Long 1 8 2 7 7 6 7 Colo r fruto - Supe rficie 1 1 2 1 1 2 1 1 8 2 7 7 6 7 8 9 11 8 8 8 8 1 1 2 1 1 2 1 Ñ:Ñora, C:Costal, N:Negral, T.V:Trompa de Vaca, M:Mazarronero, H: Huertanico, G.M:Grueso de Murcia 500 h Inmaduros Vitamin C (mg/100g PF) g Maduros 400 f ef 300 cde cdef bcd ab ef ef def bcd abc 200 a 100 0 1 2 3 4 5 6 7 Variedades Fig. 1. Contenido en vitamina C total en variedades de pimiento murcianos en dos estados de maduración. 1: Trompa de Vaca, 2: Grueso de Murcia, 3: Huertanico, 4: Mazarronero, 5: Negral, 6: Ñora, 7: Costal. Letras diferentes indican diferencias significativas entre medias de acuerdo con el test de Duncan (n=4). +)'$