e l o m s o l e od M ia g o l o cn e t o i B r a l u c Mole s e r a l u c Modelos Moleculares v Las especies modelo son una herramienta fundamental en algunas áreas de la investigación científica, ya que permiten realizar estudios sobre determinados caracteres y los resultados pueden ser extrapolados a otras especies. Características de una especie modelo ò Fácil mantenimiento y manipulación en el laboratorio ò Ciclos de vida cortos ò Gran número de descendencia ò Disponibilidad de variabilidad fenotípica y genotípica ò Fenotipo de interés sencillo de observar o medir ò Escherichia coli es un tipo de bacteria que ha sido utilizada durante décadas como organismo modelo y, con el surgimiento de la ingeniería genética, pasó a ser el “organismo estrella” de la disciplina del ADN recombinante. ò E. coli se utiliza, para obtener muchas copias de un fragmento de ADN de interés (amplificación), y para la fabricación de proteínas recombinantes a gran escala (la insulina humana). ò Los plásmidos de E.coli son importantes ya que contienen genes de interés biológico, como aquellos que determinan ventajas adaptativas (por ejemplo, resistencia a antibióticos) y son utilizados como vectores de clonación y de expresión en ingeniería genética ò Reino ò Bacteria ò Filo ò Proteobacteria ò Clase ò Gammaproteobacteria ò Orden ò Enterobacteriales ò Familia ò Enterobacteriacea ò Género ò Escherichia ò Especie ò E.coli Características ò Organismo procariota más estudiado ò Fue descrita por primera vez en 1885 por Theodore von Escherich, bacteriólogo alemán, quien la denominó Bacterium coli. ò Es un bacilo que reacciona negativamente a la tinción de Gram ò Anaerobio facultativo ò Móvil por flagelos peritricos ò No formador de esporas ò Fermenta glucosa y lactosa Gram Negativo ò La Escherichia coli, en su hábitat natural, vive en los intestinos de la mayor parte de los mamíferos ò Principal organismo anaerobio facultativo del sistema digestivo ò Organismo comensal ayuda a la absorción de nutrientes Patogenia ò La Escherichia coli puede causar infecciones intestinales y extraintestinales generalmente graves. ò Infecciones del sistema excretor, cistitis, meningitis, peritonitis, mastitis, neumonía y septicemia. Flora Normal ò Se distinguen seis cepas según su capacidad patógena (virotipos) ò Escherichia coli enteropatogénica (ECEP) ò Escherichia coli enterotoxigénica (ECET) ò Escherichia coli enteroinvasiva (ECEI) ò Escherichia coli enterohemorrágica o verotoxigénica (ECEH) ò Escherichia coli enteroagregativa (ECEA) ò Escherichia coli de adherencia difusa (ECAD) Escherichia coli enteropatogénica (ECEP) ò Esta cepa causa diarrea en humanos, conejos, perros y caballos, al igual que la enterotoxigénica, pero la etiología y los mecanismos moleculares de colonización son diferentes. ò Carece de fimbrias, utiliza la proteína intimina, una adhesina para adherirse a las células intestinales. Escherichia coli enterotoxigénica (ECET) ò Se parece mucho a Vibrio cholerae, se adhiere a la mucosa del intestino delgado, no la invade y elabora toxinas que producen diarrea. ò Produce diarrea no sanguinolenta en niños y adultos, sobre todo en paises en vias de desarrollo. Escherichia coli enteroinvasiva (ECEI) ò Es inmóvil ò No fermenta la lactosa ò Invade el epitelio intestinal causando diarrea sanguinolenta en niños y adultos, libera el calcio en grandes cantidades impidiendo la solidificación ósea. (artritis y arterioesclerois) E. coli enterohemorrágica (ECEH) ò Aparece en la década del 80 en casos esporádicos y en brotes epidémicos fundamentalmente en países desarrollados. El serotipo más observado en EE.UU., Europa y Japón ha sido O157 H7. ò La convención internacional de nomenclatura de patógenos ha recomendado el uso de STEC (Shiga Toxin Escherichia coli) para este grupo, debido a que estas bacterias producen una toxina citotóxica. Escherichia coli enteroagregativa (ECEA) ò Sólo encontrada en humanos. Son llamadas enteroagregativas porque tienen fimbrias con las que aglutinan células en los cultivos de tejidos. ò Se unen a la mucosa intestinal causando diarrea acuosa sin fiebre. ò No son invasivas. ò Producen una toxina similar a la de las enterotoxigénicas Escherichia coli de adherencia difusa (ECAD) ò Se adhiere a la totalidad de la superficie de las células epiteliales y habitualmente causa enfermedad en niños inmunológicamente no desarrollados o malnutridos. No se ha demostrado que pueda causar diarrea en niños mayores de un año de edad, ni en adultos y ancianos. ò Kingdom: Fungi ò Phylum: Ascomycota ò Subphylum: Saccharomycota ò Class: Saccharomycetes ò Order: Saccharomycetales ò Family: Saccharomycetaceae ò Genus: Saccharomyces ò Species: S. cerevisiae Saccharomyces cerevisiae ò Es una especie modelo perteneciente a los hongos unicelulares. Este organismo ha sido parte de la biotecnología desde los comienzos de la historia ya que es la levadura utilizada en la elaboración del pan, el vino y la cerveza, entre otros productos obtenidos por fermentación. ò La levadura Saccharomyces cerevisiae es el microorganismo eucarionte ideal para estudios biológicos y genómicos, y ha resultado una herramienta poderosa para el entendimiento de los genes de organismos eucariontes superiores. ò La simplicidad de manipulación genética de la levadura permite que sea utilizada convenientemente para analizar la función de los productos génicos de organismos eucariontes superiores. ò En cuanto a su utilización biotecnológica como fábrica de moléculas recombinantes, la levadura es de gran utilización para la preparación de proteínas recombinantes de uso comercial. S. cerevisiae ò S. cerevisiae tiene un tiempo de generación corto (doubling time 1.25–2 hours at 30 °C (86 °F)) ò Fácil de cultivar. Saccharomyces cerevisiae ò Especie de levadura ò Células son redondeadas a ovoides (5-10 um de diámetro) ò Se reproducen por un proceso que se llama germinación (budding) ò Crecen aeróbicamente en glucosa, maltosa y no crecen en lactosa ni celulosa. ò Habilidad para crecer en distintas azúcares. ò Todas las cepas pueden usar amonia y urea como fuente de nitrógeno, pero no pueden usar nitrato. ò Levaduras tienen un requerimiento por fósforo, algunos metales son requeridos para un buen crecimiento de la levadura. ò S. cerevisiae puede ser transformado por la adición de nuevos genes o delección atraves de recombinación. ò Comparte estructuras celulares internas de plantas y animales sin el alto porcentaje de DNA que no codifica. ò S. cerevisiae fue el primer genoma eucariota completamente secuenciado ò El genoma salio al público en Abril 24,1996. ò Base de Datos del Genoma de Saccharomyces (SGD) ò Centro de Información para secuencias de proteínas (Munich) (MIPS)