Microorganismos, ¿amigos o plagas? José Juan Aguilar Gavilán Dpto. Microbiología Microorganismos Microbiólogo/a Bacterias Virus Hongos Algas Protozoos Su tamaño pequeño y la rapidez con que se reproducen* les confiere una gran capacidad de dispersión. Su variabilidad y flexibilidad metabólica les permite tolerar condiciones medioambientales desfavorables. Streptococcus (1 m) * Una sola bacteria, con un tiempo de generación de 20 minutos, creciendo de forma exponencial durante 48 h. formaría una población que pesaría unas 4.000 veces más que la Tierra (esta pesa unos 6.600 trillones de toneladas), algo impresionante habida cuenta que una sola bacteria pesa solo 10-12 gramos. Rhodobacter (bacteria fototrófica capaz de crecer también en la oscuridad, tanto anaeróbicamente como en presencia de O2, utilizando materia orgánica o inorgánica como fuente de energía). Su plasticidad genética les hace adquirir por recombinación caracteres favorables para adaptarse fácilmente a los cambios en sus hábitats naturales, justificando su persistencia en los mismos. Mycobacterium tuberculosis (la aparición de estirpes multi- resistentes a los fármacos eficaces contra la cepa silvestre ha permitido la reemergencia de brotes de tuberculosis en zonas en las que se había erradicado la enfermedad). Los microorganismos, omnipresentes en la Tierra No transcurre un día de nuestra vida sin que nos veamos expuestos a agentes infecciosos Con excepción de la música y la danza, el impacto de los microbios en el resto de las artes clásicas – arquitectura, escultura, pintura y literatura- es notable. Incluso en lo que respecta a la música, la acción de microorganismos patógenos podría considerarse también destacable, pues cercenó la vida de ilustres genios musicales. Beethoven (1770-1827) Schubert (1797-1828) Chopin (1810-1849) Tchaikowsky (1840-1893) Microbiota corporal Residentes (microbiota autóctona) Se denomina “microbiota corporal” al conjunto de microorganismos (la mayoría bacterias) que viven íntimamente asociados a las superficies corporales de cualquier ser vivo. Transeúntes (microbiota alóctona) Por cada célula humana, existen 10 células microbianas en nuestro organismo (suponen del 1-3% del peso corporal) Liping Zhao (Dpto. de Microbiología de la Escuela de Ciencias de la Vida y de Biotecnología, Universidad Jiao Tong de Shanghai, China, 2008). “Somos superorganismos”, una interacción de dos genomas: el humano (estable, heredado de los padres, de unos 19.000 genes), y el microbioma (genoma de los microorganismos comensales que conforman la microbiota, un genoma flexible, adquirido del medio ambiente, de 8.000.000 de genes). El estudio del microbioma humano deja entrever que el organismo no podemos considerarlo como algo separado de los microbios, en realidad es un conjunto cambiante de ecosistemas. Nuestra salud depende, en buena medida, del equilibrio de esos ecosistemas y, por ende, de la diversidad de nuestros microbios. Para abordar terapias frente a diversas patologías será vital entender qué transforma a una población comensal en patógena y cómo evitar desequilibrios en la composición del microbioma. Medicina y Salud Pública Enfermedades infecciosas Prevención de enfermedades infecciosas Tratamiento y curación de enfermedades Belleza y estética Incidencia de la muerte negra en Europa (año 1353) Muerte negra (peste bubónica), irrumpe en Europa en 1347 y en 4 años acabó con el 75% de la población (25 millones de muertes). 6 V 5 4 V * * * * V * Importada desde Crimea por un navío genovés, la muerte negra rápidamente se extendió por regiones de la costa europea (desde Génova a la Provenza, al Languedoc, a Cataluña y Valencia), para después penetrar en el interior del la zona continental del occidente europeo (en el mapa, las diferentes tonalidades de rojo muestran las áreas de incidencia desde más temprana a más tardías, numeradas del 1 al 6). En color verde (marcadas con la letra V) aparecen reflejadas aquellas zonas en las que la peste tuvo menor incidencia. 3 2 1 La colonia genovesa de Kaffa, en Crimea, fue asediada por los mongoles. Los sitiadores se vieron aquejados por un terrible mal que les diezmó y que fue contagiado al interior de la ciudad: los mongoles lanzaron en 1346 cadáveres de apestados para minar su resistencia. Los marinos genoveses que partieron de Kaffa transmitieron la enfermedad. Microorganismos, prevención de enfermedades Edward Jenner (1796) Louis Pasteur (1885) Vacunas (sarampión, parotiditis y rubéola) Microorganismos, tratamiento y curación de enfermedades Probióticos Mycobacterium vaccae Alexander Fleming (1928) Antibióticos (penicilina) Suprime la inflamación Estimula la inteligencia Antidepresivo (disminuye la ansiedad) Eficaz para combatir enfermedades (tuberculosis, lepra, asma, dermatitis atópica, soriasis y cáncer) Microorganismos, belleza y estética Levaduras Louise Augusta (1755-1842), reina Nefertiti (1370-1330 a.C.), de Prusia (Elisabeth Vigeé-Lebrun, esposa de Akenatón (Museo 1801) egipcio de Berlin) Toxina botulínica (Botox®) Clostridium botulinum Colagenasas G/H (Col GHPB220®) Clostridium hystoliticum Agricultura y Ganadería Enfermedades infecciosas Reciclaje de nutrientes y fertilización Producción animal/vegetal Microorganismos y enfermedades infecciosas Mildio lanoso de la vid (1878) Peste porcina africana (1957) Plasmopara viticola Virus de la peste porcina africana Reciclaje de nutrientes y fertilización Ciclo del nitrógeno Rhizobium sp. Fijación de nitrógeno Desnitrificación Nitrificación Bacillus sp. Nitrosomonas Nitrobacter Producción vegetal Micorrizas Estructuras fúngicas especializadas que se establecen en las raíces (son como extensiones de la raíz) y que se asocian con éstas ayudando a la absorción de nutrientes y protegiéndolas contra los patógenos. Producción animal Microbiota del rumen Los microorganismos presentes en el rumen convierten los nutrientes ingeridos por el rumiante (hierba y cereales) no solo en la fuente de energía que la vaca precisa sino también en la importante cantidad de biomasa microbiana que se erige en la fuente principal de nutrientes para el animal. Microorganismos como soporte de la vida en chimeneas hidrotermales submarinas Rymicaris hibysae (camarón pálido de Islas Caimán, capaz de vivir en zonas con 400 ºC de temperatura) Bathymodiolus thermophilus (mejillón gigante, hasta 20 cm.) En las inmediaciones de las chimeneas hidrotermales submarinas se descubren ecosistemas sorprendentes, con comunidades densas y florecientes de invertebrados (almejas y mejillones gigantes -20 a 25 cm-; gusanos tubulares de hasta 2,5 m; camarones, etc.) sustentadas por la actividad de microorganismos quimiolitoautótrofos. Thiovulum spp., bacteria sulfooxidante Rifita pachyptila (gusano pluma de mar, hasta 2,7 m.) El gusano pluma de mar es un gusano tubícola, carente de boca y ano, que sustituye su aparato digestivo por un tejido esponjoso (llamado trofosoma) cargado de gránulos de azufre y de bacterias sulfooxidantes. Éstas bacterias quimiolitotrofas suministran al gusano los compuestos orgánicos y la energía que precisa para vivir. Algo similar ocurre en almejas y mejillones, aunque en ellos las bacterias colonizan sus branquias. Alimentación Descomposición de alimentos Infecciones e intoxicaciones alimentarias Alimentos fermentados Conservación de alimentos Fuente de carbono y energía Aditivos alimentarios Descomposición de alimentos Desde la perspectiva de su resistencia al ataque microbiano, los alimentos se separan en varias categorías, a saber: Muy perecederos Perecederos. Poco perecederos. Resistentes o imperecederos Intoxicaciones e infecciones alimentarias Brucelosis –Fiebre de Malta(queso de cabra no pasteurizado) Salmonelosis Intoxicación con toxinas fitoplanctónicas Alimentos fermentados Bebidas alcohólicas Derivados lácteos Lactobacillus delbrueckii subespecie bulgaricus Vino Saccharomyces cerevisiae Zymomonas mobilis Streptococcus salivarius subespecie thermophilus Conservación de alimentos Pediococcus cerevisiae Cerveza Lactobacillus plantarum Encurtidos (fermentación láctica) Pulque Microorganismos: fuentes de proteínas, vitaminas, etc. Levaduras (SCP, Single Cell Proteins) Levaduras comestibles Levaduras pienso Extracto de levadura, subproducto del proceso de elaboración de la cerveza. Aporta vitaminas B (B1, B2, B3, B9 y B12) y proteínas. Microorganismos y aditivos alimentarios Aspartamo (E951) A B Éster metílico de ácido aspártico y fenilalanina (aminoácidos obtenidos industrialmente a partir de dos bacterias: Corynebacterium glutamicum –A- y Brevibacterium linens –B-). Edulcorante artificial (E 951). Aspartamo E-951 Fenilcetonuria Energía/Medio ambiente Condiciones atmosféricas Biocombustibles y recuperación de ellos Elaboración de compost Bioinsecticidas y plástico biodegradable Extracción microbiana de minerales Biorremediación Biodeterioro Contaminación ácida Condiciones atmosféricas Pseudomonas syringae Desarrollo de nubes y precipitaciones Sensibilidad de las plantas frente a las heladas (cepa ICE plus de Pseudomonas syringae: cepa silvestre productora de una proteína de superficie, llamada “ina” –acrónimo del inglés “Ice nucleation-active”-, que permite actuar a esta bacteria como centro de nucleación para los cristales de hielo: normalmente, el agua pura, como la del rocío, puede enfriarse hasta –4 ºC y permanecer líquida, pero en presencia de “ina” se forma hielo justamente en el punto de congelación del agua) y protección frente a las mismas (cepa ICE minus de P. syringae: su incapacidad para producir “ina”, hace descender hasta -7 a -9 ºC la temperatura de formación de cristales en las plantas donde prolifera). Producción de nieve artificial La lluvia ácida (pH 3,5-4 vs. 5,6) Control bacteriano de sus efectos Eliminar el azufre de los combustibles fósiles Acidithiobacillus sp. Protección de las obras de arte en piedra caliza y mármol Myxococcus xanthus Biocombustibles vs. agrocombustibles Bioetanol Biometanol n-Butanol Hidrógeno Metano Biodiésel Zymomonas mobilis Las algas son los organismos fotótrofos más indicados para la producción de biocombustibles. Su utilización para la fabricación de bioetanol y biodiesel podría presentar varias ventajas en comparación con el resto de materias primas utilizadas para elaborar agrocombustibles, a saber: Son los eucariotas fotótrofos con el crecimiento más rápido (se descubren especies capaces de cuadruplicar su biomasa en un solo día). Aunque, como cualquier planta, no necesitan mucho más que agua, luz solar y CO2 para crecer, el rendimiento de la producción de biocombustibles por las algas es mucho más alto que el de las plantas. Es posible cultivarlas durante todo el año. El cultivo de algas, al no requerir ni tierras arables ni agua limpia (las algas crecen hasta en aguas negras y agua del mar), no va a competir por dichos recursos con los cultivos alimenticios. Cultivo de algas (sus féculas y aceites son una fuente de bioetanol y biodiésel) Recuperación de combustibles fósiles Xantano, producido por Xanthomonas campestris, usado en la extracción de petróleo. Microorganismos al rescate de problemas medioambientales Compostaje Residuos orgánicos frescos Reducción de volumen y peso 100% 50% 100 Kg 60 Kg 0 meses 3 meses 40% 50 Kg 6 meses Compost 30-35% Microorganismos aerobios y mesófilos (bacterias, levaduras y mohos). 30-40 Kg Microorganismos termófilos (bacterias del grupo actinomicetos y hongos basidiomicetos). 9 meses Los insecticidas biológicos como alternativa a los plaguicidas Taladro del maiz (oruga de Ostrinia nubilalis) e insecticida Bt® (esporas de la bacteria Bacillus thuringiensis). Polilla del manzano y Granulopom® (Granulovirus de Cydia pomonella). Picudo rojo de las palmeras (Rhynchoforus ferruginosus) y Boverol-Garden (hongo ascomiceto entomopatógeno Beauveria bassiana). Plásticos contaminantes: los ecosistemas en peligro En mayo de 2015, cada español gastábamos unas 100 bolsas de plástico anuales -frente a las 300 unidades de 2007-, una reducción drástica de casi el 60 % que aproxima al país a los objetivos de la directiva europea aprobada por la Eurocámara el 28 de abril de 2015, y que establece como objetivo principal un consumo de 90 unidades por habitante en 2019 y de 40 en 2026, lo que supone rebajar el actual consumo de las bolsas de plástico ligeras (bolsas de menos de 50 µm de espesor). Plástico ecológico: Polímeros sintéticos vs. polímeros microbianos biodegradables Los plásticos son “materiales sintéticos” obtenidos a partir de compuestos orgánicos derivados del petróleo y otras sustancias naturales, mediante fenómenos de polimerización de los átomos de carbono en las largas cadenas moleculares. Bacterias que acumulan PHA Copolímero poli-β-hidroxivalerato (PHV) /poli-β-hidroxibutirato (PHB) Bacillus megaterium uyuni S29 Ralstonia eutropha Estructura monomérica de polímeros sintéticos comunes En 2013, en uno de los llamados "ojos de agua" del salar de Uyuni (sur de Bolivia) se aisló una nueva cepa del Bacillus megaterium, bautizada como B. megaterium uyuni S29. Resultó ser especialmente prolífica en la formación de polímeros de poli-β-hidroxialcanoato –PHA(en condiciones extremas, tanto de temperatura, de presión o concentración de sal, ciertas bacterias –ver Tabla- sintetizan cantidades importantes de PHAs) de propiedades térmicas que los hacen más fácilmente procesables que los producidos por otras bacterias. Biolixiviación: minería microbiana (biohidrometalurgia) Acidithiobacillus ferrooxidans, una bacteria quimiolitótrofa, que obtiene su energía de la oxidación de sulfuros metálicos (MS) y del hierro ferroso (Fe+2) Lixiviación indirecta FeS2 + 3,5O2 + H2O FeSO4 + H2SO4 2FeSO4 + 0,5H2 + H2SO4 CuFeS2 + 2Fe2(SO4)3 2S0 + 3O2 + 2H2O Fe2(SO4)3 + H2O CuSO4 + 5FeSO4 + 2S0 2H2SO4 Lixiviación directa MS + 2O2 MSO4 2FeS2 + 3O2 + 2H2O 2H2SO4 + 2 S2- + 2Fe2+ Sulfolobus solfataricus, una arquea hipertermófila metabólicamente similar a A. ferrooxidans, responsable de la biolixiviación a alta temperatura de las menas de hierro y de cobre Drenaje ácido de minas de carbón Biorremediación Biodegradación microbiana que permite a los ecosistemas contaminados retornar a su estado inicial. También se conoce como “biorreparación” o “saneamiento biológico”. Balsa de Bolidén (Aznalcóllar, Sevilla) Burkholderia cepacia En la madrugada del 25 de abril de 1988 la rotura de la presa liberó casi 6 millones de m3 de residuos tóxicos, afectando un área de unos 62 km2 del Parque Nacional de Doñana (Huelva). Exxon Valdez El accidente se produjo el 24 de Marzo de 1989. Derrame de millón y medio de barriles de crudo (37.000 toneladas de hidrocarburo). Afectó a las costas de Alaska, causando una marea negra en más de 2.000 km de costa. Biodeterioro Proceso de destrucción de un material por organismos vivos o por productos de su metabolismo. Corrosión de estructuras metálicas Degradación del hormigón Acidithiobacillus thiooxidans Desulfovibrio desulfuricans Obras de arte Degradación de combustibles fósiles Amorphoteca resinae (Hormoconis resinae) Methanococcus maripaludis Biotecnología Organismos modificados genéticamente (OMGs) Proteínas recombinantes Genomas recombinantes Microbiología Industrial y Biotecnología Los procesos de utilización industrial de los microorganismos por los humanos, inicialmente basados en ensayos y errores, y más tarde desarrollados en tecnologías, se denominan colectivamente “Microbiología Industrial”. El desarrollo de la Ingeniería Genética a finales de los años 1970 marca la aparición de la Biotecnología, ciencia que integra conocimientos de otras disciplinas -Microbiología, Bioquímica, Genética, etc.con el objetivo de “optimar el empleo de seres vivos para obtener productos útiles”. Según dónde se aplica, se habla de: Medicina Industria Agricultura Marina/Dulceacuícola Ingeniería Genética y tecnología del ADN recombinante ADN bc vírico Extracción del ARN del virus Paul Berg (1926) ARN Aislamiento del gen vírico de interés e introducción en el plásmido Transcriptasa inversa Vector de clonación Endonucleasa de restricción + Plásmido de levadura Aparición de inmunidad frente al virus David Baltimore (1938) ADN ligasa Integración del plásmido híbrido en el núcleo de una célula de levadura Werner Arber (1929) Vector de expresión La levadura fabrica la proteína víricas con poder inmunogénico Howard M. Temin (1934-1994) Inyección de las proteínas víricas en un chimpancé Hamilton O. Smith (1931) Tecnología del ADN recombinante y biotecnología La tecnología del ADN recombinante ha abierto áreas totalmente nuevas de investi-ación y de Biología aplicada, y constituye una parte esencial de la Biotecnología, que en la actualidad se encuentra en fase de rápido crecimiento y desarrollo. La promesa que ofrece la Biotecnología para la Biología básica, la Medicina y la Salud, la Agricultura y la Industria en general, es enorme. Ha permitido utilizar microorganismos, plantas y animales transgénicos, como biorreactores para producir fármacos, antígenos vacunales, grasas buenas, u otros productos de utilidad. Ha posibilitado la clonación de animales. Dolly (1996-2003) y su creador Ian Wilmut (Roslin Institute, Edimburgo, Escocia) Ha permitido la secuenciación completa del genoma humano (Febrero, 2001) y, con ella, la posibilidad de conocer la base molecular de ciertos comportamientos humanos, de la longevidad, de enfermedades y malformaciones, etc. Organismos remodelados genéticamente Sitio de clonación múltiple (lugar de inserción del transgen de interés) Se denomina organismo modificado genéticamente (OMG) Promotor a “cualquier ser vivo cuyo material genético ha sido modi- del gen de ficado mediante técnicas de Ingeniería Genética”. Según la interés modificación genética experimentada se establecen 3 tipos de OMGs, a saber: los “transgénicos”, que expresan genes que pertenecen a otra u otras especies distantes y no compatibles sexualmente; los “cisgénicos”, que albergan en su genoma genes provenientes de especies relacionadas y sexualmente compatibles, y los “intragénicos”, sin portar genes extraños en su genoma, muestran modificado o suprimido el paOrigen de trón de expresión de alguno o varios de sus genes. replicación Entre las aplicaciones de los OMGs figuran: autónomo La posibilidad de estudiar a nivel molecular el desarrollo embrionario y su regulación. Estudiar la función de genes específicos. Manipular de forma específica la expresión génica in vivo para incrementar la síntesis de determinada proteína. Su uso como centros de producción de proteínas humanas. Resistencia a infecciones, herbicidas, metales pesados, etc. Tratamiento del cáncer (viroterapia). Alimentos saludables y/o más nutritivos. Vacunas comestibles. La corrección de errores innatos de metabolismo mediante terapia génica. Donación de órganos para xenotrasplantes. Perpetuación de especies amenazadas con extinguirse. Promotor del gen de selección Vector de clonación Gen de selección Obtención en horticultura de variedades coloreadas imposibles de lograr mediante cruzamiento o hibridación Tomate azul (gen de la antocianina, del arándano azul). Inst. Biología Molecular y Celular de Plantas de Valencia, 2006 Rosa azul (gen de la delfidina de la petunia y gen silenciador de la cianidina, responsable del color rojo natural de Rosa gallica), Florigene, 2004 Fresa azul (resistente al frío, expresa el gen AFP de la platija del Atlántico –Liopsetta glacialis-,). Universidad de Cornell (Ithaca, Nueva York). Marzo de 2012 ¿Transgénesis o ficción? El 8 de Octubre del 2008 los estadounidenses Roger Y. Tsien y Martin Chalfie, junto al japonés Osamu Shimomura, recibieron el Nobel de Química 2008 por descubrir y desarrollar la GFP, un marcador hoy día indispensable para la Biología y la La medusa Aequorea victoria, Medicina modernas. frecuente en las costas occidentales de Norteamérica, porta en su genoma el gen de la “proteína verde fluorescente” (GFP, siglas del inglés “Green Fluorescent Protein”): esta proteína convierte en verdes los flashes de luz azul emitidos por la fotoproteína “aequaorina”, valiéndose de ellos, la medusa emite bioluminiscencia verde-azulada en la oscuridad. Albert Einstein Los microorganismos son imprescindibles para nuestra salud y la salud del Planeta