Cómo buscar bioherbicidas para la A i lt Agricultura Ecológica: E ló i del laboratorio al campo del laboratorio al campo Carolina G. Puig*, Lorena Álvarez‐Iglesias, Pablo Souza, Manuel J. Reigosa, Nuria Pedrol cgpuig@uvigo.es Departamento de Bioloxía Vexetal e Ciencia do Solo, Facultade de Bioloxía Introducción REGLAMENTO (CE) N° 834/2007 DEL CONSEJO DE LA UNIÓN EUROPEA Métodos de control de malas hierbas: CULTURALES FÍSICOS BIOLÓGICOS Alelopatía (Rice, 1984). Es el efecto directo o indirecto positivo o Es el efecto directo o indirecto, positivo o negativo, mediado o no por microorganismos, que ejerce una planta sobre otra a través de la liberación de sustancias químicas en su entorno. liberación de sustancias químicas en su entorno. Introducción Objetivo Realizar una prospección de la diversidad vegetal cuyos metabolitos secundarios y potencial fitotóxico secundarios y potencial fitotóxico aún no hayan sido estudiados, para y p encontrar extractos y compuestos naturales que pudiesen actuar como t l di t bioherbicidas ambientalmente ambientalmente correctos. Metodología Campo Invernadero In vitro Metodología Por dónde empezar… Plantas utilizadas tradicionalmente en climas similares pero no se dispone de p p referencias bibliográficas. Sp. silvestres emparentadas taxonómicamente con cultivos alelopáticos ricos en aleloquímicos fitotóxicos. cultivos alelopáticos ricos en aleloquímicos fitotóxicos Sp. de las que se han aislado aleloquímicos que no reproducen su capacidad alelopática observada en el campo su capacidad alelopática observada en el campo. Sp. silvestres o cultivadas destinadas a fines medicinales con propiedades “ icidas” pero no evaluadas como bioherbicidas “‐icidas”, pero no evaluadas como bioherbicidas. Sp. p invasivas cuya actividad radica en la liberación al medio de metabolitos y secundarios. Ensayos in vitro 1 g peso seco : 15 mL agua destilada (0,66 g ps/mL) 24 horas en oscuridad Lactuca sativa L. cv. Grandes Lagos Agrostis stolonifera L. cv. Pencross Dayan et al. 2000 Ensayos in vitro Zea mays 120 a Gt (% r. c.) 100 Amaranthus retroflexus 120 Equation 3 a a a 80 a a a 60 IC 50 40 40 c 20 20 40 150 120 60 80 Met. bc IC 80 a a 90 20 20 b 60 40 b 80 Met. 20 40 150 Met. 80 60 a a 120 90 ab b c d d 20 40 a 0 a 20 40 60 Met. 80 Aqueous extract concentration g dw L-1 d d 20 40 80 Met. a a b 90 b 60 Equation 11 120 a a a 60 c c 30 0 0 cd 150 ab 90 0 80 Met. 60 Equation 8 30 30 bc 30 0 0 60 60 80 Met. a 60 cd 120 ab 60 b bc 150 Equation 5 40 90 b 0 0 20 Equation 10 120 30 0 0 150 a 60 30 60 Equation 7 90 ab b 0 0 120 a Equation 9 40 d 150 Equation 4 a 60 0 20 a a a a 80 b 60 0 Radicle length (% r.. c.) R 100 80 0 Shoot length (% % r. c.) Equation 6 a 100 Echinochloa crus-galli 120 0 0 Met. 20 40 60 80 Aqueous extract concentration g dw L-1 0 Met. 20 40 60 80 Aqueous extract concentration g dw L-1 Ensayos in vitro 0 % 10 % 25 % 50 % 100 % Ensayos de invernadero Ensayo 1. Efecto sobre el establecimiento de un cultivo infestado de malas hierbas (Puig et al. 2013) Filodios de eucalipto Pajitas de plástico (Wuest et al., 2000) [IC50 e IC80] Eucalipto Control 5 L 4 kg suelo agrícola Patent PK [12 % P2O5, 15 % K2O, y 5 % MgO] = 800 kg ha ‐1 NO C l i NO Nit ó NO Calcio, NO Nitrógeno 3 x Ensayo 1. Efecto sobre el establecimiento de un cultivo infestado de malas hierbas (Puig et al. 2013) Flora arvense: Densidad = 6 g m‐2 (Dhima et al., 2009). Cultivo: 5 granos/maceta Amaranthus retroflexus L. (bledo) Zea mays L. cv. Anjou 387 (maíz) Solanum nigrum L. (hierba mora) Dicotiledóneas Portulaca oleracea L. (verdolaga) Echinochloa crus‐galli L. (cola de caballo) Di it i sanguinalis Digitaria i li (L.) Scop. (pata de gallina) (L ) S ( t d lli ) Monocotiledóneas 30 DÍAS TRAS LA INCORPORACIÓN DEL Ó EUCALIPTO Parámetros: Nº de plántulas emergidas Biomasa aérea en peso seco Biomasa aérea en peso seco Rendimiento (%) = pH y CE del suelo pH y CE del suelo Bio aérea maíz Bio aérea maíz + bio aérea malas hierbas X 100 Ensayo 1. Efecto sobre el establecimiento de un cultivo infestado de malas hierbas (Puig et al. 2013) EUCALIPTO CONTROL Ensayo 2. Duración y dinámica de la fitotoxicidad del abono verde (Puig et al. 2013) 0 Días T1 T 1 3 Días 30 Días T2 T 2 T 10 T 10 . . . . 10 días 10 días 10 días Parámetros: ‐ Germinación total ‐Longitud de parte aérea y raíz principal de maíz ‐ Altura de las plántulas de flora arvense ‐ Biomasa seca Ensayo 2. Duración y dinámica de la fitotoxicidad del abono verde 24 Días 6 Días Control Eucalipto Control Control Eucalipto Eucalipto Campo Ensayos de campo Dosis Formas Momentos de incorporación p Ensayos de campo Se describen los efectos sobre la diversidad y abundancia de la flora arvense y sobre parámetros agronómicos del cultivo. Conclusiones 9La combinación de ensayos in vitro con experimentos de maceta sobre los efectos fitotóxicos de una especie vegetal, es muy útil para valorar su uso potencial para el control de malas hierbas en el campo. 9Se establece una metodología adecuada de bioensayos de invernadero en maceta para el estudio del potencial bioherbicida de cultivos y plantas silvestres. yp 9La Alelopatía representa una alternativa real a los h bi id d í t i herbicidas de síntesis, como herramientas complementarias a h i t l t i otras prácticas ecológicas para una producción agrícola de calidad sostenible saludable y respetuosa con el medio calidad, sostenible, saludable, y respetuosa con el medio ambiente.