2ª CONFERENCIA NACIONAL DEL PROGRAMA MEXICANO DE SANIDAD DE MOLUSCOS BIVALVOS 9 al 11 de marzo de 2016 San José del Cabo, B.C. S. Retos para el monitoreo de las comunidades fitoplanctónicas: hacia la estandarización de métodos Dra. Christine Band-Schmidt- IPN-CICIMAR Dra. Mary Carmen Ruiz de la Torre – FCM, UABC 10 de marzo de 2016 Sugerencias al ¨LINEAMIENTO DE TRABAJO PARA EL MUESTREO DE FITOPLANCTON Y DETECCIÓN DE BIOTOXINAS MARINAS¨ de la COFEPRIS como parte de los acuerdos de la 1a Conferencia Nacional del PMSMB en el 2014. (COS-DEPE-P-01-PO1-05-L-01) 2 Aspectos nocivos e impactos de los FAN TÓXICOS Producción de metabolitos nocivos NO TÓXICOS Mecánicos y biológicos Déficit de oxígeno Obstrucción de branquias Atenuación de la luz Síndromes de intoxicación Diatomeas ASP Dinoflagelados PSP NSP CFP DSP Intoxicación paralizante por consumo de mariscos – Saxitoxina Intoxicación amnésica por consumo de mariscos – Acido domoico Intoxicación diarreica por consumo de mariscos – Acido okadaico 3 Programa de monitoreo y alerta temprana Objetivos académicos de un programa de monitoreo: Establecer conocimiento básico sobre la estructura y función del ecosistema. Conocer de forma detallada la respuesta de los diversos ecosistemas a la eutroficación o eventos físicos y biológicos. Establecer patrones y tendencias de las poblaciones fitoplanctónicas. • Prevenir la intoxicación por el consumo de moluscos bivalvos –SALUD- • Minimizar los daños de los recursos vivos –AMBIENTE- • Minimizar pérdidas en la industria acuícola, de pescadores, industria turística – ECONÓMICO- Salud Ambiente Socioeconómica 4 LINEAMIENTO DE TRABAJO PARA EL MUESTREO DE FITOPLANCTON Y DETECCIÓN DE BIOTOXINAS MARINAS COS-DEPE-PO1-05-L-01 5 6.4 Implementación de las técnicas de muestreo * Se requiere un orden en los procedimientos y descripción del tipo de muestra. Análisis cualitativo Análisis cuantitativo Toma de la muestra Lectura de la muestra Análisis de la muestra Red de fitoplancton con luz de malla de 20 micras. Botella muestradora a profundidades específicas. Estimar abundancias relativas (%) de las especies. Deberán estimarse después de realizar un conteo en cámaras de Uthermöl o de SedgwickRafter. Cuantificación e identificación (cel/L) de especies en cámara de Uthermöl o Sedgwick-Rafter. Los laboratorios que realicen una evaluación cualitativa y cuantitativa deben de contar con personal capacitado en taxonomía de fitoplancton. 6 Red No da información cuantitativa (es selectivo (tamaño de malla), volumen de agua filtrada incierta) No da información de distribución vertical de las especies. La información es CUALITATIVA: presencia/ausencia, % relativa. Da información de especies poco abundantes. No es útil con especies delicadas. Botellas muestreadoras Da información CUALITATIVA (cel/ml). Información de distribución vertical. Bajo costo. No da información de especies poco abundantes. 7.1 Observaciones cualitativas in situ de fitoplancton 7.1.2. Procedimiento para la toma de muestra de agua con red y determinación in situ. Capilar plano - Método impreciso que solo proporcionará una idea de las especies presentes. No se recomienda su uso. No se debe clasificar la abundancia de las especies en muchas, pocas o escasas. Determinar su abundancia relativa (%). No es posible revisar muestras en campo ya que se requiere de una superficie nivelada, solo se puede tener un análisis cualitativo en el laboratorio en caso de un FAN, pero no durante un monitoreo normal. 8 7.2 Muestreo de agua de mar para análisis cuantitativo de fitoplancton con cámaras Sedgewick-Rafter. Para análisis cuantitativos se requiere la toma de muestras con botella oceanográfica (Niskin, Van Dorn, etc.). El tubo o manguera muestreadora sólo se recomienda para lugares con poca turbulencia. Es preferible usar una botella. Dependiendo de la abundancia y del tamaño de los organismos los conteos y la identificación se deberá hacer con cámaras de SedgewickRafter (de 50 a 500 µm) o de Uthermöl (de 2 a 500 µm). Si el tamaño del organismo lo permite el conteo con cámaras de Sedgewick-Rafter debe hacerse para muestras que provengan de un evento de FAN, no durante un monitoreo rutinario. 9 7.2.4 Análisis cuantitativo de fitoplancton a través del Método Utermöhl. El análisis por Uthermöhl debe hacerse para muestras de agua tomadas con botella (Niskin) de cierta profundidad. Un monitoreo de rutina debe de realizarse con el método Uthermöhl y reportarse ya sea como abundancia relativa en porcentaje o como células por ml. 10 9. Límites máximos permisibles máximos de fitoplancton toxico y biotoxinas marinas Tabla 2 Yesotoxinas Azaspirácidos no son toxinas diarreicas, son toxinas lipofílicas. 11 9.2 Limites permisibles máximos permisibles de fitoplancton toxico en agua de mar Tabla 3. Cel/L Alexandrium spp 1000 Pyrodinium bahamense var. compressum 5000 Gymnodinium catenatum 5000 Dinophysis sp. 200 Prorocentrum lima, P. concavum 200 Pseudonitzschia spp Karenia brevis 50,000 5000 Una veda sanitaria no puede establecerse en base al número de células de una especie. La abundancia no tiene una relación lineal con la cantidad de toxinas en moluscos. Al presentarse una especie toxica se debe hacer el seguimiento. Faltan especies: Chattonella sp., Fibrocapsa japonica, Cochlodinium sp., P. lima, Gambierdiscus sp., Coolia sp.,cianobacterias. 12 Se sugiere hacer una lista de especies por regiones geográficas del país. Observación de muestras vivas Chattonella sp. Fibrocapsa japonica 13 Monitoreo de las comunidades fitoplanctónicas RUTINA • Ausencia de fitoplancton nocivo. • Ausencia de ficotoxinas en tejidos de organismos marinos. VIGILANCIA • Parámetros ambientales (temperatura, nutrientes, pigmentos (imágenes de satélite). • Toxinas presentes por debajo de los límites regulatorios. • Presencia de especies de fitoplancton nocivos. ALERTA • Toxinas presentes por arriba de los límites de regulación. • Comportamiento de la vida silvestre que indique síntomas de intoxicación. 14 Monitoreo de las comunidades fitoplanctónicas MONITOREO DE RUTINA MONITOREO DE VIGILANCIA Cuantitivas • Toma directa o con botella oceanográfica. • Vigilar cambios en la temperatura del agua u otras variables locales. • Conteo por técnica de Uthermöhl. • Toma directa o con botella oceanográfica. Cualitativas • Arrastre verticales y circulares por lo menos 5 • Arrastre verticales y circulares por lo minutos con red de 20 micras. menos 5 minutos con red de 20 micras. • Técnica Uthermöhl para conteo. • Abundancia relativa (técnica de Uthermöhl). MONITOREO DURANTE UN FAN • Conteo mediante técnica de Uthermöhl o con la cámara de Sedgwick-Rafter (si el tamaño del organismo lo permite). • Identificación taxonómica por personal capacitado. • Cuantificación de toxinas. 15 Recomendaciones DATOS ADICIONALES Para un monitoreo preciso es necesario que cada productor reporte las condiciones presentes cuando se tomó la muestra. Punto de muestreo Temperatura del agua Salinidad Nubosidad Oleaje Otros MANEJO DE LA MUESTRA - Tomar muestras correctamente. - Fijar la muestra con suficiente lugol. - Etiquetar muestra con toda la información (lugar, fecha, profundidad). - Transportar en oscuridad y a temperatura ambiente o en fresco (SIN CONGELAR). 16 Academia • Necesitamos llevar a cabo estudios multiparámetricos, a multiescala y Sector productivo multidisciplinarios. Autoridades sanitarias Sociedad • Determinar los factores que determinan la ocurrencia de FAN. 17 Manejo de la Información Muestras MUESTREO - Fitoplancton - Moluscos bivalvos - Parámetros ambientales Pescadores Autoridades Consultores Análisis de muestras - Identificación y cuantificación de muestras de fitoplancton. - Mediciones de toxicidad Pescadores Autoridades Consultores Datos Evaluación de resultados Comunicación de la información Planes de acción / Medidas de mitigación Autoridades y consultores Industria pesquera Acuacultores Autoridades Público general 18 RECOMENDACIONES ADICIONALES - Evitar la traducción literal cualificación, implantación). del ingles (Ejemplo: Veneno, - Especificar y dar la referencia de las pruebas rápidas de toxinas. - Los métodos deben poder adaptarse a diferentes regiones geográficas del país. - Generar una ruta crítica para la toma de muestras de rutina, durante un monitoreo, una alerta temprana y durante la presencia de un FAN. - Actualizar referencias bibliográficas. 19 MESA DIRECTIVA Dra. Mary Carmen Ruiz de la Torre-Presidenta mary.ruiz@uabc.edu.mx Dra. Christine Band-Schmidt-Tesorera Dra. Ivonne Sandra Santiago Morales-Vicepresidenta Dr. Carlos Poot Delgado-Secretario Vocales Dr. José Jesús Bustillos Guzmán Dr. José Antolín Aké Castillo Dra. María Esther Meave del Castillo Dr. Aramis Olivos Ortíz 20 21 Recomendaciones Durante monitoreo de rutina y un FAN Muestras de botella (Niskin), u otra botella. ANÁLISIS CUANTITATIVO UTHERMöHL Muestras de red Observadas en Cámaras Uthermöhl, diferentes volúmenes y tiempo de sedimentación Reportar cel/ml. 22 ¿Por qué es importante llevar a cabo un monitoreo fitoplanctónico y quienes están involucrados? Evitar efectos negativos a la salud pública (AUTORIDADES DE SALUD) Minimizar perdidas en las actividades económicas costeras (PRODUCTORES, SECTOR TURISMO) Establecer un conocimiento básico sobre la función del ecosistema (ACADEMIA) 23 Recomendaciones Durante la presencia de un FAN Muestras de red ANÁLISIS CUALITATIVO Muestras de red Observadas en SedgwickRafter Reportar % de abundancia relativa de especies. Actual formato 24 7.1 Cualificación in situ de fitoplancton – Bajo que condiciones 7.1.1. Material y equipo necesario para la cualificación CUALITATIVO in situ de fitoplancton. Especificar el tipo de red desde el inicio (tamaño de luz de malla) 20 micras. 25