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ESTANDARIZACIÓN DE LA PRUEBA DE ENSAYO INMUNOENZIMÁTICO PARA
LA DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IGG EN SUEROS DE HUMANOS PARA EL
VIRUS PHLEBOTOMUS FEVER. Cruz Malpica, Cristhopher Donat's
Tesis UNMSM
I. SUMMARY
The Phlebotomus fever virus is an arbovirus transmitted to humans by the
bits of hematofagous flies with limited flight range, which belong to the genus
Phlebotomus, Sergentomyia and Lutzomyia. The human infection mainly occurs
among people who work and live in the jungle.
An inmunoenzimatic indirect assay (ELISA) was standardized in this
thesis to detect antibodies IgG against the virus in human serum. This test was
applied to determine the antibody seroprevalence against this virus in people
coming from Iquitos. The positive case confirmation was performed using the
Plaque Reduction for Neutralization Test (PRNT).
The ELISA test was performed in four stages: the antigen fixation,
reaction to the serum, addition to the conjugate and reaction to the substrate.
During the antigen production, the cell line Vero E-6 was used, obtaining a work
dilution of 1:1500. The conjugated used is a purified antibody peroxidase labeled
goat antihuman IgG, obtaining a work dilution of 1:8000.
Using the ELISA test, 400 sera from Iquitos were tested, resulting with a
seroprevalence of 16.25%. When confirming the results with the PRNT trial, the
ELISA test showed a specificity of 83.02% and a sensitivity of 98.24%.
I concluded that the ELISA test developed for the Phlebotomus fever virus is
applicable to perform prevalence studies.
Key words: Phlebotomus fever, ELISA, PRNT.
Elaboración y diseño en formato Pdf, por la Oficina General de Sistema de Bibliotecas y Biblioteca
Central.
ESTANDARIZACIÓN DE LA PRUEBA DE ENSAYO INMUNOENZIMÁTICO PARA
LA DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IGG EN SUEROS DE HUMANOS PARA EL
VIRUS PHLEBOTOMUS FEVER. Cruz Malpica, Cristhopher Donat's
Tesis UNMSM
I.
RESUMEN
El virus Phlebotomus fever es un arbovirus cuya transmisión al hombre
ocurre por la picadura de moscas hematófagas de vuelo limitado, pertenecientes a
los géneros Phlebotomus, Sergentomyia y Lutzomyia. La infección en humanos
ocurre principalmente en personas que trabajan o viven en la selva.
En el presente trabajo se estandarizó una prueba inmunoenzimática
indirecta (ELISA) para detectar anticuerpos IgG contra el virus en sueros
humanos. También se aplicó esta prueba en la determinación de la
seroprevalencia de anticuerpos contra dicho virus en personas procedentes de
Iquitos. La confirmación de los casos positivos se realizó mediante la Prueba de
Neutralización por Reducción de Placa (PRNT).
El ELISA se realizó en cuatro pasos: fijación del antígeno, reacción con el
suero, adición del conjugado y reacción con el sustrato. En la producción del
antígeno se utilizó la línea celular Vero E-6, siendo la dilución de trabajo 1:1500.
El conjugado utilizado es un Anti IgG humano de cabra purificado y marcado con
peroxidasa, siendo su dilución de trabajo 1:8 000.
Se analizó con la prueba de ELISA 400 sueros procedentes de Iquitos,
encontrándose una seroprevalencia de 16.25%. Al confirmar los resultados con la
prueba de PRNT, el ELISA obtuvo una especificidad de 83.02% y una
sensibilidad de 98.24%. ELISA desarrollado para el virus Phlebotomus fever es
aplicable para realizar estudios de prevalencia.
Palabras claves: Phlebotomus fever, ELISA, PRNT.
Elaboración y diseño en formato Pdf, por la Oficina General de Sistema de Bibliotecas y Biblioteca
Central.