DILUCIONES SERIADAS Nombre del alumno (a): Introducción: Una

DILUCIONES SERIADAS
Nombre del alumno (a):
Introducción:
Una parte importante del entrenamiento que recibe el estudiante de microbiología en el manejo de los
microorganismos, lo constituye el uso adecuado del material del laboratorio, como tubos, pipetas y matraces.
Así de la habilidad adquirida en el manejo adecuado de este material, dependerá el resultado de los
experimentos realizados y su reproducibilidad.
Para el aislamiento de los microorganismos a partir de diversas muestras, se recurre al método de las diluciones
para obtener suspensiones, en las cuales la concentración de los microorganismos es inversamente proporcional
a la dilución efectuada en cada caso. En esta técnica es importante manejar la pipeta adecuadamente (ver
figura) ya que cada dilución sucesiva “amplifica” los errores previos, de modo que cualquier medición
volumétrica debe hacerse con exactitud.
Al hacer las diluciones se debe succionar y soplar fuertemente en cada tubo, por lo menos 5 veces antes de
transferir la dilución al siguiente tubo, siempre el mismo número de veces.
Al usar las pipetas siempre se debe medir el volumen desplazado desde el cero de la pipeta; lo que sobre del
líquido debe regresarse al tubo del que se tomó, soplando para eliminar la mayor cantidad de líquido de la
pipeta.
Nunca debe de tener en su mano dos tubos al mismo tiempo mientras hace las diluciones, cuando utilice tubos
con tapón, debe de quitar el tapón con el dedo meñique de la mano que sujeta la pipeta.
Cuando succione líquido de un tubo, debe hacer llegar la punta de la pipeta hasta el fondo del tubo (a menos
que el profesor indique lo contrario) y al soplar, deberá sacar la pipeta del líquido para evitar que al salir el aire
el líquido se derrame.
Cada alumno deberá hacer las diluciones sin ayuda de sus compañeros.
Objetivo:
El alumno aprenderá a utilizar en forma adecuada el material del laboratorio.
Material:
a) Por mesa:
30 ml de solución de sacarosa al 40%
3 ml de solución de azul de metileno al 1%
130 ml de solución de NaOH 0.001 M de reciente preparación
3 ml de solución de HCl 1 N
3 ml de solución de fenolftaleina al 0.01 %
Gradilla
b) Por persona:
8 tubos de 16 X 150 mm
8 tubos de 16 X 150 mm con tapón de rosca
3 pipetas de 5 ml
3 pipetas de 1 ml
Gradilla
Método:
A) Diluciones decimales en serie de la solución de azul de metileno
Tubo número
1
2
3
4
5
6
7
8
solución de sacarosa al 40%
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
solución de azul de metileno al 1%
0.5
-
-
-
-
-
-
-
-
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Tubo número (tapón de rosca)
1
2
3
4
5
6
7
8
solución de NaOH 0.001 M ml
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
4.5
solución de HCl 1 N ml
0.5
-
-
-
-
-
-
-
-
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
Volumen de transferencia
B) Diluciones decimales en serie de la solución de HCl.
Volumen de transferencia ml
solución de fenolftaleina al 0.01 % ml
Informe:
1. Diga a partir de que dilución ya no se observa el azul de metileno.
2. Diga a partir de que dilución vira la fenolftaleína.
3. Que significa una dilución 1:2, 1:9, 1:1.5, y 1:10?
4. Si usted mezcla 1 ml de soluto más 4 ml de solvente, ¿Qué dilución realizó?____________________________
Y si mezcla 0.3 ml de soluto más 2.7 ml de diluente ¿Qué dilución realizó?_______________________________.
5. Diga tres ejemplos para realizar una dilución 1:10 (variando los volúmenes de soluto y solvente).
6. Cuál es la dilución final de la siguiente serie de diluciones? 1:2, 1:5, 1:10____________________
Bibliografía: Manual de prácticas del laboratorio de microbiología general. Departamento de microbiología.
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas.