[Ide@s CONCYTEG 6(71): Mayo, 2011] ISSN: 2007-2716 Cómo citar: Riojas H. H., P. Gortáres, I. Mondaca y J. J. Balderas (2011), “Aplicación de Tween 80 y D-Limoneno en la biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos”, Ide@s CONCYTEG, 6 (71), pp. 571-584. Aplicación de Tween 80 y D-Limoneno en la biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos Héctor H. Riojas González1, Pablo Gortáres Moroyoqui2, Iram Mondaca Fernández3 y José de Jesús Balderas Cortes4 Resumen La aplicación de surfactantes y solventes en biorremediación incrementa la biodisponibilidad de hidrocarburos, lo cual mejora la eficiencia de remoción. El surfactante no iónico Tween 80 ha demostrado ser efectivo en procesos de biorremediación, siendo además biodegradable. El aceite vegetal D-Limoneno actúa en la biorremediación como un solvente natural, remueve el hidrocarburo y además puede servir como sustrato para los microorganismos degradadores. La finalidad de mezclar Tween 80 con el DLimoneno es ocasionar una sinergia de modo que se incremente el porcentaje de remoción de hidrocarburos. La presente revisión tiene por objeto describir las características de los surfactantes y solventes en la biorremediación, dándole un énfasis a los efectos que influyen en la mezcla Tween 80 con el D-Limoneno. Palabras clave: biorremediación, Tween 80, D-Limoneno, hidrocarburos 1 Estudiante de Doctorado en Ciencias en Biotecnología, Instituto Tecnológico de Sonora. Profesor/Investigador. Departamento de Biotecnología y Ciencias Alimentarias, Instituto Tecnológico de Sonora. pablo.gortares@itson.edu.mx 3 Profesor/Investigador. Departamento de Biotecnología y Ciencias Alimentarias, Instituto Tecnológico de Sonora. imondaca@itson.mx 4 Jefe del Departamento de Biotecnología y Ciencias Alimentarias, Instituto Tecnológico de Sonora; ibald@itson.mx 2 ISBN 978-607-8164-02-8 571 Aplicación de Tween 80 y D-Limoneno en la biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos Héctor H. Riojas González, Pablo Gortáres Moroyoqui, Iram Mondaca Fernández y José de Jesús Balderas Cortes Summary In bioremediation, the usage of surfactants and solvents increase the bioavailability of hydrocarbons, which ease the efficiency of remotion. The not ionic surfactant Tween 80 had demonstrated to be quite effective in bioremediation process and it’s environmental friendly and biodegradable. The vegetal oil DLimoneno acts as natural solvent in the bioremediation, although it removes the hydrocarbon and can be used as a substratum for degrading microorganisms. The main purpose of mixing Tween 80 with DLimoneno is to produce a reaction in a way the remotion of hydrocarbons’ percentaje may increase. The present review focuses in describe the surfactants and solvents characteristics in the bioremediation, giving a special attention to the effects that influence the mix of Tween 80 with D- Limoneno. Keywords: Bioremediation, Tween 80, D-Limoneno, hydrocarbons. Introducción L ambiental que ocasionen otro problema posterior al ocasionada por el petróleo y ambiente (Rittmann y McCarty, 2001; productos petroquímicos (mezclas Madigan a contaminación et 2003). al, biorremediación como uno de los más graves problemas de cuando se lleva a cabo de manera natural, la actualidad, sobre todo cuando se asocia a se los derrames accidentales a gran escala incrementarla. (Plohl y Leskovsek, 2002). Además de este alternativas tales como adición de inóculo, impacto la el compostaje (estiércol o lodos activados), contaminación con hidrocarburos genera la adición de sustancias que mejoren la impactos de tipo económico, social y de biodisponibilidad de los compuestos a salud pública en las zonas aledañas al lugar biorremediar, o incluso el uso de plantas afectado (Nadarajah et al, 2002). Por tal (fitorremediación) son algunas de las motivo, es necesario desarrollar tecnologías estrategias que se han empleado. ambiental negativo, propuesto El resultar la complejas de hidrocarburos) se reconoce han puede Aunque lenta, opciones uso de para algunas las cuales deben ser efectivas y que no supongan un alto costo de instalación y En este artículo se hace énfasis en una operación. Por lo que se propone la mezcla de un surfactante con un solvente, biorremediación, de que ha dado buenos resultados de remoción solucionar el problema se puede considerar de hidrocarburos. Esta mezcla consiste de como “amigable” al medioambiente, puesto un surfactante no iónico, Tween 80, el cual que no genera residuos intermedios (como se el caso de algunos tratamientos químicos) biorremediación y de un solvente, el D- la cual ISBN 978-607-8164-02-8 además ha aplicado con éxito en la 572 [Ide@s CONCYTEG 6(71): Mayo, 2011] Limoneno, el cual es un extracto de Entre los tratamientos de biorremediación cáscaras de naranja, que ha tenido éxito en se pueden mencionar los siguientes: productos de limpieza (Nguyen y Sabatini, 2009). Al momento de mezclarse estas dos sustancias pueden obtener una sinergia, lo cual es muy adecuado porque con ello se logra mejorar la biorremediación en su a) la bioestimulación que consiste en el incremento de las poblaciones microbianas indígenas existentes en el suelo, mediante adición de nutrientes, conjunto. regulación de condiciones redox, cambio de pH, u otras condiciones diversas sobre las que se puede influir. Tipos de técnicas de biorremediación La biorremediación b) la bioaugmentación o inoculación de microorganismos capaces de es una técnica actuar específicamente innovadora que se ha desarrollado en las determinados dos últimas décadas, y ha sido aplicada con contaminados. éxito en el tratamiento contaminados con de suelos hidrocarburos, en ambientes c) el bioventeo que consiste en el suministro de aire, con bajas caracterizándose por ser una técnica de bajo velocidades de flujo, para satisfacer costo de operación. Sin embargo, la los requerimientos de oxígeno de aplicación de este tipo de tecnología ha los encontrado cierta resistencia debido al biodegradadores. microorganismos tiempo necesario para conseguir las metas d) la biolabranza, que consiste en arar de saneamiento deseadas (Cerniglia y el suelo contaminado, con el fin de Shuttleworth, 2002). airear y homogenizar el suelo contaminado para estimular la El uso de tecnologías de biorremediación actividad microbiana, así como para el tratamiento de sitios contaminados mantener condiciones óptimas de es una opción que presenta ventajas con pH, la temperatura y aireación. respecto a métodos físicos y químicos, tales e) el compostaje que es un sistema como: a) sencillas de implementar, b) que utiliza a los microorganismos efectivas y ambientalmente seguras c) los para degradar contaminantes del contaminantes se destruyen o transforman suelo, generalmente se realiza en d) biopilas. generalmente no se requieren tratamientos adicionales, e) son económicas (80-150 USD/m3) (Bollag, 1992). ISBN 978-607-8164-02-8 f) la aplicación inmovilizadas de capaces enzimas de 573 Aplicación de Tween 80 y D-Limoneno en la biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos Héctor H. Riojas González, Pablo Gortáres Moroyoqui, Iram Mondaca Fernández y José de Jesús Balderas Cortes transformar o degradar algunos entre ellos se pueden mencionar los alquil contaminantes específicos. benceno sulfonatos (detergentes), el lauril g) la fitorremediación, que es un sulfato (espumante) y las sales de ácidos o grasos (jabones). Otros forman un ion éstas positivo en agua y se denominan catiónicos, tecnologías pueden ser aplicadas como por ejemplo el cetil trimetil amonio, tanto in situ como ex situ ya que los un agente bactericida, hidrofobante y suelos contaminados pueden ser antiestático. Los que no se ionizan en agua trasladados a espacios apropiados se llaman no iónicos. Sus grupos polares diferentes a donde se produce la están formados por funciones éter, éster, contaminación (Mishra, et al, 2001; alcohol, cetona, ácido, amina ó amida. Volké y Velasco, 2003). Entre los más comunes se pueden citar los proceso que microalgas. utiliza Muchas plantas de alquil fenol etoxilados (detergentes, dispersantes) y los copolímeros de óxido de Características de los surfactantes y solventes etileno y óxido de propileno (dispersantes) Los surfactantes son sustancias químicas La dualidad polar-apolar de las moléculas cuya molécula presenta una parte polar y de surfactantes, les confiere propiedades una parte apolar (Raiger y López, 2009). La muy particulares. Para satisfacer su doble parte apolar es una cadena hidrocarbonada afinidad, las moléculas de surfactantes se lineal o ramificada, incluyendo a veces un ubican en la interfase de tal forma que su núcleo aromático, con un número de grupo polar esté cubierto en agua y su átomos de carbono variando en general grupo apolar esté fuera del agua. Esta entre 12 y 20. Como consecuencia, la migración de las moléculas de surfactante interacción entre polar-apolar implica que en la interfase se llama adsorción. La un surfactante obtenga un grupo apolar adsorción puede deberse al grupo hidrófobo netamente más grande que su grupo polar señalado anteriormente, o a otros efectos ionizado (carboxilato, sulfanato, sulfato, como etc.) de ahí proviene que al surfactante se soluciones acuosas, los surfactantes forman esquematice a menudo con una pequeña estructuras esféricas organizadas llamadas “cabeza” polar y una larga “cola” apolar micelas, que por su naturaleza anfipática, (Salager, 1987; Rojas y Bullon, 1995). tienen Algunos se denominan aniónicos por que compuestos hidrofóbicos (Bhairi, 2001). El forman un ion negativo en solución acuosa; empleo de surfactantes se ha propuesto ISBN 978-607-8164-02-8 (Salager et al, 2007). la la atracción electroestática. capacidad de En solubilizar 574 [Ide@s CONCYTEG 6(71): Mayo, 2011] como una técnica para incrementar la producen cambios físicos en la superficie biodisponibilidad de los líquidos, ocurriendo dichos cambios de contaminantes como en la interfase entre dos líquidos, o entre un hidrocarburos totales de petróleo (HTP), líquido y un gas o sólido. Debido a los explosivos, clorofenoles, pesticidas, entre cambios otros, y así facilitar su biodegradación superficies, los surfactantes se conocen (Majer et al, 1999). como agentes con actividad superficial. Las orgánicos hidrofóbicos (HOCs) que ellos producen en las aplicaciones prácticas de los surfactantes Los surfactantes pueden ser sintetizados son debidas a su tendencia a ser absorbidos químicamente algunos en la interfase entre la solución y la fase microorganismos, en este último caso se les líquida, sólida o gaseosa adyacentes. Todos conoce Estos los surfactantes poseen la forma común de compuestos incrementan la solubilidad de un grupo soluble en agua (hidrofílico) los HOCs a través de una fase micelar adherido a una larga cadena hidrocarbonada (hidrofílica/hidrofóbica), la cual propicia la soluble en aceite (lipofílico). o como bien por biosurfactantes. desorción de los contaminantes del suelo hacia la fase líquida, lográndose así un Los incremento en la biodisponibilidad de los principalmente para solubilizar HOCs en HOCs. los suelos mediante tratamientos de lavado in contaminantes se lleva a cabo solamente situ. Esta técnica implica la inyección de cuando se forma la fase micelar, la cual se solventes, los cuales, al igual que los obtiene del surfactantes son capaces de incrementar la surfactante es superior a la concentración solubilidad de los contaminantes. Los micelar critica (CMC), es decir, arriba de la solventes empleados más comúnmente con concentración el este fin, son los alcoholes (metanol, etanol monómero del surfactante aún se mantiene y propanol), los cuales tienen la propiedad en solución (Ko et al, 2000). La CMC es de ser miscibles en agua y en la fase una la hidrofóbica de los contaminantes. Es decir, temperatura y polaridad del medio, y cuando se agregan grandes cantidades de generalmente alcohol a un suelo contaminado, crea una La solubilización cuando la concentración máxima propiedad su de a muy la cual sensible valor se a reporta a solventes se han empleado interfase entre el agua y el contaminante, temperaturas entre 20 y 25°C. incrementando de esta manera la movilidad Los surfactantes facilitan o aumentan la y la solubilidad de la fase no acuosa de los emulsividad, mojado, HOCS. Además de los alcoholes, otros distribución, adherencia, penetración y compuestos usados para desorber HOCS otras propiedades de las superficies de los son el diclorometano, acetona, tolueno, líquidos. Ellos dispersión, son compuestos ISBN 978-607-8164-02-8 que 575 Aplicación de Tween 80 y D-Limoneno en la biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos Héctor H. Riojas González, Pablo Gortáres Moroyoqui, Iram Mondaca Fernández y José de Jesús Balderas Cortes ciclohexano, N,N-dimethilformamida y altas eficiencias degradadoras, si existen factores que limiten su verdadero potencial, etilacetato (Brinch et al, 2002). uno de los principales factores es la Aunque la aplicación de los solventes biodisponibilidad del contaminante. En comúnmente ha sido para incrementar la otras palabras, si un compuesto no se solubilidad de los HOCs, existen estudios encuentra disponible para la célula, ésta no que demuestran que su adición puede lo podrá utilizar como sustrato; esto es lo incrementar la degradación de algunos que sucede con los hidrocarburos que son contaminantes hidrofóbica altamente insolubles en agua o bien, pueden (Birman y Alexander, 1996). Una de las encontrarse unidos hidrofóbicamente con claves del éxito de esta técnica es la otros sustratos. Por las razones anteriores, selección adecuada del solvente (Kueper et actualmente en el campo de investigación en la fase deben en biorremediación se han llevado a cabo considerarse para su selección son: a) esfuerzos en la búsqueda de nuevas técnicas capacidad que permitan aumentar la biodisponibilidad al, 1997); los para criterios que disolver contaminante, cantidades adecuadas del b) toxicidad en concentraciones (ausencia de carcinogenicidad), baja de los contaminantes. Los surfactantes y traza solventes son compuestos que pueden c) emplearse con este fin (Majer et al, 1999). fácilmente biodegradable, d) rutas de degradación conocidas y e) costo unitario El uso de surfactantes no iónicos, es una de (Block, 2000). las prácticas más comunes y efectivas empleadas para la desorción de compuestos orgánicos hidrofóbicos (HOCs) (Kotterman Aplicación de los surfactantes y solventes en la biorremediación et al, 1998; Ghosh, 1997). La eficiencia de desorción de un surfactante depende de su naturaleza, de la dosis empleada, de la hidrofobicidad del contaminante, de la Al hacer referencia a la biorremediación, interacción surfactante-suelo y del tiempo además de considerar las vías degradativas de contacto surfactante-suelo (Guha y la regulación de los microorganismos que Jaffé, 1996). y llevan a cabo la detoxificación de los contaminantes, también es necesario Sin embargo, la mejor eficiencia de considerar otros factores que influyen en el desorción no está siempre relacionada con rendimiento de la biorremediación. Es la mejor eficiencia de degradación, debido decir, no es suficiente adicionar cepas con principalmente a que el empleo de una alta ISBN 978-607-8164-02-8 576 [Ide@s CONCYTEG 6(71): Mayo, 2011] concentración de surfactante puede inhibir HTP de 63.8% sin surfactantes y del 90.9 % la degradación. Laha y Luthy (1992) y cuando se adicionó surfactantes (Tween Stelmack et al, (1999) demostraron que el 80). Los autores lo atribuyen a que el uso de surfactantes reduce la adhesión de surfactante las bacterias en la superficie hidrofóbica, contacto dando como resultado una baja actividad de hidrofóbico insoluble y el aumento de la biodegradación. Para solucionar este tipo de biodisponibilidad tanto del agua como de problema, investigadores las sustancias insolubles (Brinch et al, recomiendan la utilización de surfactantes 2002; Van Gestel et al, 2003; Silva et al, fácilmente biodegradables, como el Brij 30, 2009). algunos aumenta del agua la superficie con el de sustrato Brij 35 y Tween 80 (Ghosh, 1997). En el caso de la aplicación de solventes, Abiola y Olenyk (1997) determinaron que ésta ha sido básicamente empleada para el uso de surfactantes favorece la remoción incrementar la solubilidad de los HOCS de HTP en un suelo contaminado con (Catherine y Luthy, 1993). Sin embargo, se 20,000 mg/kg de suelo. Los sistemas ha observado también que el empleo de experimentales fueron biopilas estáticas solventes mejora la biodegradación de los alargadas con y sin surfactante. El grupo contaminantes observó que en las biopilas adicionadas de (Birman y Alexander, 1996). El tolueno ha surfactante, sido uno de los solventes más empleados se biodegradación lograba de una mayor hidrocarburos. en la fase hidrofóbica De con este fin, teniendo entre sus principales acuerdo con Singh-Cameotra y Bollag características que es un excelente solvente (2003), los surfactantes son eficaces en de reducir la interfase del petróleo y también (Fenistein et al, 1998). Sin embargo, este pueden reducir la viscosidad del aceite. tipo de compuesto resulta extremadamente compuestos polares y asfaltenos tóxico, por lo que un punto crítico para el En los tratamientos asistidos con uso del tolueno es precisamente la surfactantes y sin ellos, presentan una tolerancia de los microorganismos. Aunque diferencia mayor en bajas concentraciones, hay lo cual ratifica la necesidad del suministro tolueno, éstos no son inmunes a su efecto de agentes de superficie esenciales para tóxico y son sensibles a su presencia, sin lograr una adecuada biodisponibilidad (Tsai embargo, son capaces de recuperarse et al, 2009). Del mismo modo, Helmy et al. (Huertas et al, 1998). (2009) reportan una mejora en microorganismos degradadores de la biodegradación después de 105 días de García et al, (2002) demostraron que la tratamiento (concentración inicial 10,000 adición mg/kg) con una eficiencia remoción de intemperizados, tiene un efecto positivo en ISBN 978-607-8164-02-8 de tolueno en suelos 577 Aplicación de Tween 80 y D-Limoneno en la biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos Héctor H. Riojas González, Pablo Gortáres Moroyoqui, Iram Mondaca Fernández y José de Jesús Balderas Cortes en la (> 200°C). Los derivados etoxilados de los biodegradación de estos compuestos. De Spans se producen por la reacción del óxido acuerdo con sus resultados, la adición de de etileno con cualquier grupo hidroxilo 14,000 suelo, libre del grupo éster del sorbitan. De forma incrementó la velocidad degradación de los alternativa, el sorbitol es primero etoxilado HTP en un suelo contaminado con 292,000 y después esterificado. la desorción de los HTP y mg de tolueno/kg de mg de HTP/kg de suelo, hasta tres veces con respecto a la velocidad observada para El Monooleato de sorbitán etoxilado un suelo sin tolueno. En 30 días de conocido comercialmente como Tween 80 tratamiento se obtuvo 45% de degradación es insoluble en agua, pero soluble en la de HTP en el suelo tratado con tolueno. mayoría de disolventes orgánicos y no se ionizan en solución acuosa, por lo que no es En estudios de biorremediación, de suelo afectado por el agua dura; es decir, no contaminado con diesel, llevados a cabo en forma sales insolubles con iones calcio, fermentación de medio sólido (columnas magnesio, férrico, entre otros. También tipo Raimbault), en la cual se agregaron puede ser usado en soluciones ácidas nutrientes, oxígeno y una mezcla al 50% fuertes. Tiene baja toxicidad y en general, (v/v) del surfactante no iónico Tween 80 y baja fitotoxicidad (Hickey et al, 2007). Otra D-Limoneno, se logró una eficiencia de propiedad de este surfactante no iónico es remoción de hasta el 78% de una su actividad como emulsificador, formando concentración inicial de diesel de 5,950 emulsiones estables. Forma menos espuma mg/kg (Riojas et al, 2010). que los surfactantes aniónicos y es considerado como agente espumante leve ha moderado. Además de lo antes señalado, el Características del Tween 80 Tween 80 es adecuado para la biorremediación debido a que su CMC (12 Los ésteres grasos del sorbitan g/L) es baja con respecto a otros (generalmente denominados Spans, como surfactantes. Esta baja CMC, permite la marca formación comercial) y sus derivados de micelas a bajas etoxilados (generalmente conocidos como concentraciones de surfactante. De acuerdo tweens) fueron con los resultados presentados por Ghosh inicialmente por comercializados Atlas en USA y (1997), este surfactante puede ser adsorbido comprados por ICI. Los ésteres del sorbitan por se producen por interacción del sorbitol con microorganismos hasta en un 99.6%, el suelo y degradado por los un ácido graso a una elevada temperatura ISBN 978-607-8164-02-8 578 [Ide@s CONCYTEG 6(71): Mayo, 2011] durante los primeros 10 días de un inflamación típico de 40 ºC y puede ser tratamiento de biorremediación. empleado como solvente cuando se aplica en frío (Lif y Holmberg, 2006; Nguyen y Sabatini, 2009). Características del DLimoneno Los aceites típicos como el D-Limoneno, tolueno, benceno, tetraclorometano son Mezcla de Tween 80 con DLimoneno para mejorar la biorremediación considerados y empleados como solventes, una parte de las moléculas se inserta a los En experimentos realizados, por este equipo constituyentes de la película interfacial de investigación, con la mezcla de un mientras que el resto se distribuye entre las surfactante no iónico como el Tween 80 y fases acuosa y oleosa según su afinidad el relativa (Antón et al, 1992). Los terpenos rendimiento en la remoción y desorción de son metabolitos los hidrocarburos adheridos en la matriz del secundarios de las plantas de los cuales, el suelo, lo cual evidencia una sinergia que limoneno está distribuido por lo menos en potencia la biorremediación una gran clase de D-Limoneno origina un mayor 300 especies, por lo que se convierte en un sustrato disponible a bajo costo para ser En muchas aplicaciones industriales se han usado en diversos procesos (Prieto et al, realizado diversas mezclas de surfactantes 2007). en vez de aplicaciones de surfactantes individuales. En algunos casos este efecto En el caso del D-Limoneno extraído de la es involuntario ya que los surfactantes cáscara de naranja, conocido también como comerciales, ocasionalmente son mezclas terpeno de naranja, es un líquido incoloro a de materiales no homogéneos o con materia ligeramente amarillo, con un olor cítrico prima sin reaccionar. En otros casos se característico de mezclan surfactantes puros con el propósito moderada a lenta. En cuanto al costo, se de mejorar las propiedades del producto podría adquirir el D-Limoneno de los (Rivas y Gutiérrez, 1999; Bravo et al, 2004; desperdicios de la industria cítrica y con Bergström y Eriksson, 2000; Gharibi et al, esto reducir los costos para su obtención. Es 2002). y tiene evaporación de fácil biodegradación por ser obtenido de fuentes naturales. Principalmente, es usado En como componente en formulaciones de parámetros principales que influyen en el agentes limpiadores, desengrasantes y como alcance agente dispersante. Tiene un punto de biodisponibilidad (Bouwer et al, 1997). Los ISBN 978-607-8164-02-8 la biorremediación, de la uno biodegradación de es los su 579 Aplicación de Tween 80 y D-Limoneno en la biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos Héctor H. Riojas González, Pablo Gortáres Moroyoqui, Iram Mondaca Fernández y José de Jesús Balderas Cortes son ocasionando una ampliación del tamaño en fácilmente biodisponibles debido a su baja el núcleo y con un avance en la capacidad solubilidad acuosa o su tendencia en de separación del contaminante por las adsorberse fuertemente al suelo (Billingsley micelas y b) por la relación del HLB et al, 2002; Thibault et al, 1996). La (Balance Lipofílico-Hidrofílico) y tensión más superficial donde el Tween 80 obtiene degradación valores superiores (comparado a con otros biológica termine siendo lenta, además surfactantes) y se aumenta con la ayuda del parece D-Limoneno. contaminantes hidrófobos biodisponibilidad es importante que para disminuir envejecimiento Rockne, el factor la con del 2003). no el suelo La tiempo de (Makkar y biodisponibilidad En otro estudio sobre sinergias de limitada de un contaminante se presenta surfactantes con solventes en la remoción cuando por de hidrocarburos, llevado a cabo por Chu y microorganismos está afectada por una Kwan, (2002), se encontró que la adición de barrera acetona su tasa de degradación físico-química entre el al surfactante mejora su contaminante y los microorganismos. Al rendimiento de remoción de un 15-25%. La mezclarse D- adición de disolventes a una solución de Limoneno, en la biorremediación, mejora el surfactante permite un mejor rendimiento rendimiento del surfactante, esto se puede de lavado, esto debido a que deberse a que el D-Limoneno puede ayudar eficazmente a la remoción, biodisponibilidad y actuar contaminante hidrofóbico llevándolo a la como un sustrato de crecimiento de los fase acuosa de las partículas del suelo, con microorganismos de esto los contaminantes son transferidos de hidrocarburos, también se tienen reportes la fase sólida hacia la fase líquida o bien que el D-Limoneno ha sido de interés en puede ser capturado por el núcleo micelar y formulaciones de productos de limpieza en en ambos casos se consideran validos para superficie remediación el proceso de descontaminación. Además el medioambiental y aplicaciones de biodiesel propio disolvente puede ser solubilizado en (Lif y Holmberg, 2006; Nguyen y Sabatini, el núcleo, dando lugar a un disolvente 2009). incorporado en la micela (Chu y Kwan, el surfactante con degradadores dura, el a la disolución ayuda del 2003). Esto se puede explicar probablemente por dos razones: a) la posible sinergia que La sinergia de la mezcla (Tween 80 con D- pueda existir entre la molécula del D- Limoneno) se puede atribuir también a que Limoneno y la micela del surfactante el surfactante utilizado (Tween 80) es una ISBN 978-607-8164-02-8 580 [Ide@s CONCYTEG 6(71): Mayo, 2011] fuente de carbono fácilmente biodegradable (Ghosh, 1997), que por sus propiedades fisicoquímicas, inicialmente es cuantificado como materia orgánica y como parte de los compuestos solubles del hidrocarburo, y por lo tanto la máxima velocidad de biodegradación de este compuesto se detecta en los primeros días del tratamiento. Por otra parte, se ha demostrado que los surfactantes que incrementan la solubilidad de los hidrocarburos, pueden acelerar su biodegradación debido al incremento en su biodisponibilidad (Bardi et al, 2000). Esto aunado a que el D-Limoneno es candidato para mezclarse con los disolventes orgánicos y surfactantes, ocasiona que agregando este aceite natural en el suelo facilite aun más la remoción, la biodisponibilidad y actuar como un sustrato en el crecimiento de los microorganismos degradadores de hidrocarburos, de modo que el D-Limoneno, mejora su remoción al ser mezclado con este surfactante . Conclusiones La biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos puede ser beneficiada cuando se le agrega surfactantes, la elección de éste es crucial para lograr éxito en la biorremediación. La mezcla de surfactante con solvente como es el caso del Tween 80 con el D-Limoneno actúan de manera conjunta, logrando con esto mejorar el proceso de biorremediación. ISBN 978-607-8164-02-8 Bibliografía Abiola, A., y M.Olenyk (1997), Effects of amendment surfactants on bioremediation of hydrocarbon contaminated soil by composting. 34th. Annual Soil Science Workshop. Alberta, Cánada, febrero. Antón, R., J. L. Salager, A. Graciaa y J. Lachaise (1992), Surfactant-oil-water systems near the affinity inversion – Part VIII: Optimum formulation and phase behavior of mixed anionic-nonionic systems versus temperature. J. Dispersion Sci. Technol., 13, 565-579. Bardi, L., A. Mattei, S. Steffan y M. Marzona (2000), Hydrocarbon degradation by a soil microbial population with beta-cyclodextrin as surfactant to enhance bioavailability, Enzyme Microb Technol. 27, pp. 709–13. Bergström, M. y J. C. Eriksson (2000), A theoretical analysis of synergistic effects in mixed surfactant systems. Langmuir, 16, pp. 7173-7181. Bhairi, S.M. (2001), “Detergents: a guide to the properties and uses of detergents in biological systems”, CalbiochemNovabiochem Corporation, pp.41. Billingsley, K.A., S.M. Backus, S. Wilson, A. Singh y O. P. Ward (2002), “Remediation of PCBs in soil by surfactant washing and biodegradation in the wash by Pseudomonas sp. LB400”, Biotechnol. Lett, 24, pp. 1827– 1832. Birman, I. y M. Alexander (1996), “Optimizing biodegradation of phenanthrene dissolved in nonaqueous-phase liquids”, Applied Microbiology and Biotechnology, 45, pp. 267-272. Block, D. (2000), “Acetone helps microbes remediate TNT-contaminated soil”, BioCycle, 41 (8), pp. 38-40. Bollag, J.M. (1992), “Decontaminating soil with enzymes: An in situ method using phenolic and anilinic compounds”, Environmental Science & Technology, 26, pp.1876–1881. Bouwer, E.J., W. Zhang, L. P. Wilson y N. D. Durant (1997), “Biotreatment of PAHcontaminated soils/sediments”, Ann NY Acad Sci., pp. 829,103–17. 581 Aplicación de Tween 80 y D-Limoneno en la biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos Héctor H. Riojas González, Pablo Gortáres Moroyoqui, Iram Mondaca Fernández y José de Jesús Balderas Cortes Bravo, B., G. Chávez, A. Cáceres, F. Ysambertt y N. Márquez (2004), “Thermodynamic parameters of the chromatographic equilibrium distribution process of amphiphilic compound by HPLC”, Part II: Nonylphenol Polyethoxylated. CIENCIA, 12 (4), pp. 323-330. Brinch, U.C., F. Ekelund, y C. Jacobsen. (2002), “Method for spiking soil samples with organic compounds”, Applied Environmental Microbiology, 68 (4), pp. 1808 - 1816. Catherine, A. P. y R. Luthy (1993), “Coal tars dissolution in water-miscible solvents: experiment evaluation”, Environmental Science & Technology, 2713, pp. 28312843. Cerniglia, C.E. y K.L. Shuttleworth. (2002), “Methods for isolation of polycyclic aromatic hydrocarbons PAH.-degrading microorganisms and procedures for determination of biodegradation intermediates and environmental monitoring of PAHs”, en C. J. Hurst, R. L. Crawford, G. R. Knudsen, M. J. McInerney y L. D. Stetzenbach, Manual of Environmental Microbiology 2nd. Edition. Editorial American Society for Microbiology, Washington D.C., U.S.A., pp. 972–986. Chu, W. y C. Y. Kwan (2002), “The direct and indirect photolysis of 4, 40dichlorobiphenyl in various surfactant/solvent-aided systems”, Water Research, 36 (9), pp. 2187–2194. Chu, W. y C. Y. Kwan (2003), “Remediation of contaminated soil by a solvent/surfactant system”, Chemosphere, 53, pp. 9−15. Fenistein, D., L. Barré, D. Broseta, D. Espinat, A. Livet, J. Roux y M. Scarsella (1998), “Viscosimetric and neutron scattering study of asphaltene aggregates in mixed toluene/heptanes solvent”, Langmuir. 14, pp. 1013-1020. García, R.M., C. G. Saucedo, H. S. Flores y R. M. Gutiérrez (2002), “Mass transfer and hydrocarbon biodegradation of aged soil in slurry phase”, Biotechnol. Prog. 18, 728733. Gharibi, H., S. M. Hashemianzadeh y B. M. Razavizadeh (2002), “Determination of interaction parameters of mixed surfactant system using a Monte Carlo simulation ISBN 978-607-8164-02-8 technique”, Colloids and Surfaces A: Physicochem. Eng. Aspects, 196, pp. 31–38. Ghosh, M.M. (1997), Kinetic considerations in surfactant-enhanced bioavailability of soilbound PAH, The Sixth International in situ and on site Bioremediation Symposium. Battelle, 2, pp. 575-580. Guha, S. y P. R. Jaffé (1996), “Bioavailability of hydrophobic compounds partitioned into the micellar phase of nonionic surfactants”, Environmental Science & Technology, 30, pp. 1382-1391. Helmy, Q., E. Kardena y Wisjnuprapto. (2009), “Performance of petrofilic consortia and effect of Surfactant tween 80 addition in the oil sludge removal Process”, Journal of Applied Sciences & Environmental Management., 4 (3), pp. 207-218. Hickey, A.M., L. Gordon, A. D. W. Dobson, C. T. Kelly y E. M. Doyle (2007), “Effect of surfactants on fluoranthene degradation by Pseudomonas alcaligenes PA-10”, Applied Microbiology and Biotechnology, 74, pp. 851-856. Huertas, J., E. Duque, S. Marqués y J. Ramos (1998), “Survival in soil of differents toluene degrading Pseudomonas strains after solvent shock” Applied Environmental Microbiology, 64 (1), pp. 38-42. Ko, S. O., M. A. Schlautman y E. R. Carraway (2000), “Cyclodextrin-enhanced electrokinetic removal of phenanthrene from a model clay soil”, Environmental Science & Technology, 34, 1535-1541. Kotterman, M.J.J., H. J. Rietberg, A. Hage, y J. A. Field (1998), “Polycyclic aromatic hydrocarbon oxidation by the white-rot fungus Bjerkandera sp. strain BOS55 in the presence of nonionic surfactants”, Biotechnol. Bioeng. 57(2), pp. 220-227. Laha, S. y R. G. Luthy (1992), “Effects of nonionic surfactants on the solubilization and mineralization of phenanthrene in soilWater systems”, Biotechnol. Bioeng. 40, pp. 1367-1380. Lif, A. y K. Holmberg (2006), “Water-in-diesel emulsions and related systems”, Advances in Colloid and Interface Science, 123–126, pp. 231–239. 582 [Ide@s CONCYTEG 6(71): Mayo, 2011] Madigan, M.T., J. M. Martinko y J. Parker (2003), Brock Biology of Microorganisms, 10th edition, Upper Saddle River, NJ, USA: Prentice-Hall. Majer, R.M., I. L. Pepper y C. P. Gerba, (1999), Environmental Microbiology, Academic Press, pp. 583. Makkar, R. y K, Rockne (2003), “Comparison of synthetic surfactants and biosurfactants in enhancing degradation of polycyclic aromatic hydrocarbons”, Environ Toxicol Chem., 22 (10), pp. 2280–2292. Mishra, S., J. Jyot, R. Kuhad y B. Lal (2001), “Evaluation of inoculum addition to stimulates in situ Biorremediation of OilySludge-Contaminated Soil”, Appl. Environ. Microbiol., 67(4), pp. 2235-2240. Nadarajah, N., A. Singh y O.P. Ward. (2002), “Evaluation of a mixed bacterial culture for de-emulsification of water-in-oil petroleum oil emulsions”, World J Microbiol Biotechnol, 18, pp. 435–40. Nguyen, T.T. y D. A. Sabatini (2009), “Formulating Alcohol-Free Microemulsions Using Rhamnolipid Biosurfactant and Rhamnolipid Mixtures”, J. Surfact Deterg., 12, pp. 109–115. Plohl, K., y H. Leskovsek (2002), “Biological degradation of motor oil in water”, Acta Chim. Slov., 49,pp. 279-289. Prieto, G., J. Perea y E. Stashenko (2007), “Biotransformación del limoneno para la obtención de terpenoides por la acción de bacterias: Rhodococcus erythropolis y Xanthobacter sp”, Scientia et Technica, Año XIII, No 33, pp. 291-292. Raiger-Iustman, L.J. y N. I. López (2009), “Los biosurfactantes y la industria petrolera”, Rev. QuímicaViva, 3(8), pp.146-161. Riojas, H., P. Gortáres, I. Mondaca, J. Balderas y L. G. Torres (2010), “Evaluación de la biorremediación aplicando mezclas de surfactante-solvente en suelo contaminado con diesel”, Rev. Latinoamer. Rec. Nat., 6(2), pp. 100-109. Rittmann, B.E. y P. L. McCarty (2001), Environmental Biotechnology: Principles and Application, New York, USA: McCraw-Hill. ISBN 978-607-8164-02-8 Rivas, H. y X. Gutiérrez (1999), “Los surfactantes: comportamiento y algunas de sus aplicaciones en la industria petrolera”, Acta Científica Venezolana, 50 (1), pp. 5465. Rojas, O. y J. Bullon (1995), Fisicoquímica del destintado, Módulo AVTCP. Maracay – Venezuela. Salager, J. L. (1987). Detergencía, Módulo de enseñanza en fenómenos interfaciales. Universidad de Los Andes. Escuela de Ing. Química, Mérida – Venezuela. (7). Cuaderno FIRP 330. Salager, J.L., J. Bullon y O. Rojas (2007), “Surfactantes - Version 3”, Cuadernos FIRP Nº S340-C. Singh-Cameotra, S. y J. M. Bollag. (2003), “Biosurfactant-Enhanced Bioremediation of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons”, Crit. Rev. Environ. Sci. Technol, 30 (2), pp. 111– 126. Silva I., M. Grossman y L. Durrant. (2009), “Degradation of polycyclic aromatic hydrocarbons (2-7 rings) under microaerobic and very low-oxigen conditions by soil fungi” Int. Biodeter. Biodeg. 63, pp. 224-229. Stelmack, P.L., M. R. Gray y M. A. Pickard (1999), “Bacterial adhesion to soil contaminants in the presence of surfactants”, Applied and Environmental Microbiology, 65, 163-168. Thibault, S.L., M. Anderson y W. T. Frankenberger (1996), “Influence of surfactants on pyrene desorption and degradation in soils”, Applied and Environmental Microbiology, 62, pp. 283– 287. Tsai, T. T., C. M. Kao, T. Y. Yeh, S. H. Liang y H. Y. Chien (2009), “Remediation of Fuel Oil-Contaminated Soils by a Three-Stage Treatment System”, Environmental Engineering Science, 26(3), pp. 651-659. Van Gestel, K., J. Mergaert, J. Swings, J. Coosemans y Ryekeboer. (2003), “Bioremediation of diesel oil-contaminated soil by composting with biowaste”, Environ. Poll., 125, pp. 361-368. Volké, T. y J. Velasco (2003), “Biodegradación de hidrocarburos del petróleo en suelos 583 Aplicación de Tween 80 y D-Limoneno en la biorremediación de suelo contaminado con hidrocarburos Héctor H. Riojas González, Pablo Gortáres Moroyoqui, Iram Mondaca Fernández y José de Jesús Balderas Cortes intemperizados mediante composteo”, Instituto Nacional de Ecología. (INESEMARNAT), 1era. Edición, México: CENICA. Referencias electrónicas United States Department of Defense (1997), Technology practices manual for surfactants and cosolvents, Kueper, B., M. Pitts, K. Wyatt y T. Simpkin, disponible en:. http://www.cluin.org/PRODUCTS/AATDF/Toc.htm ISBN 978-607-8164-02-8 584