CARACTERIZACIÓN FÍSICO-QUÍMICA Y BIOLÓGICA DE UN LECHO DE MACRÓFITAS CON PRETRATAMIENTO ANAEROBIO Elizabeth Ramírez, Esperanza Robles, Juan M. de la Cerda, Mónica López, Guadalupe Sainz, Ma. Elena Martínez y Patricia Bonilla Facultad de Estudios Superiores Iztacala UNAM Av. de los Barrios S/N, los Reyes Iztacala, Tlalnepantla, Edo. de México C.P. 54090. Tel 01 (5)6 23 12 97 ext. 112. Fax: 01 (5)3 90 76 04, erf@servidor.unam.mx RESUMEN Se estudio un sistema de tratamiento de agua residual doméstica de lechos de macrófitas con un pretratamiento anaerobio, para evaluar su eficiencia de remoción de materia orgánica y patógenos. Se determinaron pH, DBO 5 , DQO, OD, temperatura, sólidos suspendidos, nitrógeno amoniacal e indicadores bacteriológicos, según las Normas Mexicanas. Así como las amibas de vida libre, que se identificaron morfológicamente. Las bacterias coliformes fecales y totales disminuyeron de 0 a 4 unidades. El pH osciló entre 7.2 y 7.6, el OD entre 0.68 y 0.93mg/L. Los valores promedio de remoción fueron: DBO 5 el 50%, sólidos suspendidos el 70% y nitrógeno amoniacal el 13%. El sistema no ha alcanzado una adecuada eficiencia debido a que es de reciente construcción y le falta estabilizarse. El género Acanthamoeba fue el más abundante, pero se eliminó en un alto porcentaje (93%). Este género es potencialmente patógeno, por lo que su eliminación es importante. INTRODUCCIÓN El método de lecho de macrófitas o humedales artificiales es un método de tratamiento de aguas residuales que tiene notables ventajas con respecto a otros, debido a sus bajos costos de operación y mantenimiento, construcción simple y elevada calidad del efluente (Gopal, 1998). El tratamiento esta basado en la acción de los microorganismos dentro de zona de las raíces de diversas plantas macrófitas, el cual depende del flujo de las aguas residuales a lo largo del espacio anular entre el suelo y los rizomas de las raíces conocido como rizósfera . En dicho espacio los microorganismos principalmente bacterias y protozoos oxidan bioquímicamente la materia orgánica del agua de desecho (Duncan y Groffman, 1994; Shutes, 1998). Las raíces proveen a su vez un abastecimiento de oxígeno atmosférico por difusión a través de los tallos y hojas hacia la rizósfera, lo cual permite que se mantengan condiciones aerobias, de modo que los microorganismos de metabolismo aerobio puedan usar el oxígeno para la transformación bioquímica de la materia orgánica. Por su parte los protozoos por su actividad depredadora son importantes en la eliminación de las bacterias incluyendo las patógenas (Sánchez y Lugo, 1993). Para que el crecimiento de las raíces de las plantas macrófitas sea adecuado, es esencial que el lecho ya sea de grava o de suelo permanezca saturado de agua durante todo el año. El lugar donde se coloque el sistema debe ser abierto y de preferencia con una pendiente del 2 al 6% aunque esto último no es indispensable. Los lechos de suelo o grava pueden tener una profundidad que varia de 0.30 m a 0.80 m, dependiendo de las características del agua a tratar y de la calidad del agua que se desea obtener, asimismo la porosidad del suelo ha de ser por lo menos de 50 %. Los humedales artificiales pueden utilizarse confinando los lechos y las macrófitas, con muros y suelos impermeabilizados (Duncan y Groffman, 1994) o bien en zonas pantanosas naturales como las ciénegas y pantanos frecuentes en las costas mexicanas. La importancia de los lechos de macrófitas se ha incrementado por su capacidad para absorber grandes cantidades de nutrientes y substancias tóxicas. Los procesos físicos, químicos y biológicos que se presentan en los lechos contribuyen a mejorar la calidad del agua (Prystay, 1998). El principal proceso físico involucrado es la sedimentación de materia particulada suspendida. Los procesos químicos incluyen la adsorción, quelación y precipitación, los cuales son los responsables en mayor grado de la eliminación de fósforo y metales pesados. Entre los procesos biológicos los mas importantes son aquellos en los que tienen que ver los microorganismos e incluye la oxidación de carbono, nitrógeno y azufre; esto depende de la disponibilidad de oxígeno. Generalmente, las reacciones de reducción predominan en los sistemas en presencia de gran cantidad de materia orgánica, la mayor parte del nitrógeno se pierde por medio de la desnitrificación. Las interacciones entre estos procesos y la biota son bastantes complejas y algunos elementos como el hierro, aluminio y manganeso juegan un papel importante en la remoción de fósforo. Es digno de llamar la atención que las condiciones anaerobias, en donde se da la desnitrificación, no son favorable para la adsorción y precipitación del fósforo de las aguas residuales (Nichols, 1983; Gale et al., 1993). Las plantas acuáticas contribuyen a la transformación de nutrientes participando en los procesos físicos, químicos y microbiológicos, pero además los remueven al utilizarlos para su crecimiento. Las plantas ofrecen resistencia mecánica al flujo del agua, incrementa el tiempo de retención y facilita la sedimentación de material particulado. También mejoran el paso del agua a través del suelo, a medida que las raíces crecen y crean espacios después de su muerte. Las plantas también proveen un área superficial grande para el crecimiento microbiano (Spangler et al., 1976). Muchas plantas acuáticas activamente transportan oxígeno a las capas anerobias de el suelo y así ayudan a la oxidación y precipitación de los metales pesados en la superficie de las raíces. La adsorción de nutrientes por las macrófitas varia con la especie y esta relacionada a su crecimiento bajo diferentes condiciones. La transformación de nutrientes en los lechos depende de un gran número de variables, las cuales incluyen el régimen hidrológico, concentración de nutrientes en el influente, los nutrientes que ya se encuentran en le sistema, la clase de vegetación, tipo de sedimentos y de la biota presente (Wolverton et al., 1976). Se ha investigado la habilidad de algunas macrófitas, para ayudar a la degradación de desechos humanos y animales, eliminación de microorganismos patógenos y de contaminantes. Se ha encontrado una amplia variedad de plantas que muestran estas propiedades pero las más eficientes han sido Phragmites australis y Typha latifolia, estas plantas tienen una gran biomasa en ambos sentidos, por arriba (hojas) y por debajo (tallo subterráneo y raíces) del suelo o sustrato. Los tejidos de la planta subsuperficiales crecen horizontalmente y verticalmente y crean una matriz extensa la cual agrupa las partículas de suelo y crea un área superficial grande para la toma de nutrientes y iones (Spangler et al., 1976). Los vasos en el tejido de la planta hacen posible que el aire se mueva desde las hojas a las raíces y al suelo circundante. Los microorganismos que requieren oxígeno florecen en esta zona (rizósfera) cercana a la raíz. Los microorganismos anaerobios, que no requieren oxígeno, también están presentes por todo el suelo. Los procesos de biodegradación de desechos orgánicos, hidrocarburos y metales tóxicos estarán influenciados por estos microorganismos. Las reacciones químicas y procesos de descomposición biológica descomponen los compuestos complejos en substancias más sencillas. La filtración natural en el sustrato también ayuda a la eliminación de muchos contaminantes y microorganismos patógenos (Wolverton et al., 1976). Los lechos de macrófitas se desarrollaron en Alemania, de ahí paso a otros países como el Reino Unido, Holanda, Francia, Estados Unidos y Austria. Por sus características parece ser un tratamiento adecuado para México, pero es necesario adecuarlo a nuestras condiciones, por lo que el objetivo de este estudio fue caracterizar físico-química y biológicamente un lecho de macrófitas para evaluar la eficiencia de remoción de materia orgánica y microorganismos patógenos. DESCRIPCIÓN DEL SISTEMA Área de estudio El estudio se realizó en un sistema de tratamiento localizado en el poblado de Santa Matilde en el estado de Hidalgo. La comunidad de Santa Matilde se encuentra dentro del municipio de Pachuca en el estado de Hidalgo (figura 1), se localiza en las coordenadas Longitud 98° 44’ 09’’ y Latitud 20° 08’ 21’’, con un clima semiseco templado, presenta una precipitación de 387mm promedio anual, una temperatura promedio de 14°C. La vegetación es de tipo matorral, pastizal y la agricultura es de riego, INEGI 2001. Figura 1. Ubicación del municipio de Pachuca en el estado de Hidalgo. Descripción del sistema de tratamiento Se estudio un sistema de tratamiento que utiliza lecho de macrófitas con flujo subsuperficial, a este tipo también se le conoce como el Método de la zona de la raíz (MZR). El sistema esta localizado en un área rurales de nuestro país, recibe el agua residual de una casa-habitación que no cuenta con red de drenaje para recolectar su agua de desecho. El sistema recibe el agua residual de una casa habitada permanentemente por cinco personas (tres adultos y dos niños) y dos perros. El sistema esta constituido por un tanque anaerobio como pretratamiento, un lecho de macrófitas y un tanque de almacenamiento. El tanque anaerobio mide 2.0 m de largo por 1.0 m de ancho y por 2.0 m de profundidad. El lecho tiene como dimensiones 1.7 m de ancho, 5.0 m de largo y 0.45 m de profundidad. El tanque de almacenamiento mide 1.0 m por lado y 1.0 m de profundidad. El lecho tiene una pendiente del 2%, utiliza grava de aproximadamente 5 mm de diámetro como sustrato y esta plantado con Phragmites sp y Typha sp. METODOLOGÍA Los muestreos se realizaron mensualmente durante diez meses (de agosto del 2000 a mayo del 2001), se colectaron muestras del influente y del efluente. Se tomaron dos tipos de muestras las biológicas y las fisicoquímicas. Los parámetros físico-químicos que se determinaron fueron pH, oxígeno disuelto (OD), temperatura, sólidos suspendidos, demanda bioquímica de oxígeno (DBO 5 ), demanda bioquímica de oxígeno (DQO) y nitrógeno amoniacal (N-NH3 ). Las técnicas utilizadas son las establecidas por las Normas Mexicanas. Los parámetros bacteriológicos analizados fueron Coliformes totales y fecales de acuerdo a las técnicas de las Normas Mexicanas. Se analizo también el grupo de amibas de vida libre patógenas, para lo cual se concentró la muestra por centrifugación y el sedimento se inoculo en cajas Petri con medio de agar no nutritivo sembrado con Enterobacter aerogenes (NNE). Las cajas se incubaron a 3 distintas temperaturas (22°C, 30°C y 37°C), las placas se observaron por medio de un invertoscopio para detectar el crecimiento amebiano a las 48 horas de incubación y después cada 24 hrs hasta completar una semana para detectar el crecimiento de las amibas. Las amebas aisladas se identificaron tomando en cuenta las características morfológicas de las formas trófica y quística; así como la temperatura de crecimiento y la prueba de flagelación bajo las especificaciones de las claves de Page, 1988. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Con los resultados obtenidos de los parámetros físico-químicos se calcularon las eficiencias de remoción que se presentan en la tabla 1 y figura 1. Para la DBO 5 el porcentaje de remoción medio fue de 50.2 %y en general en casi todos los muestreos el valor osciló alrededor de la media a excepción del mes de abril que presento la remoción más baja (17.3%). La DQO presento un porcentaje medio de remoción de 71.3%, llegando a alcanzar porcentajes de más del 90% en los meses de agosto y de abril. En los sólidos suspendidos el porcentaje fue de 77.5% variando desde 67.8 en el mes de septiembre hasta 99.3% en agosto, a excepción del último mes que no hubo remoción. El nitrógeno amoniacal dio un porcentaje medio de 17.4%, encontrando el valor más bajo desde 6.9 en el mes de marzo hasta el valor mas alto de 30.5 en el mes de agosto. Los resultados obtenidos para los análisis bacteriológicos se presentan en la tabla 2. La remoción bacteriana se estimó en base al número de unidades logarítmicas que disminuyeron las bacterias coliformes totales y fecales del efluente con respecto al influente. Las mejores remociones se presentaron en agosto (4 unidades logarítmicas), en septiembre (2 unidades logarítmicas) y en enero (3 unidades). En general la mejor remoción la presentaron los sólidos suspendidos, el hecho de que en el último muestreo no haya habido remoción es justificable ya que para ese muestreo el tanque anaerobio tenía muchos lodos, los cuales fueron arrastrados al lecho de macrófitas, incrementando con ello la concentración de sólidos. En el caso de la materia orgánica sucedió lo mismo, aunque la remoción que se había alcanzado en los meses anteriores fue menor que la de los sólidos. En relación a las bacterias, éstas casi no presentaron remoción y en conjunto con los parámetros físico-químicos podríamos pensar que el tiempo de retención no es suficiente ya que no permite que se realicen bien los procesos de depuración. En cuanto a organismos patógenos se detectaron las amibas de vida libre patógenas que pueden causar fatales infecciones cerebrales en el humano. Entre éstas, se encontraron 32 especies pertenecientes a 12 géneros predominando las del género Acanthamoeba (59%) (tablas 3 y 4). En general, la eliminación de amebas fue superior al 50%, destacando la eliminación del género Acanthamoeba en un 93% (tabla 5), ya que tiene especies patógenas para el hombre, mientras que para Hartmannella, la segunda mas frecuente, la eliminación fue del 50% (tabla 5). La predominancia de Acanthamoeba se debe a que su quiste tiene en su estructura celulosa, componente que le confiere una gran resistencia a diversos factores ambientales Hay que mencionar que el género Naegleria, al cual pertenece la especie más virulenta del grupo, estuvo pobremente representado en el sistema, solo se detectó en un muestreo y fue eliminada del sistema. Esto probablemente se debió a que son amibas muy sensibles a condiciones ambientales extremas Acanthamoeba que imperaron en el agua de desecho John, 1993; Martinez y Visvesvara, 1997). Aunque hasta el momento no se ha detectado que las amibas de este grupo sean peligrosas por vía oral, si hay que tener cuidado en el caso de que las aguas de desecho sin tratar o mal tratadas se utilicen para fines recreativos, ya que es durante la natación, cuando las amibas pueden entrar por las fosas nasales y viajar directamente al cerebro, donde pueden producir dos enfermedades que generalmente son mortales, la meningoencefalitis amibiana primaria y la encefalitis amibiana granulomatosa (Martinez y Visvesvara, 1997), representando así un peligro potencial para la salud de los usuarios. CONCLUSIONES La baja eficiencia de remoción de algunos parámetros, se debió a que antes del humedal se encuentra inmediatamente el tanque anaerobio lo cual afecta al agua, haciendo que salga con una concentración baja de oxígeno disuelto. Esto repercute en la degradación de la materia orgánica por parte de los microorganismos, los cuales requieren de oxígeno para poder llevar a cabo la oxidación de la materia. AGRADECIMIENTOS Agradecemos a la DGAPA por su apoyo económico para la realización de este estudio. REFERENCIAS Duncan, CP. y Groffman, PM. (1994). Comparing microbial parameters in natural and constructed wetlands. J. Environ. Qual. 23, pp 298. Gale, PM., Reddy, KR. y Graetz, DA. (1993). Nitrogen removal from reclaimed water applied to constructed and natural wetland microcosms. Water Environ. Res. 65, pp162. Gopal, B. (1998). Natural and constructed wetlands fro wastewater treatment: potencial y problemas. Proceedings 6th International Conference on Wetland Systems for Water Pollution Control, Brasil. Instituto Nacional de Estadística, Geografía e Informática. (1997). Estadísticas del medio ambiente. Informe de la situación general en materia de equilibrio ecológico y protección al ambiente. INEGI, SEMARNAP. John, DT. (1993). Opportunistically pathogenic free-living amebae. In Parasitic Protozoa, Kreier, JP. y Baker, J. eds. Academic Press, San Diego. Martinez, AJ. Y Visvesvara, GS. (1997). Free-living, amphizoic and opportunistic amebas. Brain Pathol. 7, pp 583. Nichols, DS. (1983). Capacity of natural wetlands to remove nutrients from wastewater. J. Water Pollut. Control Fed. 55, pp 495. Page, CF. (1988). A new key to freshwater and soil Gymnamoebae. Freshwater Biological Association Scientific Publication. England. Prystay, W. (1998). Assessment of constructed wetlands for the reduction of nitrogen and phosphorus. Proceedings 6th International Conference on Wetland Systems for Water pollution Control, Brasil. Sánchez, R., y Lugo, A. (1993). Protozoos en lechos de raíces. Cienc. y tecnol. 15, pp18. Shutes, B. (1998). Rooting out pollution: is natural treatment sustainable?. Inagural lecture. Middlesex University, England. Spangler, F., Sloey, W. y Fetter, CW. (1976). Experimental use of emergent vegetation for the biological treatment of municipal wastewater in Wisconsin. In Biological Control of water pollution. Tourbier, J. y Pierson, R. eds. University of Pensylvania Press, Pensylvania. Wolverton, BC., Barlow, RM. y McDonald, RC. (1976). Application of vascular aquatic plants for pollution removal, energy, and food production in a biological system. In Biological Control of water pollution. Tourbier, J. y Pierson, R. eds. University of Pensylvania Press. Pensylvania. Figura 1. Porcentajes de remoción de los parámetros físico-químicos en Santa Matilde, Hgo. Porcentaje de remoción 120 100 80 DBO SOL. SUSP N-AMON. 60 DQO 40 20 0 Agosto Sept. Oct. Nov. Dic. Ene. Feb. Marzo Jun Mayo Tabla 1. Porcentajes de remoción de los parámetros físico-químicos en el lecho de macrófitas del poblado de Santa Matilde, Hgo. Muestreo Agosto Septiembre Octubre Noviembre Diciembre Enero Febrero Marzo Abril Mayo Media Párametro DBO5 57.2 57.3 49.1 61.6 54.1 60.3 48.4 29.3 67.4 17.3 50.2 DQO 97.1 51.9 65.9 79.2 43.9 81 82.8 49.2 90.8 83 71.3 Sólidos 99.3 67.8 87.6 90.7 74.1 91.7 84.4 84.5 95 77.5 30.5 14 14.1 20.7 14.9 18.6 - 6.9 12.3 25.1 0 suspendidos Nitrógeno amoniacal 17.4 Tabla 2. Disminución bacteriana en unidades logarítmicas en el lecho de macrófitas del poblado de Santa Matilde, Hgo. Muestreo Parámetro Agosto Septiembre Octubre Noviembre Diciembre Enero Febrero Marzo Mayo Abril Coliformes totales 4 2 0 0 0 3 1 2 0 0 Coliformes fecales 1 2 0 0 1 3 0 0 0 0 Tabla 3. Géneros amibianos encontrados en el lecho de macrófitas del poblado de Santa Matilde, Hgo. Género Acanthamoeba Hartmannella Mayorella Vannella Dactylamoeba Platyamoeba Vahlkampfia Gutillinopsis Rosculus Echinamoeba Thecamoeba Naegleria Frecuencia (%) 59 10 7 5 5 3 3 3 2 1 1 1 Tabla 4. Especies amibianas encontradas en el lecho de macrófitas del poblado de Santa Matilde, Hgo. Especie Influente Efluente Especie Influente Efluente A astronyxis x 0 Hartmannella sp x 0 A castellanii x 0 H cantabrigiensis 0 x A comandoni x 0 H vermiformis x x A cultbertsoni x 0 M microeruca x 0 A griffini x 0 M spatula x x A mauritaniensis x X Naegleria sp x x A palestinensis x 0 Platyamoeba placida x x A polyphaga x 0 Platyamoeba stenopodia x 0 Acanthamoeba sp 0 X Rosculus ithacus 0 x A triangularis x 0 Techamoeba sp x 0 A tubiashi x 0 Vahlkampfia eberdonica 0 x D bulla x X Vahlkampfia enterica x x Dactylamoeba sp x X Vannella cirrifera 0 x D stella x X Vannella platypodia 0 x Echinamoeba sp 0 X Vannella simplex x 0 G nivea x X Guttulinopsis sp 0 x x= presente 0=ausente Tabla 5. Número de aislamiento amibianos obtenidos en el lecho de macrófitas de Santa Matilde, Hgo. No. de muestreo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Entrada Salida 8 12 8 17 12 10 20 16 13 5 6 10 8 9 12 12 19 13 11 2 Tabla 6. Promedio de los parámetros de campo del sistema de tratamiento Entrada Salida Parámetro T°C pH OD T°C pH OD Promedio 24 7.2 0.68 23 7.6 0.93