La reacción de la antrona - Revista Clínica Española

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LA REACCION DE LA ANTRO N A
en démontrant son effet sur les symptómes
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du
Iasme, fonction hevatique, etc. V1s a v1s des
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production de la cnTlwse hepabque.
ｾｩｱｵ･ｳ＠
17
pleados no daban resultados bastante satisfactorios.
Al estudiar la aplicación del método de la antrona a nuestro problema tuvimos ocasión de
realizar algunas observaciones acerca de la
reacción de esta sustancia con los hidratos de
carbono, que creemos puedan ser de interés
para quienes se preocupen ror estas cuestiones, y que damos a conocer en el presente trabajo.
D8SCRIPCI(¡:-.; DE T.OS EXPERI\11::\TO>; .
LA REACCION DE LA ANTRONA EN LA
DETERMINACJON DE LOS HIDRATOS DE
CARBONO
F.
GRA:\DE,
lnstiiuto dt• ｉｮ
A.
UTRERA
ｶ｣ｳｾｬｧｮ･ｩｯ＠
l'mfpsor C. J
y J. C. DE ÜYA.
:\féd1cas. :\fadri!l . Directo•·.
Di.lz.
l llt'> r.z.
La casi totalidad de los métodos empleados
habitualmente para la determinación de la glucosa en los líquidos biológicos se basan en el
poder reductor de este glícido. Por ello, dichos
métodos pueden dar valores anormalmente ele·
vados al computar como glucosa otras sustancias reductoras que suelen acompañar a ésta.
Aunque muchos de los métodos empleados en
la actualidad evitan este inconveniente ｭ･ｲｾ､＠
al uso de desproteinizantes adecuados, es interesante en ciertos casos disponer de un método exacto que permita la determinación de los
hidrocarbonados sin depender del poder reductor de los mismos.
La reacción de los hidratos de carbono con
la antrona, descrita recientemente por DHEYwooo, ofrece en este sentido un gran ｩｮｴ･ｲ
￩ｾＮ＠
ya que se trata de una reacción extremadamente sensible y específica que puede ser apli ·
cada a todos los hidratos de carbono, sean o no
reductores, y permite la valoración de los poｬｩｾ￭｣､
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sin necesidad de recurrir a la previa
h1drolisis de los mismos. Estos y otl os motivos
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dado lugar a que en la literatura de los
ｵｬｴｾｭｯ
ｳ＠ años se hayan publicado algunos trabaJos relacionados con la aplicación de esta
reacción a la determinación de los hidratos de
carbono en distinto::; productos biológicos. En·
tre estos trabajo::; debemos mencionar los de
MORRIS (194.8), SEIFTER y cols. (1950) y ZIPF y
WALDO (1952) .
Nuestro interés por el método de la antrona
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inicialmente al buscar un procedimiento para la determinación del alucógeno
en pequeñas muestras de tejidos y eno condiciones en las que los métodos habitualmente emｳｾ＠
•liélodos. - La antrona utilizada <'n uuPst! os expenmentos fué preparada a partir de antraquinona, siguiendo el método descrito en Orgrulic Synt111 sis (vol. 1,
página 60 l. Las primer as m u es tras fu eron preparadas
t•n el Instituto Ibys por los señores ｂｕｅｒｴＺｾ＠
y ｇＮｾｌｅｏＬ＠
cu:ya colaboración agradecemos; las demás, fueron pre·
par·adas <'n nuestro laboratorio.
La solución de antrona se preparó, según ｚｉｐｾ＠
y \\"ALt)(), di!<olviendo O 2 gr. del producto puro <'n la mezcla
fría de 5 c. c. de agua y 95 c. c. de sulfúrico concentl ado. El sulfúrico debe ser purísimo, habiendo obtenido resultados sati.sfactorios con <'1 de la marca Probus,
calidad para análisis. La solución de antrona se preparó nueva cada dia aunque puede conservarse cuatro
o cinco días sin que se modifiquen los resultados. Las
ｭｵ･ｾｴｲ｡ｳ＠
de hidrato de ca1bono utilizadas fueron en todos los casos de marcas conoci<las y de calidad "purísima" o para análisis. En t odos los casos las muestras
fueron desecadas cuidadosamente, en vacío, sobre sulfúrico, antes de preparar las soluciones correspondientes.
Estas se hicieron en gene1-al a partir de una solución
madn• conserva da en la nevera, de la que por dilución
S<' pr<'paraba ca<la dia la solución a utilizar.
Dl'b<' tenerse gran cuidado en el Sl cado d<'l material
d<' viril io, quP no debe hac erse nunca con papel de Iil·
lro o paños. T odo el material utilizado por nosotros fué
S<'cado a la estufa después del lavado habitual.
Como aparatos de mPdida utilizamos el colodmetro
fotoeléctrico de Evelyn y el espectrofotómetro de Coleman.
R ESULTADOS.
A continuación exponemos los resultados de
nuestras observaciones, que agrupamos en una
serie de capítulos de acuerdo con los distintos
problemas examinados.
a)
Influencia del calentamiento.
La reacción de la antrona requiere para su
producción la elevación de la temperatura de
la mezcla durante algún tiempo . Generalmente
se admite que el calor producido al mezclar la
solución sulfúrica de antrona con la solución
acuosa que se analiza, basta para hacer marchar la reacción. Sin embargo, algunos autores
opinan que el desarrollo de calor puede no ser
bastante uniforme, lo que puede influir sob1 e la
intensidad del color de la reacción.
E studiamos el desarrollo de calor en las condiciones de nuestras determinaciones introduciendo directamente un termómetro en el tubo
del colorímetro en donde se mezclaban :3 c. c. de
la solución a analizar con 6 c. c. de solución sulfúrica de antrona. El desarrollo de calor en el
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REVISTA CLINICA ESPAÑOLA
18
tubo mantenido al aire puede verse en la figura 1, que reproduce una de las observaciones
realizadas.
Siguiendo esta misma técnica se realizaron
una serie de 118 determinaciones con cantidaentre 2 y 50 mides de glucosa que ｯｳｾｩｬ｡ｲｮ＠
crogramos para el volumen total de 9 c. c. (3 de
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Temperatura exterim·: 25 ｾｲ｡｣ｴｯｳＮ＠
solución acuosa de glucosa y 6 de solución
sulfúrica de antrona ) . El color fué medido en
el fotoc:olorímetro, pasados treinta minutos
usando el filtro 620.
Los resultados fueron en general excelentes
para cada serie de determinaciones, pero los
valores variaban de un día para otro más de
lo que parecía conveniente. Se pensó en que estas diferencias podían estar ocasionadas por
modificaciones en el calentamiento de la mezcla y se ensayó entonces otro método capaz de
permitir mantener más constantes las condiciones en cuanto a la temperatura de la mezcla.
Siguiendo lo señalado por otros autores practicamos la adición de la solución de antrona en
sulfúrico a la solución que contiene el hidrato
de carbono, mientras los tubos de Evelyn que
contienen esta solución se hallan sumergidos en
un baño de agua a temperatura ambiente. Los
tubos son sacados luego del baño de agua y llevados a otro en el -cual el agua se mantiene a
una temperatura más elevada. Se hicieron una
serie de ensayos para establecer las condiciones
óptimas de la reacción, de los que se dedujo
que la temperatura del baño más conveniente
era la de 80 grados, mantenida durante quince
minutos. El procedimiento finalmente adaptado fué el siguiente:
15 O<'tub 1·e 1953
Los tubos de Evelyn conteniendo la solución
del hidrato de carbono en un volumen total de
3 c. c. se colocan en una gradilla adecuada. Con
una bureta se añaden a cada tubo los 6 c. c. de
la solución de antrona en sulfúrico, agitando el
tuvo vivamente para que la mezcla se efectúe.
Tan pronto se ha verificado dicha mezcla se
lleva el tubo al baño a 80 grados, anotando exac.
tamente el tiempo y manteniéndolo allí quince
minutos, al cabo de los cuales se le lleva de nuevo a ot ro baño con agua corriente. El método
requiere d os personas: una, para ir poniendo el
sulfúrico en los tubos, y otra, para anotar la
entrada en el baño a 80 grados y cuidar de sacarlos cuando han pasado exactamente los quince minutos de calentamiento. Este procedimiento es un poco más complicado que otros procedimientos que han sido descritos, pero es el
que nos ha dado resultados más constantes. St
se dejan los tubos en un baño hasta que se ha
puesto el reactivo de antrona en todos ellos llevándolos todos a la vez al baño caliente, se obtienen resultados que hemos considerado menos satisfactorios.
En la tabla I presentamo!-> los valores obtemdos con este procedimiento para una serie de
muestras de glucosa determinadas en distintos
días.
b)
D esarrollo de color y su relación co11 la
C'Oncentración df'l hülrofo de carbono.
El producto de la reacción entre la antrona y
los hidratos de carbono tiene color azul, pero
como la solución de antrona tiene un tono amarillento, el color del líquido que se observa cuando la reacción se hace con pequeñas cantidades
de glícido adquiere un tinte verdoso.
Se realizó el estudio del color en el espectro
visible utilizando el espectrofotómetro modelo
Coleman, midiendo la absorción entre 400 y 750
milimicras, con intervalos de 25 milimicras. El
resultado de estas medidas se presenta en la figura 2, en la que se reproducen la curva de ab·
sorción luminosa de la solución de antrona al
0,2 por 100 en sulfúrico más un 50 por 100 de
su volumen de agua bidestilada y la de un pro·
blema que contiene 50 microgramos de glucosa
en un volumen total de 9 c. c. (3 de solución de
glucosa y 6 de reactivo de antrona).
El estudio de la curva muestra que el pro·
dueto de la reacción tiene su máximo de absor·
ción en 625 milimicras. P or esta razón emplea·
mos sistemáticamente para nuestras determina·
ciones en el colorímetro de Evelyn el filtro 620.
De acuerdo con lo observado por MORRIS, he·
mos encontrado que el desarrollo de color pue·
de medirse también con el filtro 540 de Evelyn,
pero se obtiene entonces una menor sensibili·
dad, como puede verse en la figura 3.
De acuerdo con las observaciones de este
autor hemos encontrado que el desarrollo de
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LA REAOOJON DE LA ANTRON A
TOll(\ L1
N t MERO 1
olor sigue la ley de Beer, existiendo buena pro｡ ｬｩ､ ｡ ､＠ por lo menos hasta la cantidad
de 150 microgramos de glucosa en el volumen
total de 9 c. c., como puede ver se en la figura 4.
ｾｯｲ｣ｩｮ
19
losa da una intensidad de color mucho mayor.
La glucosa ocupa una posición intermedia. Los
poliglícidos muestran un desarrollo de color
que es comparable al de los monoglícidos que
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Fig. 2.-Curva de absorción de la r eacción de la antrona
(bnflo a 80 grados, 15 minutos).
X 6 c. c. de solución sulfúrica de antrona. -r 3 c. c. de
agua bidestilada.
1 6 c. c. de solución sulfúrica de antrona. + 3 c. c. de solución acuosa C'Onteniendo 50 microgramos de g lucosa.
Ordenadas: Coeficien te de extinción .
Abscisas: Longitud de onda en m !lim icras.
Espectrofotó:netro Coleman.
I nfluencia de la clase de hidrato de carbono
sobre el desar rollo de color.
La reacción de la antrona, según se ha indicado ya, es común a todos los hidratos de carbono, pero la cantidad de producto coloreado
resultante puede variar de un glícido a otro.
Ya en 1946 observó MORRIS que la misma cantidad en peso de glucógeno y de glucosa dan
una ligera diferencia de intensidad de color. El
glucógeno da por término medio un 11 por 100
más de color que la glucosa. La galactosa, en
cambio, sólo da un 54 por 100 del color desarrollado por una cantidad igual de glucosa.
Estas observaciones nos movieron a estudiar
sistemáticamente el desarrollo de color de los
distintos hidratos de carbono a nuestro alcance, siguiendo la técnica antes descrita.
En la figura 5 reproducimos los valares obtenidos con una serie de hidratos de carbono.
. Como puede verse, los monosacáridos reaccionan con la antrona con tres grados diferentes de intensidad. La galactosa y la mannosa
desarrollan menos color, mientras que la levu-
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F ig. 3.-Desarrollo de color en la reacción entr e la ant rona
y la glucosa.
F otocolorimetro de Evelyn. Filtro, 620 y 540. V olu men t otal, 9 c. c. (3 c. c. de solución de glucosa y 6 c. c. de reactivo de a n trona) . Baño a 80 grados, 15 minutos.
Ordenadas: Coeficiente de extinción.
Abscisas: Microgramos de glucosa p or tu bo.
a Lecturas con el filtro 620.
+ Lecturas con el filtro 540.
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Fig. 4.-Relación entre d e sarrollo de color y cantidad de
g lucosa .
Volu:nen total, 9 c. c. (3 c. c. de solución gl ucosa y 6 de
r eactivo de antrona). Lectur as, fotocolorimetro de Evelyn.
Filtro 620, 15 minutos de b a ñ o a 80 grados.
Ordenadas: Coeficiente de extinción.
Abscisas : Micr ogramos de g lucosa p or t ubo.
los componen. Así, la inulina da aproximadamente la misma intensidad de color que la levulosa, mientras que el almidón y el glucógeno
dan una intensidad de color comparable a la de
la glucosa.
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20.
REVISTA OLIN IOA ESPAÑOLA
115 octubre 1953
que 100 microgramos de glucosa dan un color
equivalente a 106 microgramos de glucógeno.
La purificación del glucógeno por disolución en
agua caliente seguida de precipitación por alcohol y secado cuidadoso del producto, no modificó sensiblemente el resultado.
Sobre el mecanismo de la reacción.
d)
Los datos publicados hasta el presente con
respecto al mecanismo de la reacción de la antrona hacen depender ésta de la formación de
furfural o un derivado del mismo (SATTLER v
fZERBAN; ZIPF y W ALDO) .
M#
Fig. 5.-Color producido por la antrona con diferentes hidratos de carbono.
Volumen total; 9 c. c. (3 c. c. de solución de hidrato de carbono y 6 c. c. de reactivo de antrona).
Baño 80 grados, 15 minutos. Lectura, fotocolorlmetr·o tle
Evelyn. Filtro 620.
Ordenadas: Coeficiente de extinción.
Abscisas: Cantidad total de hidrato de <'arbono en mi{'rogramos por tubo
Los disacáridos se comportan de manera un
poco más compleja. La maltosa, por ejemplo, da
el mismo color que la glucosa, lo que hace pensar que tanto los di como los poliglícidos compuestos de glucosa tienen el mismo desarrollo
de color. Sin embargo, la trehalosa, que es como
la maltosa, un diglícido compuesto de dos moléculas de glucosa, da mucho menos color que
aquélla. La diferencia entre la maltosa y la trehalosa consiste únicamente en el modo de unión
de las dos moléculas de glucosa, que forman
un enlace 1-4 en el caso de la maltosa, y un
enlace 1-1 en el caso de la trehalosa. Así, pues,
es posible que no sólo sea importante la naturaleza de los monosacáridos que componen el diglícido, sino también la forma de estar unidos.
La lactosa da un color intermedio que viene
a corresponde aproximadamente a la mezcla de
glucosa y galactosa que la constituye. La sacarosa, en cambio, parece dar más color del que
corresponde a la levulosa y la glucosa que la
constituyen.
Nuestros resultados no coinciden exactamente con los de MORRIS en lo que respecta a la relación entre el desarrollo de color del glucógeno y la glucosa. Los valores que hemos obtenido indican que el glucógeno desarrolla, en
efecto, un poco menos de color que la glucosa.
Mientras MORRIS encuentra que 100 microgramos de glucógeno dan el mismo color que 111
microgramos de glucosa, encontramos nosotros
--
·----
.
Es interesante señalar a este respecto que la
reacción de la antrona con el furfural no es
exactamente comparable a la que da con los
hidratos de carbono. En su primera publicación
señaló DREYwooo, en efecto, que el color verde
de la reacción suele virar a ocre con rapidez.
Hemos ensayado la reacción del furfural con
la antrona empleando una muestra de furfural
recién destilado y hemos observado también
este fenómeno, que no se da con los hidratos
de carbono.
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Fig. S.-Comparación del color producido con la antrona
por· dos pentosas (xllosa y arabinosa), una metllpentosa
(ra:rmosa) y una hE'xosa (glucosa).
Volumen total, 9 c. c. (3 c. c. de solución de hidrato de car·
bono y 6 c. c. de reactivo de antrona). Baf'ro a 80 grados,
15 minutos.
LE'duras colorlmetro, foto eléctrico de Evelyn. Filtro 200rdenadas: Coeficiente de extinción.
Abscisas: Micromoles de hidrato de carbono por tubo.
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LA REACCION DE LA ANTRON A
ToMO Ll
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;-<()MERO 1
A fin de obtener algún dato más acerca de
esta cuestión, realizamos una serie de experimentos en los que estudiamos comparativamente el color ､･ｳ｡ｲｯｾｬ＠
por dos pentosas: la
l-arabinosa y la d-xilosa; una hexosa, la el-glucosa, y una metilpentosa, la ramnosa.
Los resultados de estos experimentos se recogen en la figura 6, cuyos valores son cifras
medias de dos experimentos coincidentes realizados en diferentes días.
Es fácil otservar que el color desarrollado
por las pentosas, referido a igual concentración
molecular, es mucho menor que el desarrollado
por la ramnosa o la glucosa.
Por la acción de los ácidos, las pentosas forman furfural , mientras que la metilpentosa
debe formar metil-furfural, y la hexosa, hidroximetil furfural , según se expresa en las fórmulas siguientes (ver BERNHAUER, HURD e ISENHOUR, WOLFRON y cols.).
CHO
e)
CH-CH
H.C.OH
HOC.H
HC
C.CHO
o
H .C.OH
CH,OH
r('ntosll .
Furfural.
CHO
H.C.OH
CH-CH
HCOH
HOCH
HOCH
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H,C
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O
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CHO
HC.OH
HOC"H
IICOH
HCOH
CH
CH
C
C.COH
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HCOH O
CH,OH
Hexosn.
las pentosas y las hexosas pudiera ser, por tanto, detido a este hecho.
Es digno de tenerse en cuenta que dentro de
las pentosas el color desarrollado es mucho menor para la arabnosa que para la xilosa a igual
concentración molar. En 1932 observaron HURD
e ISENHOUR que en ¡:resencia de ácido sulfúrico
al 32 por 100 la arabinosa se transforma ｾｮ＠
furfural en un 45 por 1CO, mientras que la xilosa en iguales condiciones da un 70 por 100
de dicho producto. Es interesante que los colores desarrollados ror estas dos pentosas en
nuestros experimentos se encuentran entre sí
en proporción análoga a la que acabamos de
señalar.
Los resultados indican, por tanto, que en el
mecanismo de la reacción de los hidratos de carbono con la antrona debe intervenir, en primer
lugar, la clase de derivado furfurólico formado,
y en segundo lugar, la proporción del mismo
que se rroduce en las condiciones de la reacción.
H id I"OXimetll furfu ral.
Si se admite que los productos formados por
la acción del ácido sobre los azúcares son los
ｱｵｾ＠
acabamos de señalar, tendremos que conclUir que el color desarrollado por el furfural al
rea:cionar con la antrona es menor que el pro､ｾ｣ｬｯ＠
cuando ésta reacciona con el metil o el
hldroximetilfurfural.
La diferencia entre el color desarrollado por
La aplicación clel método ele la antrona a la
deternánación del glucógeno.
Uno de los aspectos más útiles de la reacción
de la antrona es su aplicación a la determinación del glucógeno, puesto que permite prescindir de la hidrolisis, que de otra manera es necesaria.
En 1950, SEIFTER y cols. describieron un método para la determinación del glucógeno empleando la reacción de la antrona, que encierra
notables ventajas de sencillez y exactitud.
Hemos realizado una serie de ensayos para
aplicar la reacción de la antrona a la determinación del glucógeno en el hígado y el músculo
de rata. El método que hemos adoptado finalmente no se diferencia de modo fundamental
del que SEIFTER y cols. llaman método indirecto. El trozo de hígado o músculo (hasta 100 miligramos del primero y 200 del segundo) se pesan rápidamente con balanza de torsión y se
llevan a un tubo de centrifuga :::alocado en baño
hirviente en el que hay 1 c. c. de KHO al 30 por
1GO. Se deja en el taño unos veinte a treinta
minutos, agitando de vez en cuando hasta que
el tejido esté completamente disgregado y la
solución sea perfectamente homogénea. Se deja
enfriar y se añade 1,25 c. c. de alcohol absoluto, mezclando bien y llevando a baño caliente
para coagular el glucógeno, hasta que se inicie
la etullición del alcohol. Se deja enfriar y se
centrifuga el tuto quince minutos a 3.000 revoluciones por minuto.
Se decanta el tubo invirtiéndolo sobre parel
de filtro. Se añade luego 1 c. c. de agua destilada caliente, lavando Cien las paredes del tubo
y disolviendo el glucógeno, que se vuelve a precipitar con alcohol, repitiendo la centrifugación
y la decantación. Esta maniobra es conveniente, sobre todo cuando se trata de trozos de
músculo (diafragma de rata. por ejemplo) que
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REVISTA CLINICA ESPA!VOLA
22
han sido incubados en un medio que contiene
elevada concentración de glucosa. En estos casos hemos encontrado útil lavar también en
Ringer sin glucosa el músculo, y secarlo luego
con papel de filtro, antes de pesarlo.
El precipitado de glucógeno se disuelve finalmente en un volumen de agua destilada caliente de unos 10 c. c., tomando dos fracciones, de
3 c. c. cada una, para hacer la determinación
con 6 c. c. de reactivo de antrona, según se dijo
anteriormente.
El método se comparó con el clásico de Gooo,
KRAMER y SoMOGYI, encontrando en general excelente acuerdo, como -¡:uede verse en la tabla II
que reproducimos a continuación. Los valores
son medias de dos determinaciones paralelas.
En la determinación del glucógeno utilizamos
sistemáticamente para la lectura colorimétrica
dos soluciones patrón de glucógeno, purificado
y desecado como se ha dicho anteriormente. De
esta manera los valores vienen expresados en
cantidades de glucógeno y no en el equivalente
de glucosa, como se expresa frecuentemente.
DISCUSIÓN.
Los datos que hemos dado indican que el método de la antrona constituye un procedimiento
sensible específico y exacto para la determinación del material hidrocarbonado en los productos biológicos. Su aplicación a la determinación
de la glucemia da resultados satisfactorios según han demostrado ZIPF y WALDO, y puede
constituir un método de gran utilidad por su
sencillez. Creemos, sin embargo, que el mayor
valor del método está en su aplicación a la determinación del glucógeno.
Los dos mayores inconvenientes P!'ácticos del
método de la antrona están sin duda en la necesidad de vigilar con gran exactitud la temperatura durante el desarrollo del color y en el
manejo de la solución sulfúrica. Esta última
dificultad ha sido obviada por LoEwus, que emplea una solución de antrona en acetato de eti-
16 octubre 1953
lo, añadiendo luego por separado el ácido sul.
fúrico.
El hecho de que la antrona reaccione con t 0 •
dos los hidratos de carbono hace que esta reac.
ción sea útil sobre todo en aquellos estudios en
que se desee conocer la cantidad total de hidrocarbonados, pero no importa saber cuáles son
los glícidos individuales presentes. Si el proble.
ma que interesa es el último señalado, enton.
ces es preciso recurrir a otros procedimientos
capaces de permitir la individualización de los
diferentes hidratos de carbono.
Por lo que respecta al mecanismo de la reacción, los datos de la literatura (ZIPF y W ALDo)
y nuestras observaciones indican que se trata
de la condensación del derivado furfurólico
con la forma enólica tautómera de la antrona
o antranol. Nuestras observaciones indican que
los derivados metílicos del furfural (metil-furfural e hidroximetilfurfural) dan muy aproximadamente el mismo color ror mol.
El menor desarrollo de color observado en
las pentosas podría explicarse por el hecho de
que formen furfural y no su derivado metílico.
La semejanza entre la cantidad de calor producida y la cantidad de furfural formada por
estas pentosas puede ser una indicación más
en este sentido.
No es fácil comprender la diferencia entre
las distintas hexosas, en lo que re::l¡,ecta a la
cantidad de color producida, que no podemos
explicar con los datos que poseemos. La diferencia en la intensidad de color desarrollado
por las distintas hexosas con la antrona hace
que su aplicación a mezclas de las mismas sólo
pueda realizarse de modo cuantitativo si se conoce la proporción en que éstas se encuentran.
La mayor utilidad del método en el análisis
bioquímico está, como hemos dicho, en que per·
mite determinar la glucemia sin ser afectado por
las sustancias reductoras no azúcares y en la
determinación del glucógeno. Su utilidad es
también evidente para demostrar la presencia
de otros hidrocarbonados no reductores y para
establecer la cifra total de hidratos de carbono
en un problema.
TABLA I
DESARROLLO DE COLOR DE LA REACCTON DE LA ANTRONA ｃｏｾ＠
LA GLUCOSA MEDIDO EN EL FOTOCOLORIMETRO DE EVEYN. FILTRO 620
Volumen total, 9 c. c. (3 c. c. solución problema y 6 c. c. solución antrona en sulfúrico). Calentamiento en baño a 80
grados, quince minutos.
COEFICIENTES
Experimento
l.
2.
3.
4.
5.
Medias.... .....
10
0,0901
20
----
DE
EXTINCION
Cantidad total de glucosa por tubo en microg't'amos
30
50
•o
60
---
0,1135
0,1010
0,0996
0,1772
0,1871
0,2041
0,2007
0,1990
0,2716
0,2924
0,3100
0,3080
o,3010
0,369
0,382
0,385
0,395
0,367
0,101
0,193
0,296
0,379
---- -
100
150
0,.35
0,495
0,502
0,512
0,.91
0,561
0,585
0,()06
0,602
0,598
1,000
0,939
0,930
0,921
1,488
1.426
1,398
1,347
0,487
0,590
0,947
--1,415
---
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PERFORACIONES GASTRODUODENALES
To:JO LI
NO'MPJRO 1
TABLA li
COMPARACION DE LOS VALORES OBTENIDOS EN
LA DETERMINACION DE GLUCOGENO HEPATICO DE
R,ATA POR EL METODO DE LA ANTRONA Y EL DE
GOOD, KRAMER Y SOMOGYI
23
The values obtained indicate that the anthrone reaction is produced by the condensation
of anthranol with methyl furfural or hydroxylmethyl furfural.
Cifras de glucógeno en por 100 de peso fresco de tejido.
Método
de antrona
Experimento
l.
2.
3.
4.
15.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
Medias.... ..... ..
M étodo
de Good, Krame1
y Somogyl
1,70
1,56
l,ISO
1,49
1,94
2,64
2,66
2,42
2,64
1,92
3,21
3,25
3,54
3,62
1,77
1,74
1,69
1,46
1,69
2,03
2,62
2,72
2,39
1,82
3,152
3,52
3,41
3,51
2,43
2,42
RESUMEN.
Se hace un estudio de la reacción de la antrona con los hidratos de carbono, señalando
algunos de los factores que es preciso tener
en cuenta para la aplicación de dicha reacción
a la determinación cuantitativa de los glícidos.
Se describe también la aplicación del método a la determinación del glucógeno en los tejidos.
Los datos obtenidos indican que la reacción
de la antrona es producida por la condensación
del antranol con el metil furfural o el hidroximetilfurfural.
m!SAM.MENFASSUNG
Man untersuchte die Antronreaktion mit
der Kohlehydrate, wobei besonders auf die
Faktoren aufmerksam gemacht wird, die bei
der Anwendung der besagten Reaktion zur
quantitativen Bestimmung von Gluciden berücksichtig werden müssen.
Beschrieben wird weiterhin die Verwendung
dieser Methode zur Glykogenbestimmung in
den Geweben.
Die erzielten Resultate zeigen an, dass die
Antronreaktion dadurch entsteht, dass das
Antranol durch das Methylfurfural oder Hydroxymethylfurfural kondensiert wird.
On fait une étude de la réaction de l'antrone
avec les hydrates de carbone, en signalant
les facteurs dont il faut tenir compte pour
l'application de cette réaction a la déterminaison quantitative des glycides.
On décrit également l'application de la méthode a la déterminaison du glucogene dans les
tissus.
Les résultats obtenus indiquent que la réaction de l'antrone est produite par la condensation de l'antranol avec le méthyle-furfural ou
1'hyroximéthyle-furfural.
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SUMMARY
ｾ･＠
anthrone reaction to carbohydrates is
stud1ed. Sorne of the factors to be borne in
ｭｩｾ､＠
when that reaction is applied to quantitative determinations of glucides are pointed
out.
.The. application of the method to the determmabon of glycogen in the tissues is likewise
described.
HIPERAMILASEMIA EN LAS PERFORACIONES GASTRODUODENALES
C.
PERA BLANCO-MORALES.
Médico Interno.
Servicio de Aparato Digestivo. Jefe: Doctor GARCÚ BARÓ.'\.
C. ASENSIO BRETONES.
Farmacéutico Interno.
Servicio de Qulmica. Jefe: Doctot· CXI'AYÉ.
Casa de Salud Valdecllla (Santander).
I
La determinación de la amilasemia para el
diagnóstico de las pancreatitis agudas es considerada, desde hace algunos años, como el método complementario eficacísimo que, junto a
la valoración adecuada del cuadro clínico, puede darnos las seguridades que precisamos en
las dudas que siempre trae consigo un proceso