EVALUACIÓN COMPARATIVA DEL RENDIMIENTO DEL PROCESO DE EXTRACCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DEL ACEITE DE VARIEDADES DE LA SEMILLA DE PIJIGUAO (Bactris gassipaes HBK) Ortiz, P. Jean C. Departamento de Ingeniería Química. Escuela de Ingeniería Química Facultad de Ingeniería. Universidad de Carabobo. Valencia. Estado Carabobo. Venezuela. email: ortizjeancarlos@hotmail.com por los pobladores indígenas de la región y forma parte de su acervo cultural y de sus creencias mítico-religiosas. En otros países como Costa Rica, Colombia y Brasil, esta planta tiene una mayor diversificación: de la pulpa y la semilla se obtiene aceite, las yemas foliares se utilizan para la producción de palmito (al año y medio de plantada), el tallo de las plantas adultas se utiliza como madera y las hojas son empleadas localmente para construir el techo de las viviendas (Lugo y Hernández, 2004). Resumen: La siguiente investigación consistió en evaluar el proceso de extracción de aceite para las variedades roja y amarilla de la semilla de pijiguao (Bactris gassipaes HBK). Se caracterizaron las semillas, se determinaron las mejores condiciones de extracción del aceite y el porcentaje de rendimiento. Se realizó la extracción, refinación y caracterización del aceite crudo de la variedad amarilla. Las variedades solo difieren en su contenido de humedad. La variedad amarilla presentó mayor porcentaje de aceite con un (28,8%±0,2%)%, y las mejores condiciones de extracción fueron 5 g de semilla seca, tamaño de partícula de 0,850 mm y 6 h de extracción. El aceite refinado posee un índice de acidez de (0,111±0,001) mg NaOH/ g aceite, un contenido de yodo de (5,34±0,01)cg I/ g aceite, e índice de saponificación de (194±20) mg KOH/g aceite. El perfil de ácidos grasos permitió conocer que posee un (90,34±0,01)% de grasas saturadas. La pertinencia científica de la investigación se centra en la caracterización de la semilla, la determinación de las mejores condiciones de extracción del aceite de dos variedades en un equipo piloto Soxhlet y la caracterización del aceite extraído. Palabras clave: Aceite, extracción, pijiguao, rendimiento, semilla. La escogencia de las dos variedades del pijiguao se realizó en función de la disponibilidad de las variedades en la Estación Experimental Samán Mocho, ya que se pudo comprobar que las variedades con mayor número de plántulas y mayor tamaño de racimo fueron las semillas con el exocarpio de color rojo y amarillo. Cabe destacar que la variedad de color naranja, también existente en la estación experimental no se descartó por la ausencia de material graso, sino por que el número de semillas a recolectar sería menor que las dos primeras, de tal manera que estas últimas proporcionaron mayor cantidad de materia seca para llevar a cabo la extracción. Una vez recolectadas las muestras se llevaron al laboratorio y se procedió a obtener la semilla de la fruta y a almacenarla en recipientes oscuros sellados y lejos de la humedad para evitar la oxidación del material. COMPARATIVE EVALUATION OF THE EXTRACTION PROCESS’ EFFICIENCY FOR OBTAINING OIL FROM TWO VARIETIES OF PIJIGUAO SEEDS UNDER A 50° DRYING SCHEME (Bactris gassipaes HBK) Abstract: The research that follows evaluated the oil extraction process regarding two varieties (red and yellow) of Pijiguao seeds. These seeds were characterized, and the best condition for oil extraction was determined, as well as the efficiency through a mixed experimental-factorial design and a Soxhlet solid-liquid extraction equipment. Crude oil was extracted from the yellow seeds and was characterized according to COVENIN norms. The seeds’ characterization allowed the determination of their similarities and that they differ in the moisture content by 6.56%. The yellow variety had higher oil content, being 28.770%, and the best extraction conditions were: 5 grams of dry seed, 1 of ground seed and a 6-hour extraction time. The characterization of the refined oil shows the following results: acid number 0.1111 mg NaOH / g oil; iodine 5.34 cg I / g oil; saponification number 194 mg KOH / g oil; refractive index 1.334 adim and relative density of 0.923. The fatty acid profile allowed to know that its percentage of saturated fat is 90.34%. Key words: Oil extraction, pijiguao, yield, seed INTRODUCCIÓN El pijiguao (Bactris gassipaes HBK) es un fruto de palma similar al que se obtiene de la palma africana, coroba, corozo, palmiste entre otros, es una especie perteneciente a la familia palmas Arecaceae, cuya palmera es originaria de América tropical. Pertenece al grupo de las Bactrioideas, las cuales tienden a formar una cepa de varios tallos o estípites que emergen de la base. El fruto tiene la pulpa carnosa, amilácea, algo aceitosa, con fibras. En Venezuela es cultivada en los estados Amazonas, Bolívar, Portuguesa en dónde gran parte de este cultivo es llevado a cabo por grupos indígenas de la zona (Lugo, Hernández y Orozco, 2005) y en el estado Carabobo en la Estación Experimental Samán Mocho donde se realizó la recolección de las especies para el desarrollo de la presente investigación. Se puede consumir directamente después de cocida, en forma de harina, helados, jugos, entre otros. Este fruto es muy apetecido Ingeniería y Sociedad UC. Vol. 7, No. 2 87 P. 87-94 2012 METODOLOGÍA Selección de las dos variedades del pijiguao (Bactris gassipaes HBK) Caracterización de la semilla del pijiguao (Bactris gassipaes HBK) Se realizó la caracterización de la semilla según las Normas Venezolanas COVENIN, los nutrientes que se consideraron fueron: porcentaje de humedad (115679), cenizas (328-01), grasa libre (3218-96), fibra cruda (1194-79), calcio (1158-82), fósforo (1178-83) y proteínas (1195-80), los valores obtenidos se compararon con los de la pulpa de la misma especie, ya que se carecía de esta información con respecto a la semilla. 88 Diseño Experimental De acuerdo a las investigaciones en semillas oleaginosas realizadas por Oviedo, Hernández y Mieres (2010), Delgado y Ramírez (2006) y Rondón (2009), se pudo observar que las variables más influyentes en el proceso de extracción fueron: masa de semilla seca, tamaño de partícula y tiempo de extracción; partiendo de los hallazgos encontrados por estos investigadores se procede a la selección de los niveles de cada una de estas variables los cuales se pueden observar en la Tabla Nº 1 y cuya variable de respuesta es el porcentaje de rendimiento. Tabla Nº 1. Factores y niveles involucrados en el proceso de extracción Factor Masa (g) Tamaño (mm) Tiempo (h) Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3 5 15 - 0,850 1,680 - 4 5 6 El diseño experimental que se emplea para el estudio es de tipo factorial mixto del tipo mn, donde m representa los niveles a analizar y n el número de variables independientes (Camisón, Cruz y González 2006). Finalmente resulta 31x22, se obtiene así un total de 12 experimentos; los ensayos se realizan por triplicado con la finalidad de garantizar la reproducibilidad y confiabilidad de los resultados. Se realiza un análisis de varianza a través de un software estadístico que indica la interacción entre las variables y el rendimiento del proceso de extracción con un nivel de significancia del 95%. Este análisis permitió no solo determinar las mejores condiciones de extracción con las cuales se realizaría la obtención del aceite para su análisis, sino la selección entre las variedades. Las condiciones de extracción utilizadas se describen a continuación: Preparación de la semilla La preparación de la semilla consta de varias etapas que se enumeran a continuación: a. Obtención del fruto de las plantas. b. Descascarado para la obtención de la semilla. c. Pre-tratamiento térmico: se realizó un proceso de calentamiento de 6 h a 40ºC, con éste se logra el Evaluación Comparativa del Rendimiento del Proceso de Extracción y Caracterización .... Ortiz, P. Jean C. total desprendimiento de la pulpa adherida a la misma y liberación parcial de la humedad de la almendra dentro de la semilla. d. Ruptura de la semilla a través de un proceso mecánico que logra la fractura de la misma desalojando así la almendra que contiene en su interior. e. Disminución del tamaño de la almendra; con la finalidad de aumentar el área de exposición al proceso de secado. f. Secado a 50ºC y 24 h de exposición. g. Trituración y tamizado de la almendra con la finalidad de obtener los tamaños para los tamices disponibles en el laboratorio, 0,850 mm y 1,650 mm. h. Almacenamiento de la almendra seca a 40ºC, para evitar incorporación de humedad y evitar crecimiento de microorganismos que pudieran contaminar la muestra. De igual forma se muestra en la Tabla Nº 3 las mejores condiciones de extracción para las variedades en conjunto. (703, 2001), índice de refracción(702, 2001, índice de saponificación (323, 1998), índice de yodo (324, 2001), índice acidez (325, 2001) e índice de peróxidos (508, 2001). Finalmente se realiza el perfil de ácidos grasos basados en la norma COVENIN 2281-1998. Tabla Nº 3. Mejores condiciones de extracción para las variedades roja y amarilla en conjunto. Perfil de ácidos grasos El perfil de ácidos grasos se llevó a cabo en un cromatógrafo de gases en una empresa dedicada a la manufactura de aceites y grasas comerciales. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Rendimiento durante el proceso de extracción Se muestra en las figuras 1 y 2 el rendimiento durante el proceso de extracción para las variedades en estudio. Proceso de extracción. Materiales y equipos Figura 2. Porcentaje de rendimiento de extracción del aceite de la semilla de pijiguao para la variedad amarilla. Análisis estadístico sobre las mejores condiciones de operación En la Tabla Nº 2 se muestra la interacción de las variables sometidas a estudio: masa de semilla alimentada, tamaño de partícula, tiempo de extracción y variedad así como su nivel de significancia con un 95% de confiabilidad. Se empleó un equipo de extracción Soxhlet (Rondón, 2009) a escala piloto con seis planchas de calentamiento, lo que permitió realizar de forma simultánea dos experimentos por triplicado. La variable que permitió llevar a cabo el control del proceso de extracción fue el tiempo, establecido anteriormente con 3 niveles. Tabla Nº 2. Análisis estadístico de varianza para la extracción de aceite de la semilla de pijiguao para las dos variedades en conjunto Procedimiento experimental del proceso de extracción de aceite La extracción del aceite se realiza a través del método Soxhlet considerando la recuperación del hexano una vez concluida la extracción. El rendimiento del proceso de extracción se determina a través de la ecuación 1: (1) Caracterización del aceite extraído Para la caracterización del aceite extraído fue necesario purificarlo a través de una filtración al vacío con un filtro Büchner, el cual permite la eliminación de posibles sólidos disueltos en la mezcla; este procedimiento se realiza a 50ºC (COVENIN 635, 1997). Posteriormente se realizaron los siguientes análisis de acuerdo a las normas COVENIN: densidad relativa Fuente Figura 1. Porcentaje de rendimiento de extracción del aceite de la semilla de pijiguao para la variedad roja. Es necesario destacar que el mayor rendimiento de extracción de aceite se obtuvo para tamaños de molienda de 0,850 mm y para 6 horas de extracción, el análisis estadístico siguiente indica las mejores condiciones de extracción. Ingeniería y Sociedad UC. Vol. 7, No. 2 89 P. 87-94 2012 90 Valor-P De acuerdo a lo anterior se puede observar que las variables influyentes en el proceso de extracción quedan determinadas por la variedad y el tamaño de la partícula, finalmente se selecciona la variedad amarilla, con un tiempo de extracción de 6 horas, 15 g de semilla alimentada y un grado de molienda de 0,850 mm. La aplicación del análisis de varianza solo para la variedad amarilla y sus mejores condiciones de extracción se muestran en las Tablas Nº 4 y Nº 5. Tabla Nº 4. Análisis estadístico de varianza para la extracción de aceite de la semilla del pijiguao para la variedad amarilla Fuente Valor-P Masa (A) 0,0663 Tamaño (B) 0,0000 Tiempo (C) 0,0000 AB 0,3016 Masa (A) 0,0197 Tamaño (B) 0,0000 AC 0,0116 Tiempo (C) 0,0000 BC 0,0290 Variedad (D) 0,0050 CC 0,0431 AB 0,0051 AC 0,0045 AD 0,4310 BC 0,0002 BD 0,0516 CC 0,2700 CD 0,0225 Del análisis anterior se puede observar que las mejores condiciones de extracción para la obtención del aceite de la variedad amarilla fueron 6 horas de extracción, 5 g de semilla alimentada y 0,850 mm como tamaño de partícula. El análisis de varianza permite obtener un modelo matemático con un factor de correlación R2= 96,79%, para predecir el rendimiento en el proceso de extracción: Y= 21.754 + 0.3239A – 4.58098B + 1.13072C – 0.56185AC – 0.47816 BC+ 0.76214C2 -0.17804AB Evaluación Comparativa del Rendimiento del Proceso de Extracción y Caracterización .... Ortiz, P. Jean C. (2) Tabla Nº 5. Mejores condiciones de extracción para la variedad amarilla de pijiguao Caracterización del aceite crudo Una vez obtenido el aceite de la semilla de pijiguao de la variedad amarilla bajo las mejores condiciones de operación, se procedió a caracterizarlo para determinar las propiedades físico-químicas de acuerdo a los requerimientos establecidos en las normas COVENIN para aceites y grasas vegetales que se indican en la Tabla Nº 7. Tabla Nº 7. Requerimientos establecidos por las normas COVENIN para aceite y grasas vegetales Cabe destacar que el modelo es sólo aplicable bajo las condiciones de trabajo iniciales, no es extrapolable, es decir al cambiar las condiciones de trabajo el modelo no es confiable. Caracterización de aceite refinado La única etapa de refinación aplicada para el aceite crudo fue la decoloración o blanqueo debido a la presencia de impurezas y turbidez en el producto. Cabe destacar que no fue necesario realizar la etapa de neutralización, ya que según la tabla Nº 8, se obtuvo un índice de acidez dentro de la norma COVENIN 325:01. La etapa de desodorización no fue necesaria ya que el olor el aceite no presentaba olores desagradables. Caracterización de la semilla del pijiguao (Bactris gassipaes HBK) Los resultados obtenidos de la composición nutricional de la semilla de pijiguao se muestran en la Tabla Nº 6, en ésta se puede observar diferencia en el porcentaje de humedad, aunque el porcentaje de grasa cruda solo se diferencia en 1,5% a favor de la variedad amarilla, ésta última representa la variedad con mayor contenido graso por lo que ofrece adicionalmente debido a su menor contenido de humedad ofrece mayor contenido de materia seca para extracción y menor desperdicio de material. La semilla puede representar una alternativa para la elaboración de alimentos para animales en vista del alto contenido de fibra cruda, fósforo y proteínas que contribuyen al crecimiento, formación de huesos y tejidos entre otros beneficios (Rondón, 2009). Tabla Nº 6. Composición nutricional obtenida para dos variedades de la semilla de pijiguao El aceite posee un índice de peróxido por encima del establecido en la Tabla Nº 7 que se debe posiblemente a la aceleración del proceso oxidativo por las altas temperaturas suministradas en la extracción y al tiempo prolongado el mismo. Un aspecto importante que se debe considerar es que el índice de saponificación se encuentra dentro de los límites establecidos por la norma según la Tabla Nº 7, lo que muestra un potencial uso en la industria de jabón, ya que los mejores aceites para la elaboración de producto tienen índices elevados (Rondón, 2009).Finalmente los índices de refracción y densidad relativa se encuentran fuera de norma, debido en su mayoría a las impurezas y turbidez que contiene el aceite, por lo que dificulta el paso de la luz hacia la muestra. Los análisis físico-químicos para este aceite crudo se muestran en la Tabla Nº 8. Los resultados indican que el aceite crudo posee un índice de acidez dentro de los requerimientos establecidos por norma COVENIN 325:01. El índice de yodo determinado se encuentra por debajo del requerimiento establecido indicando la poca presencia de insaturaciones. Determinación del perfil de ácidos grasos del aceite crudo y refinado En la Tabla Nº 10 se puede apreciar el perfil de ácidos grasos, uno de los aspectos más resaltantes es que el ácido laúrico se encuentra en mayor proporción(muy común también en los aceites de palmiste y coco quienes a su vez son productos de palma) seguido del ácido mirístico, en general se pudo apreciar que el porcentaje de grasas saturadas alcanza un 90,34%. De igual forma el perfil de ácidos grasos corrobora el bajo contenido de yodo presente en el aceite ya que los niveles de ácido linoleico y oleico totalizan un 9,67% de grasas insaturadas. Tabla Nº 10. Perfil de ácidos grasos para el aceite crudo de la semilla de la variedad amarilla de pijiguao Durante la etapa de decoloración o blanqueo se obtuvo una pérdida del (19,65±0,01)%, y se realizaron nuevamente los análisis fisicoquímicos a fin de comprobar la eficiencia de esta etapa. Los resultados se muestran en la Tabla Nº 9. Tabla Nº 9. Propiedades fisicoquímicas del aceite refinado de la semilla de la variedad amarilla de pijiguao Tabla Nº 8. Propiedades fisicoquímicas del aceite crudo de la semilla de la variedad amarilla de pijiguao Fuente: Cargill de Venezuela Luego de la etapa de blanqueo se logró disminuir el índice de peróxidos en aceite refinado, pero aún este se encuentra fuera de norma, es necesario destacar que como los peróxidos se degradan, el método está limitado a las primeras etapas de la oxidación cuando éstos alcanzan una concentración máxima; por esto, Ingeniería y Sociedad UC. Vol. 7, No. 2 91 P. 87-94 2012 es probable que una grasa demasiado oxidada tenga un índice bajo, a pesar de que el olor sea característico de reacciones muy avanzadas (Badui, 1997). Se logró mejorar la densidad relativa del aceite pero el índice de refracción aún se mantiene fuera de rango. 92 Un aspecto resaltante que se puede comentar es que el alto porcentaje de ácido láurico es tecnológicamente favorable, ya que los ácidos grasos saturados son resistentes a la oxidación y al ser utilizado este aceite en formulaciones cosméticas disminuiría notablemente la posibilidad de rancidez oxidativa del producto final; por lo tanto se puede decir que debido a la presencia predominante de este ácido graso, el aceite de pijiguao podría emplearse en el área cosmética y farmacéutica como un sustituto industrial, por ejemplo, de los aceites de coco y palmiste (Marcano, Belén, Jiménez y Pino, 2004), así como también en la elaboración de productos como galletas, coberturas cremosas, Evaluación Comparativa del Rendimiento del Proceso de Extracción y Caracterización .... Ortiz, P. Jean C. glaseados y productos análogos al cacao (Carreto, Cuerdo, Dinienzo y Di Vito, 2002). la acidez. 3ra revisión. Norma N° 325-2001. Fondonorma. Caracas, Venezuela. CONCLUSIONES Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (2001). Aceites y grasas vegetales. Determinación de la densidad relativa a t/20ºC. 3ª revisión. Norma N° 703-2001. Fondonorma. Caracas, Venezuela. La caracterización de las semillas permitió conocer que poseen un contenido graso, fibra y proteínas, así como también se evidenció que la variedad amarilla posee mayor porcentaje de materia seca con respecto a la variedad roja, adicionalmente bajo las mejores condiciones de operación de 5 gramos de semilla seca, 0,850 mm de grado de molienda y 6h de extracción se obtiene el mejor rendimiento para esta variedad. La caracterización del aceite crudo y refinado para la variedad amarilla permitió comparar los resultados con los requerimientos establecidos en la norma COVENIN para aceites y grasas vegetales, donde se pudo observar que los índices de acidez y saponificación se encuentran dentro de norma, lo que propicia su estudio para la elaboración de jabones. El perfil de ácidos grasos permitió conocer que el aceite de pijiguao posee más de un 90% de grasas saturadas, predominando el ácido laúrico. El uso potencial de este aceite ha dirigido a la industria cosmética y alimentaria. AGRADECIMIENTOS El autor agradece a las siguientes instituciones que colaboraron con la elaboración de esta investigación: Estación Experimental Samán Mocho; Laboratorios de Alimentos y de Orgánica de la Facultad de Ingeniería de la Universidad de Carabobo y Departamento de Calidad de la Empresa Cargill de Venezuela. REFERENCIAS Badui, S. (1997). Química de los alimentos. México: Longman de México Editores, s.a. de c.v. Camisón, C., Cruz, S. y González T. (2006). Gestión de la Calidad: Conceptos, enfoques, modelos y sistemas. España: Pearson/Prentice Hall. Carreto M., Cuerdo M., Dirienzo M. y Di Vito M. (2002). Aceite de oliva: Beneficios en la salud. En Revista Invenio, 5(8), 141-149. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (2001). Aceites y grasas vegetales. Determinación de cenizas. 3ª revisión. Norma N° 328-2001. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (2001). Aceites y grasas vegetales. Determinación de Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (2001). Aceites y grasas vegetales. Determinación del índice de refracción. 2ª revisión. Norma N° 702-2001. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (1998). Aceites y grasas vegetales. Determinación del índice de saponificación. Norma N° 323-1998. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (1980). Determinación de nitrógeno. Método de Kjeldahl. Norma N° 1195-80. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Delgado, R. y Ramírez, M. (2006). Desarrollo de un producto cosmético con propiedades antiarrugas a partir del aceite de la semilla de merey (Anacardium oceidentale L. ). Trabajo especial de grado no publicado, Facultad de Ingeniería, Escuela de Ingeniería Química, Universidad de Carabobo, Venezuela. Lugo, M. y Hernández J. (2004). Banco de germoplasma de pijiguao. En Revista INIA Divulga 1(3), pp. 28-31. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (2001). Aceites y grasas vegetales. Determinación del índice de yodo por el método Wijs. 4ta revisión. Norma N° 324-2001. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Lugo, M., Infante J., Hernández, J. y Orozco A. (2005). Parámetros reproductivos de un banco de germoplasma de pijiguao (Bactris gassipaes HBK) en el estado amazonas, Venezuela. En Revista Bioagro, 17(3): 149-154. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (2001). Aceites y grasas vegetales. Determinación del índice de peróxido. 2da revisión. Norma N° 508-2001. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Marcano, E., Belén, D., Jiménez, N. y Pino, K. (2004). Características fisicoquímicas del aceite de la semilla de la coroba (jessenia polycarpa karst). En Revista Grasas y aceites, 55(4): 423-427. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (1997). Aceites y grasas vegetales. Preparación de la muestra para análisis. 2ª revisión. Norma N° 635-1997. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (1979). Determinación de fibra cruda. Norma N° 1194-1979. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Oviedo, E.; Hernández, C. y Mieres, A. (2010). Modelaje de la extracción de aceite asistida por microondas y con solvente de la almendra del corozo ( Acrocomia aculeata ). En Revista Ingeniería y Sociedad UC, 5(2), 78-83. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (1979). Determinación de humedad. Norma N° 1156-1979. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (1982). Determinación de calcio. Método de referencia. 1ª revisión. Norma N° 1158-1982. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (1983). Determinación de fósforo. Método de referencia. 1ª revisión. Norma N° 1178-1983. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Rondón, J. (2009). Evaluación del proceso de extracción del aceite de la pulpa del fruto de la palma del pijiguao ( Bactris gassipaes H.B.K.). Trabajo especial de grado no publicado, Facultad de Ingeniería, Escuela de Ingeniería Química, Universidad de Carabobo, Venezuela. Fecha de recepción: 19 de febrero de 2012 Fecha de aceptación: 9 de abril de 2012 Comisión Venezolana de Normas Industriales COVENIN (1996). Determinación de la grasa libre. Norma N° 3218-1996. Fondonorma. Caracas, Venezuela. Ingeniería y Sociedad UC. Vol. 7, No. 2 93 P. 87-94 2012 94 Evaluación Comparativa del Rendimiento del Proceso de Extracción y Caracterización .... Ortiz, P. Jean C.