XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico INESTABILIDAD DE MICROSATÉLITES EN PACIENTES CON CÁNCER COLORRECTAL María Reyna Huerta Sánchez, Centro Universitario de los Altos, reyna_jy@hotmail.com Asesora Melva Gutiérrez Angulo, Centro Universitario de los Altos, melva73@hotmail.com PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA A nivel mundial, el cáncer colorrectal (CCR) ocupa el 3° lugar en incidencia mientras que en México se ubica en el 4° lugar. La etiología del CCR es multifactorial y se han descrito al menos tres vías moleculares que conducen al desarrollo de este tipo de cáncer (vía de inestabilidad cromosómica, inestabilidad de microsatélites y fenotipo metilador de islas CpG). La vía de inestabilidad de microsatélites (MSI) representa el 15% de todos los casos y puede ser producida por hipermetilación del promotor del gen MLH1 o por mutaciones en línea germinal en cualquiera de los genes de reparación del DNA MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2. La caracterización de esta vía se realiza con el panel de 5 marcadores NR-24, NR-21, NR-27, BAT-25 y BAT26. En este trabajo se realizó la detección de la MSI del marcador NR-24, éste es un repetido de 24 nucleótidos de Timina en la región 3’ no traducida del gen ZNF2. METODOLOGÍA La identificación de la MSI para NR-24 se realizó en el DNA de tejido tumoral de 35 pacientes con CCR. Primero se extrajo el DNA con el kit High Pure PCR Template Preparation de Roche. La cuantificación del DNA se realizó por espectrofotometría a 260 nm. La región que contiene el repetido se amplificó por PCR y los productos se observaron en un gel de poliacrilamida teñido con nitrato de plata. El tamaño del producto de PCR para el alelo normal fue de 128 pb. Si el paciente con CCR era positivo el marcador NR-24 se podían observar los alelos de 152 pb (ganancia del repetido) o de 104 pb (deleción del repetido). CONCLUSIONES Este trabajo es parte de un proyecto de identificación de MSI en pacientes con CCR por lo que aún no concluye, sin embargo, en las 35 muestras analizadas se pudo establecer que el marcador NR-24 no presentó inestabilidad. La identificación de la MSI con los cinco marcadores en pacientes con CCR es importante como diagnóstico inicial en el laboratorio de Genética. El diagnóstico positivo de inestabilidad permite distinguir CCR de tipo esporádico y CCR de tipo hereditario autosómico dominante (síndrome Lynch). En el primer caso se procede con análisis de hipermetilación del gen MLH1 y en el segundo se debe buscar mutaciones de línea germinal de los genes MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2. Con esta información el médico especialista hará una mejor elección del tratamiento quirúrgico. En cambio, los individuos negativos para inestabilidad tienen peor pronóstico y en algunas etapas del desarrollo del cáncer no responden al tratamiento que habitualmente reciben. © Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico Agosto 2014