CLORO Color - Hg(SCN)2 + 2Cl 3SCN + Fe Presentación 01584 50ml Reactivo para la determinación colorimétrica de Cloro en suero. PRINCIPIO Los iones de cloro reaccionan con el complejo mercurio thyocianato formando cloruro de mercurio (II) e iones de thyocianato. Los iones liberados de thyocianato reaccionan con los iones de hierro (II) presentes en el reactivo formando un complejo coloreado cuyo máximo nivel de absorción es a 480 nm. La intensidad del color es directamente proporcional a la concentración de calcio en la muestra. - Código +3 PROCEDIMIENTO Llevar la muestra a la temperatura que se realizará el ensayo. Las pipetas a utilizar deben estar limpias y libres de residuos para no contaminar el reactivo. Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: - HgCl2 + 2SCN Fe(SCN)3 CONTENIDOS 480 nm (460-550 nm) 1 cm Ambiente Contra Blanco de Reactivo BLANCO PATRON MUESTRA MUESTRA (ml) -- -- 0.01 ml (10µl) PATRON (ml) -- 0.01 ml (10µl) -- REACTIVO (ml) 1.00 1.00 1.00 REACTIVO Mercurio Nitrato Mercurio Thyocianato Hierro Nitrato Solución acido-metanol 0.105mM 1.01mM 37.63mM cs PATRON Cloro en solución estabilizada 100mEq/L Mezclar e incubar 5 minutos a temperatura ambiente. Leer las absorbancias llevando a cero el espectrofotómetro con el blanco de reactivo. El color resultante es estable por lo menos treinta (30) minutos. CÁLCULOS PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS • Conservado entre 15°C y 30°C y protegido de la luz , estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. • Descartar si el reactivo se ha tornado turbio y/o café-rojizo. El reactivo debe ser una solución amarillo-pálida. • El reactivo tiene componentes tóxicos, evite el contacto con la piel y/o ropa. En caso de algún contacto lave abundantemente con agua. • La prueba mide cloro en forma muy sensible. La utilización de material de vidrio contaminado y en contacto con la piel puede llevar a valores altos de cloro. Se recomienda el uso de material de plástico de un solo uso y guantes. • El reactivo es sensible a la luz, en especial con respecto a la luz UV, por esta razón siempre debe almacenarse protegido de la luz. FACTOR = ____ 100 _______ Absorbancia Estándar Cloro (mEq/L)= Factor x Abs. Muestra VALORES DE REFERENCIA Suero: 98-108 mEq/L Nota: Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios intervalos de referencia. CONTROL DE CALIDAD Pueden ser empleados todos los sueros con valores de Cloro determinados por este método. Nosotros recomendamos el uso de nuestro suero de origen animal IHR Diagnóstica para verificar la funcionalidad del procedimiento de medida. Cada laboratorio debe establecer su propio programa de control de calidad interno, así como procedimientos de corrección en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias aceptables. MATERIALES ADICIONALES REQUERIDOS NO SUMINISTRADOS • Espectrofotómetro o foto colorímetro de filtros capaz de medir absorbancia a 460-550 nm. • Pipetas automáticas. • Cronometro y/o timer. MUESTRAS La muestra a utilizar debe ser suero no hemolizado. Separar el suero del paquete celular lo más pronto posible, y conservar la muestra en tubos bien tapados. El cloro es estable en suero 24 horas a temperatura ambiente y hasta tres (3) meses conservado en congelador (-20°C). 1/2 2006-12v3.0 CLORO Color Código Presentación 01584 50ml Reactivo para la determinación colorimétrica de Cloro en suero. CARACTERISTICAS DE DESEMPEÑO LINEARIDAD La reacción es lineal de 70 hasta 125 mEq/L. Para valores superiores, diluir la muestra con agua destilada y el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilución. REPETITIVIDAD Concentración media 97 mEq/L 111 mEq/L DE 0.9 1.2 CV% 0.9 1.1 REPRODUCIBILIDAD Concentración media 97 mEq/L 109 mEq/L DE 1.4 1.6 CV% 1.4 1.5 EXACTITUD Análisis de la regresión lineal obtenido con muestras de suero analizadas con el presente método y otro método similar se hallo un coeficiente de correlación (r) igual a 0.991 con una ecuación de regresión lineal y=1.01x+0.11 (n=80, Rango 80-120 mEq/L). INTERFERENCIAS Bromuro y fluoruro pueden causar falsos niveles altos de cloro en 2 la muestra . Muestras lipémicas y/o ictéricas no presentan interferencias significativas en la reacción. Para una lista completa de los medicamentos y sustancias que pueden interferir 4 en la determinación de calcio consulte Young, et al. BIBLIOGRAFÍA 1.Trinder, P., Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an alternative oxygen acceptor. Ann Clin Biochem. 6:24-27, 1969. 2.Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and Technics.Harper and Row Publisher. New York, 1964. 3.Young D.S., et al., Clin Chem. 18(10) 1972. th 4. Young D.S. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4 Ed AACC, 1995 Índice de Símbolos Producto para diagnóstico in-Vitro Referencia o Código Pruebas por Kit Para usar consulte las instrucciones Precaución Consultar las instrucciones Fabricante Número de Lote Fecha de Caducidad Fecha de Fabricación Limite de Temperatura Riesgo Biológico ESPECIALIDADES DIAGNOSTICAS IHR Ltda. PBX: +(2) 552 5444 / Calle 7 A No. 45-07 Santiago de Cali - Colombia e-mail: servicioalcliente@ihrdiagnostica.com www.ihrdiagnostica.com 2/2 2006-12v3.0