PRÁCTICA DE LABORATORIO I-10 CAPA MONOMOLECULAR OBJETIVOS • • • • Aprender sobre las propiedades atómicas y moleculares de la materia y sus magnitudes físicas Lograr depositar una capa monomolecular de aceite sobre una superficie de agua Medir el largo de una molécula orgánica Aprender sobre el concepto y orden de magnitud del Número de Avogadro MATERIALES 1. Cubeta con agua 2. 2 Soluciones de ácido oleico en alcohol de concentraciones distintas en frascos con gotero. 3. 1 frasco con gotero de iso-propanol. 4. Polvo de Licopodio o talco 5. Cámara digital con trípode o Webcam con soporte universal 6. Tobos y Coletos para dejar el laboratorio limpio 7. Micropipeta de 10 μl Introducción General En la Naturaleza existen objetos cuyas dimensiones varían en un inmenso rango. Por ejemplo el tamaño de nuestra galaxia es del orden de 105 años-luz (1 año-luz = 9.5 x 1015 m) y los átomos tienen radios que varían de 0.53 Å para el H hasta 2.8 Å para el Cs (1Å = 10-10 m = 0.1 nm) .La ciencia que trata con objetos de algunas decenas de Å es la nanociencia y una de sus aplicaciones es la nanotecnología que empieza a rendir frutos impensables hace algunos años. Con el microscopio electrónico más potente no es posible observar átomos, sin embargo si se pueden distinguir arreglos Capa Monomolecular I - 10 . 1 macromoleculares. Si consideramos objetos en el rango de los micrómetros (1 μm = 10-6 m), ya estamos en el dominio de objetos manejables, espesor de una hoja de papel, de un cabello, de un grano de polvo y el microscopio óptico nos permite distinguirlos. Como ejemplo, observe una resma de papel (500 hojas) y haga Ud. un estimado del espesor de una hoja sin hacer ninguna medida. En el experimento que va a realizar obtendrá una medida del alto de la molécula de un aceite, tamaño que es varios órdenes de magnitud más pequeño que el espesor de una hoja de papel. El experimento se basa en la siguiente idea: si usted deposita una pequeña cantidad de aceite sobre la superficie del agua, el aceite se esparcirá y flotará formando una capa extremadamente delgada. Si la cantidad de aceite depositado es muy pequeña, o la superficie del agua muy grande, el espesor de esta capa, o película de aceite, será al menos igual al grueso, o altura h, de una molécula de aceite. Esto es lo que se llama una capa monomolecular. Por consiguiente, si pudiésemos medir el espesor de esa película delgada de aceite, podríamos concluir que una de las dimensiones de la molécula de aceite, no es mayor que el espesor de la película. El ácido oleico es un ácido orgánico graso, que se encuentra en el aceite de oliva, es un excelente ejemplo de un material aceitoso, fácil de conseguir, y que forma películas delgadas sobre el agua. Es uno de los componentes principales del Aceite de Oliva, en la Pasta de Cacao y en el Aceite de Aguacate y se usa para disminuir el nivel de colesterol en la sangre. Información adicional sobre las aplicaciones del ácido oleico y sustancias “aceitosas”, o sea los llamados lípidos se puede conseguir en Internet. Las moléculas que son repelidas por el agua son llamadas hidrofóbicas, y las que son atraídas son llamadas hidrofílicas. El ácido oleico tiene un lado hidrofóbico, y el otro hidrofílico donde están los átomos de oxígeno (Figura 1); cuando la película de aceite flota sobre agua, el lado hidrofílico de las moléculas, se coloca en contacto con el agua, y por supuesto su lado hidrofóbico queda en contacto con el aire circundante, alejado de la superficie del agua. Agua Fig.1 Disposición de las moléculas de ácido oleico sobre una superficie de agua Una sola gota de ácido oleico puro es suficiente para que se forme una película, muy delgada, que flotará sobre la superficie entera de una piscina. Por supuesto, si la superficie entera de la piscina es cubierta por el aceite no podremos asegurar que la capa sea la más delgada posible. En nuestro experimento vamos a usar un recipiente mucho más pequeño entonces en lugar de usar el ácido oleico puro usaremos una sola gota de una solución muy diluida de éste en alcohol (iso-propanol) que se evaporará rápidamente. Capa monomolecular I - 10. 2 A continuación encontrarán una tabla con información de interés (algunas propiedades físico-químicas) del ácido oleico y un modelo aceptado de su estructura molecular (o sea la distribución de los átomos que forman esa molécula en el espacio). Fórmula molecular: C18 H34 O2 CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH Peso molecular: 282.47g/mol Punto de fusión: 13.5º C Punto de ebullición: 360 ºC (a 1 atm) Presión de vapor: 9.4 mmHg (a 0 ºC) Densidad: 0.895 g/cm3 Índice de refracción: 1.4449 Área transversal de la molécula: 2.1 x 10-16 cm2 Viscosidad: 27.64 mPa.s (a la temperatura de 25º C) En el experimento se usa, como muestra, una gota de ácido oleico altamente diluida en alcohol. Conociendo la concentración de la solución utilizada y el volumen de la gota es posible calcular el volumen de ácido oleico contenido en la gota. Usando la densidad del ácido oleico se puede calcular la masa de ácido oleico en la gota. Al depositar una gota de esta solución sobre agua cubierta de un polvo fino se va a formar una mancha cuasi circular provocada por la capa de ácido oleico, ya que el alcohol se evapora o se disuelve en el agua. Si suponemos que las moléculas se ordenan formando una capa de barritas verticales (cuya altura h es la de una molécula), orientadas con el extremo hidrofilico hacia el agua, podemos hallar la altura de la capa sabiendo el volumen de ácido oleico V y el área A de la mancha circular flotando sobre el agua: V = hA = h πd2 4 siendo d el diámetro de la mancha. Si se conoce el área transversal que cada molécula ocupa sobre el agua se puede determinar el número de moléculas que constituyen la mancha. Conociendo la masa del ácido oleico flotando sobre el agua se puede determinar el número de moléculas por gramo y conociendo el peso molecular es fácil determinar el número de moléculas en un mol de ácido oleico, que debiera ser igual al número de Avogadro. En efecto, el número de Avogadro (Símbolo: NA, L,) también llamado constante de Avogadro, es el número de “entidades” (usualmente átomos o moléculas) contenidas en un mol de una sustancia. Por ejemplo NA es el número de átomos de carbón-12 en 12 gramos de carbón (Un mol de carbón). El valor actualmente aceptado del número de Avogadro es: Capa monomolecular I - 10. 3 NA = (6.0221418 ± 0.000 000 3) x 1023 mol-1 NOTA IMPORTANTE Los experimentos se deberán llevar a cabo en el piso para evitar que el polvo entre en las computadoras, teclados o ratones. El laboratorio deberá quedar limpio para el Grupo siguiente. Por favor use los coletos y tobos y vacíen estos al terminar. A. Medición del tamaño de una molécula PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL A1. La solución Nº 1 ha sido preparada en la forma siguiente: S0 = 95 cm3 de iso-propanol + 5 cm3 de ácido oleico puro. S1 = 5 cm3 de S1 + 45 cm3 adicionales de iso-propanol. La concentración en volumen de la solución S1 es : volumen de ácido oléico c1 = volumen total Calcule la concentración de la Solución 1 que es la primera que Ud. va a usar. Es importante que mantengan los frascos de las soluciones tapados para evitar que el alcohol se evapore y que la concentración de la solución varíe. En una bandeja grande y de escasa altura, que esté limpia, vierta agua hasta alcanzar una profundidad de al menos 1 cm. Deposite una moneda de diámetro medido con el vernier en el fondo de la bandeja no muy lejos del centro. Esta moneda, de diámetro conocido, servirá para escalar las mediciones de distancias realizadas en la foto que Ud. tomará de la mancha producida. Alternativamente se puede utilizar una regla graduada como se describe más abajo. A2. Para evidenciar su película de aceite y poder medir su tamaño es necesario depositar sobre la superficie del agua un polvo fino (licopodio o talco) que no se moje y flote sobre el agua; la película al formarse va a apartar estos granos y entonces los bordes de la película estarán demarcados y será fácil observarla y medir su diámetro si su forma es aproximadamente circular. Espolvoree ligeramente la superficie del agua, con polvo de licopodio o con talco; el licopodio es un polvo fino, hidrofóbico de origen vegetal, mientras que el talco es de origen mineral. Trate de que el polvo forme una capa regular muy fina. Disperse la capa Capa monomolecular I - 10. 4 de polvo con un palillo de dientes limpio (nuevo) rompiendo los grumos y déjela reposar hasta que la capa sea fina y uniforme. Evite que la grasa de los dedos contamine la superficie. Para asegurarse de que la película de aceite flotante que vamos a medir es en efecto de ácido oleico - y no de alcohol - comience por colocar una o dos gotas de alcohol sobre el agua en la bandeja. Observe por un rato y con cuidado la superficie del agua. ¿Qué ocurre?. A3. Ahora use la micropipeta o el gotero para depositar una gota de la solución diluida, S1, del ácido oleico sobre el agua. Trabaje en el piso y deje caer la gota desde la menor altura posible en el centro de la bandeja. Si la cámara digital o la cámara de video están disponibles en el laboratorio, tome una foto en cuanto la mancha se forme y cuando aún su forma sea aproximadamente circular. (Siga las instrucciones dadas en el apéndice). Con el programa ImageJ (del National Institute of Health que se puede bajar de la web gratuitamente, http://rsbweb.nih.gov/ij/index.htm ), o con el Programa Paint de Office, Ud. puede dibujar en su foto líneas diametrales y medir su longitud.. Debe medir el diámetro en 25 posiciones distintas por lo menos y elaborar una hoja de datos. El programa ImageJ les da directamente la distancia en pixeles entre los 2 puntos o también el área de la mancha si la aproximan Ud. a una elipse que van ajustando a la mancha modificando sus puntos de anclaje. Para el escalamiento de sus medidas es decir pasar de distancias en pixeles a distancias en cm deberán determinar sobre la foto el diámetro de la moneda, promediando el largo de varias líneas diametrales o si escogió ajustar el área de la mancha deberá Ud. medir el área promedio de la moneda. Si alternativamente escogió usar una regla para escalar su foto el procedimiento para este escalamiento está descrito en el apéndice. Si no hay cámara digital entonces, haga rápidamente 25 medidas de este diámetro, d,, con la regla antes de que la mancha se deforme. Calcule el promedio de sus medidas <d> y el error sobre este promedio Δ<d>. Calcule el área de la mancha y su error, <A> ± Δ<A>. A4. Cuente cuantas gotas de su gotero hay en 0.5 cc y deduzca el volumen de una gota,, Vg. Alternativamente, utilice una micro pipeta de la cual deposita precisamente un volumen de 10 μl . (1 μl = 10-6 litros). Deberá usar una punta limpia para la micro pipeta. A5. Calcule el espesor de la película de aceite, h, en función de su área y del volumen de aceite contenido en una gota de solución que quedó sobre el agua. Evalúe el error. Así hemos determinado la longitud h ± Δh de la molécula si suponemos que el espesor de la capa fue efectivamente de una sola molécula. Capa monomolecular I - 10. 5 Fig.1 Mancha creada por una gota de solución de acido oleico en iso-propanol, y diámetros medidos para determina <d>. A6. Supongamos que la película de aceite obtenida y medida por Ud. en el laboratorio es en efecto monomolecular (o sea que su espesor es una medida del largo de la molécula) y que las moléculas tienen aproximadamente la forma de un paralelepípedo de base cuadrada de lados e2 = e3 = h/10. Si conocemos la densidad, ρ, la masa molecular, M, (masa de un mol) y el volumen de una molécula podemos estimar el número de Avogadro, NA, que es el número de moléculas en un mol. Calcule a partir de sus resultados NA ± ΔNA . Compare su resultado con el valor aceptado que se le dio anteriormente y discuta sus posibles fuentes de error o las hipótesis que Ud. hizo. A7. En caso que la mancha no tenga una forma aproximadamente circular y se dificulte la medida del diámetro de la misma, proceda a vaciar la bandeja limpiarla de nuevo y repita todo el procedimiento hasta obtener unas medidas que Ud. considere confiables. B.- Segunda determinación del tamaño de una molécula B1. Limpie su bandeja y de nuevo coloque agua limpia en ella. La solución S2 fue preparada de la siguiente forma: 1 cm3 de la solución S1 se diluye en 1cm3 de alcohol. Calcule la concentración en volumen de la solución S2. B2. Repita el experimento dejando caer una gota de esta nueva solución sobre el agua cubierta de polvo. Mida el área de la capa, y calcule el nuevo espesor, h2 ± Δh2. Capa monomolecular I - 10. 6 Compare el espesor, que ahora obtiene con el que obtuvo anteriormente. B3. Repita el cálculo del Número de Avogadro con su error. Discuta sus resultados. Apéndice: Uso de de la cámara WEBCAM y lectura de fotografías. Procedimiento de medida del área de la mancha mediante el uso de WEBCAM. la cámara 1.- Toma de las fotos. Sujete la cámara mediante un soporte universal de forma que la misma se encuentre mirando verticalmente hacia el centro de la superficie del agua a una altura de aproximadamente 50 cm. Enchufe el conector USB de la cámara en el puerto correspondiente en la PC del mesón y proceda a encender la computadora o a reiniciarla. (esto pudiera no ser necesario). Haga doble clic sobre el icono VideoCAM Look. Esto inicia el programa utilizado para tomar las fotos. Hay varias maneras de tomar las fotos. La manera recomendada es: Pisar el botón en la misma cámara. En este caso la foto tomada aparece en una ventana nueva en la pantalla de la PC y es posible guardarla en un archivo para luego poder escoger la mejor foto para efectuar sus medidas. Proceda a tomar fotos de las manchas con la solución 1 y con la solución 2. Tome también una foto de la regla sin mover la cámara ni su soporte. En la foto se deben distinguir las divisiones de la regla. Alternativamente deposite una moneda en el fondo de la bandeja no muy lejos del centro. 2.- Medida de los diámetros y/o cálculo del área. a) Usando el programa ImageJ, se obtienen directamente los largos de segmentos de recta en pixeles, en nuestro caso el diámetro de la mancha en pixeles. Aplicándole el factor de escala se obtiene el diámetro en cm. También se pueden medir áreas directamente deformando los puntos de anclaje de la herramienta elipse para describir la superficie a medir. Use los dos métodos y compárelos. La relación entre la distancia real entre los 2 puntos marcados en cm y la distancia en píxeles en la foto depende de la altura de la cámara sobre la superficie de agua. Esa relación o factor de escala (cm/pixel), FE, se obtiene a partir de la foto de un objeto de dimensiones conocidas, una regla o una moneda en el fondo de la bandeja. En la foto de la regla tome unos 5 datos de distancia en cm y haga un gráfico de la distancia en cm en función de la distancia en píxeles. Realice un ajuste lineal a esos datos y obtenga la pendiente, que será su factor de escala FE. Multiplicando las distancias en píxeles por FE obtendrá las distancias en cm. Si en su foto incluyó la moneda deberá Ud. medir el diámetro promedio de la moneda (10 medidas) en pixeles y conociendo su diámetro en cm (medido con un vernier) puede Ud. calcular el FE de sus medidas. Capa monomolecular I - 10. 7 b) Con el Programa PAINT también podrá medir los diámetros pero es más largo y complicado: abra la foto y notará que al mover el cursor sobre el dibujo aparecerán dos números en la parte inferior derecha de la pantalla que representan las coordenadas (X, Y) del cursor en Píxeles. Con la herramienta de trazar líneas dibuje 25 diámetros y anote las coordenadas de los dos extremos de cada diámetro en una hoja de datos. Calcule en su hoja de datos los largos de los 25 diámetros que trazó en pixeles. Igualmente deberá encontrar el FE descrito más arriba para pasar de su medida en pixeles a su medida en cm. Capa monomolecular I - 10. 8