EVALUACIÓN DE TRES AISLAMIENTOS DE HONGOS FORMADORES DE MICORRfZA ARBUSCULAR (HFMA) EN ARVEJA CHINA (ptsum sativum L. var. macrocarpon) Y ARVEJA DULCE (Plsum sativum L. va¡. saccharatud BAJO INVERNADERO EN LA SABANA DE BOGOTÁ. MARTHA LUCÍA CALDERÓI.I RTV¡RROO UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES - U.D.C.A FACULTAD DE INGENIERiA AGRONÓMICA BOGOTA D.C. 2011 UDCA I SIORE FECI{!.: trtg *5 7o¿t J / IAR 20 l2 n r. r.r.rr.fl.. r.a ,rr cl le l/ 2r, I I EVALUACIÓN DE TRES AISLAMIENTOS DE HONGOS FORMADORES DE MICORRIZA ARBUSCULAR (HFMA) EN ARVEJA CHTNA (ptsum sativumL.var. macrocarpon) Y ARVEJA DULCE (Plsum sat¡vum L. var. saccharafum) BAJO INVERNADERO EN LA SABANA DE BOGOTÁ. MARTHA LUCÍA CALDERÓN ALVARADO Trabajo de grado presentado como requisito para optar al título de Ingeniera Agrónoma Dirigido por: María Margarita Ramírez Gómez l.A. M. Sc. Microbiología de Suelos Codirector: Luis Hernando Estupiñan Bravo Bió|. M. Sc. Biodiversidad Vegetal UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES - U.D.C.A FACULTAD DE INGENIERíA AGRONÓMICA BOGOTA D.C. 20't1 NOTA DE APROBACIÓN Margarita Ramírez Gómez MPhil. Directora Edgar Martínez Granja Ph. D Codirector Jurado gebbrg Zenne¡ Ph. D DEDICATORIA A MI FAMILIA, MI MAYOR TESOROI A mi mamá... Incondicional. A mis hermanos, mis mejores amigos!! A mi papá, por darme el mayor regalo... AGRADECIMIENTOS A Dios, por darme la mano en el camino. A la U.D.C.A, y sus profesores que con calidad humana, contribuyeron en mi formación integral. A mis compañeras de estudio y trabajo, por su amistad y compañerismo durante esta etapa de mi vida. A CORPOICA, especialmente al Ing. Germán Sánchez, líder del proyecto de investigación en Guisante, a la Dra. Margarita Ramírez y a la lng. lsueh Arenas, por su confianza, orientación y apoyo en el desarrollo de esta investigación y por permitirme formar parte de su grupo de trabajo. A Robert Morales, por su invaluable ayuda en el trabajo de campo. A Antonio Ramirez, quien me orientó en el análisis económico. A la Dra Ingeborg, a mi codirector, a mis jurados, al Ing. Rodolfo Mejía y a Nora Zea por su oportuna colaboración. CONTENIDO pás. RESUMEN .1 .INTRODUCCIÓN 12 2. OBJETIVOS 15 2.I 15 OBJETIVO GENEML .f 'l 2.2 OBJETIVOS ESPECiFICOS 15 3 16 REVISIÓN DE LITERATURA 3.1 CLASIFICAC|óN TAXONóM|CA DE pisum sativum t. to 3.2 GENERALIDADES DEL CULTIVO 16 3.2.1 Arveja China (Pisum sativum L. var macrocarpon). 3.2.2 Aweja Dulce (Plsum sativum L. var. saccharatum) 3.2.3 Principales enfermedades del cultivo 18 3.3 EL FÓSFORO 19 3.3.1 El fósforo en el suelo 19 3.3.2 El fósforo y las plantas. 20 17 IY 3.4 M|CORR|ZAS. 21 3.4.1 Micorrizas arbusculares 21 3.4.1.1 Establecimiento de la simbiosis 22 Kuklospora colombiana (Spain & N.C. Schenck) Oehl & Sieverd 24 Acaulospora mellea Spain & N.C. Schenck (1984) 26 G/omus sp. 27 3.4.1 .2 3.4.1.3 3.4.1 .4 3.4.2 Micotrizas y exceso de fósforo. 27 4 29 MATERIALES Y MÉTODOS 4.1 DISEÑO EXPERIMENTAL. 4.2 VARIABLES EVALUADAS 4.2.1 Longitud de planta. 4.2.2 Número de nudos. 31 4.2.3 Días a floración y a formación 4.2.4 Días a cosecha. 4.2.5 Número de vainas. 4.2.6 Tamaño de vaina. 4.2.7 Número y peso de granos. 4.2.8 Peso fresco. 4.2.9 Peso seco. de vaina. 34 34 34 34 34 34 4.2.10 Contenido de Fósforo. 4.2.11 Porcentaje de colonización 35 4.2.12 Número de esporas por gramo de sustrato. 35 4.3 ANALISIS ECONÓMICO. 4.3.1 Presupuesto parcial JO 4.3.1.1 4.3.1.2 Ingreso bruto. ?A Costos Variables. ?A Total de costos. JO Ingresos netos 37 Tasa de Retorno Marginal ,\.'7 4.3.1 .3 4.3.1.4 4.3.1.5 4.3.1.6 5 Rendimientos RESULTADOS Y DISCUSIÓN 5.1 ARVEJA CHINA - GOLIATH (pisum sativum L. var. macrocarpon) 5.1.1 Curvas de crecimiento. .1 5.1 .1 .2 5.1 .1 Longitud de planta 38 Número de nudos 40 .2 Variables en floración 5.1.2.1 Días a botón, floración .2.2 5.1.2.3 1n 38 40 5.1 5.1 38 y a formación de vaina. 40 Peso fresco, seco, longitudes aérea y de raí2. 41 Micorrización 42 5.1.3 Cosecha 43 5.1.3.1 Días a cosecha. 43 Producción 44 5.1 .3.2 vainas. 5.1 .3.4 Tamaño de vaina. 5.1.3.3 5.1.3.5 Número de Modelo de componentes de 45 46 rendimiento 5.1.4 Análisis económico 5.2 ARVEJA DULCE - SUGAR DADDY (Pisum 49 sativum L. var. saccharatum) Sl 5.2.1 Curvas de crecimiento. planta. Número de nudos. 5.2.2 Yariables en floración 5.2.1.1 5.2.1.2 Longitud de vaina. Peso fresco, seco, longitudes aérea y de raíz Micorrización 5.2.3 Cosecha 5.2.3.1 Días a cosecha 5.2.3.2 Producción 5.2.3.3 Número de vainas. 5.2.3.4 Tamaño de vaina. 5.2.3.5 Modelo de componentes de rendimiento 5.2.4 Análisis económico 6 CONCLUSIONES 5.2.2.1 5.2.2.2 5.2.2.3 47 Dias a botón, floración y a formación de 51 5i 53 54 54 55 56 58 Sg 58 59 60 61 63 66 6.1 ARVEJA CHINA - GOLIATH (Pisum sativum L. var. macrocarpon) 66 6.2 ARVEJA DULCE - SUGAR DADDY (Pisum sativum L. var saccharatum) 67 7 RECOMENDACIONES 8 BIBLIOGRAFIA 68 69 LISTA DE TABLAS pag. Tabla T l. Fertilización recomendada y los nutrientes aportados (kg/ha) 32 abla 2. Promedio de altura de planta para cada tratamiento en la variedad Goliath en algunas fechas prueba de y resultado de separación de medias por la Tukey. 39 Tabla 3. DÍas hasta la aparición del botón floral, la apertura de flor y formación de vaina bajo tratamientos de fertilización y uso de HFMA en variedad la la Goliath. 4L Tabla 4. Efecto de los tratamientos de fertilización y uso de HFMA en algunas variables tomadas en época de floración para la variedad de arveja china Goliath. 42 Tabla 5 Número de repeticiones en producción para cada tratamiento al inicio de cosecha para la variedad de arveja china Goliath. 44 Tabla 6. Longitud, ancho y peso de vainas cosechadas para arveja variedad Goliath bajo tratamientos de fertilización química y uso de HFMA. 46 Tabla 7. Tabla resumen del presupuesto parcial para cada tratamiento para la variedad Goliath. 50 Tabla 8. Costos ordenados de menor a mayor y los respectivos ingresos de los tratamientos evaluados en la variedad Goliath. Tabla 9. Altura promedia de planta para los química y biológica en la variedad Sugar Daddy 50 tratam¡ento de fertilización . 52 Tabla 10. Tiempo a botón, a flor y a formación de vaina para cada tratamiento en arveja dulce variedad Sugar Daddy. 55 Tabla 11. Efecto de los tratamientos en algunas variables tomadas en época de floración para la variedad de arveja dulce Sugar Daddy. Tabla 12. Número de repet¡ciones en producción para cada tratamiento 55 al 58 inicio de cosecha para la variedad de arveja dulce, Sugar Daddy. Tabla 13. Longitud, ancho y peso de vainas, número y peso de granos por vaina y el peso de 100 granos para tratamientos de fertilización química y uso de HFMA, para la variedad Sugar Daddy Tabla 14. Tabla resumen del presupuesto parcial para cada tratamiento para la var¡edad Sugar Daddy. Tabla 15. Costos ordenados de menor a mayor y los respectivos ingresos de los tratamientos evaluados en la variedad Sugar Dadoy. Tabla 16. Tasa de retorno marginal de los tratamientos dominantes para var. Sugar Daddy. LISTA DE FIGURAS pás. Figura 1. Establecimiento de la simbiosis planta -HFMA. Figura 2. Unidades experimentales ¿c 29 Figura 3. Inoculación de las semillas de arveja china var Goliath con aislamientos de K. colombiana. JU Figura 4. Trasplante a camas aisladas, JI Figura 5. Sistema de tutorado con malla soporte Trical ó¿ Figura 6. Distribución de los hatamientos (T) y los bloques (B) para cada ensayo. Figura 7. Altura de planta por tratamiento para la variedad de arveia china Goliath a partir del 21dds. 38 Figura 8. Número de nudos por tratamiento para la variedad Goliath, a partir del trasplante. Figura 9. 40 Porcentaje de Colonización (PCOL) y Fósforo Total (p_TOTAL) acumulado en planta para cada lratamiento en la variedad de arveia china var. Goliath. 42 Figura 10. Producción (kg) de arveja variedad Goliath bajo tratamientos de fertilización química y uso de HFMA, en un ciclo de 169 días. 45 Figura 11 . Número de vainas producidas en la variedad Goliath bajo diferentes tratamientos de fertilización y uso de HFMA al final del per¡odo evaluado en un ciclo de I 69 días. 46 Figura 12. Modelo de componentes de rendimiento para la variedad Goliath Figura 13. Altura de planta por tratam¡ento para la variedad de arveja dulce Sugar Daddy a partir del transplante. 47 Figura 14. Número de nudos por tratam¡ento de fertilización química y transplante. Figura 15. Porcentaje de Colonización (PCOL) y Fósforo Total biológica para la variedad Sugar Daddy, a partir del acumulado en planta (P_TOTAL) para 54 tratamientos con fertilización quím¡ca y uso de HFMA en la variedad de arveja dulce var. Sugar Daddy. 57 Figura 16. Producción (kg/ha) para tratamientos de fertilización química y uso de HFMA, en un ciclo de 169 días para la variedad Sugar Daddy. Figura 17. Número de vainas producidas por cada tratamiento al final del ciclo para arveja dulce. Figura 18. Modelo de componentes de rendim¡ento para la variedad Sugardady 59 60 62 RESUMEN Aproximadamente el 82% de los suelos hopicales presentan deficiencias de fósforo ya que está en formas no disponibles para las plantas, lo que provoca el incremento de fert¡lizantes para el aporte de este elemento, cuyo porcentaje de eficiencia es de cerca del 10%, aumentando también la contaminación ambiental y el costo económico para los oroductores. Dentro de las alternativas a la fertilización mineral para el manejo de los cultivos limpios u orgánicos, la asociación simbiótica planta-hongo formador de micorriza arbuscular (HFMA) puede ser la clave para disminuir la cantidad de fertilizantes (espec¡almente fosfatados) que debe aplicarse para obtener buenos rendim¡entos gracias a su habilidad de sust¡tuír hasta el 50% del volumen de la fertil¡zación. de tres aislamientos de hongos formadores de micorriza arbuscular (HFMA): Glomus sp, Acaulospora mellea y Entrophospora En este ensayo se evaluó el efecto colombiana, en el crecimiento, desarrollo y rendimiento de plantas de arveja china "Goliath" y arveja dulce "Sugar Daddy", con el aporte del 50% del volumen de fert¡l¡zantes requeridos, comparados con diferentes niveles de fertilización; en total se evaluaron siete tratamientos distribuidos en tres bloques para cada variedad por separado. Glomus sp mostró un buen desempeño en la variedad Sugar Daddy, sustituyendo hasta el 50% de la fertilización mineral, con rendimientos de 11 Vha, estadísticamente iguales a las 15 Vha del testigo con el 100% de la fertilización tradicional; tuvo la mayor tasa de retorno marginal entre los tratamientos inoculados (1702Yo) y superó la tasa de retorno marginal del tratamiento con el I 00% de la fertilización mineral (1059%). Sin embargo, en Goliath no se observaron los efectos favorables de la simbiosis en las variables evaluadas. l2 I. INTRODUCCIóN Las arvejas dulce y china o guisantes, son variedades de la especie prsum sativum L. perteneciente a la familia Fabaceae. Es una de las plantas cultivadas más antiguas ya que se ha encontrado que las utilizaron pueblos neolíticos del cercano oriente, en los años 7,000 a 6,000 A.C. Su cultivo se expandió a regiones templadas y zonas altas de los trópicos de todo el mundo (Benavides ef al 2010). Una de las diferencias entre estas variedades es su punto de cosecha. La arveja china (Plsum sat¡vum L var. macrocarpon), es cosechada cuando las semillas son pequeñas e inmaduras; mientras que la arveja dulce (plsum sativum L. vat. saccharatum), se cosecha de manera similar al tipo común de arveja, pero con semillas más pequeñas (Trevor y Cantwell, 2004). Las variedades de gu¡santes de vainas comestibles son poco conocidas en nuestro país, donde no hay registro de áreas representativas de este cultivo y su consumo ¡nterno es reducido. Sin embargo, los guisantes tienen buena aceptación en los mercados internacionales como Europa, Estados Unidos, Canadá, e en Perú, Nicaragua, Brasil, entre otros (Ministerio de Ganadería y Alimentación - Guatemala. 2007). incluso Agricultura, Es de anotar que la demanda por productos orgánicos es creciente en los mercados internacionales y en éste se incluye también a las arvejas china y dulce, como lo menciona Vergara (2004). Esta situación requiere del uso de tecnologías limpias en la producción agrícola. En la medida en que se desarrollen e implementen estas tecnologías, se logrará abrir nuevos mercados de exportación, con valores agregados reconocidos por consumidores, ya que reduce riesgos en la salud de las personas y en el medio ambiente, mejorando además la calidad e inocuidad de los productos hortofrutícolas (servicio Agrícola y Ganadero - chile -, 2005). Aproximadamenle el 82o/o de los suelos tropicales presentan deficiencias de fósforo. En suelos ácidos, la fracción que es aplicada en forma de fertilizante, es fijado, pasando rápidamente a formas no disponibles para las plantas; mientras que en suelos alcal¡nos y calcáreos, las altas concentraciones de calcio producen también la fijación del fosforo, mediante precipitación de fosfatos cálcicos poco solubles y la adsorción del HzPO ¡ en el complejo calcáreo (Fassbender y Bornemisza, 1994). Esto hace que las aplicaciones de fertilizantes fosfóricos se lncrementen, ya que el porcentaje de eficiencla de fertilizantes fosfatados alcanza en afgunos casos solo el 10o/o, aumentando no solo el costo económico para los productores, sino también la contaminación ambiental. a los efectos negativos que han causado los fertilizantes químicos de síntesis en el deterioro del medio amb¡ente, se trabaja, desde hace algunas Debido décadas, en la introducción de alternativas a la fertilización mineral integrada en el manejo de los cultivos, buscando establecer cultivos limpios u orgánicos. Las asoc¡aciones simbióticas planta-hongo formador de micorriza arbuscular (HFMA) pueden ser la clave para disminuir la cantidad de fertilizantes (especialmente fosfatados) que debe aplicarse para obtener buenos rendimientos. Las plantas micorrizadas desarrollan mayor altura, vigor y área foliar, incrementan los rend¡mientos entre 15 y 50% y protegen a la planta contra algunos patógenos y plagas. También, permite ahorrar hasta un 50% del volumen de los fertilizantes necesarios, lo que genera reducción de los insumos y de los costos, e influye en el ejercicio de una agricultura sostenible y ecológicamente más sana 2009). l4 (Noda, 2. OBJETIVOS 2.1 OBJETIVO GENERAL Evaluar el efecto de tres aislamientos de HFMA en los contenidos de nutrientes y rendimiento de arveja china (Pisum sativum L. var. macrocarpon) y arveja dulce (Pisum sativum L. var. saccharatum) bajo invernadero en la sabana de Bogotá. 2.2 OBJETIVOS ESPECiFICOS: Evaluar el efecto de la simbiosis de arveja con HFMA en los contenidos de fósforo y la producción de arveja china y dulce. Establecer curvas de crecimiento de arveja bajo condiciones de simbiosis con HFMA. Analizar los costos de producción del cultivo de guisante con el uso de HFMA comparados con la fertilización mineral hadicional. t5 3. REVISIÓN DE LITEMTURA 3.1 CLAS|FICACfÓN TAXONóM|CA DE pisum sativum L. Reino Plantae Subreino Embryobionta División Magnoliophyta Clase Magnoliopsida Subclase Rosidae Orden Familia Rosales Fabaceae Subfamilia Papillionidae Género Pisum Especie Pisum sativum L. Variedades Pisum sativum L. var saccharatum Nombre común: Arveja Dulce (Cronquist, '1987). Pisum sativum L. var macrocarpon Nombre común: Arveja China (Siles y Martinez, 2004) 3.2 GENEMLIDADES DEL CULTIVO Las arvejas china y dulce se diferencian de la arveja común porque las primeras producen vainas dulces de paredes suculentas recubre interiormente las paredes y carecen del pergamino, que de la vaina. Además, las variedades comerciales de arvejas dulces ó "sugar snap" se caracterizan porque sus semillas son rugosas, de cotiledones verdes, atractivas para el mercado y ausencia de pigmentación antoc¡ánica que podría conferir sabores amargos (Meta et a\.,2007). l6 La característica de semilla rugosa se debe a la presencia de un gen recesivo que produce una enzima defectuosa que retarda la transformación de azúcar a almidón (Myers ef a/., 2001). Esta característica es favorable ya que esta variedad se consume con granos más desarrollados y no se buscan altas concentraciones de almidones en ella. La arveja china, por su parte, se consume cuando los granos están muy poco desarrollados y en ese estado no existe el inconveniente de la transformación de azúcares y coincide con que muchas de las variedades de arveja china son de semilla lisa (Mera et al., 2007). Dado que el producto que se consume es la vaina entera, su apariencia es un factor fundamental para la comercialización de este tipo de arvejas. Las heladas, que no causan mucho daño a las plantas, pueden ocasionar áreas amarillentas sobre las vainas. Así mismo, temperaturas bajas durante la formación de vainas pueden causar curvatura de las mismas (Burt, l ggg), aspecto que es indeseable en el mercado. 3.2.1 Arveja China (Prsum sat¡vum L,var macrocarpon). Las plantas de arveja china germinan entre 5 y I días después de la siembra, tienen una etapa de desarrollo vegetativo comprendido llegan a formar hasta 12 nudos. Alcanza enlre 12 a 55 días en la etapa y vegetat¡va, una altura aproximada de 0.5 m. La floración comienza a los 56 días después de la siembra, forman de 12 a 22 nudos y a los 100 días después de la siembra, alcanza una altura aproximada de 1.0 m. La formación de vainas se produce entre los 60 y 100 días. El período de cosecha comienza a los 65 días y termina a los 100 días después de haberse sembrado. Las vainas miden un promedio entre 8 y 12 cm. de longitud (Cadenas, 2003). l'7 3.2.2 Aweja Dufce (Písum saüvum L. var. saccharatum). La cantidad de semillas empleada para la siembra de la arveja dulce en Guatemala oscila de 65 a 80 kg/ha. Las camas se hacen en filas simples, con distanciamientos para especies enanas de 1.25 m. entre surcos y 0.0Sm. entre sitio. Se adapta a una gran variedad de suelos, con excepción de los muy compactos, prefiere los francos, francos arc¡llosos, fértiles, profundos bien drenados con un pH de 6 a 7. El cl¡ma adecuado para el cultivo es med¡o a frío, en alturas comprendidas entre 1500 comprendidas entre los 10 a y 2450 m.s.n.m. y temperaturas amb¡entales 12oC; temperaturas más altas pueden provocar la caída de las flores y temperaturas más bajas reducir el peso y tamaño de las sem¡llas (Torres, 2003). Según Torres (2003), la instalación de tutores debe realizarse a los 10 días después de la siembra. Los tutores pueden ser de bambú o de cualquier otro material, y se colocan a lo largo de los surcos: uno a cada 4 a 5m, enterrados a una profundidad de 60 a 75cm. La rafia de plástico debe eslar entre 10 y l5cm de la cama, de manera que la planta pueda sujetarse a ésta. La siembra se debe hacer directamente en el terreno sobre los surcos marcados con anterioridad, se distribuye la semilla en hileras; ya sea a mano o con sembradoras, de tal forma que fas semillas vayan quedando a una distanc¡a de 2 a 4 centímetros entre sí v a 2 a 4 centímetros de orofundidad. En Colombia, la fertilización que se recomienda comercialmente es la aplicación de compost en el momento de la siembra a ¡azón de 2 Uha, y un fertilizante compuesto 10-30-10, en dos¡s de 150 kgiha (Sánchez y Arenas, 2010). l8 3.2.3 Principales enfermedades del cultivo Las arvejas presentan alta susceptibilidad a muchas enfermedades, siendo las manchas foliares las más limitantes, principalmente el tizón o añublo de la arveja causado por el complejo Ascochyta spp. (Alarcón, 1998), que reduce los rendimientos entre un 20% y un 50%, demeritando la calidad de la vaina y de los granos cosechados (Tamayo, 2000). Otra de las enfermedades limitantes del cultivo es ef mildeo velloso, causado por el hongo Peronospora viciae f . sp. plsl (Sydow) Boherema & Verhoeven. Esta enfermedad en Cundinamarca ha llegado a causar pérdidas totales de cultivo de arveja común (Tamayo, 2000). Ohas enfermedades reportadas con gran impacto son la antracnosis, causada por Colletotrichum prsr Pat.; el moho gris, causado por Botryotinia fuckeliana (de Bary) Whetzel y la marchitez, causada pot Fusar¡um oxysporum f. sp. plsl (van Hall) Snyd. & Hans (Forero y Ligarreto, 2009). 3.3 EL FÓSFORO 3.3.1 El fósforo en el suelo. Según Fassbender y Bornemisza (,1994), el fósforo es el macronutriente menos móvil y con menor biodisponibilidad para las plantas, debido a su alta estabilidad y poca solubilidad, lo que sumado a la baja mineralización de materia orgánica, puede causar deficlencias en las plantas. Una de las soluciones para esta condición es la aplicación de fertilizantes fosfatados, pero estos reaccionan rápidamente formando compuestos con menor solubilidad y menos asimilables para las plantas, aprovechándose solamente alrededor del 10% del fertilizante (Fassbender, 1 993; Estrada, 2002). to En suelos ácidos, los fosfatos de hierro y aluminio son muy estables e insolubles. Estos compuestos pueden disponerse en forma de películas muy delgadas, retenidas entre los cristales de las arcillas, sobre todo en arcillas tipo 2:i. En el caso de los suelos alcalinos, donde la cantidad de calcio intercambiable es alta y en algunos casos, existe la presencia de carbonatos de calcio, la inmovilización del fósforo sucede por la precipitación de fosfatos de calcio, insolubles en agua. Teniendo en cuenta la fácil inmovilización del fósforo, se hace necesario aplicar altas dosis de fertilizantes para compensar la baja utilización por parte de la planta, lo cual se traduce en pérdidas económicas (Navarro y Navano, 2003). 3.3.2 El fósforo y las plantas. Las plantas requieren fósforo para su adecuado crecimiento y desanollo. El fósforo está presente en procesos como la fotosíntesis, la respiración, la división y elongación de células, en ADN, ARN, en fosfolípidos de membrana, en la formación de semilla e incluso en procesos relacionados con la resistencia a bajas temperaturas. Es parte estructural de las moléculas energéticas, su papel más importante es el de transporte y almacenam¡ento de energía, la cual es obtenida a través de fotosÍntesis y el metabolismo de los carbohidratos, y almacenada en compuestos fosfatados para el subsiguiente uso en los procesos de crecim¡ento y reproducción (García, 2005). El fósforo es un elemento móvil en la planta, se transloca fácilmente del tejido viejo al tejido joven; por lo tanto, las deficiencias se presentan en las partes bajas de las planta donde se encuentran los órganos más viejos. La planta deficiente presenta un lento crecimiento, retrasando la madurez (García,2005). Estudios hechos por Prieto ef a/ (2009), reportan que la arveja, con una adecuada cantidad de fósforo, presenta rendimientos 46% superiores con respecto a los testigos. 20 3.4 Micorrizas. Se definen en términos estructurales como asociaciones entre hongos Gfomeromycota y la raiz de las plantas. El hongo aporta nutrientes minerales, en especial los poco móviles, como fósforo, zinc, cobre y amonio, absorbidos de la solución del suelo a través de las hifas (2¡rm de diámetro) que exploran poros del suelo en los que no pueden penetrar las raíces (200 pm de diámetro) y por la capacidad de extenderse más allá de la zona de agotamiento de la raí2. De esta manera se togra una mayor área explorada en la rizósfera en comparación con plantas no micorrizadas. La planta a su vez, sumin¡stra el carbono ecológico para el hongo (Salas, 2010). v un nicho Según Barea y Fc.cón, citado por Usuga ef al. (2008) la mayoría de plantas están micorrizadas en condiciones naturales; sin embargo, la población puede alterarse por fertilización excesiva, principalmente con fosfatos, y por el uso no controlado de fungicidas y herbicidas. Los Hongos formadores de micorrizas se han clasificado con base en su estructura morfológica y modo de infección en dos tipos principales: /as ectomicorrizas, en la cual los hongos se desarrollan intercelularmente dentro del cortex, formando un manto de hifas sobre las raíces y las endomicorrizas, en donde el desarrollo del hongo ocurre intracelularmente, y no hay formación de manto de hifas sobre la raíz (Mikola, 1973). Este último tipo se divide en varios subtipos: ectendomicorrizas, arbutoides, monotropoides, ericoides, orquidáceas y arbusculares (Sieverding, 1 991). 3.4.1 Micorrizas arbusculares. Los hongos formadores de micorriza arbuscular son simbiontes obligados y necesitan de la presencia de la raíz de una planta susceptible de ser colonizada para completar su ciclo de v¡da (García, 2006). 2l Según Tommerup y Abbot (1981) en el suelo existen tres formas de propágulos de estos hongos: las esporas que son estructuras de resistencia del hongo, los segmentos de raíces de plantas micorrizadas preexistentes, y redes de hifas que sobreviven en el suelo. Estos propágulos mantienen su capacidad infectiva, incluso permaneciendo en suelo seco durante varios meses. 3.4.1.1 Establecimiento de la simbiosis. En términos generales, el proceso de la colonización por los HFMA comienza por la germinación de las esporas del hongo. Este proceso puede darse en forma independiente de la presencia de las planta hospedera y requiere condiciones de temperatura y humedad adecuados. Algunos factores químicos, como la presencia de exudados radicales (Becard y Piché, 1989) o físicos como la exposición a temperaturas de 4'C (Hepper, 1981) puede acelerar la germinación de las esporas. García (2006), citando a García-Romera et a/.(1990), García-Romera ef a/.(1991), Bonfante-Fasolo ef a/. (.1992), García-Garrido et al.(2000), menciona que luego de que el tubo germinativo del hongo encuentra la raíz de su hospedero, forma apresorios y activa enzimas pectinolíticas y celulolíticas que degradan la pared celular de la raí2, sin llegar a destruirla, y ejerciendo presión física, logra penetrar a la superficie radical y coloniza el espacio intercelular del cortex de la raí2. Sin embargo, Genre ef al. (2005) y Akiyama et at (2005) citados Rodríguez (2010) mencionan por Ramírez y que las plantas envían señales específicas al HFMA, a través de la hormona strigolactonas, que favorece la germinación y le perm¡te una mayor capacidad de elongación y ramificación de las hifas para encontrar la raíz del hospedero. Al mismo tiempo, la planta recibe señales del hongo, acompañadas de factores micorrícicos (Myc) que inducen oscilaciones de calcio en las celulas epidérmicas de la ¡aíz y activan los genes relacionados con la 22 simbiosis. Los HFMA forman unos apresorios llamados hipopodios que se desarrollan de una hifa madura. Como efecto de la secuencia química y la estimulacion mecánica, las células de las plantas producen un aparato de pre penetrac¡ón (PPA) (Figura 1a). La hifa induce el desarrollo de estructuras similares al ppA en las celulas intercorticales y penetra a través de las paredes celulares y dentro de las células de la corteza desarrolla estructuras denominadas arbúsculos, formadas mediante repetidas ramificaciones dicotómicas y es el lugar en donde ocurre el intercambio de nutr¡entes entre la planta y el hongo (Figura 1b). Los arbúsculos son estructuras que no dañan las membranas celulares de las plantas, sino que presionan y producen una invaginación de la membrana, formando un nuevo compartimiento de interfase arbuscular. Ahí, los simbiontes están en contacto íntimo, separados sólo por sus membranas, entre las cuales hay una capa de matriz interfacial de la planta y una mínima pared fúngica (Hanison, 1997). La vida aproximada de un arbúsculo es de 1 a 3 semanas, después de lo cual se degrada y parte de él se reabsorbe hacia el citoplasma hifal y el resto de componentes permanecen en la célula hospedera, rodeados por el plasmalema (Escobar ef a/,1998). Posteriormente, se forma micelio extraradical que es el responsable de la absorción del fósforo y otros nutrientes de lugares donde las raices no pueden acceder por sÍ mismas (Escobar et al., 1998), y es allí donde se desarrollan las nuevas esporas, las cuales tienen caracterÍsticas propias que constituyen la principal estructura que puede permitir el reconocimiento morfológico de las especies de HFMA. A menudo se producen a las 3-4 semanas, después del inicio de la colonización micorrízica, bajo casi cualquier condición, excepto en presencia de altos contenidos de fósforo en el suelo que puede inhibir la (lnternational Culture Collection of simbiosis Arbuscular and Vesicular Arbuscular Mycorrhizal Fungi - lNVAM,2006). Estasesporas pueden comenzar el proceso de colonización nuevamente (Nogales, 2006). En algunas especies de HFMA también se forman vesículas ricas en lípidos, ya que son órganos de almacenamiento intercelulares. Son cuerpos de paredes defgadas producidos comúnmente en las hifas terminales en la corteza de la raiz por las especies de hongos del suborden Glomineae. Su diferenciación generalmente se activa al mismo tiempo que la esporulación y aumenta desde entonces (Escobar efal., 1998; lNVAM,2006). 3.4.1.2 Kuklospora colombiana (Spain & N.C. Schenck) Oehl & Sieverd. (Entrophospora colombiana Spain & N.C. Schenck). Esta especie se observó por primera vez en 1g78 en Carimagua, Colombia. Pertenece al Reino Fungi, Phylum Glomeromycota, Clase Glomeromycetes, Orden Diversisporales, Familia Acaulosporaceae del Género Kuktospora. (Sieverding and Oehl, 2006) En fa región amazónica colombiana, Entrophospora colombiana, ahora Kuklospora colombiana (Sieverding and Oehl, 2006), ha sido en suelos del departamento de Amazonas, municipio de Leticia, en bosques, potreros y en sistemas agroforestales asociado a la rizósfera de guamo (/nga edulis), huito reportada (Genipa americana), balso (Ochroma sp.), asaí (Euterpe precatoria), cedro macho (Bombacopsis quinata), yuca (Manihot esculenta), plátano (Musa paradisiaca), copoazú (Theobroma grandifloruml, pomarroso (Eugenia malacensis), y árbol de pan (Arto c a rp us a/ú7is). 24 a) Mr fu o fecoo ocrfneo to F€s€ pr€ -s|mboDca sútgKracton a Factor i,tyc Forr¡acrül I I Eg@rms t -q ! ! a ú, O Coatex extem o Coíex Intem o Endoderms Crlrnúo v¿scula r .,. ¡Rrgrl <d r$ b) Figura l. Establec¡miento de la simt¡irsis planta -HFMA. a) Pasos en el desanollo de la miconización. b) Detralle de un aóúscr¡lo. PAM: nembrana periarbuscular. PAS: espacio periarbusanlar. ftomado de Pamiske,2008) También ha sido a¡shda en el departamento de Guaviare, munic¡p¡o de San José del Guaviare, en Agua Bonita, San Cristobal y Santa Rosa, asociado a bosque, a chontadup (Eacfnb gasrjoaes) y arazí (Eugonia dipitata). En los departamentos de Vaupés y Mchada, se ha encontado asociado a a¡i {Capsicum qpp.) Y se ha rsportado asoc¡ado a caucfio (Hevea bravliensis) en el departamento de Caquetá, municipio de Belén de lc Andaqules lPeña et a1.,2ú7aI Su espora es globosa, opaca, de superficie lisa, ente 90-120 micras de diámeto, de color oliva pálido o amarillooliva. Tiene bes grupos de paredes: La más extema es ¡T¡embranosa, Úansparerite, de menos de 1 micra de espesor. La segunda par€d es laminada, & 2 a 4 micras de espesor, de color emarillo. La pared más interna es transparente y delgada. Esta pared se observa como una pared flexible, pero según el INVAM su naturaleza es semi-rígida. (peña et al., 2007a). Los principafes argumentos usados para separar género Entrophospora y ubicarla en el a Kuklospora colombiana del nuevo género Kuklospora, hermano del género Acaulospora Gerd. & Trappe Emend. S.M. Berch (Sieverding and Oehl 2006), son: 1) la formación de esporas con tres grupos de paredes, igual que Acaulospora spp, y no con dos paredes con dos capas, como Entrophospora spp. 2) la presencia de una "beaded layer" o reborde en forma de perlas en la pared germinativa más interna de la espora, idéntica a las producidas en esporas de las especies más conocidas de Acaulospora, en contraste con la capa relativamente coriácea de las esporas de Entrophospora spp (Walker, 1996). 3) La mayor relación fifogenética con los miembros de Acaulospora que con E. infrequens (1.R. Hall) R.N. Ames & R.W. Schneid. emend. Oehl & Sieverd., la única especie de este género de propiedades moleculares conocidas (Sieverding and Oehl. 2006). 3.4.1.3 Acaulospora mellea Spain & N.C. Schenck (1984) Su nombre proviene del esporas. Pertenece latín mellea que hace referencia al color miel de las al Reino Fungi, Phylum Glomeromycota, Clase Glomeromycetes, Orden Diversisporales, a la familia Acaulosporaceae, Género Acaulospora. Se reportó por primera vez en Carimagua, Colombia y se ha encontrado en la región amazónica colombiana, en el departamento del Amazonas, sobre el río Putumayo en Ventura, Gaudencia, Porvenir, Alegría, Puerto Huila, Arica y Faraón, en potreros y cultivos de yuca y plátano. Se ha encontrado asoc¡ada con rizósfera de pimienta negra (Pipper nigrum), caté (Coffea arabica), a pastos, cultivos de yuca (Man¡hot esculenta) y plátano (Musa sp) (Peña et al.,2007b). 26 Su espora es globosa, de 72-100 micras, color amarillo-oliva o amarillo a oliva pálido, traslúcidas. El color fue definido por Schenck y pérez como miel, de donde derivó su nombre; presenta dos grupos de paredes (peña et at.,2OO7b). 3.4.1.4 Glomus sp. Este hongo pertenece Gfomeromycetes, al al Reino Fungi, al phylum Glomeromycota, a la Clase Orden Glomerales, Familia Glomeraceae y Género Glomus. Se ha reportado a Glomus como el género de HFMA de más amplia dishibución y toleranc¡a a niveles altos de acidez. lgualmente la abundancia de G/omus en suelos tropicales ha sido descrita en trabajos realizados en la selva amazónica peruana (Arcos y Benavides, 1996) y colombiana (peña et al., 2006\. Este género se asocia a ají (Capsiculn sp.), lnga sp., paslos (Brachiaria decumbens), arazá (Eugenia stipitata), caucho (Hevea brasl/lensrs), leguminosas, guamo (/nga sp.), Cannavalia sp., chontaduro (Bactris gasrpaes), cedro macho (Bombacopsis quinata), pomarroso (Eugenia malacensis), bacaba (Anacardium occidentale), Andropogon gayanus y Paspalum notatum, etc. lpeña et at., 2006). Según las descripciones de diferentes especies de G/omus (peña et al.,2OO7) y la descripción del INVAM (sf), se observa que son: generalmente globosas, solitarias o en grupos menores a 20. Las especies de G/omus tienen enhe B0 y 250 micras de diámeho. Presentan colores amarillo pálido, amarillo oliva y tonos de café, su pared externa presenta entre I y 4 capas y la última t¡ene aspecto mucilaginoso. 3.4.2 Micorrizas y exceso de fósforo. Si bien es cierto que la micorrización aumenta la asimilación del fósforo del suelo, generalmente una alta fertilización química conduce a una colonización mínima 27 por parte de la micorriza arbuscular (Gianinazzi, 199i ). Las plantas con mayor fósforo disponible no proporcionan tantos carbohidratos al hongo, lo que limita la colonización desde la raíz al suelo. Cuando se establece la interacción planta-HFMA, la primera transfiere al hongo entre 4 y 20 o/o de los fotoasimilados netos, mientras que el hongo incrementa considerablemente la asimilación de nutrimentos (Marschner y Dell, 1g94; Morgan et al.,2005). Existe un nivel óptimo en la colonización micorrízica a partir del cual no se ¡ncrementa la asimilación de nutrimentos, pero sí el costo para mantener el metabolismo del huésped (Douds et al., 1988). Es decir, que puede ser perjudicial para la planta al convertirse en una interacción parasítica (Morgan et al., 2005), Las raíces de las plantas que crecen bajo altos niveles de fosfato restringen la exudación asimismo de strigolactonas, limitando el establecimiento de la la planta puede producir mecanismos de defensa que simbiosis; ¡mpidan el reconocimiento planta-hongo benéfico, todo esto como mecanismo de ahorro de energía (Ramirez y Rodriguez, 2010). Ya que no se establece la simbiosis, el hongo no recibe carbohidratos de la planta y reduce la cantidad de esporulación por falta de energía adecuada (Douds, 2010). 2E ¡I. TIATERIALES Y MÉTODOS La investigación se realizó bajo condiciones de invemadero en la Corporación Colombiana de Invesügación Agropecuaria (CORPOICA) Sede Tibaitatá, ubicada en el municipio de Mosquera (Cundinamarca), a una altura de 2543 m.s.n.m. Se consruyeron tf€s camas ler¡antadag a fl)crn del s¡¡elo, enmarcadas en madera, divididas en unidades experirpntalEs de 1,43m X 0,75m aisladas del suelo y separadas entre sf por medio de polietileno negro (Figura 2). El sustrato usado fue una mezcla de suelo y cascarilla de aroz, con dos años de reposo en los cuales no estuvo cultivado. Se le realizó un análisis completo en el Laboratorio de Suelos, Aguas y Foliar de CORPOICA, siguiendo el protocolo ecilablecido por el laboratorio el resultado se presenta en el Anexol. b) Flgura 2. Unidades experimentalee a) Camas divididas con polietileno n€gro y b) llenas con sustrato suelo-cascadlla. La siembra se realizó en bandejas de plantulación con 200 alveolos, donde se hizo fa respediva inoculación con aislamientos de A. mellea, Gbmus sp y colombiana, según el tratam¡ento, con 130 esporas/ semilla. Se K. utilizó turba canadiense húmeda para llenar hasta la mitiad cada alveolo, se adicionó el inóculo, encima s€ colocó una sem¡lla de la vadedad, según el fatamiento' como se muestra en la figura 3, finalmente s€ completó el volumen con turba y se hizo riego manual. Los inóculos tueron obüanidos de la colección de trabajo de HFMA de Corpoica Centro de Biotecnologfa y Bioindustria -CBB- Corpcica C.l. T¡baitatá. Figura 3. Inoq¡lac¡ón de las semillaE de arveja cñina var Goliath con aislamientos de K. alombiana. Este procedimiento se realizó de la misrna manera en todos lo€ casos. De¡ecña: afueolos con turba. Centro: sobre la turbe, un gramo del inóculo (130 esporas) . lzquierda: la s€m¡lla sobre el inóculo. A los 20 dlas se realizó el basplarfe de las plántulas a las unidades experimentales, las cuales fr¡eron sembradas en doble hilera, separades a 20 cfii y con una digtancia entre plantas de 10 crn (Figura 4). Para el sistema de tutorado se instaló una malla reja Trical, de 15crn X1scrn, sostenida en lqs extremos con postes de madera de 3m y listones de 2,70m a bavés de las camas, ofreciendo a las plantas un soporte adeq¡ado. No fue necesario colocar hilos adicionales (Figura 5). El riego se aplicó por goteo, con cinta de 0,75 l/h. con una frecuencia de tres veces por s6íiana, y duración entre 30 y 45 minutos. 30 Flgura tl. Trasplante a camas aisladas, la tabla sc manejó como patrón para las distancias entre plantas (haciéndole marcas cada lOcrn) y eritrc surcos (ancho de la tabla, 20cm.) 4.T D|SEÑO EXPERITEI{TAL Se raalizaron dos ensayos, uno para cada variedad, se utilizó un diseño de bloques completos al azar, con s¡€te tratam¡entos y t¡es f€peüdones (Figura 6). Los tratamientos evaluados fueron: T_1007o: Testigo comercial, se le apllró el 1000¿ de la fertilización r€comendada comercialmente de acuerdo con el análisiE de suelos, sin HFMA. T_50%: 50% de la fert¡lizac¡ón rccomendada, sin HFMA. K_COM: Kuldosporc domblbna con 50% de la fertilización recomendada. G_SP: Glomus sp con el 5()% de la fertilización recomendada. A_MEL: Acrlulosry'a mellea el 50% de la brtilización recomendada. T_1Oo/o: Teetigo con 10% de la bÉilización recomendada, Ein HFMA. T_0%: Teligo sin fEÉilización, sin HF[44. 3l I "*'rri Figura 5. Sistema de tutorado con malla soporte Trical La fertilización recomendada comercialmente se presenta en la tabla 1. Tebla l. Fertilización recomerdada y los nutrienbs apodados (kg/ha) Nutient* fts/ha) FUENTE Triple 15 SPT Borax Cloruro de K Sulfato de Mg sulfomag Nitrato de Ca Urea Solupotasio Cal aorícola TOTAL CANTIDAD {kq/hal 400 33 57 N 60 P¡o¡ &o 60 60 BzO¡ GaO 6,93 20,805 36 300 't3,2 60 120 r8,6 70 32,2 37 I l¡f6 t|go 15,18 60 I So¡ 96 49,2 12,9 10,8 32,4 4 1,36 19.61 1t0.80 75.18 fi3.20 tf 0.26 60,00 20,81 J¿ 58,94 Arveia china - Goliath - BI 82 T1 Arveia dulce - Suqar Daddv B3 82 B1 T2 B3 T? T6 T4 T1 r4 r4 TO TO TO T1 to r4 r2 T6 T4 T? T? T5 T2 T3 T3 t2 to T3 T5 TO f2 TO T1 T5 T1 T5 T6 T4 f1 T2 T6 TO Figura 6. Distribución de los tratamientos (T) y los bloques (B) para cada ensayo. Cada unidad exper¡mental estaba conformada por 20 plantas de las cuales se seleccionaron tres de manera aleatoria para el seguimiento de las variables no destructivas. Las variables tomadas en cosecha se midieron en la totalidad de las plantas por repetición. 4.2 VARIABLES EVALUADAS 4.2.1 Longitud de planta. Cada semana y hasta los 163 días después de la siembra (dds) se midió la longitud de las plantas. La medición inicial se hizo en el momento del trasplante. Con una cinta méhica se tomó la lectura en centímetros, desde el primer nudo al nivel del suelo. hac¡a arriba. hasta el último nudo. 4.2.2 Número de nudos. Con periodicidad semanal se contaron los nudos. desde la base de la planta, hasta el último nudo formado. 33 4.2.3 Días a floración y a formación de vaina. Se hizo el seguimiento diario de las plantas por tratamiento a partir de los 50 días después de la siembra (dds). Se registró la fecha en que el 50% de la población (es decir 1O de las 20 plantas) tuvieron al menos una flor abierta. De igual manera para la formación de vaina, se registró cuando el 50% de la Población presentó al menos una vaina. 4.2.4 Dias a cosecha. De manera visual se contaron los días que transcurrieron desde la siembra hasta que las plantas llegaron a producción. para la arveja china, cuando las primeras vainas estuvieron bien desarrolladas y con un mínimo de formación de granos; para la arveja dulce, Ia cosecha fue en el momento cuando los granos estuvieron formados y llenos sin llegar a tocarse dentro de la vaina. 4.2.5 Número de vainas. Se realizó el conteo de vainas cosechadas producidas por el total de las plantas en cada unidad experimental, por cada cosecha realizada para llegar al número de vainas totales obtenidas en el ciclo. 4.2.6 Tamaño de vaina. Se midió con un calibrador el ancho (cm) y largo (cm) de tres vainas por unidad experimental por cada cosecha. y peso de granos. Para el caso de la arveja dulce, se contó el número de granos formados por vaina en tres vainas al azaÍ por cosecha. 4.2.7 Número También se registró el peso, en gramos, de 100 granos en total para cada reoetición. 4.2.8 Peso fresco. Se tomaron tres plantas al azar en cada unidad experimental y se registró el peso en gramos, tanto parte aérea como parte radical. Estas plantas eran diferentes a las plantas marcadas para hacerles es seguimiento de altura y n uoos. 34 4.2.9 Peso seco, Las muestras tomadas para la variable anterior, se secaron en horno a 60'C hasta conseguir un peso constante, medido en gramos 4.2.10 Contenido de Fósforo. Para esta variable se tomaron las muestras de la parte aérea ya secas y se enviaron al Laboratorio Integral de Serv¡c¡os para el Sector Agroalimentario, LISSALAB de CORPOICA, empacadas adecuadamente para el análisis del porcentaje de P presente en la parte aérea de la planta con el método Bray ll. El producto de este porcentaje, multiplicado por la materia seca arrojó los gramos de fósforo presente en la planta. 4.2.11 Porcentaje de colonización. Para la medición de esta variable se tomó una de las raíces de las muestras tomadas y se sometió a tinción con azul de tripán, de acuerdo con la metodología propuesta por phillips & Hayman (1970). Se tomaron segmentos de raíces secundarias y se colocaron en un tubo de ensayo cubiertas de una soluc¡ón de KOH durante l0 minutos a baño María. Luego se lavaron con agua corriente y se añadió HCI 0,1N durante 2 Minutos. Posteriormente, se dejaron en azul de Tripán durante 24 horas, luego se hicieron los montajes en láminas de vidrio, recubiertos con laminillas. La lectura se realizó con un microscopio compuesto, en cada uno de 100 campos del microscopio y se marcaron como positivos los que presenten hifas, arbúsculos y demás estructuras teñidas 4.2.12 Número de esporas por gramo de sustrato Se utilizó la metodología de decantación y aislamiento de esporas propuesta por Gerdemann (1963). Se pesaron 10 g de suelo próximo a las floración. La muestra se sometió a ra & Nicolson íces de las plantas tomadas en agitación durante 10 minutos y se tamizó en mallas de 500qm, 250qm, y 38 qm. El suelo que quedó en el tamiz de 38qm se colocó en un tubo de centrifuga, se le agregó una solución de sacarosa al 72% con tween 80 y se centrifugó a 2000 rpm durante cinco minutos. La interfase formada se retiró del tubo y se lavó en el tamiz de 38qm recuperando las esporas 35 en un papel filtro con líneas paralelas que se colocó en una caja petri. El conteo se real¡zó con la ayuda de un estereoscopio. 4.3 ANÁLIStS ECONóMtCO. 4.3.1 Presupuesto parcial se realizó un presupuesto parcial o marginal de los costos que varían con el uso de los tratamientos y se extrapoló a hectárea. Siguiendo lo mencionado por el Centro Internacional de Mejoramiento de Maíz y Trigo (CtMMyT) (199S), un presupuesto marginal o parcial es adecuado para poder organizar los datos experimentales con el fin de obtener los costos y ingresos de los diferentes tratamientos utilizados. En este se incluyó: 4.3.1.1 Rendimientos: La producción para cada tratamiento, expresada en kg/ha. 4.3.1,2 Ingreso bruto: El valor del producto por kg, multiplicado por el rendim¡ento. Se realizará este cálculo teniendo en cuenta Según Sánchezl se ofrecen en el mercado. $3200/kg y lo dos precios que $6000$/kg, según el comprador y el destino del producto. El precio promedio es $4.600. 4.3.1.3 Costos variables: Los costos en los que se incurren afectados por el tratam¡ento utilizado, en este caso los costos de fertilización. costo de la inoculación y mano de obra. 4.3.1.4 Total de costos: Corresponde a la sumatoria de los costos anteriormente mencionados. ENTEVISTA con Gemán Daüd Sánchez, llder del Proyecto de Invest¡gación "Tecnologfas de Manejo Agronómico para el Desarroffo Competit¡vo del Cultivo del Gu¡sante (P¡suñ sativum uat. macrccarpon), en el Departamento de ' l. Cundinamarca, como Base Efc¡ente Para la Exportación', Mosquera, 10 de Junio de 201 36 1. 4.3.1.5 Ingresos netos: Calculada con la resta del total de los costos que varían y los ingresos brutos. 4.3.1.6 Tasa de Retorno Marginal: Relación en términos porcentuales entre el ingreso percibido y el incremento de los costos al pasar de un tratamiento a otro. 37 5. RESULTADOSY DISCUSIÓN A continuación se presentan los resultados y discusión de la evaluación del efec.to de las cepas de hongoe formadorcs de micofiiza arbusollar en arveja china var. Goliath y arveja dulce var. Sugar Daddy. Se hizo un análisis estadfstico para algunas de las variables, mienfas que paft¡ oüas se realizó una observación desoiptiva. 5.1 ARVEJA CHf¡{A- GOLIATH lPlsum sattuumvan m*rocarponl 5.1.1 Curvas de crsclm¡ento. 5.1.1.1 Longltud de planta 350 300 .-...- f_ 10O% 250 E -- 200 !t ¡! r50 o T_50% COL -K +G_SP 100 MEL 50 0 .{ @ rrl .¡¡ cr \o.n o N <t.\¡ @ \o,nc|N.ñd ^¡.t.r <t <r ¡ñ (o.\ ¡\ ú cr c\ I : : : 3 ao \t : : gg rtl -A _r0oh -f fo% DOS Flgura 7. Altura de planta por tratamiento para la variedad de arveja china Goliath a partir del 21dds, fecfia en que se ealizó el trasp¡anle. En la Figura 7 se ob€ervan las cr¡rvas de crecimiento para cada tratamiento, para la variedad Goliath. En general, existe un comportam¡ento similar en todos los casos, donde la curya sigmoidal presenta la fase logarftmica y lineal, y no 38 exper¡mentó un detenimiento en su crecimiento en el momento en el que se dio por finalizada su cosecha ya que esta es una variedad de crecimiento indeterminado. Los primeros muestreos presentaron diferencias estadíst¡cas entre los tratamientos, el tratamiento con el 10% de la fertilización (T_10old es superior a los demás en los días 21,28,35 y 42 dds y los tratamientos inoculados con HFMA tienen alturas inferiores, Roveda et al (2007) mencionan que la etapa de establecimiento de la simbiosis no trae beneficios para la planta hospedera ya que hay una demanda de fotosintatos por parte del hongo, sin que aun inicie el HFMA a pasar nutrientes a la planta; en este caso, es posible que esta situación se refleje en la menor altura de las plantas inoculadas frente a las demás a los 21 dds, sin embargo, a los 28 días, la altura de estas es similar a las de los otros tratamientos; a partir del día 49 y hasta el final del ciclo no se presentaron diferencias estadísticas entre estos (Tabla 2). Tabla 2. Promedio de altura de planta para cada tratamiento en la variedad Goliath en algunas fechas y resultado de separación de medias por la prueba de Tukey. 21dds 28dds 35dds 42dds ANAVA T_100% 4,21 ab T_50% 4,33 ab 11,27 K-COL 3,67 9,32 uür 3,58 D o-"a|. 3,13 h f Á aq -10To 9,67 8,69 ao 14,03 ab 21 ,26 14,97 ab 21 ,1 12,77 ab ab 11,82 D 18 ab 16,01 o ab 12,82 ao 18,38 ab 12,45 16,77 a 22,28 49dds 163dds ND ND 29,89 a 28,42 a 25,23 a 23,32 a 25,39 a 29,46 a ¿¿.t5 a 288,03 a 242,15 a ,07 a 255,2 a 271 228,06 a 277 ,1 a I 0o/o ¿-JO D 13.17 ab 17.39 ab 216.47 a *': Diferencias altamente significativas (P<f 0,01), Diferencias s¡gnificat¡vas ': = (P<f = 0,05), ND: diferencias no s¡gn¡ficativas de acuerdo a Ia ANAVA. Letras d¡ferentes indican d¡ferencias sign¡ficativas de acuerdo con la prueba de rango Multiole de Tukev. 39 5.1.1.2 t{úmorc de nudos. El número de nudos no presentó diferencias estadfsúicas enfe faüamientos para esta variedad (Figura 8), loo tedips con algún nivd de fertilización y sin inóculo estwieron por encima de los tratamientos inoq¡lados, mienüas que el testigo absoluto tuvo los menores valorcs. 5.1.2 Varlebbs en f,oreclón 5.1.2.1 Dhs a botón, f,o¡¡ción y a formaclón de vr¡na. Los tratamientos no ejercieron ningrin efecto sobró la du¡ación de las etapas de la brmación de f,or y vaina, según el análisi¡ de varianza. Este resultado concuerda con el obtenllo por Proaño (2007), donde los dias a f,oración en diferent€s variedades de arveja no fueron inf,uenciados con el üpo de feftilización utilizado Oabla 3). 45 40 +T_1OO% 30 z 25 !¡ 20 z K_COL - -G-sP 10 o tovo -A-MEL -f TO% d 6 d \g Fr <t d !9 dr 6 F d @ d.n <t sr <t r^ (0 O F\ l-r\ a ct € <ñ C, i * d 6 sl <l ¡tt (o ofxt Flgura 8. Número de nudos por ffiam¡erÍo para la variedad Goliath, a partir del hasplante. ,lO 5.1 .2.2 Peso fresco, seco, longitudes aérea y de raiz Para la arveja ch¡na, las variables longitud aérea y de raíz, número de nudos, peso seco aéreo y de raí2, no presentaron diferencias significativas, en cuanto a peso fresco de raíz hubo diferencias altamente significativas, sin embargo, en el peso seco, los tratamientos tuvieron valores iguales (Tabla 4) Tabla 3. Días hasta la aparición del botón floral, la apertura de flor y la formación de vaina bajo tratamientos de fertilización y uso de HFMA en la variedad Goliath. Dias a botón TRATAMIENTO ND T _100o/o 60,00 a 60,00 a 61,00 a 61,60 a 59,00 a 61,00 a 61,00 a T _50% K-COL G-SP A-MEL f _10o/o T0% a11 *: Días a flor ND 70,66 70,33 71,66 74,33 69,66 70,00 70,00 Días a vaina ND a a a a a a a 81 a 80a 80,66 a 82a 78,6 a 79a óze amenté sign¡ficativas sion¡ficat¡vas (P<f lP<f = 0,01) 0 0l D¡ferencias significativas (P<f = 0,05), ND: d¡ferencias no significat¡vas de acuerdo a la ANAVA. Letras diferentes indican diferencias significativas de acuerdo con la prueba de Tukey. 4l Tabla ¡0. Efecto de los ffiambritos de fertilización y uso de HFMA en algunas variableE tomadas en época de lloración para la variedad de arveja china Goliath. Longih¡d *: P. S6co P. Seco lE]lz aér€o f.alz ND ND Long, refz Nudc eéreo ND ND ND ND T r00% Tl,U r-so¿ K_col gl,73 el,(x) G-sp A_mel TO% P. Fr€8co aár€a tratamirnto T_10% P. Fr€lco a 17,76 a 14,4 a a m,U a 13,88 a 16,EÍl 88,50 a 19,f6 6,47 a 18,29 a 19,16 a 'r5,96 a 68,01 62,61 a a a a 11,U 8,65 a 13,¡14 a 7,Cg a 4U abc 1,91 1,43 1,32 a 13,n 8,67 13,33 I 6,78 13,¡14 a s,17 13,3:| a 7,(xl a 2,13 bc 1,6 a 2,5 abc 3,2. eb a D¡ferÉncias ¡¡tem€nb significati\ras (Pcf = 0,01), ND: dibrenclas no 3bnificativs de aoj€rdo a 2,78 ab a 3,57 a a 1,76 ': Dibrencia: le ANAVA. a c 1,¿18 a 0,22 0,25 0,21 0,1E o,'t7 a 1J.2 a 023 a 1,3f a 0,14 a significatn as a a a a (P<= 0,05), Lefas dibtBnt€s indican difer€ncias sl¡nificativas de aqrordo con la pruebe d6 Tukey 5.1.3.3 tlcontsaclón 9{) 80 70 E60 c> o.rs =50 $ E¡o c o.r .e r% coloñb.ckiñ I Fó¡toro toa¡l E o 8.0 20 o,05 10 o T_too% T_50% K_COL G-SP A-MEL T_10% T_O'¿ Figura 9. Poroentair de Colonización y Fóeforo Total acumulado en planta para cada tratamiento en la variedad de arveja cfiina var. Goliaü. Ninguna variable pres€ntó diferenciae estadfsticarlente signifcativas según h prueba de Tukey 42 a a a a fl f _10% tuvo el mayor porcentaje de colonización, seguido de los tratamientos A_MEL, f _50o/o, K_COL, G_SP, T_0% y por último T_100%, a pesar de no tener diferencias estadísticas, se observa que los tratamientos con algún nivel de fertilización inferior al 100% fueron más adecuados para la colonización que el tratamiento con la fertilización completa, el testigo absoluto también mostró valores inferiores. (Figura 9) Por otro lado, el contenido de fósforo a pesar de ser estadísticamente similar para todos los tratamientos, es mayor en el T_10%, coincidiendo con el porcentaje de colonización, situación que difiere en los otros tratamientos, G_SP tuvo la segunda mayor cantidad de fósforo, mientras que K_COL y f _0% son los tratamientos que acumularon la menor cantidad de fósforo en época de floración. Los otros tratam¡entos tuvieron valores intermedios. (Figura 9) 5.1 .3 Cosecha 5.1.3.1 Días a cosecha. El día 79 se dio in¡c¡o a la cosecha de los ensayos. En esta fecha, las tres repeticiones de T_100% y G_SP iniciaron producción; los demás tratamientos tuvieron sus tres repeticiones en producción a los 82 dds con T_10% que completó sus tres repeticiones a los 84 días, y el excepción del T_0% hasta el g7 dds, esto es una diferencia de 18 dias con el testigo comercial y entre 13 y 15 días con los demás tratamientos (Tabla 5). 43 Tabla 5 Número de repeticiones en producción para cada tratamiento al inicio de cosecha para la variedad de arveja china Goliath. DDS 82 84 óo 89 ol 97 TRATAMIENTO r_0% 1 T_100vo 3 ? T _50% K-COL 3 1 G-SP A-MEL T 3 3 3 1 ó la producción de Goliath no se presentaron ó 10% 5.1.3.2 Producción En la figura l0 se observa que en diferencias significativas. El T_100% con 16247 kg/ha, seguido del T_50% y G_SP, con producciones de 15590 y 15345 kg/ha, respectivamente, son superiores a las de los tratamientos A_MEL y T_10Yo, que oscilan entre 15000 y 14000k9, finalmente el T_0% es inferior, con una producción de 12713 kgtha. Estos datos coinciden con los observado en la tabla 4, tanto el T_100%, T _S0o/o y G_SP que ¡nician cosecha en el total de sus repet¡ciones sobre los 79dds, tienen los mayores valores de producción. 44 18000 ¡! a' Ic 16000 14000 12000 10000 I ! 8000 c 6000 o a - 4000' T 100% T 50% K COt 65P A MEL T 10% I f 0.¡/, TNATAM|ET¡¡O Flgura 10. Producción ((q/ha) de arveja variedad Goliath bajo tratam¡entos de fertilización qufmica y uso de HFMA, en un ciclo de 169 dlas. Letras diferenteg indican difeencias significativas de aq¡e¡do con la prueba de Tukey. 5.1.3.3 Número de vainac. Esta variable, al igual que la ploducción, no muesfra diferencias estadfsticas entre los tratam¡entos. G_SP tuvo la mayor canüdad de vainas (527), seguido de T_100% (511) y T_50oÁ (512); el T_10%, con 23 vainaE menos estuvo por encima de A_MEL mientras que K_COL, es el inferior de los trataml€nto inoculados. El testigo absoluto tuvo 33 vainas menos que K_COL. (Figura 1l). Proaño (2ü)7) obcerva este mismo comportamiento en variedadeE de arveja, donde el tipo de ÉÉilización no fuvo inferencia sobre el desanollo de las vainas en cada una de las variedades cr¡ltivadas. 45 600 a 5(x) o I - ?'¿oo 2 E ¡oo 5 s 20o 100 o I T loo% Figura lt. II I T K 50% A MEt TMIAMIE¡IK' COL G5P I T 10% I f 0.h Número de vainas poducftlas en la variedad Goliath bajo diferentes tratamientoe de fertilización y uso de HFMA alfinal del periodo evaluado en un ciclo de 169 dfas. Letras diferentes indican dibrencias significativas de aq¡erdo con la prueba de Tukey. 5.1.3.¡0 Tamaño do vaana. Tabla 6. Longitud, andro y peso de vainas co6echadas para arveja variedad Goliath bajo batamientos de fertilización qulmica y uso de HFMA. Peso va¡na (g) ANAVA ND T lm96 T-s{M K-COL G-SP Longih¡d vaina And|o vaina (cfn) (cn) ND ND 8,96 e 3a 8,7 8,7 3,01 a " 8,66 a 3,1 ,83 1,8 1,8 't,8 A-MEL 325 . 8,86 a 1,8 T_10% 3,05 a 8,73 a r,80 f _o% 3,21 a 8,76 a 1,8 6 Los tratrami€ntos no t¡vieron un efecto signilicativo en el tamaño de las vainas cosechadas, presentrando diferencias a n¡vel de décimas de milfmetro, lo cr¡al no constituye relevencia para e€ta variable (Iabla 6). 5.1.3.5 todelo do componentes de nndimlonto Se realizó una regres¡ón múftiple pera construir el modelo de componentes de rendimiento para la vadedad Gol¡at (fqura 12), donde por cada unllad de peeo de las vainas r€col€dadas en un pass aumenta en 136,32 unidades la producción total. La expresión matemática a conünuación e¡elica en un 80% comportamiento de la producción de esta variedad: MPRODACUT =?A3.17 + 136.32 IWTOT Donde: ilPRODACUI: promedio de producción acumulada. ÍúIYTOT: Promedio de peso total de vainas cosecfiadas en un pase. I Figura f 2. Modelo de componentes de rndimiento para la variedad Goliath 47 el La fertilización recomendada ofrece la disponibilidad de nutrientes suficiente para el correcto desarrollo de las plantas, sin embargo, los tratam¡entos con niveles inferiores de fertilización, incluso los inoculados no presentaron diferencias significativas con el T_100%, por lo que se puede inferir que los tratamientos con niveles bajos de fertilización no estaban en condiciones de deficiencia nutricional o que las cepas nativas tuvieron un efecto positivo en las plantas esta variedad, s¡tuac¡ón evidente sobretodo en el testigo absoluto, en el que se esperaba una disminución considerable en la producción y en las demás variables pero no fue asÍ. González-VizcaÍno encuentra resultados similares en sus ensayos donde el establecimiento en pepino, de la colonización micorrícica no se reflejó en un incremento significativo de la producción y afirma que puede deberse, entre otras, a que la variedad no fuese sensible a los beneficios de la m¡corrización y/o que no se expresara el potencial estimulador de la micorriza al no encontrarse las plantas bajo condiciones de estrés, coincidiendo con las consideraciones hechas en este exDerimento. Se observó que hubo colonización incluso en los tratamientos no inoculados y que los tratamientos con el 10% y el 0%o de la fertilización tuvieron una producción inferior, pero estadísticamente similar a los tratam¡entos inoculados; esto sug¡ere que ex¡s¡tió una simb¡osis efectiva con las cepas nat¡vas, presentes en el sustrato, las cuales, posiblemente tienen mejor capacidad de adaptación al medio (CIAT' citado por Dávila ef a\,2009); esta cepas lograron que las plantas tuv¡eran un comportamiento s¡milar a las plantas con niveles mayores de fertilización' demostrando su capacidad de suplir deficiencias nutricionales (Sieverding,1991 citado por Alarcón y Fenera, 1999). 48 ; En el caso de que los niveles de nutrientes en el sustrato fueran suficientes y/o que la recomendación comercial estuv¡era por encima de los requerimientos nutricionales para esta variedad en las condiciones en las que se realizó el ensayo, el testigo absoluto pudo suplir sus requerimientos con los contenidos de nutrientes presentes, por lo que los demás tratamientos también pudieron hacerlo, además no se observaron síntomas de deficiencia nutricional en ningún tratamiento. Teniendo en cuenta esto, las plantas inoculadas estarían en un amb¡ente con suf¡cientes nutrientes, entre ellos fósforo, factores que pudieron influir en el crecimiento, desarrollo 5.1 .4 y producción de estas plantas sin inocular. Análisis económico En la tabla 7 se presentan los ingresos brutos y netos calculados para el promedio de los precios del mercado, las pequeñas diferencias en la producción influyen directamente en el presupuesto de cada tratamiento. Dentro de los tratam¡entos con micorrizas, cuyos costos en cuanto a fertilización y mano de obra para tal fin son iguales, los costos del G_SP estuv¡eron por encima a A_MEL y K_COL debido a que tuvo mayor rend imiento por lo que el rubro de las labores y elementos requeridos para la cosecha aumentaron. Además, el pico máximo de producción superó el de los demás tratamientos, aumentando también el número de canastillas requeridas para la recolección. El T_100% fue el de mayores costos debido a los fertilizantes, además, ya que su producción estuvo por encima de la de los demás tratamientos (aunque sin diferencias estadísticas), el costo de la mano de obra requerida para la cosecha fue mayor. A pesar de esto, sus ingresos netos superaron los de los demás. 49 Tabla 7. Tabla resumen del presupuesto parc¡al para cada tratamiento para la variedad Goliath. UN¡DAD RENDIMIENTO T 100% f TRATAMIENfO s0% X G5P kdha 16247 15590 13468 15345 A_ME! 146¡7 k&/ha 14622 14031 r2721 1381.1 s/ha 5/ha s 1.201.729 s 601.219 So s0 s 601.219 s 169.500 5/ha 5 200-000 s 125.000 s/ha So 5/ha COL I r0% 70% 14931 1,2713 13146 13438 11442 s 601.219 s 601,219 s 120.173 s0 s 169.500 s 169.500 JO s0 s 125.000 s 125.0N 5 12s.000 s 12s.000 5o So s 25.000 5 2s.000 s 25.000 5o So 51.150.000 51.100.000 s 950.000 s 1.07s.000 51.02s.000 51.0s0.000 s 446.196 s 324.900 s 2.270.619 3 1.661.227 RENDIMIENTO AJUSTAOO {90%t cosToS VARIABI.ES ieft¡l¡zontes Íerlilizoc¡ón s 900.000 5/ha s 348.726 5/ha 5 2.900.455 s 394.212 s 2.220.431 s 2.167.461 S 2.¡141.915 5/ha 567.261.200 s64.s42.600 555.756.600 s63.530.600 560.471.600 s51.814.800 s 52.633.200 s/ha S64.350.745 562,t22.169 9s3,589.139 s51.088.68s 9s8.20t).981 950.1S3.s73 s 51.453,786 TOTAL s 296.742 s 366.0s4 s 279.414 5 r.179.414 INGRESOS BRUTOS INGNESO NETO Tabla 8. Costos ordenados de menor a mayor y los respectivos ingresos de los tratamientos evaluados en la variedad Goliath. TMTAMIENTO f 0To COSTOS VARIABLES TOTALES INGRESO NETO Incremento Incremento cosTos INGRESO NETO VARIABLES s1.179.414 $51.453.786 T _10% 91.661 .227 s60.153.573 $ 481 .813 $ 8.699.787 K COL $2.167 .461 $53.589.139 s 506.234 -$ 6.564.434 T 50% A MEL 62.220.431 $62.322.169 $ 52.970 $ 8.733.030 $2.270.619 $58.200.981 $ 50.188 -$ 4.'121.188 \J DT s2.441.915 $61.088.685 $ 171.296 $ 2.887.704 f $2,900.455 $64.360.745 $ 458.540 $ 3.272.060 1000/o 50 La tabla 8 muestra que tanto tratamientos inoculados como los no inoculados presentan un ingreso neto pos¡tivo, esto ind¡ca que se recuperó la inversión hecha en todos los casos. Sin embargo, se observa que con el aumento de los costos no necesariamente se presenta un aumento de los ingresos netos: K_COL, tiene ingresos netos inferiores al T_10%, mientras que A_MEL y G_Sp tienen ingresos netos menores a los de T_50% y para los dos casos, los tratamientos inoculados tuvieron costos mayores que T_10% y T_50%. Dentro de un análisis de dominancia (Evans, 2008) K_COL, G_SP y A_MEL estarÍan dominados por los demás tratam¡entos y serían excluidos del análisis económico. Sin embargo, G_SP presentó un incremento en el ingreso neto, contrario a lo que ocurre con K_COL y A_MEL. Con niveles de nutrientes en el suelo insuficientes para esta variedad sería necesar¡a la aplicación de mayores cantidades de fertilizantes, en tal caso el uso de HFMA podría traer mayores beneficios económicos y ambientales. 5.2 ARVEJA DULCE - SUGAR DADDY (Pisum sativum L.var. saccharatuml 5.2.1 Curvas de crecimiento. 5.2.1.1 Longitud de planta Para arveja dulce Sugar Daddy se puede observar en la figura 13 que el testigo comercial (T_100%) estuvo por encima de las demás, notándose hacia el día 70, Acaulospora mellea (A_MEL) y Kuklospora colombiana (K_COL) están en segundo lugar, seguidas de los testigos con el 10% (f _10o/o) y absoluto (T_Oolo), por último el tratam¡ento con el 50o/o (T_50%) de fertilización y el inoculado con Glomus sp (G_SP), sin embargo, no hubo 5l diferencias estadíst¡camente significat¡vas a través del ciclo, con excepción del día 84, cinco dÍas después del inicio de cosecha, donde existen diferencias significativas entre los tratamientos: el testigo comercial estuvo por encima pero similar a los demás tratamientos, los cuales también son iguales estadísticamente con el testigo absoluto; lo días siguientes, no hubo diferencias (tabla 9). Tabla 9. Altura promedia de planta para los tratamiento de fertilización química y biológica en la variedad Sugar Daddy . 2l dds 28dds 77dds .Pr<f TMTAMIENTO ND ND 84dds 92dds T_50% K-COL G-SP A-MEL T _10o/o f 0lo 2,65 2,46 2,25 1,99 2,04 1,77 2,08 52,2 56,44 a 6,79 44,5 45,57 ab a 6,77 50,2s 52,38 ab a 6,06 43,16 a 6,27 46,15 43,54 b 49,04 ab E 43,31 a a ND ND a 67 ,167 71,478 a 47,608 47,608 a 58,958 58,9s8 a 44,611 44,611 a 60,267 60,267 a 55,108 55,108 =0,049 a 6,86 7,1 163dds ' pr.f = 0,04 T1 154dds a a 45,75 ab 44,53 ab 41,79 59,05 46,15 53,65 44,33 51,4 46,97 46,44 a 54,'t42 a 53,908 Esta variedad mostró una típica curva sigmoidal donde se observan la fase logarítmica, lineal y de senescencia o detenimiento en el crecimiento, este últ¡mo en las fechas en que inicia la etapa reproductiva, entre los 70 y 80 dds. 52 80 70 60 -E50 T_100% + - 540 ü tso T_50% K_COL G_SP A-M ET 20 -r_10% T0% to F @ rO ct (D (9 l, O F t .\l @ @ lt (D l.- ..t F ó !t .'t N a.¡ r) * rC rO ag t- t- aO O <D O p F N dt !t !i ¡¡t @ ddg Figura 13. Longitud de planta por tratamiento para la variedad de arveja dulce Sugar Daddy a partir del transplanb. 5.2.1.2 Númelo de nudc. El análisis de varianza no mosüó diferencias enhe los tatamientos para esta variable, de la misma manera que la altura, en el dfa &4 se presentaron dibrencias significaüvas que luego desaparecen, volviendo a ser iguales eetadlsticamente. Al final del cido, a pesar de la similitud, el batam¡ento con Glomus sp tuvo el menor número de nudos y el tratramiento comercial (Figura 14) 53 el mayor valor para la variable. T_100% .-T_500/6 K_COL A-MEL +f - _1aoa T_0.Á 0 ñ&8$?E3RF8Sts t9gñ3 ;938 .lds Figura '14. Número de nudos por tratamiento de fertilización qufmica y biológica para la variedad Sugar Daddy, a partir del transplante. 5.2.2 Variable¡ en lloración 5.2.2.1 Di¡¡ a botón, llo¡ación y a formaclón de valna. En cuanto a Sugar Daddy (arveja dulce), no se observaron diferencias para los días a botón y a furmación de vaina, pero sí para los dfas a llor abierta, El testigo cornercial fuvo el menor número de dfas mienfas el testigo absoluto tuvo el mayor, entre ellos hay una diferencia cercana a 6eis dlas, esto muestra qu€ el testigo absoluto tuvo un perlodo más largo de apertura de f,or y un periodo más corto hasta la formación de vainas (Tabla 10). 54 Tabla 10. T¡empo a botón, a flor y a formación de vaina para cada tratamiento en arveja dulce variedad Sugar Daddy. D¡as a botón TMTAMIENTO T1 00% T_501o K-COL G-SP A-MEL r_10% f 0Yo Días a flor Días a vaina ND 56,60 57,30 56,50 57,30 57,30 57,30 57,30 ND a 62,66 b 63,00 ab 63,00 ab 63,00 ab 66,00 ab a 66,66 ab a 68,33 a a a a a tó a 78a 78a 78a tó 78a 78a a .*: Diferencias altamente significativas (P<f = 0,01), .: Diferencias s¡gnificativas (P<f = 0,05), ND: diferencias no signif¡cativas de acuerdo a la ANAVA. Letras d¡ferentes indican d¡ferenc¡as srgn¡f¡cativas de acuerdo con la prueba de Tukey. 5.2.2.2 Peso fresco, seco, longitudes aérea y de raíz La arveja dulce Sugar Daddy presentó diferencias encontrándose que el testigo comercial y en peso fresco de raí2, Glomus sp tuvieron los mayores promedios, con diferencias estadíst¡cas frente al testigo absoluto. Los demás tratamientos fueron similares a los dos testigos. Entre las plantas inoculadas, A.mellea obtuvo el menor valor para esta variable. A pesar de esto, el peso seco no presentó diferencias estadísticas, aunque los tratamientos no d¡fieren mucho con la var¡able anterior, guardando el mismo orden en la acumulación de materia seca, siendo el testigo comercial y Glomus sp los tratamlentos con mayores promedios, A.mellea, en este caso estuvo por encima del tratamiento con 1O% de fertilización, contrario a lo sucedido en el peso fresco (Tabla 1 1). En cuanto a la parte aérea, el anális¡s de var¡anza para el peso fresco no mostró diferencias estadísticas, pero para los promedios de peso seco sí se observaron 55 diferencias, en donde el testigo comercial tuvo el mayor promedio mientras que el testigo absoluto estuvo por debajo de los demás, que son similares a los dos anteriores. Los tratamientos con HFMA estuvieron por encima de los tratamientos con 50 y 10% de la fert¡lización. (Tabla I 1). Tabla 11. Efecto de los tratamientos en algunas variables tomadas en época de floración para la variedad de arveja dulce Sugar Daddy. Longitud aérea (cm) TMTAMIENTO r _100% T_50% K-COL G-SP A-MEL T_1jYo f _0% Long, rafz (cm) P. fresco P. seco P. fresco P. seco aéreo (g) aéreo (g) raíz (g) raíz (g) ND ND 56,06 a 45,83 a 49,56 a 48,81 a 50,28 a 48,88 a 47 ,32 a 18 OR 15,35 17,13 18,47 17 ,31 18,74 14,83 1 1,38 ND a 2,07 a 1,28 3,45 a 0,27 ab 2,42 ao 0,2 a 1,U ab 2,69 a 7,53 6,82 6,61 a 1 ,32 ab 3,41 a 6,608 a 1,28 ab 2,46 a 1,23 2,61 a 1,16 1,69 a a a a 6,68 5,95 0,24 a 0,23 a 0,20 a 0,17 a 5.2.2.3 M¡corrización Esta variedad no mostró diferencias entre el porcentaje de colonización ni el contenido de fósforo total, sin embargo, se observa que existe una s¡mil¡tud en los datos obtenidos en el tratamiento testigo comercial con los tratamientos S0% fertilización, K.colombiana y Glomus sp, oscilando entre el 31 y el 35% mientras que el tratamiento con A. rnel/ea presenta mayor colonización, muy cercana a la del testigo absoluto (T0), el cual tiene el mayor valor para esta variable con 56,3% y el tratamiento con el 10% de la fertilización está por debajo de A. mellea con 48,9%. (Figura 15) )o El mayor contenido de fósfo¡o se presentó en el tretamiento comercial, seguido por el tedigo abeoluto; enfe las cepas, K_COL obtuvo la mayor cantidad de fósforo total, luego A_MEL, T 50% y G_SP, finalments, el batamiento con el 10% tuvo el menor valor (Figura 15) EEtos resultados se asemejan a los encontrados por Oma (2009), en su estudio de miconizas en tomate no encoritró diferencias de altura, diámeúo de tallo y peso fresco de frutos, asimismo, los nivelee de 6sforo abeorbirlos por las plarfas no moefraron difelencias significalivas ente los úatamientos a lc que se lee hizo apoftes de fósforo sin inocr¡lar comparados oon los inoculados. 60 0,30 50-r nrq {u40 c I o.zo Éso l!c o-() 10 0 T 't00% T 50% I K-COL I GSP A MEL T 10% $ o.'u I o,'o $o r% colonizac¡ón a FóSoro total 0.05 0,00 I 0% Figura 15. Porcentaje de Colonización y Fósforo Total acumulado en planta para tratamientos con brtilización qulmica y uso de HFMA en la variedad de arveja dulce var. Sugar Daddy. 57 5.2.3 Cosecha 5.2.3.1 Días a cosecha. (Tabla 12). abla 12. Número de repeticiones en producción para cada tratamiento al inicio de cosecha para la variedad de arveja dulce, Sugar Daddy. T DDS 79 82 84 86 89 TRATAMIENTO TCOM T-50Yo K-COL G-SP A-MEL T_10% Para esta variedad, el ¡n¡cio de la cosecha fue homogéneo para todas las repet¡ciones de los tratamientos, iniciando la producción hacia los g4 días, con excepción de una de las repeticiones del T_50% inició cosecha S días antes, una diferencia no tan marcada como en la arveja china Goliath. Este no es un parámetro anal¡zado estadísticamente, pero se evidencia una similitud entre los tratamientos. 5.2.3.2. Producción En la figura 16 se presenta la producción de arveja dulce en kg/ha. Se presentaron diferencias estadísticas entre los tratamientos, siendo el mayor el testigo comercial, mientras que los tratamientos con el 10% de la fertilización 5E y el testigo absoluto tienen los m€nores valores, los fatamientos con 50% fertilización de la dosis recomendada son similares a los tatam¡entos con el 100. el 10 y el 0% de fe¡tilización. 18000 16000 a! g ¡ I; 3 , E c 14000 f2000 10000 eooo ri D 6000 4000 lOO% T-50% K-COL G-SP A-MEL TRATAIIIENTO T10% TU% Flgura 16. Producción (kdha) pan fatamientos de brtilización qufmica y uso de HFMA, en un cido de 169 días para la variedad Sugar Daddy. Lefas diferEntes indican diferencias significativas de aq¡ordo con la prueba de Tukey. Las cepas tienen mayores promedios que el tratamiento con el 50% solamente, es{e resultado muestra la capacftlad de los HFMA para sustituir el 50% de la fertilización, especialmenb Glomus sp, ya que los batamientos de inoct¡lación presentan mayores producciones qrc los testigos absoh¡tos (Oo/o y 1OoAl, producen más que el trestigo 50% y no prBsentan diferencias significativas con el bstigo 100%. 5.2.3.3 l{¡imelo de vainas. A pesar de que la prueba de Tukey muesüa que no hay dibrencias significativas entre tratamientos, el tesfigo comercial e9 super¡or a los demás tratamientos, con 373 vainas, comparado con los oEo8, que están por debajo 59 de 250 vainas. Gbmus sp y A.mellea son lígeramente mayores que las plantas con 50% y K.colombiana (Figura 17). ¡t00 35{) 300 -22fi lrt E ¡ 150 lo0 50 0 T_r00% T_50% K_coN- c_sP A_MEL T_10% T_0% IRATAIIEIITO Figura l?. Número de vainas producidas por cada tratamiento al final del ciclo para arveja duloe. Letras difercnbs indican diferencias significativas de a@erdo con la prueba de Tukey. 5.2.3.¡f T¡maño de va¡na. Tabh 13. Longitud, ancho y peso de vainas, núnrero y peso de granos por vaina y el peso de'|fi) granos pera tratambnlos de hrtilizac¡ón qulmica y uso de HFMA, para la variedad Sugar Daddy P€so Longil|¡(l Anclro vana vaha va¡na (s) (cm) (cm) Peso N"granoc/ granoe/Vaina ANAVA K-COL 8,fxl a 2,23 a 5,38 ab 7,66 abc 2 abc 5,99 ab E,36 ab 2,23 a G-SP 5,93 ab A-MEL 5,88 eb 8,26 abc T_10% 5,22 ab 7,26 bc 2,13 ab 1,83 bc T ¡+,39 b 1,66 T-1ll0pá 6,73 a T_50% 096 8,3 abc 2,13 ab 8,96 c P6so c @ v€ha (s) ND NO l00grenos (s) y,24 5,¡13 a 1,86 a 5a 1,4i1 a 27,92 a A ñ 5,26 5,16 5,26 a 1,76 a a 1,7 1,7 5,1 5,1 a 't,5 a 28,82 Ab a 1,3 a 33,22 A a 32,90 Ab a 31,93 Ab 26,17 B Las plantas de arveja dulce no presentaron diferencias significativas en el número y peso de granos por vaina, sin embargo, existen diferencias altamente significativas en el peso de '100 granos: el testigo comercial y K colombiana tuv¡eron los mayores pesos, seguidos de G/omus sp, A. me ea, el tratam¡ento con el 1Q% y el 50% de la fertilización, en ese orden, el testigo absoluto tuvo los menores valores para esta variable En cuanto al tamaño de vaina, se presentaron diferencias significativas entre los tratamientos, siendo superior el testigo comercial, las cepas son similares a este, y entre elfas K.colombiana fue la mayor, seguida de Glomus sp finalmente los tratamientos con 50%, orden 10o/o y A-me ea, y el testigo absoluto, coincidiendo este a los promedios de peso de vaina, donde las diferencias estadísticas estuvieron entre el testigo comercial y el absoluto, los demás tratamientos fueron similares a ambos testigos (Tabla 13). 5.2.3.5. Modelo de componentes de rendimiento Se realizó también una regresión múltiple para construir el modelo componentes de rendim¡ento para la variedad Sugar Daddy (figura 1g), de que mostró que el número de ramas, el número promedio de granos por vaina y el peso de cien granos son los componentes de rendimiento relevantes en la producción acumulada, describe en un 73% el comportam¡ento de la producción de esta variedad con la siguiente expresión matemática: MPRODACUM = -1'1149 + 817.84MRAM + 1545.8 MNGPROM + 190.49 Mp1O0 Donde: MPRODACUM: promedio de producción acumulada. MRAM: promedio de ramas 6l MNGPROM: promedio de número de granos por vaina MPl00: promedio de peso de 100 granos Para variedad Sugar Daddy el tratamiento comercial tuvo un comportamiento superior en la mayoría de las variables, este tratamiento con el 100% de la fertilización estuvo por encima debido al aporte de nutrientes a través de fuentes minerales. Figura 18. Modelo de componentes de rendimiento para la variedad Sugar Daddy El tratamiento con el 50% de la fertilización mostró una disminución en algunos parámetros de crecimiento observados, lo que sugiere que las cepas nativas no tuvieron un efecto evidente en estas plantas. En cuanto a las cepas inoculadas, las tres tuvieron producciones ligeramente superiores al tratamiento con el 50% de la fertilización, sugiriendo que la asociación simbiótica con los HFMA inoculados tuvo un efecto positivo, al compararlo con los tratam¡entos s¡n inocular. Sieverding (1991), menciona que Glomus se adapta a casi cualquier tipo de suelo y condiciones edafoclimáticas, coincidiendo con lo obtenido en este caso, donde la cepa G/omus sp tuvo mejor desempeño, comparado con los demás HFMA utilizados. Exceptuando'A.mellea, tanto las cepas como los testigos con el 100% y el 50% de la fertilización tienen valores similares de colonización de raí2, menores a los tratamientos con el 10 y 0o/o de la fertilización, lo que coincide con Lambais y Cardoso (1988), ellos mencionaron que la reducc¡ón del porcentaje de colonización, debido a la fertilización con P, es variable según la dosis utilizada, la planta hospedera y el aislamiento fúngico, lo que explica que A. mel/ea no se comportara de la misma manera que las otras dos cepas evaluadas. En esta investigación f _10o/o y T _0oA a pesar de tener los mayores valores en colonización, no se vé reflejado en su producción y otras variables evaluadas. Alarcon y Ferrera (1999), mencionan que los hongos pueden tener una alta eficiencia en la colonización pero un efecto bajo en su efectividad, lo que sugiere que la capacidad de infección no necesariamente está relacionada con la influencia de estos microorganismos sobre la planta huésped. Es posible que para el caso de esta variedad, el mantenim¡ento de la simbiosis fuera costoso energéticamente para las plantas sometidas a niveles bajos de fertilización. Según Marschner y Dell en 1994, la simbiosis micorrícica representa un costo para la planta, la cual tiene que compensar mediante el aporte de fuentes energéticas de carbohidratos, para que se facilite la actividad metabólica del hongo. También menciona que se ha hecho la estimación de que aproximadamente entre 10 y 30% de los fotosintatos producidos se requieren para la formación, mantenimiento y funcionalidad de las estructuras micorrízicas. 63 5.2.4 Análisis económico En la tabla 14 se presentan los ingresos brutos y netos, calculados teniendo en cuenta el promedio de los precios. Tabla 14. Tabla resumen del presupuesto parcial para cada tratamiento para la variedad Sugar Daddy. UNIOAD REND¡MIENTO TRAÍAMIENTO T T 50% 100% K COt A GSP MET r 70% f096 k&/ha 17212 9567 11003 12109 11318 6904 5836 kg,/ha 15491 8610 9903 10898 10186 6214 5252 s/ha s 1.475.801 s 737.900 s 737.900 s 147.580 s0 s0 So s 169.s00 s 737.900 s 169.500 s 737.900 t/ha s 169.s00 50 s0 2u.000 5 125.000 s 12s.OOO 5 125.000 s 12s.000 5 125.000 5o 5/ha 5o So s 2s.000 2s.000 s 25.000 So So 5/ha 51.225,000 s 675.000 5 775.000 s 8s0.oo0 s 800.000 s s00.000 s 425.000 s688.788 5 376.884 s 498.180 5 342.228 5 22s.264 s 3.s89,s89 s 1.91¿.784 s 2,330.s80 5 413.706 s 2.321.106 s 470.022 5/ha s 2.t27.422 s 1.114.808 5 650.264 5/ha 549.s71.200 527.ss2.000 531.689.600 534.873.600 s32.595.200 s19.884.800 s16.806.400 9/ha 54s.981.611 $25.637.216 $29.359,020 532.552.¿94 930.267.7?8 518.769.992 516.155.136 RENDIMIENTO AJU5TAOO (90%) cosros VARIABLES 5/ha lornoles cosecho TOÍAL INGRESOS ERUTOS INGRCSO NETO s s Tabla 15. Costos ordenados de menor a mayor y los respectivos ingresos de los tratamientos evaluados en la variedad Sugar Daddy. cosros TRATAMIENTO f f jYo T VARIABLES TOTALES INGRESO NETO s 650.264 s 16.156.136 10o/o $ 1 .I 14.808 s '18.769.992 50% s 1.914.7U D (J Di. s 2.321.106 A MEL K T Incremento COSTOS VARIABTES Incremento INGRESO NETO s 464.544 s 2.613.856 700 074 s 6.867.224 g 32.552.494 s 406.322 s 6.915.278 g 2.327 .422 g 30.267 .778 ¡ o.c t0 -s 2.284.716 COL $ 2.330.580 $ 29.359.020 $ 3.1 58 -$ 908.758 100% $ 3,589.589 $ 45.981.61 I s 1.259.009 ZC.OJI.¿ tO 64 R 916.622.591 La tabla 15 presenta los costos variables, organizados de menor a mayor, y los ¡ngresos netos para cada tratamiento, como en la variedad Goliath, los ingresos netos de todos los tratamientos son positivos lo que significa que el proceso productivo logró recuperar la inversión. A_MEL y K_COL tienen valores negativos en el cálculo del incremento del ¡ngreso neto, lo que coincide con el análisis de dominancia (Evans, 2008), donde los tratamientos A_MEL y K_COL se presentan como dominado, para estos dos el incremento en rendimiento es menor, por tanto, los ingresos netos son menores en comparac¡ón a los costos en los que se incurre con respecto a los demás tratamientos. Glomus sp, en cambio, estuvo dentro de los tratamlentos dominantes. Tabla 16. Tasa de retorno marg¡nal de los tratamientos dominantes para var. Sugar Daddy. TMTAMIENTO T0% T T Incremenlo cos¡os lncremento INGRESO NETO $ 650.264 inoresos TNR $16.1s6.136 10% $ 1.114.808 $ 464.544 $18.769.992 $ 2.613.856 COJ'/o 50% $ 1.914.784 $ 799.976 $25.637.216 $ 6.867 .224 858Yo $ 2.321.106 c2 Áeo qqo $ 406.322 $32.552.494 $ 6.915.278 1702o/o $13.429.117 1059% GSP T cosTos TOTALES 100% $1.268.483 $45.981.61 1 El cálculo del retorno marg¡nal neto (tabla 16) presenta a G-SP como el tratamiento con el que se obtiene la mayor tasa de retorno marginal, siendo el único tratamiento inoculado que presentó una TMR positiva. debajo de Glomus sp, seguido del T-50% y I -10o/o. El T-100% está por Este resultado muestra que el uso de micorrizas puede llegar a traer beneficios económicos, comparado con el uso del 100% del volumen de fertilizantes. o) 6. CONCLUSTONES 6.1 ARVEJA CHf NA . - GOLIATH (Pisum sativum L.var. macrocarpon) Para esta variedad, no se presentaron diferencias en las curvas de crecimiento, etapas de desarrollo y producción, entre los tratamientos inoculados y los no inoculados, comparados con el testigo comercial, pud¡endo deberse a una cantidad de nutrientes en el sustrato o un aporte en la fertilización superior al requerido por esta variedad de arveja china. r caso de los tratamientos con 10ok y 0o/o de la fertilización recomendada, las cepas nativas pudieron tener efectos positivos en el crecimiento y producción de esta variedad o como se menciona Para el anter¡ormente, las cond¡ciones de fertilidad del sustrato fueren suficientes para su crecimiento y desarrollo, ya que no se observaron deficiencias nutricionales en ningún tratamiento. . La absorción de fósforo fue estadísticamente similar en todos los en las otras variables como crecimiento producción, donde tampoco hubo diferencias significativas entre tratamientos, situación que se refleja o tratamientos. . Para esta variedad, la inoculación con HFMA significó una reducción de costos, sin embargo, Glomus sp. fue el la única cepa que incrementó el ¡ngreso neto. 66 6.2 ARVEJA DULCE . - SUGAR DADDY (Pisum sativum L. var. Saccharatum Aunque las curvas de crecimiento no presentaron diferencias entre los tratamientos, Glomus sp estuvo por debajo de los demás tratamientos, sin que ello afectara su producción. . La absorción de fósforo no se vio afectada por la presencia de HFMA en el suelo, no obstante, los tratamientos inoculados presentaron ligeros incrementos en la producción, en mayor medida con G/omus sp. comparados con el tratamiento con el 50% de la fertilización, siendo capaces de sustituir el 50% del volumen de fertilizantes, obteniendo rendimientos similares al testigo 100%. . Para el caso de Sugar dady, en este ensayo, el uso de HFMA también logró una disminución en los costos de producción comparado con el T_100%, además existió un incremento en los ingresos netos, gracias al aumento en la producción. . La tasa de retorno marginal de G/onus sp (G_SP) fue de 170204, superior a todos tratam¡entos, incluso al T_100%; fue el único tratamiento de HFMA que tuvo una tasa de retorno marginal positiva. 67 7. RECOMENDACIONES . Invest¡gar más acerca de los requerimientos nutricionales de la arveja china var. Goliath para lograr una fertilización eficiente bajo las condiciones de la sabana de Bogotá. . Estudiar otros aislamientos de HFMA en las variedades de arveja china var. Goliath para conseguir una de mejor desempeño, que logre suplir el 50% de la fertilización mineral. . Evaluar el efecto de la inoculación con H FMA sobre la sanidad del cultivo de arveja china y dulce. . Realizar estudios acerca del efecto de la inoculación con HFMA en las cualidades nutricionales u organolépticas de ambas variedades. . Revisar el efecto de la inoculación de HFMA en varios ciclos de cultivo. . Hacer investigación acerca del uso de doble inoculación con Rhizobios u otros microorganismos que complementen la fertilización integral de cultivos de arveja china y dulce. 68 8. BIBLIOGRAFIA ALARCÓN, A; FERRERA, R. 1999. Manejo de la Micorriza Arbuscular en Sistemas de Propagación de Plantas Frutícolas. TERRA Latinoamericana, julio-septiembre, añoivol. 17, número 003. 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