Vol. 2 Núm. 1 Naturaleza y Desarrollo Enero-Junio 2004 Dulzura Percibida de Aspartame y Sacarosa en Yogur Arturo Hernández Montes, Emilia Palomo López, Armando Santos Moreno Departamento de Ingeniería Agroindustrial Universidad Autónoma Chapingo Km 38.5 carretera México-Texcoco, C.P. 56230 Tel: 01(595)9552141 Correo electrónico: artuhm@taurus1.chapingo.mx Resumen No existen reportes sobre la percepción de dulzura de aspartame en yogur. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto del aspartame y sacarosa sobre las características sensoriales y físicas del yogur batido. Se evaluaron 5 concentraciones equivalentes de cada edulcorante: aspartame y sacarosa. Asimismo, se evaluó la dulzura en función del tiempo, la diferencia apenas detectable, el punto de igualdad subjetiva, consistencia y acidez del yogur. Los resultados mostraron que el aspartame tuvo un poder edulcorante mayor que la sacarosa a bajas concentraciones, no obstante su dulzor se redujo con el tiempo; la concentración ideal de aspartame es equivalente a 14 % (g·g1 ) de sacarosa y puede modificarse en ± 3 %. Las diferentes concentraciones de aspartame en el yogur no modificaron su consistencia y firmeza. El yogur edulcorado con aspartame mostró un mayor desarrollo de la acidez comparado con el yogur edulcorado con sacarosa. Palabras Clave : Dulzura, consistencia, percepción. Abstract Reports on the effect of aspartame on the perceived sweetness of yoghurt do not exist. The aim of this research was to evaluate the effect of aspartame and sucrose on the sensory and physical properties of stirred yoghurt. Five equivalent concentrations of each sweetener (aspartame and sucrose) were used. Acidity, consistency, sweetness, the just noticeable difference and the point of subjective equality were evaluated in yoghurt. At low concentrations, aspartame sweetness was greater than sucrose sweetness. Aspartame sweetness was reduced through time. The ideal concentration of aspartame was equivalent to 14 % (g·g-1 ) sucrose and it can be modified up to ± 3 %. Consistency and firmness of yoghurt was not affected by aspartame concentration. Aspartame sweetened yoghurt showed a greater development of acidity than sucrose sweetened yoghurt. Keywords : Consistency, perception, sweetness. Introducción Comúnmente los yogures se edulcoran con sacarosa, pero este edulcorante no responde a las necesidades de algunos consumidores que buscan el cuidado de su salud e inclusive de su figura. El aspartame es uno de los edulcorantes artificiales más usados por la industria de los yogures bajos en calorías o light. Es un edulcorante sintético 180 veces más dulce que el azúcar. El aspartame (L-aspartil–L-fenilalanina o- metil ester) es un dipéptido compuesto por 50 % de fenilalanina, 40 % de ácido aspártico y 10 % de metanol, es muy estable en estado seco, su estabilidad en soluciones depende mucho del pH y de la temperatura. La estabilidad del aspartame depende del pH y de la temperatura del medio, es estable a pH 3-5, su mejor estabilidad está a pH de 47 4.3, es menos estable a pH > 5 y también se hace menos estable con el calor (Nelson, 2000). EL pH del yogur es de 4-4.5 (Tamime y Deeth, 1980), por lo que la estabilidad del aspartame en estos sistemas es alta. Adicionalmente, el aspartame potencia los sabores frutales en el yogur. Pattanaargson et al. (2001) estudiaron la degradación de las soluciones de aspartame a varias condiciones de pH (soluciones amortiguadoras de fosfato-citrato a pH de 2, 4, 6, 7, 8, 10 y 12); encontraron que la solución de aspartame a pH 2 se degradó menos que a pH 4. La psicofísica tiene por meta el mejorar la comprensión de las respuestas al estimulo sensorial. Para medir la sensación producida por el estimulo, se necesita saber la relación entre la escala y la propiedad que se desea medir. Esta relación está dada por la ley de Weber. De Arturo Hernández Montes, Emilia López Palomo y Armando Santos Moreno acuerdo a esta ley, el incremento en el estimulo necesario para una diferencia apenas detectable es función de un incremento proporcional en el estimulo. Así, el estimulo se puede usar para medir la sensación (Gescheider, 1976). Cardello et al. (1979) compararon el poder edulcorante de la sacarosa y la fructosa a 6 diferentes concentraciones, aplicando la ley de Stevens, la cual transforma logarítmicamente la percepción y la concentración del estímulo, para obtener a través de una regresión lineal los valores de n y K, siendo n el valor de la pendiente y K el punto de intersección de la recta a la ordenada. Cuando se comparan los valores de n y K de dos estímulos, un valor grande de K indica una mayor percepción a bajas concentraciones y pendientes más grandes muestran una mayor percepción del estímulo a altas concentraciones. McBride y Booth (1986) determinaron la preferencia en la intensidad de dulzura en una bebida artificial de naranja. Se trabajó con 25 panelistas donde a cada uno se les dio a evaluar 5 concentraciones de la bebida y se les pidió especificar y dar la respuesta de “es demasiado dulce” o “no suficientemente dulce”. Las respuestas obtenidas después de un número de juicios (100) de cada par de concentraciones como “es demasiado dulce” fueron transformadas dentro de una distribución normal a valores Z y fueron graficados como una función del logaritmo del estímulo. La transformación logarítmica permite linearizar las curvas de los resultados de las frecuencias de juicios “demasiado dulces” o “no suficientemente dulces” en función de la concentración del edulcorante. Al graficar los valores de Z en la ordenada, se visualiza la intersección de la línea de regresión con el eje que corresponde a Z = 0 (50 % de respuestas “demasiado dulces”), la cual proporciona el punto de igualdad subjetiva (PSE). La diferencia de las concentraciones del estímulo correspondientes al 50 y 75 % de la frecuencia de respuestas “demasiado dulces” corresponde a la diferencia apenas detectable (JND). El cociente de la JND entre el PSE permite obtener la constante de Weber, la cual indica cuanto se debe de aumentar el estímulo inicial para que se detecte un cambio en su percepción. El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar en yogur la percepción de dulzura de aspartame y sacarosa, así como, la consistencia y desarrollo de acidez titulable. Materiales y Métodos Elaboración de yogur La elaboración del yogur fue basada en la metodología reportada por Santos (2001). El contenido de grasa en la leche se estandarizó a 2 % y posteriormente, la leche fue calentada hasta alcanzar una temperatura de 60 ºC, se le adicionó 1 % de suero en polvo ITAL (B-600) y 1% de almidón modificado (YAD-1000) y se mezcló en una licuadora por 3 minutos. El tratamiento térmico fue a 85 ºC, durante 20 minutos y se enfrió a 45 ºC, para inocular con cultivo liofilizado EZAL (Rhône-Poulenc, Alemania), usando 0.006 % de una mezcla de las siguientes cepas: MY800 Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus y Streptococcus salivarius ssp. termophilus. La incubación fue a 42-45 ºC, en termos de plástico por 2.5 horas o hasta que el yogur alcanzara una acidez de 0.45 % ácido láctico (g·mL-1). El yogur fue trasvasado a botes de plástico y enfriado a 8 ºC durante 20-24 h hasta alcanzar una acidez de 0.65 %. Este yogur fue la base para aplicar los diversos tratamientos de edulcorantes. Edulcorantes Se evaluaron sacarosa y aspartame. Para cada edulcorante se usaron 5 concentraciones, 6.0, 7.5, 9.0, 10.5 y 13.0 % (g·g-1) para sacarosa; y 7.5, 10.5, 13.5, 16.5 y 19.5 % (g·g-1 ) (como dulzura equivalente a la concentración de sacarosa) para aspartame, ambas concentraciones fueron expresadas en molaridad (Cuadro 1). El yogur con sacarosa fue edulcorado con un jarabe de 70 ºBrix, y el yogur con aspartame se edulcoró de manera directa. En las pruebas de percepción de la dulzura con respecto al tiempo, medición de consistencia y acidez Cuadro 1. Concentraciones de los Edulcorantes Utilizados en el Yogur Sacarosa 1 Aspartame 1 % (g·g-1) Sacarosa Aspartame Moles x10 -3 6.0 7.5 7.5 10.5 175.3360 219.1700 0.7721 1.0809 9.0 10.5 13.5 16.5 263.0040 306.8381 1.3898 1.6986 13.0 19.5 379.8947 2.0075 -1 El porcentaje de aspartame está expresado como % (g·g ) de la dulzura de sacarosa. 48 Vol. 2 Núm. 1 Naturaleza y Desarrollo Enero-Junio 2004 se usó un lote en donde el yogur fue edulcorado un día después de su elaboración; para la obtención de los valores n y k, se utilizó yogur endulzado el mismo día de las pruebas. en preguntar a los consumidores si del par de muestras una de ellas era “demasiado dulce” o “no suficientemente dulce”. Los valores de JND y PSE se obtu-vieron como fue reportado por McBride y Booth (1986). Evaluación sensorial de los tratamientos Selección del panel De una población inicial de 27 personas, a través de una prueba de ordenamiento, fueron preseleccionadas 12 personas, quienes posteriormente realizaron quince pruebas triangulares, evaluando 5 series por sesión, utilizando dos concentraciones de sacarosa (8.5 y 9.0 % p/p). Los resultados se evaluaron mediante un análisis secuencial con una habilidad mínima (po) igual a 0.33, una habilidad máxima (p1) igual a 0.70 y errores α y β de 0.05 y 0.10 respectivamente, se usó una escala nominal (igual/diferente). Las cinco personas que rebasaron el límite superior de la gráfica del análisis secuencial fueron aceptadas como panelistas para la evaluación final. Evaluación física y química de los tratamientos Medición instrumental de textura La medición de consistencia se realizó para las cuatro mayores concentraciones de edulcorantes, las cuales fueron percibidas como pares iguales. Se utilizó el analizador de textura TA-XT2i (Stable Micro Systems, England). Se empleó una muestra de 100 g de yogur, la cual se colocó en un recipiente cilíndrico de 7.5 cm de altura y 6 cm de diámetro interno. Se usó la celda de extrusión inversa (A/BE35). Se midió fuerza en comprensión, con la opción vuelve al inicio, a una velocidad de pre, post y durante ensayo igual a 1.0 mm/ s, y una distancia de 30 mm por debajo del nivel de la muestra. La celda de carga utilizada fue de 5 Kg. Se realizaron tres replicas por muestra, la consistencia se midió a partir de los valores de fuerza máxima positiva y área bajo la curva de las gráficas obtenidas. Percepción de la intensidad de dulzura del aspartame con respecto al tiempo En pruebas preliminares, se detectaron cambios de dulzura en el yogur edulcorado con aspartame, por lo cual se diseñó una prueba que demostrara estos cambios. Se prepararon cinco muestras de yogur con las cinco concentraciones de aspartame y fueron evaluadas durante cuatro días consecutivos utilizando una escala de estimación de magnitud. Para el análisis de los datos se empleó un diseño de bloques al azar con arreglo factorial. Medición de acidez La acidez del yogur fue cuantificada durante 5 días consecutivos siendo estos días los mismos en los que fueron aplicadas las pruebas de percepción de dulzura del aspartame con respecto al tiempo. La medición de la acidez fue por titulación y en triplicado, reportándose en porcentaje (g · mL-1) de ácido láctico. La evaluación de la consistencia y la acidez fueron analizadas utilizando un diseño completamente al azar con arreglo factorial. Percepción de dulzura por ley de Stevens Cinco panelistas seleccionados evaluaron en ocho sesiones (dos por día) cinco concentraciones de un solo edulcorante por sesión, utilizando una escala de estimación de magnitud. Los datos fueron analizados mediante una regresión lineal considerando a la concentración de edulcorante como la variable independiente y a la percepción de dulzura como la variable dependiente. Ambas variables fueron transformadas logaritmicamente y con ellas a través de una regresión se obtuvieron los valores de n y K para cada edulcorante. Resultados y Discusión Percepción de la intensidad de la dulzura de aspartame en función del tiempo Los resultados del análisis estadístico mostraron diferencias significativas (α =0.05), así como interacción entre las concentraciones y el tiempo. La intensidad de dulzura percibida en yogur edulcorado con aspartame varió de acuerdo a los niveles del edulcorante empleado y dependió del tiempo transcurrido desde su elaboración. Se observó que a menor concentración de edulcorante empleado, no existieron cambios de percepción de dulzura conforme pasó el tiempo, en tanto que a mayor concentración de aspartame, las variaciones de percepción de dulzura fueron mayores (Figura 1). Determinación de la Diferencia Apenas Detectable (JND) y el Punto de Igualdad Subjetiva (PSE) Se emplearon 25 consumidores de yogur, los cuales mediante una escala de estímulos constantes evaluaron las 5 concentraciones de aspartame en cuatro sesiones haciendo un total de 100 juicios por cada concentración (estímulo). La prueba de estímulo constante consistió Los resultados de la Figura 2 muestran que el yogur endulzado con aspartame y almacenado por 4 y 5 días después de elaborado, mostró una mayor acidez que el 49 Arturo Hernández Montes, Emilia López Palomo y Armando Santos Moreno Percepción de dulzura (escala de estimación de magnitud) 30 Día 1 Día 2 Día 3 Día 4 25 20 15 10 5 0 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 Moles de aspartame (10-3 ) Figura 1. Valores promedios del efecto de la interacción entre la concentración de aspartame y el tiempo después de elaboración en la percepción de dulzura en Yogur. almacenado de 1 a 3 días, lo que pudo enmascarar la percepción de la dulzura del aspartame en el yogur. acidez, la cual aumentó alrededor del 20 % (de 0.7 a 0.85 %) en los últimos 3 días. Acidez en yogur Todos los yogures elaborados con las diferentes concentraciones de aspartame presentaron cambios en la acidez en función del tiempo transcurrido después de su elaboración, en los dos últimos días la acidez aumentó de 0.7 a 0.85 %. La acidez final del yogur no dependió de la concentración de aspartame, sino más bien del tiempo transcurrido a partir de su elaboración (Figura 2). En cambio, la acidez del yogur endulzado con sacarosa (Figura 3) presentó variaciones en todos los niveles de concentración y presentó una disminución de la acidez a medida que se incrementó la concentración de la sacarosa, por lo que la acidez del yogur dependió de la concentración de sacarosa, la cual tiene una influencia en la actividad acuosa, que pudo reducir la actividad microbiana fermentativa. Percepción de dulzura por ley de Stevens a través de los valores de n y K Para el caso de la sacarosa, se obtuvo un valor de n de 1.505, un valor de K de –2.696 y un R2=0.852. El aspartame tuvo un valor de n de 1.074, un valor de K de 0.828 y un R2=0.873 (Cuadro 2). Las comparaciones de K muestran que la percepción de dulzura en el yogur edulcorado con aspartame es mayor a bajas concentraciones, debido a que el aspartame tuvo un mayor valor de K (punto de intersección de la ordenada) con respecto al de la sacarosa. Sin embargo, a altas concentraciones, la pendiente de la sacarosa fue mayor que la del aspartame, lo cual indica que a altas concentraciones, la sacarosa es más dulce que el aspartame. Estos resultados son similares a los obtenidos por Cardello et al. (1979). Los valores de n y K obtenidos permiten ratificar el mayor poder edulcorante del aspartame con respecto a la sacarosa. Sin embargo, el aspartame a concentraciones superiores a 2 moles x 10-3 se percibirá menos dulce que la sacarosa. Dado el pH del yogur (4.5), el cambio químico del aspartame no es posible, ya que a este pH el edulcorante presenta su máxima estabilidad. El enmascaramiento de la percepción de la dulzura se debió al desarrollo de la 50 Vol. 2 Núm. 1 Naturaleza y Desarrollo Enero-Junio 2004 % Acidez titulable (g ácido láctico/100 mL) 1.0 0.8 0.6 Día 1 Día 2 Día 3 Día 4 Día 5 0.4 0.2 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 -3 Moles de aspartame (10 ) Figura 2. Valores promedios del efecto de la interacción de la concentración de aspartame y el tiempo transcurrido desde elaboración sobre la acidez de yogur. %Acidez titulable (g ácido láctico/100mL) 1.0 Día 1 Día 2 Día 3 Día 4 Día 5 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 150 200 250 300 350 400 -3 Moles de sacarosa (10 ) Figura 3. Valores promedios del efecto de la interacción de la concentración de sacarosa y el tiempo transcurrido desde elaboración sobre la acidez de yogur. 51 Arturo Hernández Montes, Emilia López Palomo y Armando Santos Moreno Cuadro 2. Valores de n, K y Coeficientes de Determinación para Yogures Edulcorados con Sacarosa y Aspartame. Sacarosa Aspartame Pendiente de la recta (n) 1.505 1.074 Intersección a la ordenada (K) -2.696 0.828 Coeficiente de determinación 0.852 0.873 Determinación del JND Y PSE Se calculó el porcentaje de respuestas “demasiado dulce” para cada concentración y luego se transformaron a valores Z ( Cuadro 3), usando las tablas de distribución normal, se aplicó una regresión lineal al logaritmo decimal de las concentraciones y a los valores zeta, obteniéndose la siguiente ecuación: Z = 7.302515 Log C-8.377577 Donde C es la concentración del estímulo. A partir de la ecuación 1, se calculó la concentración ideal que corresponde al 50 % (Z = 0) de respuestas “demasiado dulce”. El valor de 14.03 % corresponde al PSE (Gescheider, 1976). De forma similar, con un valor de Z (0.675) correspondiente a un valor de 75 % de las respuestas “demasiado dulce”, se obtuvo un valor de concentración de aspartame equivalente a la dulzura de sacarosa de 17.36 %. (Figura 4). La diferencia entre estos dos valores (respuesta al 75 % y 50 %) describe la JND, cuyo valor correspondió a 3.3 %, de esta manera se dice que la concentración ideal de aspartame equivalente a la dulzura de sacarosa para el caso específico de este yogur es de 14.03 % (g·g-1), Este valor de concentración se puede modificar en un rango de 3.3 % (14.03 % < X < 17.3 %), sin modificar el valor de su percepción, es decir, sin que el consumidor lo note. La proporción de Weber fue 0.237, siendo ésta la relación JND/PSE que indica el incremento proporcional en el estímulo necesario para una diferencia apenas detectable. Los resultados obtenidos a partir de esta prueba son semejantes a los obtenidos por McBride y Booth (1986). El PSE permite recomendar el óptimo de dulzura para el yogur, el cual correspondió a una concentración de aspartame de 1.3 X 10-3 moles. Medición de la consistencia del yogur La consistencia del yogur (área bajo la curva y máxima fuerza) edulcorado con aspartame siempre fue mayor que la del edulcorado con sacarosa (figuras 5 y 6). La . Cuadro. 3 Valores de Z Correspondientes a las Probabilidades Obtenidas en Cada Concentración de Aspartame Usada en Yogur. Concentración de aspartame equivalente a la dulzura de sacarosa % (g·g -1) Probabilidad o área bajo la curva Normal Valor de Z 7.5 10.5 13.5 16.5 19.5 0.03 0.18 0.34 0.70 0.87 -1.881 -0.915 -0.412 0.524 1.126 52 Vol. 2 Núm. 1 Naturaleza y Desarrollo Enero-Junio 2004 Valores de Z de una curva normal 2 Z = 7.302 log C - 8.377 1 P < 0.05 R2 = 0.989 0 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 -1 -2 Logaritmo de concentración (moles 10-3 ) de aspartame Consistencia de yogur medida como área (N x s) Figura 4. Línea de regresión obtenida a partir de los valores de z correspondientes a las probabilidades obtenidas en cada concentración de aspartame usada en yogur. 12.5 12.0 11.5 11.0 Aspartame Sacarosa 10.5 10.0 9.5 9.0 7 8 9 10 11 12 13 14 Porcentaje (g/g) de edulcorantes en yogur expresado como la dulzura equivalente de sacarosa Figura 5. Valores promedios del efecto de la interacción entre la concentración y tipo de edulcorante en la consistencia de yogur medida como área. 53 Consistencia de yogur medida como fuerza máxima (N) Arturo Hernández Montes, Emilia López Palomo y Armando Santos Moreno 0.48 0.46 0.44 0.42 Aspartame Sacarosa 0.40 0.38 0.36 0.34 7 8 9 10 11 12 13 14 Porcentaje (g/g) de edulcorantes en yogur expresado como la dulzura equivalente de sacarosa Figura 6. Valores promedios del efecto de la interacción entre la concentración y tipo de edulcorante en la consistencia de yogur medida como fuerza máxima. y fue mayor en el yogur con aspartame. Las bajas concentraciones de aspartame utilizadas en la elaboración de yogur no influyeron en su consistencia. Sweetness of Fructose and Sucrose in Model Solutions, Lemon Beverages and White Cake. Journal of Food Science. 44: 748-751. Conclusiones Gescheider, A, G. 1976. Psychophysics. Method and Theory. Hamilton College. Lawrence Erlbaum Associates, Hillsdale, New Jersey. El aspartame tiene un poder edulcorante mayor que el de la sacarosa, percibén se más dulce a bajas concentraciones, en tanto que la sacarosa se incrementa su poder edulcorante a altas concentraciones. El aspartame proporcionó un producto en el que la percepción de la dulzura disminuyó a través del tiempo transcurrido a partir de su elaboración, debido a la formación del ácido láctico, que enmascaró la per-cepción de dulzura. Desde el punto de vista sensorial, los consumidores podrían notar la disminución de la dulzura, lo que limitaría la aceptación del yogur. La acidez titulable del yogur con sacarosa disminuyó al incrementar la concentración del edulcorante. La concentración ideal de aspartame en el yogur equivalente a la dulzura de sacarosa es 14 %y puede variar en 3.3 % sin modificar su valor de percepción. La consistencia y firmeza del yogur endulzado con sacarosa disminuyó a medida que se incrementó la concentración su consistencia y firmeza del yogur endulzado con aspartame no fue modificada significativamente. Literatura Citada Cardello, A.V., D. Hunt, and B. Mann. 1979. Relative McBride, R. L and D. A. Booth. 1986. Using Classical Psychophysics to Determine Ideal Flavour Intensity. Journal of Food Technology 21, 4-6: 775-780. Nelson, L. A. 2000. Sweeteners Alternative. Eagan Press Handbook Series. Practical Guides for industry. Pattanaargson, S., C. Chuapradit and S. Srisukphonraruk 2001. Aspartame Degradation in Solutions at Varios pH Conditions. Journal of Food Science. 66, 6: 808-809. Santos, M. A. 2001. Manual de Elaboración de Productos Lácteos. Departamento de Ingeniería Agroindustrial PUIA. Universidad Autónoma Chapingo, México. Tamime, A. Y. and H. C. Deeth. 1980. Yogurt: Technology and Biochemistry. Journal of Food Protection. 43 12: 939-977. Recibido: 20 de septiembre de 2002 Aceptado: 16 de marzo de 2004 54