Subido por Magdiel Sánchez

Anticuerpos

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24/01/18
Anticuerpo
Anticuerpos
Ê Glucoproteínas (INMUNOGLOBULINAS)
Ê Producidas por células plasmáticas
Ê Se unen de manera específica al antígeno
Ê Ayudan a su destrucción o eliminación
Ê Se encuentran en muchos líquidos corporales
Ê Más concentrados en suero
Ê Defienden al cuerpo contra
Ê Virus, bacterias y protozoarios extracelulares
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Estructura de las inmunoglobulinas
Ê Cuatro cadenas protéicas
Ê 2 cadenas pesadas
Ê 4 dominios (verde)
Ê 2 cadenas ligeras
Ê 2 dominios (amarillas)
Partes de los anticuerpos
Ê 2 fragmentos
Fab
Ê 1 fragmento Fc
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Regiones variables y constantes
Ê Regiones variables
Ê En la parte distal de los
fragmentos Fab (en rojo)
Ê Se unen al antígeno
Ê Se unen a la región Fc mediante la
región de bisagra
Varibilidad Regiones Variables
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Región constante
Ê Sirve para la activación
de diferentes
respuestas inmunes,
DESPUÉS de que el Ab
se une al Ag.
Ê Activación del
complemento
Ê Opzonización
Region de Bisagra
Ê Dan movilidad a las
regiones Fab
Ê Región rica en el aa prolina
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Funciones
de los Ac
(Ig)
ISOTIPOS (Tipos de Inmunoglobulinas)
Ê IgG, IgA, IgM, IgD, IgE
Ê Dependen del tipo de la cadena pesada
Ê α, γ, δ, ε, µ
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IgG
Ê Producida en bazo, ganglios
linfáticos y médula ósea
Ê Más común en sangre
Ê Importante en defensa
mediada por Ac
Ê Opsoniza, aglutina y precipita
antígenos
Ê Puede activar el complemento
Ê Cadenas pesadas tipo γ
IgM
Ê Producida y secretada por
células plasmáticas en bazo,
ganglios linfáticos y médula
ósea
Ê Ig más grande: 900 KDa
Ê 5 subunidades de 180 KDa
Ê Cadenas pesadas tipo µ
Ê Ig más producida en respuesta
humoral primaria
Ê Confinadas al torrente
sanguíneo por su gran tamaño
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IgM
Ê Muy eficiente para activación de complemento,
aglutinación y neutralización de virus
Ê Más que IgG
Ê Poca importancia en inflamación
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IgA
Ê Secretada por células plasmáticas
localizadas bajo la superficie
corporal
Ê Paredes del intestino
Ê Vías respiratorias y urinarias
Ê Piel
Ê Glándulas mamarias
Ê Estructura convencional en forma
de dímero
Ê Cadena pesada tipo α
IgA
Ê No activa complemento ni es opsonina
Ê Aglutina antígenos y neutraliza virus
Ê Ig importante en secreciones externas de
animales no rumiantes
Ê Evita la adherencia de antígenos a superficies
corporales
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IgE
Ê Producida en superficies
corporales
Ê Cadena pesada tipo ε
Ê Concentración baja en el suero
Ê Actúa como molécula de
transducción de señales
Ê Muy importante en la
inflamación y en la mediación de
alergias de tipo I
IgD
Ê No se ha detectado en todas
las especies
Ê Sólo en primates y roedores
Ê Superficie de linfocitos B
Ê Receptor de antígenos
Ê 180,000 daltons
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Alotipos e Idiotipos
Ê Alotipos
Ê Variaciones hereditarias en la
estructura de las Ig
Ê Ig de Pedro difieren de las Ig de Juan
Ê Idiotipos
Ê Segmento de una Ig que determina su
especificidad para un Ag.
Ê Cambios en las secuencias de AA de
los dominios variables de las cadenas
ligeras y pesadas
Métodos de laboratorio con
Anticuerpos
Ê Anticuerpos
Ê Útiles para detectar, purificar y cuantificar antígenos
Ê Se producen contra casi cualquier tipo de macromoléculas
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ELISA
Inmunohistoquímica
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Isotipos y subisotipos de Ig
Anticuerpos monoclonales
Ê Anticuerpos específicos de un solo tipo, producidos en
cantidades ilimitadas
Ê Hibridoma
Ê Fusión de un Linfocito B x mieloma
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Inmunoanálisis
Ê Cuantificación de antígenos
Ê Alta sensibilidad
Ê Alta especificidad
Ê ELISA (Análisis de inmunoadsorción ligado a enzimas).
Ê Utiliza 2 Ac distintos que reaccionan con 2 epitopos diferentes
del Ag cuya concentración se quiere medir
ELISA
Ê Cantidad fija de Ac se une a un soporte sólido igual
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ELISA
Ê Se añade la solución problema que contiene el antígeno
Ê La concentración puede ser desconocida
Ê Se pueden añadir soluciones estándar con concentraciones
conocidas del Ag
ELISA
Ê El Ag que no se unió a los anticuerpos fijados en la placa, es
eliminado mediante lavado
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ELISA
Ê Se añade el segundo anticuerpo
Ê Contiene una enzima o un radioisótopo
Ê Ag sirve de puente entre los Ac
Ê A mayor cantidad de Ag en la solución problema, o en los estándares,
mayor será la cantidad del 2º Ac marcado con la enzima o radiosótopo
ELISA
Ê Se elimina el exceso de Ac marcado no unido mediante lavado
Ê Se mide la cantidad de Ac marcado que permanece unido
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Trabajo para lo que no tienen derecho
a presentar examen
Ê En un estudio, se vacunó a toda la población
canina de la ciudad con una vacuna contra una
bacteria patógena. Se descubrió que los perros
desarrollaron anticuerpos contra un epitopo en
particular presente en la membrana celular del
patógeno.
Ê Se determinó que la estructura de este epitopo era un
péptido de 10 aminoácidos de longitud. Se sintetizó
este péptido en el laboratorio y se usó para inmunizar
otros perros susceptibles de infección.
Ê Desafortunadamente, los perros vacunados con el
péptido no presentaron protección contra la
bacteria. Explique porqué ocurrió esto.
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Métodos de identificación de proteínas
Ê Inmunoprecipitación
Ê Sirve para aislar un
antígeno proteico, que se
encuentra presente en una
mezcla de proteínas
Inmunoprecipitación
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Cromatografía de Afinidad
Ê Se fijan anticuerpos específicos a un
antígeno, a un soporte sólido
Ê Agarosa
Ê En una columna
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Cromatografía de afinidad
Ê Mezcla compleja de antígenos (que
contiene el Ag de interés).
Ê Se hace pasar por la columna (que
contiene los Ac).
Ê El Ag se une al Ac
Ê Los Ag que no se unen al Ac son
eliminados por un lavado
Ê El Ag fijado al Ac se elimina
modificando el pH
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Inmunotransferencia
Ê Determina cantidad y peso molecular de una proteína
Ê Que está mezclada con otras proteínas
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Regiones variables y constantes
Ê Regiones constantes
Ê Parte proximal de los fragmentos
Fab y todo el fragmento Fc (en
color azul)
Tipos de Inmunoglobulinas o
Anticuerpos
Ê 5 tipos
Ê IgG: más abundante en suero
Ê IgM: 2a más abundante en suero
Ê IgA: Saliva, leche, líquido intestinal
Ê IgD: raro en líquidos corporales
Ê IgE: mediadora de alergias
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IgG
Ê Inmunoglobulina más pequeña
Ê Sale fácilmente de los vasos sanguíneos
Ê Inflamación
Ê Se adhiere con facilidad a Ag extraños
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