Producto 6 PROTOCOLO TOMA DE MUESTRAS DE LAS PUSTULAS DE Puccinia graminis f. sp. tritici (Ug99) Objetivo Inspección y toma de muestras de Puccinia graminis f. sp. tritici (Ug99) en cultivos de trigo. La toma de muestras se realizará una vez que se detecten signos sospechosos similares a los ocasionados por la roya UG99. Materiales de colecta Prensa Papel periódico Lupa de 10X Libreta de campo GPS Navaja Se utilizará el diseño 5 de oros, tomando 5 plantas por punto. En el caso de las esquinas el punto debe estar a 9 metros del borde de la parcela (Figura 2). El total de las muestras a tomar son 25 por hectárea. Colectar las hojas, tallos o espigas que presenten las pústulas características de la enfermedad (Figura 3). Fecha de toma de muestra Los campos de grano o forrajes pueden ser inspeccionados en cualquier estado de crecimiento. Para el estado de plántula hasta que tenga alrededor de cinco o seis hojas, las lesiones son más evidentes en las hojas. El principal momento para inspeccionar es en la etapa de espigamiento, hasta la madurez cercana. La inspección se realizara una vez cada quince días en las etapas de nacencia, amacollamiento y encañe. En las etapas de encañe, enbuche, espigamiento, grano lechoso, grano masoso y madurez, la inspección se realizara una vez por semana. 7 Metodologías de muestreo Diseño de muestreo Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica Fitosanitaria Informe 2009 Procedimiento para obtener la muestra* 1. Utilizando el GPS, tomar las coordenadas de ubicación de la muestra y marcar la planta a muestrear con el número de la muestra. 2. Etiquetar la hoja periódico, tal como se establece en la sección de datos de muestra. 3. Cortar 5 hojas de trigo de 15 cm de longitud, que presenten síntomas y signos de roya en el cultivo. 4. Colocar las muestras vegetales con todos sus respectivos datos en papel secante (periódico). 5. Poner 3 capas de periódico con las muestras vegetales entre dos piezas de cartón corrugado. 6. Apilar de 5 a 10 niveles de estas capas de muestras y prensar (se puede utilizar una prensa, libros o material pesado), con el objetivo de que el material se deshidrate y quede liso. 7. Cambiar el periódico diariamente para evitar la pudrición de las muestras vegetales. 8. Mantener prensado el material vegetal durante 3 días mínimamente o hasta que esté se encuentre totalmente deshidratado. 9. Al cuarto día, sacar las muestras ya prensadas y colocarlas en sobres diferentes y ponerlas en un sobre más grande para ser enviadas al CNRF. *Elaboro (Elaboró: M.C. Antonio Carcamo Rodríguez Fecha: 27 de mayo de 2009) Datos de colecta de muestra Cada papel periódico deberá ser etiquetado con el número de muestra y en la libreta de campo se registrará el número de muestra con los siguientes datos: 1. Nombre del huerto, rancho o parcela 2. Croquis de ubicación del huerto 3. Municipio, Entidad Federativa 4. Posición geo-referenciada de la planta muestreada 5. Fecha de colecta 6. Fecha de envío (una vez que el material se encuentre completamente seco) 7. Colector Las muestras colectadas que presentes síntomas característicos de la enfermedad, serán enviadas vía paquetería al Centro Nacional de Referencia Fitosanitaria para su identificación. 8 Municipio Localización Localidad Huerto superficie (ha) Lat. GPS Metodologías de muestreo Hospedero Revisadas Grado 1 Grado 2 Grado 3 Grado 4 Grado 5 Sano Menor al 25% 25%-50% Mayor de 50% a 75% Mayor al 75% ** Intensidad del ataque Long. C/síntomas signos No. De plantas Formato 1. Datos de muestreos realizados para la detección de Puccinia graminis f. sp. tritici (Ug99). Nombre del colector: ___________________ Fecha de colecta: _________________ Entidad Federativa:______________ Intensidad o ** del ataque Producto 6 9