2009 PROFESOR: Dr. Miguel A. Larrea Céspedes ALUMNA: Claudia Coronel Aller CODIGO: 05-27906 INFORME Nº 03 DETERMINACIONES REFRACTOMETRICAS EN ALIMENTOS UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN FACULTAD DE INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS ANALISIS DE LOS ALIMENTOS Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos PRACTICA Nº 03 DETERMINACIONES REFRACTOMETRICAS EN ALIMENTOS I. OBJETIVO: • Conocer los fundamentos del uso de los instrumentos y sus aplicaciones en la determinación del índice de refracción como un método de análisis en los alimentos el mismo que permitirá determinar el contenido de sólidos solubles, sólidos totales, establecer relaciones tabulares y graficas entre: gravedad especifica, grados Brix, índice de refracción, sólidos solubles, etc. II. FUNDAMENTO TEORICO: 1. Definición Es una técnica analítica que consiste en la medida del índice de refracción de un líquido con objeto de investigar su composición si se trata de una disolución o de su pureza si es un compuesto único. Poco han variado los refractómetros desde el diseño original de Abbé (1874) y Pulfrich (1887). 1.1. Teoría Un rayo de luz que pasa oblicuamente desde un medio hacia otro de diferente densidad, cambia su dirección cuando traspasa la superficie. Este cambio en la dirección se denomina refracción. Cuando el segundo medio es más denso que el primero, el rayo el rayo se aproxima a la perpendicular trazada sobre la superficie divisoria en el punto de incidencia. La causa fundamental de este cambio en la dirección se debe al cambio en la velocidad de la luz que se hace más lenta cuanto más denso sea el medio por el que pasa el haz. La luz amarilla de la lámpara de sodio disminuye su velocidad desde 3x1010 cm/s en el vacío hasta 2,25x1010 cm/s en el agua. El ángulo formado entre el rayo en el primer medio y la perpendicular se llama ángulo de incidencia, i, mientras que el correspondiente ángulo en el segundo medio se denomina ángulo de refracción, r. El índice de refracción, n, es la razón entre las velocidades de la luz en ambos medios. La ley de Snell representa a este índice como la razón de los senos de los ángulos de incidencia y refracción Es práctica normal referir el índice de refracción al vacío que se define arbitrariamente como índice de refracción unidad. Si se refiere al aire el error cometido es 3 partes en 104. Es una constante adimensional por lo tanto, cuyo valor para una luz de una determinada longitud de onda viene determinada por las características del medio líquido o sólido y el aire como medio de referencia. Si se va a comparar los índices de 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos líquidos o disoluciones se debe indicar el medio de referencia así como otras variables que afectan a la velocidad de la luz en la muestra a medir. El símbolo nD 20, por ejemplo, se refiere a la medida a 20 °C del índice para las líneas D del sodio. La mayoría de los índices de refracción recogidos en la bibliografía se refieren a estas condiciones. Ejemplos: Agua, 1,33; vidrio “crown”, 1,50; CS2, 1,63; vidrio “Flint”, 1,75; diamante, 2,42; rutilo (TiO2), 2,60-2,90. 1.2. Índice de Refracción (IR) El índice de refracción (IR) de una sustancia, al que generalmente se le asigna el símbolo n, es una medida de la velocidad de la luz a través de la sustancia y se define como la razón entre la velocidad de la luz en la sustancia y la velocidad de la luz en el vacío. Para fines prácticos, se usa la velocidad de la luz en el aire y no en el vacío, siendo la diferencia muy pequeña. Índice de refracción de una sustancia determinada(n) = Velocidad de la luz en el vacío Velocidad de la luz en la sustancia La velocidad de la luz a través de un medio depende de la longitud de onda (o el color) de la luz. Por lo tanto, el IR debe definirse a una longitud de onda especifica, por lo general, la luz del sodio. Por ejemplo, nD indica un índice de refracción basad en la longitud de onda de la línea D del sodio, de 589 nm. El IR también esta en función de la temperatura. Normalmente, un aumento de la temperatura da lugar a una disminución de la densidad y la luz viaja más rápido a través de un medio de densidad mas baja. Por lo tanto, el IR tiende a disminuir a aumentar la temperatura. Para medir el índice de refracción de las sustancias, generalmente líquidos, se usa un refractómetro. La mayoría de los refractómetros se basan en el efecto del ángulo crítico, que define el punto de equilibrio, el punto de sombra o limite, entre la refracción y el reflejo interno total de la luz en un interfaz prisma/muestra. El índice de refracción de la muestra se deriva de la geometría de la vía óptica y el índice de refracción del material del prisma. 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos 2. Clases de Refractómetros Los aparatos más importantes se basan en dos principios: refractómetros de ángulo límite o crítico y los refractómetros de desplazamiento de imagen. 2.1. Refractómetros de ángulo límite En estos aparatos se observa el campo del ocular dividido en una zona obscura y otra clara. La separación entre ambas corresponde al rayo límite. El rayo límite se puede visualizar en el esquema siguiente. La luz pasa a través de una capa delgada de muestra (0,1 mm) y entra en el prisma de difracción P2. El prisma P1 es de difusión de manera que muestra una superficie rugosa y actúa como fuente de un número infinito de rayos que entran en la muestra en todas direcciones. La radiación que únicamente roza la superficie del prisma P2 penetra en él formando un ángulo Ø c llamado ángulo límite o crítico y su valor depende de la longitud de onda y de los índices de refracción de la muestra y del prisma. Ningún rayo puede formar un ángulo superior al límite ya que la fuente de tales rayos no penetra en el prisma y todos los demás rayos que penetran en el prisma se refractan según ángulos menores (a la derecha), que el ángulo límite, e iluminarán la parte derecha del ocular. La zona de la izquierda permanece obscura ya que no se refractan rayos a ángulos superiores al límite. La medida de este ángulo permite medir el índice de refracción de la muestra. En un aparato de Abbe, lo que se mide es α que es el complementario de Ø c, y es el ángulo con el que emergen los rayos del prisma P2. La mayoría de los refractómetros utilizan este principio y los más importantes son los de Abbe, Pulfrich y los de inmersión. 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos a. Refractómetro de Abbe Aparece un esquema que muestra dos prismas articulados entre los cuales se coloca la muestra. Por el centro de los prismas pasa un eje que permite mover el prisma de refracción P2 y así medir a en una escala graduada que es proyectada en el ocular y que se gradúa en unidades de nD hasta 0,001. El amplificador permite determinar la siguiente cifra, 0,0001. Se miden índices entre 1,3 y 1,7. Los denominados compensadores están formados por unos prismas (prismas de Amici), y permiten utilizar luz blanca como fuente. Estos prismas de vidrio permiten dispersar todas las longitudes de onda excepto el color amarillo en le vecindad de la línea D del sodio, que es la única que atraviesa el prisma. Es decir, actúa como un monocromador, pero la resolución no es perfecta. Refractómetro de Abbe b. Refractómetro de inmersión Es el más simple de todos. Requiere sólo 10-15 ml de muestra. En prisma simple va montado en un telescopio que contiene el compensador y el ocular. La escala se sitúa debajo del ocular dentro del tubo. La superficie inferior del prisma se sumerge en un pequeño vaso que contiene a la muestra, con un espejo debajo para reflejar la luz hacia arriba a través del líquido. Refractómetro de inmersión 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos c. Refractómetro de Pulfrich Se usa sobre todo para medidas precisas en disoluciones o líquidos muy volátiles, reactivos o higroscópicos, para placas sólidas, estudios diferenciales y para medidas de dispersión. Los valores absolutos obtenidos no son fiables en la quinta cifra decimal, pero una comparación a dos longitudes de onda o con dos sustancias puede dar una precisión de ±1x10-5. Los sólidos o líquidos con índices entre 1,33 y 1,86 pueden ser determinados en un amplio intervalo de temperaturas. El índice de refracción n no puede ser determinado directamente, sino después de una serie de observaciones. Una vez estabilizado el aparato es posible obtener el índice en unos cinco minutos. 2.2. Refractómetros de desplazamiento de imagen En estos aparatos se mide el desplazamiento del rayo refractado en relación al rayo incidente, en vez de medir el desplazamiento de la línea de separación entre la zona clara y obscura debido al ángulo límite. Se construye un prisma con la muestra y el índice se calcula en base al desplazamiento angulas de la luz al pasar por la muestra. Si la muestra es líquida se coloca en un recipiente en forma de prisma. La precisión es unas dos veces superior a la obtenida con el refractómetro de Abbe. No hay límite en la determinación de índices de refracción y se puede trabajar en un mayor número de longitudes de onda, incluso zonas del ultravioleta o infrarrojo cercano, si se usan prismas de cuarzo. Entre estos aparatos están los refractómetros diferenciales. a. Refractómetros diferenciales Se emplean primariamente para el análisis de mezclas líquidas. Se aplican a cualquier mezcla cuyo índice de refracción es una función simple de la composición; esto incluye aproximadamente a todos los sistemas binarios. En la medida de los índices de refracción siempre es un problema la temperatura que debe controlarse cuidadosamente. Estos instrumentos emplean una sola célula a través de la cual la luz es transmitida. El rayo es difractado un ángulo cuyo valor depende de la diferencia del índice de refracción entre la muestra y una muestra estándar que constituye una parte de la célula. El ángulo de refracción se mide con un dispositivo fotoeléctrico. La aplicabilidad al análisis de líquidos es mediante un procedimiento empírico. Muestras de composición química conocida se hacen pasar a través del instrumento, obteniendo así una curva de composición frente a lecturas del refractómetro. Algunos instrumentos pueden dar rangos de valores hasta Δn = 10-5 a cualquier valor nominal. 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos La mínima diferencia de índice detectable es del 1% para rango de 10 -7 unidades del índice de refracción para los instrumentos más precisos. La precisión viene condicionada por los cambios de temperatura y deformaciones del aparato. 3. Aplicaciones En la industria alimentaria para la semilla de soja o del aceite de semilla de algodón con índices de 1,47. El producto final para producir margarina tiene 1,43. Otras aplicaciones se relacionan con la variación de la concentración de disoluciones. Así, la concentración en azúcar, salmueras y ácidos es fácil de seguir mediante refractometría. Por ejemplo, el índice de refracción de una disolución de sacarosa aumenta 0,0002 unidades por un incremento de la concentración de 0,1%. También se detectan cambios de 0,02% en la concentración de ácido nítrico por el mismo procedimiento, e incluso más sensibilidad se puede conseguir en las medidas de las concentraciones de ácido sulfúrico. Índice de refracción frente a la concentración Hay gran diferencia entre los índices de refracción de los compuestos aromáticos y los saturados; los primeros tienen índices de alrededor de 1,50 y los segundos, 1,40. Las mezclas alcohol-agua pueden también ser medidas. El agua tiene un índice de 1,33299, el metanol, 1,32920, el etanol 1,36176 y el isopropanol 1,37757; se puede determinar concentraciones acuosas de estos alcoholes. Para el control de torres de destilación fraccionaria como en la separación del ciclohexano del n-hexano, con índices 1,42623 y 1,37486 respectivamente. Se pueden detectar cambios en la composición de hasta 0,1%. Asimismo, se emplea este método en la separación fraccionaria del butano e isobutano. Los refractómetros de ángulo crítico son adecuados para su instalación en línea para monitorizar las medidas especialmente en aquellos fluidos opacos, con partículas de catalizador o polímeros. 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos Los refractómetros de ángulo crítico deben medir fluido representativo ya que el índice de refracción medido es de la capa de la interfase. La agitación o turbulencia contribuyen a la homogeneidad del fluido y a la limpieza del vidrio de la interfase; pero cuando la agitación es pequeña o, en el caso de ser muy viscoso el fluido, se pueden producir errores de lectura. a. Refractómetros de ángulo crítico en línea Miden el índice de refracción de líquidos en la interfase con aire o, más corrientemente, un prisma de vidrio. La luz es enviada a la interfase a varios ángulos cercanos al crítico. el ángulo crítico es el ángulo formado por la perpendicular a la cual el haz cambia desde luz transmitida en el líquido a luz totalmente reflejada en la superficie del líquido. A ángulos más pequeños que el crítico la luz se transmite en el líquido. El ángulo crítico no depende sólo de la composición de la disolución sino del material del prisma. El índice de refracción se puede calcular así: ic = arcsen(ng/nl), Donde ic es el ángulo crítico en radianes en el vidrio; ng índice de refracción del vidrio, nl el índice de refracción del líquido. El principal hecho destacable de esta técnica es que el índice de refracción se mide en la superficie de la disolución. Como la superficie de reflexión no requiere penetración del 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos rayo en la disolución, este instrumento puede ser usado para muestras bastante opacas y suspensiones además de muestras transparentes. III. MATERIALES ,EQUIPOS Y METODOS: 1. MATERIALES − − − − − 2. Refractómetro Abbe mesa) Refractómetro manual Termómetro Embudos de 60 ml Baguetas (de − − − − − − Erlenmeyer de 250 ml Vasos de pp. De 50 ml Cocinilla eléctrica Probetas Agua destilada Alcohol MUESTRAS: • Soluciones salinas a diferentes concentraciones. • Soluciones de sacarosa a diferentes concentraciones. IV. PROCEDIMIENTO: Funcionamiento del Refractómetro Manual Utilice, lea el termómetro y registre la temperatura. 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos Compruebe que el prisma este limpio. Utilice una pipeta para colocar una gota de sustancia problema, la misma que debe ser lo suficientemente transparente para dejar pasara la luz. La medida será realizada a 20ºC; si la temperatura es diferente, deberá hacerse las correcciones de acuerdo a tablas y productos especificados. Mire a través del ocular. Funcionamiento del Refractómetro Abbe Abra el montaje del prisma y quite el tejido fino. Compruebe que el prisma este limpio. 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos Utilice una pipeta para colocar una gota de sustancia problema, la misma que debe ser lo suficientemente transparente para dejar pasara la luz. La medida será realizada a 20ºC; si la temperatura es diferente, deberá hacerse las correcciones de acuerdo a tablas y productos especificados. Tenga cuidado de no tocar el prisma con el extremo de la pipeta, esto puede rasguñar el cristal suave del prisma. Mire a través del ocular. Si usted está cerca índice de refracción de su muestra usted debe ver que la visión en el ocular demuestra una región oscura en la región inferior y más clara en la tapa. Para leer índice de refracción, presione el interruptor en el lado de la mano izquierda del refractómetro hasta que usted ve la escala a través del ocular. La escala superior indica índice de refracción. Cuidadosamente interpolando usted puede leer el valor a la exactitud del lugar decimal 4. El ejemplo demostrado aquí tiene un índice de refracción de 1,4606. 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos Registre el índice de refracción en su cuaderno del laboratorio. Después lea el termómetro y registre la temperatura. Después de que le acaben, limpie el refractómetro. Primero utilice un tejido fino al lenguado lejos más de su muestra. Entonces lave el prisma con un pequeño solvente, nosotros utilizan generalmente un alcohol simple tal como etanol para las muestras orgánicas de la limpieza. V. RESULTADOS Y DISCUSIONES: 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos A. REFRACTOMETRO MANUAL i. Soluciones azucaradas o de sacarosa Solución de sacarosa (1) Temperatura.- 16ºC Sólidos Solubles.TABLA: Concentración (%) Corrección 0 1.9 5 0.24 X 0.25 5 −1.9 0.25 − X = 1.9 − 0 X − 0.24 3.1 0.25 − X = 1.9 X − 0.24 ( X − 0.24)3.1 = (0.25 − X )1.9 3.1X − 0.744 = 0.475 −1.9 X 3.1X + 1.9 X = 0.475 + 0.744 5X =1.219 X 1.219 X = 5 X = 0.2438 (se resta) 1.9000 - 0.02438 =1.6562 % (Concentración) Índice de Refracción.TABLA: Concentración (%) IR 1.0000 1.6562 2.0000 1.3344 X 1.3359 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos 2 −1.6562 1.3359 − X = 1.6562 −1 X −1.3344 0.3438 1.3359 − X = 0.6562 X −1.3344 ( X −1.3344)0.3438 = (1.3359 − X )0.6562 0.3438 X − 0.4588 = 0.8766 − 0.6562 X 0.3438 X + 0.6562 X = 0.8766 + 0.4588 1X =1.3354 X =1.3354 (IR) Grados Brix.TABLA: Índice de Refracción Grados Brix 1.3353 1.3354 1.3356 1.3356 −1.3354 1.8 − X = 1.3354 −1.3353 X −1.6 0.0102 1.8 − X = 0.0001 X −1.6 ( X −1.6)0.0102 = (1.8 − X )0.0001 0.0102 X − 0.01632 = 0.00018 − 0.0001X 0.0102 X + 0.0001X = 0.00018 + 0.01632 0.0103 X = 0.0165 0.0165 X = 0.0103 X =1.6019 (º Brix) Sólidos Totales.- 23 1.6 X 1.8 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos ST = 701.51(IR - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(1.3354 - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(0.0354) - 22.378 ST = 24.833454 - 22.378 ST = 2.455454 Sólidos Insolubles.ST = SS + SI SI = ST − SS SI = 2.455454 − 1.6562 SI = 0.799254 Solución de sacarosa (2) Temperatura.- 16ºC Sólidos Solubles.TABLA: Concentración (%) Corrección 5 7.5 10 0.25 X 0.26 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos 10 − 7.5 0.26 − X = 7.5 − 5 X − 0.25 2.5 0.26 − X = 2.5 X − 0.25 1= 0.26 − X X − 0.25 ( X − 0.25) = (0.26 − X ) X + X = 0.26 + 0.25 2X = 0.51 0.51 X = 2 X = 0.255 (se resta) 7.500 - 0.255 = 7.245 % (Concentración) Índice de Refracción.TABLA: Concentración (%) IR 6.0000 7.2450 8.0000 1.3418 X 1.3448 8 −7.245 1.3448 − X = 7.245 −6 X −1.3418 0.755 1.3448 − X = 1.245 X −1.3418 ( X −1.3418)0.755 = (1.3448 − X )1.245 0.755 X −1.013059 =1.674276 −1.245 X 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos 0.755 X +1.245 X =1.674276 +1.013059 2X = 2.687335 X = 2.687335 2 X =1.3436675 (IR) Grados Brix.TABLA: Índice de Refracción 1.3436 1.3436675 1.3439 Grados Brix 7.2 X 7.4 1.3436675 1.3439 −1.3436675 7.4 − X = 1.3436675 −1.3436 X − 7.2 0.0002325 7.4 − X = 0.0000675 X − 7.2 ( X − 7.2)0.0002325 = (7.4 − X )0.0000675 0.0002325 X − 0.001674 = 0.0004995 − 0.0000675 X 0.0002325 X + 0.0000675 X = 0.0004995 + 0.001674 0.0003 X = 0.0021735 0.0021735 X = 0.0003 X = 7.245 (º Brix) Sólidos Totales.ST = 701.51(IR - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(1.3436675 - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(0.0436675) - 22.378 ST = 30.633118793 - 22.378 ST = 8.25518793 Sólidos Insolubles.- 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos ST = SS + SI SI = ST − SS SI = 8.25518793 − 7.245 SI = 1.01 Solución de sacarosa (3) Temperatura.- 16ºC Sólidos Solubles.TABLA: Concentración (%) Corrección 0 3.6 5 0.24 X 0.25 5 − 3.6 0.25 − X = 3.6 − 0 X − 0.24 1.4 0.25 − X = 3.6 X − 0.24 ( X − 0.24)1.4 1.4X − 0.336 1.4X + 3.6 X 5X = (0.25 − X )3.6 = 0.9 − 3.6 X = 0.9 + 0.336 = 1.236 X 1.236 X = 5 X = 0.2472 (se resta) 3.6000 - 0.2472 = 3.3528 % (Concentración) Índice de Refracción.TABLA: Concentración (%) IR 2.0000 3.3528 4.0000 1.3359 X 1.3388 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos 4 −3.3528 1.3388 − X = 3.3528 − 2 X −1.3359 0.6472 1.3388 − X = 1.3528 X −1.3359 ( X −1.359)0.6472 = (1.3388 − X )1.3528 0.6472 X − 0.8646 =1.8111 −1.3528 X 0.6472 X +1.3528 X =1.8111 + 0.8646 2X = 2.6757 2.6757 X = 2 X =1.33785 (IR) Grados Brix.TABLA: Índice de Refracción 1.3376 1.33785 1.3379 23 Grados Brix 3.2 X 3.4 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos 1.3379 −1.33785 3.4 − X = 1.33785 −1.3376 X − 3.2 0.00005 3.4 − X = 0.00025 X − 3.2 ( X − 3.2)0.00005 = (3.4 − X )0.00025 0.00005 X − 0.00016 = 0.00085 − 0.00025 X 0.00005 X + 0.00025 X = 0.00085 + 0.00016 0.0003 X = 0.00101 0.00101 X = 0.0003 X = 3.367 (º Brix) Sólidos Totales.ST = 701.51(IR - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(1.33785 - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(0.03785) - 22.378 ST = 26.5521535 - 22.378 ST = 4.1741535 Sólidos Insolubles.ST = SS + SI SI = ST − SS SI = 4.1741535 − 3.3528 SI = 0.8213535 Solución de sacarosa (4) Temperatura.- 16ºC Sólidos Solubles.TABLA: Concentración (%) Corrección 5 5.7 10 0.25 X 0.26 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos 10 − 5.7 0.26 − X = 5.7 − 5 X − 0.25 4.3 0.26 − X = 0.7 X − 0.25 ( X − 0.25) 4.3 = (0.26 − X )0.7 4.3 X − 1.075 = 0.182 − 0.7 X 4.3X + 0.7 X = 0.182 + 1.075 5X = 1.257 1.2571 X = 5 X = 0.2514 (se resta) 5.7000 - 0.2514 = 5.4486 % (Concentración) Índice de Refracción.TABLA: Concentración (%) IR 4.0000 5.4486 6.0000 1.3388 X 1.3418 6 −5.4486 1.3418 − X = 5.4486 − 4 X −1.3388 0.5514 1.3418 − X = 1.4486 X −1.3388 ( X −1.3388)0.5514 = (1.3418 − X )1.4486 0.5514 X −0.73821432 =1.94373148 −1.4486 X 0.5514 X +1.4486 X =1.94373148 + 0.73821432 2X = 2.6819458 2.6819458 X = 2 X =1.3409729 (IR) Grados Brix.TABLA: 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos Índice de Refracción 1.3409 1.3409729 1.3412 Grados Brix 5.4 X 5.6 1.3412 −1.3409729 5.6 − X = 1.3409729 −1.3409 X − 5 .4 0.0002271 5.6 − X = 0.0000729 X − 5 .4 ( X − 5.4)0.0002271 = (7.4 − X )0.0000729 0.0002271X − 0.00122634 = 0.00040824 − 0.0000729 X 0.0002271X + 0.0000729 X = 0.00040824 + 0.00122634 0.0003 X = 0.00163458 0.00163458 X = 0.0003 X = 5.448 (º Brix) Sólidos Totales.ST = 701.51(IR - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(1.3409729 - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(0.0409729) - 22.378 ST = 28.74289908 - 22.378 ST = 6.36489908 Sólidos Insolubles.ST = SS + SI SI = ST − SS SI = 6.36489908 − 5.4486 SI = 0.91629908 CUADRO 1: Completar las constantes físicas de la soluciones de sacarosa. 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos b. c. d. Concentración (%) IR ºBrix S.S. 1 2 3 4 1.6562 7.2450 3.3528 5.4486 1.3354 1.3437 1.3379 1.3410 1.6019 7.2450 3.3670 5.4480 1.6562 7.2450 3.3528 5.4486 Conociendo el índice de refracción de las soluciones utilizadas en la práctica, determinar la concentración de azúcar. Con las ecuaciones indicadas anteriormente, calcular el % de sólidos totales correspondientes a cada solución. Confeccionar en papel milimetrado una curva la concentración (%) vs. ºBrix. Realizar previamente las correcciones por efecto de la temperatura. Concentración (%) vs Grados Brix ) (% traió ce n o C a. Muestra 8 7 6 5 4 3 2 1 0 2 4 3 1 0 ii. 2 4 Grados Brix Soluciones de cloruro de sodio Solución de cloruro de sodio (A) Temperatura.- 16ºC Sólidos Solubles.- 12.45 Índice de Refracción.-1.3512 Sólidos Totales.- 23 6 8 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos ST = 701.51(IR - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(1.3512 - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(0.0512) - 22.378 ST = 35.917312 - 22.378 ST = 13.539312 Solución de cloruro de sodio (B) Temperatura.- 16ºC Sólidos Solubles.- 8.9 Grados Brix.-1.3431 Sólidos Totales.ST = 701.51(IR - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(1.3431 - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(0.0431) - 22.378 ST = 30.235081 - 22.378 ST = 7.857081 Solución de cloruro de sodio (C) Temperatura.- 16ºC Sólidos Solubles.- 8.8 Índice de Refracción.-1.3452 Sólidos Totales.ST = 701.51(IR - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(1.3452 - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(0.0452) - 22.378 ST = 31.708252 - 22.378 ST = 9.330252 Solución de cloruro de sodio (D) Temperatura.- 16ºC Sólidos Solubles.- 10.2 Índice de Refracción.-1.3452 Sólidos Totales.- 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos ST = 701.51(IR - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(1.3493 - 1.3000) - 22.378 ST = 701.51(0.0493) - 22.378 ST = 34.584443 - 22.378 ST = 12.206443 B. REFRACTÓMETRO ABBE i. Soluciones azucaradas o de sacarosa Solución de sacarosa (1) Temperatura.- 20ºC Sólidos Solubles.- 2.4 IR.- 1.3362 Z.- 41.02 Solución de sacarosa (2) Temperatura.- 21ºC Sólidos Solubles.- 5.678 IR.- 1.34 Z.- 41 Solución de sacarosa (3) Temperatura.- 21ºC Sólidos Solubles.- 4.3 IR.- 1.3391 Z.- 41 Solución de sacarosa (4) Temperatura.- 21ºC Sólidos Solubles.- 5.21 IR.- 1.3419 Z.- 42 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos ii. Soluciones de cloruro de sodio iii. Solución de cloruro de sodio (A) Temperatura.- 21ºC Sólidos Solubles.- 12.4 IR.- 1.3512 Z.- 35.9 Solución de cloruro de sodio (B) Temperatura.- 21ºC Sólidos Solubles.- 6.9 IR.- 1.3431 Z.- 35.9 Solución de cloruro de sodio (C) Temperatura.- 21ºC Sólidos Solubles.- 8.4 IR.- 1.3452 Z.- 37.5 Solución de cloruro de sodio (D) Temperatura.- 20.5ºC Sólidos Solubles.- 11 IR.- 1.3493 Z.- 40.8 Agua Temperatura.- 20ºC Sólidos Solubles.- 11 IR.- 1.3493 41.9 41.8 41.9 41.8 42.1 41.9 Z.- 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos TABLA: Concentración (%) IR 4.0000 5.4486 6.0000 1.3388 X 1.3418 VI. CUESTIONARIO 1. ¿Como varia el índice de refracción cuando se aumenta la temperatura? ¿Que esperaría encontrar si graficaría valores de índice de refracción vs temperatura, porque? El IR también esta en función de la temperatura. Normalmente, un aumento de la temperatura da lugar a una disminución de la densidad y la luz viaja más rápido a través de un medio de densidad mas baja. Por lo tanto, el IR tiende a disminuir a aumentar la temperatura. Muestra 1 2 3 4 Temperatura (ºC) (T1) (T2) 16 20 16 20 16 20 16 20 IR 1.3354 1.3437 1.3379 1.3410 2. Explique el proceso que seguiría para determinar el numero ABBE y diga cual es la interpretación de este numero VII. CONCLUSIONES La refractometría de fundamenta en que un rayo de luz al pasar oblicuamente desde un medio hacia otro de diferente densidad, cambia su dirección cuando traspasa la superficie. Este cambio en la dirección se denomina refracción. 23 Practica Nº 03: Determinaciones Refractometricas en Alimentos La velocidad de la luz que se hace más lenta cuanto más denso sea el medio por el que pasa el haz. La refractometría nos ayuda a calcular la concentración en azúcar, salmueras y ácidos, por ejemplo, el índice de refracción de una disolución de sacarosa aumenta 0,0002 unidades por un incremento de la concentración de 0,1%. La temperatura cumple un papel importante en para la determinación de la concentración, por lo que se deben realizar las correcciones necesarias con las tablas en función de la temperatura. VIII. BIBLIOGRAFIA http://pdf.directindustry.es/pdf/bellingham-stanley/principios-derefractometria/25236-5975-_4.html http://cursweb.educadis.uson.mx/payala/quimica_analitica2/Refractometria.htm 23