Subido por Iosefka Vounther

122767479-Analisis-microbiologico-en-cosmeticos

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Ivonne Bernier P
CEO IBLAB
• Industria de cosméticos y de tocador. Métodos de ensayo
microbiológicos para productos cosméticos .
NTC 4833
• ISO 21148, Cosmetics – Microbiology – General instructions for
microbiological examination.
• ISO 21149, Cosmetics – Microbiology – Enumeration and detection
of aerobic mesophilic bacteria.
• ISO 16212, Cosmetics – Microbiology – Enumeration of yeast and
mould
• ISO 18415, Cosmetics – Microbiology – Detection of specified and
non-specified microorganisms.
• ISO 22716, Cosmetics – Good Manufacturing Practices (GMP) –
Guidelines on Good Manufacturing Practices.
• ISO 29621, Cosmetics – Microbiology – Guidelines for risk
assessment of microbiologically low risk products1)
• ISO 24444 – Test de protección solar in vivo
• ISO 22717 – P. aeruginosa
• ISO 22718 – S. aureus
• Bacterias mesófilas, mohos y levaduras (crecimiento
en un rango de temperatura entre 15 y 40ºC),capaces
de crecer en aerobiosis.
Cosméticos en general < 1000 UFC/g ó mL
Cosméticos para bebé y área de los ojos (1) < 100 UFC/g ó
mL
•
(1) niños menores de 3 años, y aquellos a ser usados en el área de los ojos
• Formas cosméticas líquidas solubles en agua
• Formas cosméticas sólidas y polvos
• Formas cosméticas líquidas semisólidas,
sólidas de base oleosa no miscibles en agua
• Caldo de dilución
• Agua peptonada tamponada
• Agar TSA – Bacterias Mesófilas
• Agar Sabouraud al 4% _ Mohos
• Agar Extracto de levaduras – Levaduras
• Agar Manitol sal rojo de fenol _ S. aureus
• Agar Baird Parker – S. aureus
• Agar Vogel Johnsosn – S. aureus
• Agar TBX – E. coli
• Agar Macconkey
• Agar EMB
• Agar VRBA
• Agar Cetrimide – Pseudomonas sp y P. aeruginosa
• Caldo TSB
• Medio de SIM
• Caldo Lethen modificado
Peso de muestra
Diluyente
Medio de cultivo
Microorganismo
10 g o 10 mL
90 mL Caldo Casoy
Agar Cetrimide +
suplementos
P. aeruginosa
10 g 0 10 mL
Caldo Lauril sulfato + MUG
90 ml Caldo Casoy
Agar MacConkey
Agar EMB
10 g o 10 mL
90 mL Caldo Casoy
Agar sabourud al 4%
glucosa
E. coli
Mohos
Coliformes
Microorganismo
Presencia/ Ausencia
Bacterias Mesófilas
Recuento
No. Colonias* FD
S. aureus
P/A
P. aeruginosa
P/ A
Mohos y Levaduras
No. Colonias* FD
Coliformes
No. Colonias*FD
Clostridium SR
No. Colonias * FD en tubo
(esporas)
Placa
• La norma nombra el TBX pero no lo utiliza en
los recuento de E. coli
• No se nombra el caldo lauril sulfato con MUG
• No se nombra los medios para Clostridium
sulfito reductor
• Términos y definiciones
• Manejo de las muestras
• Instalaciones
• Equipos
• Personal
• Preparación y manejo de muestras
• Muestreo de los cosméticos
– Diluyentes
– Neutralizantes
– Medios de cultivo
• Técnicas de recuento en placa
• Técnicas por FM
• Preparación y calibración de los inóculos
Microorganismo
Medio de cultivo
Técnica
Neutralizante
Mohos y
Levaduras
Agar Sabouraud
SDCA
R placa
FM
Caldo
caseina+lecitina
polisorbato 20
Agar Patata dextrosa
Agar GP glucosa peptona
Agar Extracto de malta
Recuento en placa
•
•
•
•
•
Peso de muestra 1g o 1mL
Diluyente 9mL
Dilución de muestra 10-1
Siembras en profundidad : 1mL
Siembra en superficie : 0,1mL
• Recuento por FM
• Membrana de ≤ 0,45µm
• Peso muestra 1g o 1mL
• Filtrar y lavar membrana
• Validación de la técnica por recuento en placa
• Validación de la técnica por FM
• Validación del inóculo
• Validación del neutralizante
• Principio
– Enriquecimiento usando un caldo no selectivo
– Aislamiento e identificación
Hacer neutralización para inhibición microbial
Medio de cultivo
Peso de Muestra
Microorganismo
Agar caseína (SCDA)
1g ó 1mL/ 9 mL diluyente
P. aeuriginosa
Agar caseína (SCDA)
1g ó 1mL/ 9 mL diluyente
E. coli
Agar Caseína (SCDA)
1g ó 1mL/ 9 mL diluyente
S. aureus
• Siembra en placa a 32,5±2,5°C por 72±6 h
• Siembra por FM
• Detección de bacterias por enriquecimiento
– Incubación en caldo no selectivo
– Aislamiento a un agar selectivo
• Medios de enriquecimiento
– Caldo Eugon LT 100
– Medio de siembra:
• Agar (SCDA)
• Agar TSA
• Enriquecimiento en medios no selectivos
• Siembra en medios selectivos
• Inoculación a 32,5±2,5°C por 20-72 h
• Siembra : Agar Cetrimide 32,5±2,5°C por 48 h
• Identificación bioquímica
– Pruebas convencionales
– Pruebas miniaturizadas
• Enriquecimiento en medios no selectivos
• Siembra en medios selectivos
• Inoculación a 32,5±2,5°C por 20-72 h
• Siembra: Agar Baird Parker 32,5±2,5°C por
24h
• Identificación bioquímica
– Pruebas convencionales
– Pruebas miniaturizadas
• Parte del concepto de
crecimiento en Agar Plate
Count para realizar las
siembras para patógenos
• No incluye enriquecimiento
para
microorganismos
patógenos
• Hay que trabajar cada
grupo de microorganismos
independientemente
• Incluye
enriquecimiento
para
microorganismos
patógenos
• Medios
de
convencionales
cultivo
• Medios de cultivo de difícil
consecución
• Realiza PB convencionales
• Incluye PB miniaturizadas
• Diluyentes
• Valida diluyente
• Neutralizantes
• Valida neutralizante
PBX: (57 1) 416 63 01
Web Page: www.iblaboratorio.com
Mail: contactenos@iblaboratorio.com
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