UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE MEDICINA GENÉTICA Integrantes: Palaguachi Michelle Quimbita Kevin Rodríguez Luis Sánchez Adrián Santafé Gabriela Yungan Israel Semestre: Cuarto "B" Docente: Dr. Josué Acosta Tema: Citogenética RESUMEN VIDEO 1 Tema: Construcción de Cariotipo. A primera instancia, las células eucariotas presentan un núcleo, donde se encuentra el material genético, específicamente el ADN nuclear. Los cromosomas se forman a partir de una molécula de ADN, el cual se enrollan en proteínas básicas que constituyen histonas; el conjunto del ADN enrollado con las proteínas básicas, dan lugar al nucleosoma. El conjunto de nucleosomas forma un solenoide. El conjunto o agrupación de solenoides conforma la cromatina. Finalmente, la cromatina se enrolla o se condensa, formando el cromosoma profásico, constituido de dos cromátidas unidas a través de un centrómero. Se evidencian brazos cortos p y brazos largos q, y telómeros. Tipos de cromosomas Metacéntrico: El centrómero se encuentra próximo al centro; se evidencia brazos q y brazos p de la misma longitud. Submetacéntrico: El centrómero se encuentra desplazado hacia un extremo del cromosoma, el brazo q es más grande. Acrocéntrico: El centrómero se localiza muy desplazado hacia un extremo, el brazo p es demasiado corto y el brazo q es demasiado prolongado. Telocéntrico: El centrómero se ubica en los telómeros. No se presentan en los seres humanos. En las divisiones celulares como en la mitosis o meiosis, el cinetocoro es el lugar de anclaje, en donde las fibras del huso se adhieren para separar las cromátidas y repartir la información genética. Construcción de un Cariotipo 1. Toma de muestra de tejido sanguíneo periférico. 2. Sedimentación de los glóbulos rojos. Se traspasa solo los glóbulos blancos hacia un nuevo tubo de ensayo. 3. Se añade colchicina, que detendrá la división celular en la etapa de metafase. Permite la visualización máxima de los cromosomas. 4. Centrifugación de los glóbulos blancos con colchicina. Los glóbulos se hinchan y estallan. 5. Separación de los cromosomas con el uso de solución hipotónica. 6. Fijación y tinción de la muestra, para la visualización en el microscopio. 7. Se fotografía y ampliación de los cromosomas visualizados. 8. Ordenamiento de los cromosomas humanos en grupos de la A-G y en pares, por la forma y ubicación del centrómero. Para la construcción del Cariotipo, los cromosomas se separan en grupos que son: ➢ Grupo A conformado por el par (1,2,3) ➢ Grupo B conformado por el par (4 y 5) ➢ Grupo C conformado por los pares (6,7,8,9,10,11 y 12) ➢ Grupo D conformado por los pares (13,14,15) ➢ Grupo E conformado por los pares (16,17,18) ➢ Grupo F conformado por los pares (19,20) ➢ Grupo G conformado por los pares (21,22) ➢ El par sexual está conformado por el cromosoma X Y (hombre) y X X(mujer) FORMACIÓN DEL CARIOTIPO ➢ Primero se va a dividir el cariotipo en cuatro cuadrantes diferentes. ➢ Segundo se va a realizar el conteo de los cromosomas ➢ Tercero se va a resaltar la posición de los centrómeros en todos los cromosomas (pintar) ➢ Cuarto se realiza la clasificación de los cromosomas según la posición del centrómero en metacéntrico (MC), submetacéntricos (SMC) y acrocéntricos (AC)en nuestro trabajo. ➢ Quinto se lleva a cabo una clasificación de acuerdo a su tamaño en grandes medianos y pequeños. ➢ Sexto se va a llevar a cabo la búsqueda de la pareja de cada cromosoma recordando que son dos cromosomas de acuerdo a la posición del centrómero y su tamaño, para ello nos basaremos en la siguiente tabla. ➢ Séptimo se lleva a cabo la construcción del cariotipo con la utilización de la tabla. ➢ Finalmente se analiza los resultados como son el sexo, alteración cromosómica. Sexo masculino (XY) Ninguna alteración RESUMEN VIDEO 2 Tema: Biología Molecular El conocimiento en genética en los últimos años a cambiado el curso en medicina al presentar un diagnóstico o tan solo conocer la enfermedad, gracias a un cambio en diversas formas sabiendo que esto es importante partiendo desde que es la biología molecular. La biología Es de gran importancia la biología molecular para trazar nuestra historia antropológica, el origen de las especies ,esto se va a considerar como el estudio de los procesos que se desarrollan en los seres vivos desde un punto de vista de sus moléculas más simples es decir un ejemplo claro el ADN, desde el inicio de vida el código genético ha sido desde siempre un libro por descifrar los ciclos de evolución de las especies conociendo que se comparte en común 4 bases púricas y pirimidinas cada esta información esta presente en nuestra célula en el cabello, leucocitos, neuronas y la saliva desde su fabricación en la región denominada núcleo conocidos como atlas de la vida en estructuras como el cromosoma, los cuales contienen genes y estos se encuentran formados por 4 bases conocidas como adenina timina citosina y guanina. Los usos de la biología molecular son ilimitados permitiéndonos conocer el origen de leucemias tumores y más enfermedades dándonos información del comportamiento epigenético y de genes entre otros. El ser humano comprende de un 3,200 millón de pares de bases ,22 pares más 2 cromosomas sexuales X y y, cada uno contiene 1,400 genes dependiendo de su tamaño, se estima que 30 mil se encuentran en el núcleo y una porción menor se encuentran en las mitocondrias. RESUMEN VIDEO 3 Tema: Cuerpos Barr: Observación en laboratorio Características principales: En 1923 Theophilus Painter, demostró la existencia de cromosomas sexuales, es decir, dos cromosomas X y un cromosoma Y. El número de cromosomas y la existencia de cromosomas determinan el sexo de un individuo. En 1949, Murray Barr y Edwart Bertram observaron agregados, cuerpos condensados y teñidos en células hembras de gatos. En 1961, Marie Leon propuso el cuerpo de Barr, este condensado, que es un cromosoma X inactivado. Esta inactivación ocurre alrededor del día 16 después de la fertilización y el cromosoma permanece inactivo en las células somáticas de la progenie de la célula original. Por ejemplo, en los gatos, tenemos un gen que controla el color del cuerpo. El color del pelaje puede ser negro o naranja, y el gen que controla este color se encuentra en el cromosoma x, porque uno de los dos cromosomas x está en un estado inactivo, parte del cuerpo Expresando el alelo negro, parte del cuerpo expresa el alelo naranja, por lo que los gatos, las hembras, tienen cuerpos de dos colores. Si es masculino, debido a que solo tiene un cromosoma x, solo puede expresar uno de dos colores. Si la hembra es homocigota, es decir, los dos cromosomas x tienen el mismo alelo, la hembra será de un solo color, negro o naranja. Solo en el caso de hembras heterocigotas tendremos dos tipos de cuerpo con colores diferentes. dado que todas las células provienen de una célula inactiva, el cromosoma x tiene el mismo cromosoma activado, si vemos un gato de dos colores, será una hembra, si lo vemos un solo color pues será un macho o una hembra que sí en este caso sería homocigota. Preparación de muestras para observar cuerpos Barr: Organismos • Células procedentes de la saliva Productos y equipos • Orceína acética 1% • Cubreobjetos • Portaobjetos • Microscopio óptico • Papel de filtro • Pinzas de disección • Depresor bucal estéril Procedimiento 1. Ponga una gota de agua destilada en el portaobjetos de vidrio. 2. Utilizar un depresor bucal para recolectar muestras de células de la cavidad bucal. 3. Coloque la muestra en el portaobjetos de vidrio. 4. Agregar una gota de orceína acética y espere 20 minutos. 5. Remover y cuidar que no se seque. 6. Colocar el cubreobjetos y secar. 7. Observe con un microscopio óptico a 40 aumentos. RESUMEN VIDEO 4 Tema: Citogenética En primer lugar, se debe comprender que el material hereditario, se encuentra en una molécula llamada ADN. En las células Eucariontes el ADN se organiza en una estructura llamada cromatina, es decir un empaquetamiento de una hebra y una condensación de ésta alrededor de una proteína, además la cromatina vuelve a condensarse para forman una estructura llamada cromosoma. Los cromosomas permiten que se reúna una gran cantidad de información en ADN en muy poco espacio Cada espacie tiene un número fijo de cromosomas con características bastante diferenciadas, los cromosomas de una especie ordenados según su Tamayo y su forma se llama cariotipo en donde se debe tener en cuenta su estructura, tamaño y numero ya que una variación en cualquiera de estos representa un problema. Para el estudio de citogenética es necesario seguir cierta técnica. 1. Toma de muestra: la muestra más común para el estudio puede ser sangre periférica, pero en algunos casos también puede ser otro tejido que contenga células vivas. 2. Estas células deberán ser cultivadas para que se multipliquen y así disponer de una mayor cantidad de células que se puedan estudiar 3. Se agrega un inhibidor de la mitosis que detendrá el proceso de mitosis en proceso de metafase, debido a que en esta etapa los cromosomas se encuentran más condensados facilitando si visualización y estudio. 4. Una vez que la célula ha sido detenida en metafase se procede a teñir los cromosomas, mediante una tinción. 5. En todas las diferentes tinciones lo que se tiene en común es que son capaces de unirse a los cromosomas y dar color. 6. Por lo general estas tinciones se unen con mayor afinidad a una zona de cromosomas que otros, por esta razón es que se observa bandas más oscuras y bandas más claras, esto se conoce como bandeo. 7. Existen también otro tipo de tinciones en los cuales el bandeo se produce unión de tinciones de distintos colores de modo que las bandeo se verán diferentes. 8. El bandeo permitirá el reconocimiento de cada cromosoma y de su estructura. 9. Puesto que se conoce el cariotipo de la mayoría de las especies, será necesario ordenar los cromosomas observados para comparar con un cariotipo normal. 10. Por lo general se ordenan los cromosomas de mayor a menor tamaño. 11. Al final se coloca los cromosomas humanos. Hombre XY y mujer XX 12. Mediante el estudio de estos cariotipos se pueden identificar ciertas anomalías típicas. Como monosomías (1 cromosoma en vez de 2) y Trisomías (3 cromosomas en vez de 2) 13. Cuando un cromosoma presenta un trozo extra se llama translocación y se produce cuando un trozo de un cromosoma se une a cualquier otro cromosoma cambiando así su función RESUMEN VIDEO 5 Tema: FISH La principal técnica de genética molecular es la hibridación in situ florescencia mediante el cual, una sonda que ha sido marcada con un fluorocromo hibrida a una región específica del genoma, por lo cual en metafase podemos comprobar si está presente aquella zona en el mismo. La hibridación in situ se puede utilizar para regiones en una lesión del cromosoma (metafase) En la imagen se puede detectar una deleción También es posible detectar translocaciones gracias a esta técnica Otras de las utilidades del FISH son detectar anomalías numéricas estudiando núcleos en interfase, sin la necesidad de estudiar metafases. Adicionalmente a esto, se puede detectar translocaciones En la técnica de FISH se incluyen 4 pasos: • fijación y permeabilización de la muestra • hibridación • lavado • la detección de las células marcadas a través del microscopio de epifluorescencia o confocal
