Machine Translated by Google manuscrito aceptado Título: Síndrome de Hutchinson-Gilford Progeria: un prematuro enfermedad del envejecimiento causada por mutaciones en el gen LMNA Autor: Susana Gonzalo Ray Kreienkamp Peter Askjaer IIP: S1568-1637(16)30134-9 DOI: Referencia: http://dx.doi.org/doi:10.1016/j.arr.2016.06.007 AR 687 Aparecer en: Reseñas de investigaciones sobre el envejecimiento Fecha de recepción: 11-4-2016 Fecha revisada: 25-6-2016 Fecha de aceptación: 28-6-2016 Por favor cite este artículo como: Gonzalo, Susana, Kreienkamp, Ray, Askjaer, Peter, Síndrome de Hutchinson-Gilford Progeria: una enfermedad de envejecimiento prematuro causada por LMNA mutaciones genéticas. Revisiones de investigación sobre el envejecimiento http://dx.doi.org/10.1016/j.arr.2016.06.007 Este es un archivo PDF de un manuscrito sin editar que ha sido aceptado para su publicación. Como un servicio a nuestros clientes, ofrecemos esta primera versión del manuscrito. El manuscrito se someterá a corrección de estilo, composición tipográfica y revisión de la prueba resultante. antes de que se publique en su forma final. Tenga en cuenta que durante el proceso de producción puedan descubrirse errores que puedan afectar al contenido, y todos los avisos legales que aplicar a la revista pertenecen. Machine Translated by Google Síndrome de Hutchinson-Gilford Progeria: una enfermedad de envejecimiento prematuro causada por LMNA mutaciones genéticas Susana Gonzalo1*, Ray Kreienkamp1 y Peter Askjaer2 1Edward A. Doisy Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, San Luis Escuela Universitaria de Medicina, St. Louis, MO 63104, EE. UU. 2Centro Andaluz de Biología del Desarrollo (CABD), CSIC/Junta de Andalucia/Universidad Pablo de Olavide, Carretera de Utrera, km 1, 41013 Seville, Spain. *Autor correspondiente Susana Gonzalo Departamento de Bioquímica y Biología Molecular Centro de Investigación Doisy Escuela de Medicina de la Universidad de St Louis 1100 S Gran Avenida S t. Louis, MO 63104, EE. UU. Teléfono: 314-9779244 Correo electrónico: sgonzalo@slu.edu 1 Machine Translated by Google Reflejos • HGPS es causado por mutaciones en el gen LMNA y la expresión de una proteína mutante “progerina” que causa el deterioro celular y del organismo. • Las células HGPS muestran alteración de las funciones nucleares, incluidas alteraciones epigenéticas, expresión génica desregulada, defectos de reparación del ADN y disfunción de los telómeros. • Los pacientes con HGPS exhiben un envejecimiento sistémico acelerado, muriendo en la adolescencia a causa de enfermedades del miocardio. infarto o apoplejía debido a aterosclerosis severa. • La expresión de progerina aumenta con la edad en individuos normales, lo que sugiere su implicación en el envejecimiento fisiológico. • Las terapias actuales tienen como objetivo reducir la toxicidad de la progerina mediante la regulación a la baja de sus niveles o dirigiéndose directamente a los procesos celulares desregulados. Resumen Los productos del gen LMNA , principalmente las láminas A y C, son componentes clave del gen nuclear. lámina, una red proteica que subyace a la membrana nuclear interna y es esencial para una arquitectura nuclear adecuada. Alteraciones en la lámina A y C que interrumpen el integridad de la lámina nuclear afectan a todo un repertorio de funciones nucleares, provocando rechazar. En humanos, se han identificado cientos de mutaciones en el gen LMNA y correlacionado con más de una docena de trastornos degenerativos, denominados laminopatías. Estos Las enfermedades incluyen neuropatías, distrofias musculares, lipodistrofias y envejecimiento prematuro. enfermedades. Esta revisión se centra en una de las laminopatías más graves, Hutchinson-Gilford Síndrome de progeria (HGPS), que es causado por empalmes aberrantes del gen LMNA y expresión de un producto mutante llamado progerina. Aquí, discutimos los puntos de vista actuales sobre el mecanismos moleculares que contribuyen a la fisiopatología de esta devastadora enfermedad, como así como las estrategias que se están probando in vitro e in vivo para contrarrestar la toxicidad de la progerina. En particular, la acumulación de progerina provoca anomalías morfológicas nucleares, mal regulado 2 Machine Translated by Google expresión génica, defectos en la reparación del ADN, acortamiento de los telómeros e inestabilidad genómica, todos ellos que limitan la capacidad proliferativa celular. En los pacientes que albergan esta mutación, una grave La enfermedad de envejecimiento prematuro se desarrolla durante la infancia. Curiosamente, la progerina también se produce en células senescentes y células de personas mayores, lo que sugiere que la acumulación de progerina podría ser un factor en el envejecimiento fisiológico. Descifrar los mecanismos moleculares por los que expresión de progerina conduce a HGPS es un área emergente de investigación, que podría traernos más cerca de comprender la patología del envejecimiento. Palabras llave: Laminopatías; lámina nuclear; progerina; inestabilidad genómica; patología HGPS; tratamiento HGPS 3 Machine Translated by Google 1. Introducción La lámina nuclear se ha convertido en un compartimento nuclear con funciones críticas en la mantenimiento de la arquitectura nuclear y la estabilidad, así como la organización del genoma y función (Burke y Stewart 2014, Gruenbaum y Foisner 2015, Gruenbaum y Medalia 2015). La lámina nuclear está compuesta por las proteínas de filamento intermedio tipo V tipo A laminas (principalmente lamina A/C) y laminas tipo B (lamina B1/B2), ademas de lamina proteínas asociadas. Las láminas de tipo B se expresan en todas las células y se encuentran casi exclusivamente en la periferia nuclear. Las láminas tipo A (lamin A/C) resultan del empalme alternativo de la gen LMNA y se encuentran en la lámina nuclear y en todo el interior nuclear, siendo se expresa principalmente en células diferenciadas. La opinión actual es que las láminas sirven de andamiaje papel, anclando la cromatina y los factores de transcripción a la periferia nuclear, proporcionando la compartimentación del genoma que se requiere para las transacciones de ADN adecuadas, como transcripción, replicación y reparación, así como la transducción de señales del citoesqueleto en el núcleo. Además, el nivel de expresión de lamin está directamente relacionado con la estabilidad mecánica. del núcleo, y la rigidez y plasticidad de los tejidos (Swift, Ivanovska et al. 2013). La Asociación de mutaciones en proteínas lamina, principalmente en el gen LMNA , con más de una docena degenerativas trastornos subraya la importancia de las láminas nucleares en la salud y la enfermedad. Lamin enfermedades asociadas o laminopatías abarcan una gama de fenotipos con diferentes tejido patologías, incluidos los trastornos de distrofia muscular (por ejemplo, Emery-Dreyfus Muscular distrofia o EDMD), neuropatías periféricas (p. ej., enfermedad de Charcot-Marie-Tooth tipo 2B1 o CMT2B), lipodistrofias, así como síndromes de envejecimiento prematuro como Hutchinson Síndrome de Gilford Progeria (HGPS), Síndrome de Werner atípico (AWS) y restrictivo dermopathy (RD) (Worman, Fong et al. 2009, Gordon, Rothman et al. 2014, Gonzalo and 4 Machine Translated by Google Kreienkamp 2015, Vidak y Foisner 2016). A pesar de la intensa investigación, las relaciones entre genotipos y fenotipos en las laminopatías siguen siendo poco conocidos (Smith, Kudlow et al. 2005, Bertrand, Chikhaoui et al. 2011). Algunas mutaciones hotspot en el LMNA gen han sido identificados y asociados con tipos específicos de laminopatías, tal es el caso de HGPS. Sin embargo, diferentes mutaciones en el gen LMNA pueden causar el mismo tipo de trastorno, y diferentes sustituciones de la misma base pueden causar diferentes trastornos. Además, la misma mutación en LMNA puede causar enfermedad en algunos individuos y ser asintomáticos en otros, destacando la enorme variabilidad fenotípica en las laminopatías (Rodríguez y Eriksson 2011). Esta variabilidad sugiere que otros mecanismos además de LMNA mutaciones contribuyen al desarrollo de la enfermedad. Entender los factores que determinar la gravedad de la enfermedad en las laminopatías es un área activa de investigación. Otra pregunta intrigante en el campo ha sido por qué las laminopatías afectan solo a un uno o unos pocos tejidos, cuando lamina A/C se expresa de forma ubicua. Algunos modelos proponen que las alteraciones de las láminas impactan en la organización 3D del genoma, induciendo cambios en los genes expresión. Estos cambios varían entre los tejidos, lo que proporciona una especificidad tisular de las laminopatías. Otros modelos proponen que las alteraciones en las láminas afectan las propiedades de mecanotransducción. de las células, siendo especialmente perjudicial para los tejidos como el músculo que están expuestos a fuertes tensión mecánica. Aquí repasamos el conocimiento sobre los mecanismos moleculares donde las mutaciones en el gen LMNA provocan el declive celular y del organismo, así como la fisiopatología de HGPS y estrategias terapéuticas actuales para mejorar esto devastadora enfermedad. 2. HGPS es causado por la expresión de una proteína mutante lamina A "progerina" 5 Machine Translated by Google El gen LMNA codifica cuatro láminas (A, C, Cÿ10 y C2) a través de corte y empalme alternativo, de cuyas láminas A y C son las que se expresan de forma más ubicua. Las láminas A y C son idénticas hasta residuo 574. Lamin C posee cinco residuos C-terminales únicos, y lamin A se sintetiza como prelamina de 664 residuos Un precursor que después del procesamiento postraduccional da como resultado un proteína lamina A madura de 646 residuos. La prelamina A contiene un motivo C-terminal -CAAX que se farnesila, seguido de la escisión de los últimos tres residuos y la carboximetilación de la cisteína terminal (Figura 1A). Estas modificaciones facilitan la asociación de prelamin A con la envoltura nuclear. Posteriormente, la endoproteasa Zmpste24 (FACE-1) escinde los 15 residuos C-terminales, lo que hace que la lámina A madura. Hasta la fecha, más de 400 mutaciones en el El gen LMNA ha sido identificado y asociado con la enfermedad (http://www.umd.be/LMNA/). En 2003, dos laboratorios informaron simultáneamente de la identificación de una mutación en el gen LMNA que causa HGPS (De Sandre-Giovannoli, Bernard et al. 2003, Eriksson, marrón et al. 2003). Esta mutación es una sustitución de base única de novo dentro del exón LMNA 11 (c.1824C>T) que activa un sitio de empalme críptico, lo que lleva a una eliminación en el marco de 50 amino ácidos cerca del extremo C de la prelamina A (Figura 1B). La proteína anormal producida, conocida como 'progerina', retiene el motivo –CAAX y está farnesilada y carboximetilada. Sin embargo, la progerina carece del segundo sitio para la escisión endoproteolítica y, por lo tanto, permanece permanentemente farnesilado y carboximetilado. Esta forma mutante de lamina A actúa en un forma dominante para inducir toda una variedad de anomalías en los procesos nucleares, que eventualmente conducen a la declinación celular y del organismo. De hecho, un oligonucleótido de morfolino inhibir el uso del sitio de empalme críptico disminuye la producción de progerina y significativamente mejora los fenotipos celulares (Scaffidi y Misteli 2006). Aunque c.1824C>T permanece la mutación más frecuente en pacientes con HGPS, se han identificado otras mutaciones en el gen LMNA 6 Machine Translated by Google informaron que dan como resultado un mayor uso del sitio de empalme críptico. Algunas de estas mutaciones causar un fenotipo más severo que el HGPS clásico. Varios estudios indican que la cantidad de progerina en relación con la prelamina A dicta la gravedad de la enfermedad (Moulson, Fong et al. 2007, Reunert, Wentzell et al. 2012). Las modificaciones postraduccionales de la progerina parecen desempeñar un papel importante en la fisiopatología de la enfermedad (Toth, Yang et al. 2005, Yang, Bergo et al. 2005, Fong, Frost et al. 2006, Varela, Pereira et al. 2008, Ibrahim, Sayin et al. 2013). Por ejemplo, bloquear farnesilación de progerina da como resultado una marcada mejora de las anomalías nucleares en fibroblastos de pacientes con HGPS y modelos de progeria en ratones. Además, el tratamiento con inhibidores de prenilación in vivo mejora el fenotipo similar al envejecimiento de los ratones y aumenta la esperanza de vida (Varela, Pereira et al. 2008). De manera similar, un modelo de ratón de progeria con un alelo hipomórfico de la isoprenilcisteína carboxil metiltransferasa (ICMT), la enzima que metila el extremo C-terminal de la prelamina A/progerina, exhibe una marcada mejora del fenotipo y aumento de la supervivencia. La inhibición de ICMT también retrasa la senescencia en HGPS fibroblastos (Ibrahim, Sayin et al. 2013). Otras modificaciones postraduccionales de lamina A incluyen fosforilación y sumoilación. La fosforilación de la lamina A facilita el desmontaje de los filamentos de la lamina y descomposición de la lámina nuclear en preparación para la mitosis (Snider y Omary 2014). En Células HGPS, se reduce la fosforilación de un sitio prominente (S22) por CDK1 durante la interfase, y los inhibidores de la prenilación pueden rescatar este defecto (Moiseeva, Lopes-Paciencia et al. 2016). Además, la prevención de la fosforilación de lamina A/progerina por inhibidores de CDK acelera senescencia en fibroblastos HGPS. Sumoilación de lamina A en lisina K201 por SUMO E2 Se ha informado que la enzima Ubc9 requiere el residuo E203 conservado (Zhang 7 Machine Translated by Google y Sarge 2008). La sumoilación es importante para la correcta localización de la lámina A dentro de la núcleo. Expresión de proteínas mutantes de lamina A marcadas con GFP K201R, E203G o E203K, que todos tienen sumoilación reducida, muestra un patrón de localización alterado, con el mutante Proteínas que se acumulan en focos cerca de la periferia nuclear en lugar de una más continua. patrón. Esto se acompaña de una disminución de la viabilidad celular. Además, los fibroblastos de un paciente con la mutación E203K lamin A muestra una disminución de la sumoilación de lamin A y un aumento celular muerte, apoyando un papel para la sumoilación en la localización y función de lamina A. En tono rimbombante, Los fibroblastos derivados de pacientes con HGPS exhiben una reducción en el núcleo/citoplasma concentración de Ran GTPase, lo que resulta en niveles nucleares reducidos de Ubc9, así como TPR, un nucleoporina de la canasta del complejo del poro nuclear (Kelley, Datta et al. 2011). Ectópico la expresión de progerina en células HeLa fue suficiente para reducir los niveles nucleares de Ubc9, mientras que la localización forzada de Ubc9 en el núcleo mejoró estos fenotipos inducidos por progerina. Estos datos sugieren que la progerina afecta la función de Ran GTPase y la sumoilación. caminos En general, estos estudios demuestran que lamin A sufre una variedad de post modificaciones traslacionales que son importantes para su adecuada localización y función. Las alteraciones en estas modificaciones con progerina contribuyen a los fenotipos inducidos por progerina. La expresión de progerina provoca el declive celular, provocando cambios morfológicos nucleares. anomalías, expresión génica mal regulada, cambios en la cromatina, mitocondrial disfunción, defectos en la reparación del ADN, empalme alternativo, acortamiento acelerado de los telómeros y senescencia prematura (Figura 1C) (Goldman, Shumaker et al. 2004, Prokocimer, Barkan et al. Alabama. 2013, Gonzalo y Kreienkamp 2015, Gonzalo y Eissenberg 2016). A pesar de enorme avances en los últimos años identificando procesos celulares alterados por la progerina, aún nos falta un 8 Machine Translated by Google imagen clara de los mecanismos moleculares por los cuales la expresión de progerina causa todos estos fenotipos celulares. 3. Mecanismos moleculares detrás de la disminución celular en HGPS 3.1. Anomalías morfológicas nucleares El sello citológico de los fibroblastos derivados de pacientes HGPS es nuclear anormalidad morfológica (Figura 2). Los núcleos de HGPS parecen más grandes y dismórficos, con protuberancias y hernias de cromatina en todas partes, así como engrosamiento del núcleo lámina y desorganización de poros nucleares y cromatina (Goldman, Shumaker et al. 2004). Además, los núcleos de HGPS acumulan un nivel basal de daño en el ADN debido a deficiencias en los mecanismos de reparación del ADN (Figura 3). Estos defectos nucleares se exacerban durante proliferación en cultivo, concomitante con acumulación de progerina e inmovilización de lámina A en la lámina nuclear. Estudios recientes han demostrado un efecto dependiente de la dosis de expresión de progerina en fibroblastos normales que inducen fenotipos característicos de HGPS fibroblastos (Chojnowski, Ong et al. 2015). Esto sugiere que la reducción de los niveles de progerina bajo un umbral podría ser suficiente para reducir la severidad del fenotipo. De hecho, Lee y sus colegas han informó la eficacia de un oligonucleótido antisentido (ASO) del exón 11 del gen LMNA aumentando la producción de lámina C a expensas de la lámina A en fibroblastos primarios normales (Lee, Nobumori et al. 2016). Estas células no presentaron un fenotipo detectable, consistente con los ratones con lamin C solo están libres de enfermedad (Fong, Ng et al. 2006). Este ASO fue capaz de reducir expresión de progerina en fibroblastos HGPS. Es importante destacar que la administración del exón 11 ASO en un modelo de ratón de progeria redujo significativamente los niveles de lamina A y progerina en tejidos de ratón y mejora de la patología aórtica. Esta estrategia para reducir la progerina podría ser de utilidad terapéutica. 9 Machine Translated by Google aplicabilidad. Mecánicamente, el estudio mostró que el factor de empalme rico en serina/arginina 2 (SRSF2) es fundamental para el empalme alternativo del gen LMNA , con pérdida de función de SRSF2 desplazando la salida del empalme hacia la lámina C, con menor expresión de todas las formas de la lámina A. La progerina también tiene un comportamiento diferente al de la lamina A durante la mitosis. Progerina causas defectos en la segregación cromosómica y el reensamblaje de la envoltura nuclear además de atrapar componentes de la lámina y proteínas de la envoltura nuclear interna en el retículo endoplásmico después mitosis (Eisch, Lu et al. 2016). Curiosamente, la progerina parece desplazar el centrómero. proteína F (CENP-F) de los cinetocoros, lo que resulta en una mayor inestabilidad genómica, que en a su vez contribuye a la senescencia prematura. Otra característica de los fibroblastos HGPS es su mayor rigidez nuclear con aumentando el paso y su sensibilidad a la tensión mecánica. Mientras que la aplicación de tensión en las células normales inducen señales proliferativas, las células HGPS carecen de esta respuesta de activación del ciclo celular (Verstraeten, Ji et al. 2008). Además, la microscopía de polarización mostró que las láminas en HGPS los núcleos tienen una capacidad reducida para reorganizarse bajo estrés mecánico (Dahl, Scaffidi et al. 2006). Estas diferentes respuestas a la fuerza pueden explicar los efectos específicos de tejido de la progerina. Para Por ejemplo, tejidos con altos niveles de estrés mecánico como hueso, músculo esquelético, corazón, y los vasos sanguíneos podrían verse especialmente afectados por la expresión de progerina. Así, deteriorado la mecanotransducción podría contribuir a defectos óseos y vasculares en pacientes con HGPS (Prokocimer, Barkan et al. 2013). 3.2. Cambios epigenéticos Alteraciones en las modificaciones de histonas, metilación del ADN, modificadores de la cromatina Se han observado actividades y la arquitectura general de la cromatina en los que expresan progerina. 10 Machine Translated by Google celulares (Arancio, Pizzolanti et al. 2014). En HGPS, hay pérdida de heterocromatina periférica. y niveles reducidos de modificaciones represivas de histonas (H3K9me3, H3K27me3) (Figura 3) y proteínas asociadas (HP1), así como un aumento de la transcripción del satélite pericentromérico repite (Scaffidi y Misteli 2006, Shumaker, Dechat et al. 2006, Dechat, Pfleghaar et al. 2008). Curiosamente, estos cambios de cromatina y expresión de progerina también se observan en células de individuos viejos, sugiriendo su implicación en el envejecimiento fisiológico (Scaffidi y Misteli 2006). Los niveles de H3K9me3 varían con los cambios de la histona metiltransferasa Suv39h1 expresión en células HGPS en cultivo (Liu, Wang et al. 2013). Esta enzima parece jugar un papel clave papel en la progeria porque la eliminación de Suv39h1 en un modelo de ratón de progeria mejora una variedad de fenotipos. Los cambios en H3K27me3 se correlacionan con la regulación al alza de genes expresados y regulación a la baja de genes altamente expresados, una tendencia que se observa en células HGPS senescentes (McCord, Nazario-Toole et al. 2013). Recientemente, la desregulación de H3K27me3 en las células HGPS se ha relacionado con una interacción deficiente de la progerina con la lámina polipéptido-ÿ asociado (LAP2ÿ). Esta proteína se une fuertemente a la lámina A, facilitando la interacción de la lamina A con la eucromatina (Gesson, Rescheneder et al. 2016). De hecho, el El perfil de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) de la lamina A/C muestra una fuerte superposición con ese de LAP2ÿ (Gesson, Rescheneder et al. 2016)ÿÿDe acuerdo con estos datos, las células deficientes en LAP2ÿ muestran unión reducida de lamin A/C a dominios eucromáticos. Por el contrario, la progerina interactúa débilmente con LAP2ÿ, y la expresión de progerina reduce drásticamente los niveles celulares de LAP2ÿÿ(Vidak, Kubben et al. 2015)ÿ Esto va acompañado de niveles reducidos de H3K27me3 y defectos de proliferación, que se salvan aumentando los niveles de LAP2ÿ (Chojnowski, Ong et al. 2015, Vidak, Kubben et al. 2015). El factor de barrera a la autointegración (BAF) es otra lámina proteína asociada recientemente propuesta para mediar defectos de cromatina en la expresión de 11 Machine Translated by Google prelamina A/progerina (Loi, Cenni et al. 2015). Se requiere BAF para los cambios en H3K9me3, HP1 y LAP2ÿ observados en respuesta a la acumulación de prelamina A. La progerina interactúa con BAF y este estudio muestran que los defectos de localización nuclear LAP2ÿ observados en células HGPS implica la interacción progerina-BAF. Estos hallazgos establecen vínculos funcionales entre la lámina proteínas asociadas y formas patológicas de lámina A/C. Las células de pacientes con HGPS también exhiben una expresión reducida de componentes de NURD (Nucleosome Remodeling Deacetylase), que incluye RBBP1, RBBP7, MTA3 y Subunidades HDCA1 (Pegoraro, Kubben et al. 2009). Pérdida de las subunidades NURD RBBP1 y RBBP7 precede a la acumulación de daños en el ADN en las células que expresan progerina y al agotamiento de estas subunidades en las células normales provoca una disminución de la metilación de la histona H3 y daños en el ADN. En Además, la función de SIRT6, un miembro de la familia de las sirtuinas con desacetilación y actividades de ribosilación de mono-ADP, está significativamente comprometida en células que expresan progerina. Se ha propuesto que la deficiencia de SIRT6 contribuye a los defectos de reparación del ADN y la falla genómica. inestabilidad en células HGPS (Ghosh, Liu et al. 2015). Además, la hipoacetilación de la histona H4 se ha informado en un modelo de progeria en ratones y se ha relacionado con la deficiencia en la histona acetiltransferasa MOF. Tratamiento de células de progeria de ratón con una histona desacetilasa El inhibidor mejoró la reparación del ADN y retrasó la entrada en la senescencia (Krishnan, Chow et al. 2011). Además de las modificaciones de las histonas, los patrones de metilación del ADN se alteran en células de progeria. En particular, la hipermetilación de los genes del ARN ribosómico y, por lo tanto, una reducción en su producción ha sido reportada en un modelo de ratón con progeria (Osorio, Varela et al. 2010). Las células HGPS también muestran una ganancia en la metilación de los sitios CpG que tienden a ser hipometilado en células normales, y una disminución en la metilación de los sitios CpG normalmente 12 Machine Translated by Google hipermetilado (Heyn, Moran et al. 2013). Todos estos estudios revelan que los cambios epigenéticos son inducidos por la expresión de progerina y que las estrategias que revierten estos cambios podrían ser investigado como una posibilidad terapéutica. 3.3. Expresión génica mal regulada El perfil de expresión de todo el genoma de los fibroblastos HGPS reveló una amplia mala regulación transcripcional en comparación con los fibroblastos normales. Factores de transcripción (TFs) y las proteínas de la matriz extracelular (ECM) fueron las proteínas funcionales más prominentes categorías expresadas diferencialmente en células HGPS (Csoka, English et al. 2004). el reportado perfil de expresión génica es consistente con trastornos que afectan mesodérmico y mesenquimatoso linajes celulares. En particular, los fibroblastos HGPS exhiben una alta expresión de proteínas ECM y baja expresión de enzimas de remodelación de ECM, lo que puede resultar en una deposición aberrante de ECM. en un modelo de ratón portador de una mutación progeric dentro del gen Lmna , inhibición de la Wnt se informó la vía, lo que lleva a una función reducida del factor de transcripción LEF1, que regula la expresión de proteínas ECM (Hernandez, Roux et al. 2010). Estos estudios sugieren que las deficiencias en la señalización de Wnt podrían causar cambios en la composición de ECM, contribuyendo a rigidez vascular en HGPS (Vidak y Foisner 2016). Además, los fibroblastos HGPS presentan defectos en la proteína del retinoblastoma (pRb) vía de señalización y estos defectos son revertidos por el inhibidor de la farnesiltransferasa (FTI) tratamiento (Marji, O'Donoghue et al. 2010). Miembros de la familia del retinoblastoma, que incluyen pRb, p107 y p130, participan en múltiples procesos celulares como el ciclo celular progresión, diferenciación, senescencia y apoptosis (Gonzalo y Blasco 2005). Rb Las proteínas inducen un estado de cromatina represiva alrededor de los promotores eucromáticos y también participar en el ensamblaje de dominios de heterocromatina como centrómeros y telómeros 13 Machine Translated by Google (Gonzalo, García-Cao et al. 2005). Por lo tanto, la deficiencia en la función de Rb en las células HGPS podría contribuyen a defectos de proliferación, cambios en la expresión génica, así como alteraciones en la estructura y función de los dominios de heterocromatina. Además, los fibroblastos HGPS activan los efectores aguas abajo de la señalización de Notch. vía (Scaffidi y Misteli 2008). Esto se debe a que la progerina libera el secuestro de el coactivador de Notch SKIP por láminas de tipo salvaje, lo que resulta en la activación transcripcional de genes aguas abajo como TEL1, HES1 y HES5. Este fenotipo también se observa en inducción de la expresión de progerina en hMSC (células madre mesenquimales humanas), que a su vez impacta en su potencial de diferenciación. Estos datos proporcionan un vínculo entre el envejecimiento acelerado en pacientes con HGPS y disfunción de células madre adultas. Más apoyo para células madre alteradas Las funciones en HGPS provinieron de la reprogramación celular de fibroblastos HGPS para inducir células madre pluripotentes (iPSC), seguido de la diferenciación de HGPS-iPSC en diferentes linajes (Zhang, Lian et al. 2011). En particular, este estudio identificó músculos lisos vasculares y defectos de células madre mesenquimales. Por lo tanto, la escasez o el agotamiento de las células madre necesarias para el reemplazo de tejido podría representar una causa importante de la patología de HGPS. Curiosamente, la interacción aberrante de la progerina con los TF que controlan la adipogénesis ha sido propuesto como un mecanismo detrás de la lipodistrofia en HGPS. Por ejemplo, SREBP1 se une con alta afinidad a la progerina, lo que resulta en el secuestro de SREBP1 en el núcleo periferia y reducción de su actividad transcripcional (Duband-Goulet, Woerner et al. 2011). De manera similar, la diferenciación deficiente de las células madre mesenquimales humanas (hMSC) en el linaje adiposo fue reportado recientemente sobre la acumulación de prelamin A (Ruiz de Eguino, Infante et al. 2012). Este efecto se debe al secuestro del factor de transcripción Sp1 por prelamina A, lo que da como resultado una expresión alterada de los genes ECM. 14 Machine Translated by Google El secuestro de TF parece ser un tema recurrente en las laminopatías. Enfoques sobre una escala global han intentado mapear el interactoma de lamin A, y dilucidar cómo la progerina altera estas interacciones. Un examen de dos híbridos de levadura identificó 225 progerina interacciones específicas, 51 proteínas que interactuaron tanto con la lamina A como con la progerina, y 61 interacciones específicas de la lamina A (Dittmer, Sahni et al. 2014). La mayoría de la progerina proteínas específicas que interactúan se localizaron en la envoltura nuclear (89%), mientras que sólo la mitad de Las proteínas de unión a lamina A se acumulan en este lugar. Los interactuadores específicos de progerina fueron enriquecido para proteínas de membrana intrínsecas con función de canal y transporte, incluido ER componentes y proteínas involucrados en la organización de la membrana, localización de proteínas y transporte mediado por vesículas. Por el contrario, muchos componentes de lámina y envoltura nuclear se encontraron entre las proteínas que interactúan con lamina A específica. Es tentador especular que la ganancia o pérdida de interacciones lamin A/C específicas de tejido podría proporcionar especificidad de tejido de laminopatías. La expresión de progerina puede aumentar o disminuir el secuestro de proteínas en la periferia nuclear o en el interior nuclear, afectando su función. Un estudio reciente también ha demostrado que lamin A/C juega un papel en la compartimentación y función del grupo Polycomb (PcG) de proteínas, reguladores clave del desarrollo y diferenciación (Cesarini, Mozzetta et al. 2015). El agotamiento de las láminas de tipo A conduce a dispersión de las proteínas PcG, dificultando sus funciones represivas génicas. Como consecuencia, la pérdida de expresión de lamin A/C acelera la diferenciación de mioblastos a miotubos (Cesarini, Mozzetta et al. 2015). Estos datos indican que a través de la regulación del grupo de factores PcG, Las proteínas lamin A/C pueden modular la expresión de una variedad de genes. Otros estudios son necesario para determinar si la expresión de progerina puede afectar la localización y función de PcG 15 Machine Translated by Google proteínas, y si estos procesos contribuyen a las alteraciones en la expresión génica observadas en Células derivadas de pacientes HGPS. 3.4. Defectos en la reparación del ADN e inestabilidad genómica Exhibición de fibroblastos de pacientes con HGPS y de modelos de progeria en ratones acumulación de daño en el ADN, inestabilidad cromosómica, aumento de la sensibilidad al ADN agentes dañinos (Liu, Wang et al. 2005, Varela, Cadinanos et al. 2005), y un permanente Respuesta activada al daño del ADN (DDR) (Figura 3) (Scaffidi y Misteli 2006). Molecular Los mecanismos que contribuyen al daño del ADN en HGPS incluyen: defectos en el reclutamiento de ADN factores de reparación 53BP1, Rad50 y Rad51 a sitios de daño que en su lugar exhiben aberrante acumulación de la proteína de reparación por escisión de nucleótidos XPA (Liu, Wang et al. 2005, Liu, Wang et al. 2008); reclutamiento retrasado de fosfo-NBS1 y MRE11, componentes del MRN complejo necesario para detectar lesiones de ADN (Constantinescu, Csoka et al. 2010); y disminución de los niveles nucleares de los componentes de la holoenzima DNAPK (DNAPKcs, Ku70 y Ku80) (Liu, Barkho et al. 2011). Estas deficiencias son consistentes con puntos de control retrasados respuesta y defectos en la reparación de roturas de doble cadena (DSB) mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ) y recombinación homóloga (HR). En modelos de ratón de progeria, defectos en ATM Se informó la señalización de KAP-1 y la remodelación de la cromatina inducida por daños en el ADN (Liu, Wang et al. 2013), y propuso contribuir a las deficiencias en el reclutamiento y retención de Proteínas reparadoras del ADN en lesiones heterocromáticas. Curiosamente, las iPSC generadas a partir de fibroblastos HGPS carecen de morfología nuclear. anormalidades y expresión de progerina, consistentes con el gen LMNA siendo silenciado en células madre (Liu, Barkho et al. 2011). Diferenciación de HGPS-iPSCs a células de músculo liso (SMC) da como resultado la expresión de progerina y la aparición de fenotipos inducidos por progerina como dieciséis Machine Translated by Google como daño en el ADN, lo que conduce a la senescencia prematura. Es importante destacar que estas células exhiben una marcada supresión de la Poli-(ADP-ribosa) polimerasa 1 (PARP1), una enzima que participa en la reparación de roturas de ssDNA y es fundamental para la fidelidad de la replicación del ADN. Pérdida de PARP1 en Los SMC de HGPS conducen a una regulación positiva aberrante de NHEJ durante la fase S, lo que contribuye a la mitosis. catástrofe y muerte celular (Liu, Barkho et al. 2011). Otros factores que contribuyen a la inestabilidad genómica en las células HGPS incluyen la acumulación de especies reactivas de oxígeno (ROS) debido a la disfunción mitocondrial. HGPS los fibroblastos se ven obstaculizados en su capacidad para reparar el daño del ADN inducido por ROS, exhibiendo mayor sensibilidad al estrés oxidativo que los fibroblastos normales (Richards, Muter et al. 2011). La acumulación de roturas de ADN irreparables en las células HGPS se correlaciona con la proliferación defectos y eliminadores de ROS reducen el daño del ADN y mejoran el crecimiento celular. Además, Análisis SILAC (marcaje de isótopos estables con aminoácidos) realizado en HGPS y normal fibroblastos muestra una reducción en los niveles de proteínas mitocondriales que participan en fosforilación oxidativa en fibroblastos HGPS, que se acompaña de mitocondrial disfunción (Rivera-Torres, Acin-Perez et al. 2013). Una disfunción mitocondrial similar fue observado en modelos de ratón de progeria, lo que sugiere que estos problemas son comunes en laminopatías. La actividad deteriorada de la vía NRF2 también contribuye al aumento del estrés oxidativo en HGPS (Kubben, Zhang et al. 2016). Normalmente, la vía NRF2 activa genes antioxidantes uniéndose a motivos de elementos sensibles a antioxidantes (ARE). Curiosamente, la progerina fuertemente se une a NRF2, causando la mala localización subnuclear de NRF2 e interrumpiendo la formación de complejos de factores de transcripción en motivos ARE. En consecuencia, los genes diana de NRF2-ARE son reprimido en HGPS, y abunda el estrés oxidativo crónico. Emocionante, reactivación de la NRF2 17 Machine Translated by Google vía mejora las alteraciones clásicas en las células HGPS, reduciendo los niveles de proteína progerina, reduciendo el estrés oxidativo y restaurando los niveles de lamin B1. Este hallazgo subraya la importancia del estrés oxidativo para el fenotipo HGPS y sugiere que la activación de NRF2 los compuestos podrían ser un medio para mejorar el fenotipo HGPS. 3.5. Acortamiento de telómeros Los fibroblastos derivados de pacientes de HGPS exhiben un desgaste de telómeros más rápido durante proliferación en cultivo que los fibroblastos normales, lo que causa daño en el ADN y entrada en senescencia (Gonzalo y Kreienkamp 2015). Expresión ectópica de telomerasa o La inactivación de p53 reduce el daño del ADN y suprime los defectos proliferativos, lo que sugiere que la disfunción de los telómeros y la activación de los puntos de control contribuyen a estos defectos (Kudlow, Stanfel et al. 2008). Es importante destacar que la expresión de la telomerasa también revierte la inducida por la progerina. cambios en la expresión génica. En particular, muchos genes desregulados en los que expresan progerina las células están vinculadas a la senescencia, y la telomerasa puede rescatar la mayoría de estos cambios (Chojnowski, Ong et al. 2015). Además, este estudio demostró que las células madre embrionarias (ESCs), que expresan altos niveles de telomerasa, están protegidos de la inducida por progerina fenotipos. Estos hallazgos respaldan la idea de que la progerina causa disfunción de los telómeros. y que la telomerasa protege a las células del paciente HGPS de los efectos tóxicos de la progerina. Estudios recientes también han demostrado que las alteraciones en la biología de los telómeros inducen acumulación de progerina. Por ejemplo, la inducción de la disfunción de los telómeros por la expresión de una proteína TRF2 negativa dominante (TRF2ÿBÿM) da como resultado un aumento de los niveles de progerina (Cao, Blair et al. 2011). Además, la senescencia replicativa de los fibroblastos humanos normales es acompañado de una producción elevada de progerina, mientras que este efecto no se observa durante senescencia independiente de los telómeros (Cao, Blair et al. 2011). Esta regulación al alza de la progerina 18 Machine Translated by Google parece deberse a cambios en el empalme alternativo del gen LMNA . Curiosamente, un todo variedad de genes se empalmaron alternativamente en respuesta al daño de los telómeros. En tono rimbombante, la expresión de telomerasa en fibroblastos normales reduce el uso del sitio de empalme críptico que resulta en la producción de progerina. Aunque el mecanismo por el cual la disfunción de los telómeros activa la producción de progerina, es tentador especular que la unión reducida de proteínas teloméricas del complejo de refugio, o activación de la respuesta al daño del ADN podría afectar el corte y empalme previo al ARNm en general, y el corte y empalme alternativo del gen LMNA en especial. En general, estos estudios revelan una relación tóxica recíproca entre los telómeros y progerina, con disfunción de los telómeros que induce la producción de progerina y la expresión de progerina causando disfunción de los telómeros. Esta relación desastrosa podría contribuir al celular disminución durante el envejecimiento fisiológico. De hecho, tanto el acortamiento de los telómeros como la expresión de progerina se observan en células de personas mayores. Por lo tanto, mantener la función de los telómeros protege del envejecimiento celular no solo al prevenir la inestabilidad cromosómica, sino también al consiguiente control adecuado del splicing alternativo, que en el caso del gen LMNA puede tener efectos altamente perjudiciales. 4. Fisiopatología del HGPS Los pacientes con HGPS presentan clásicamente alopecia (pérdida de cabello), anomalías óseas y articulares, pérdida de grasa subcutánea y aterosclerosis severa (Ullrich y Gordon 2015). Los pacientes viven durante un promedio de solo 14,6 años, y la mayoría muere en sus primeros años de adolescencia a causa de infarto de miocardio o accidente cerebrovascular como resultado de la aterosclerosis rápidamente progresiva (Gordon, Massaro et al. 2014) (Figura 4). Afortunadamente, esta enfermedad es extremadamente rara, con una 19 Machine Translated by Google estimado de 350-400 niños en todo el mundo. Sin embargo, a pesar de su escasez, esta enfermedad provoca mucha atención a la investigación. No sólo se necesita desesperadamente un tratamiento, sino mejores comprender HGPS podría aclarar misterios en el proceso normal de envejecimiento. Esto es porque la progerina, que se produce en altos niveles en HGPS, también se produce durante el envejecimiento en el población envejecida normal (Scaffidi y Misteli 2006). Los procesos de la enfermedad de HGPS probablemente comienzan en el útero. A pesar de esto, los pacientes con HGPS son aparentemente normales al nacer y tienen un peso normal al nacer. Sin embargo, es probable que algunos sutiles las características de la enfermedad, como la palidez perioral, ya están discretamente presentes al nacer. Este el fenotipo inicial leve puede ser sorprendente dado el fenotipo drástico que se desarrolla más tarde en enfermedad Sin embargo, el retraso en las manifestaciones de la enfermedad puede resultar de la atenuación expresión de lamina A/C y progerina en células indiferenciadas o embrionarias, y puede tomar algún tiempo antes de que los niveles de progerina alcancen un nivel umbral para provocar la enfermedad (Constantinescu, Gray et al. 2006, Zhang, Lian et al. 2011). Sin embargo, a los 9-12 meses de edad, Los pacientes a menudo presentan retraso en el crecimiento, anormalidades en la piel, alopecia, perioral cianosis, venas prominentes del cuero cabelludo y disminución del rango de movimiento (Merideth, Gordon et al. 2008, Ullrich y Gordon 2015). Con el tiempo, estos primeros problemas aumentan en magnitud y introducir el fenotipo característico de la enfermedad. Los pacientes con HGPS desarrollan una apariencia progeroide única. Son distintivamente pequeños, la mayoría nunca alcanza los cuatro pies o los 30 kg. Una tasa de aumento de peso disminuida y lineal evita crecimiento comparable al de sus pares de la misma edad (Gordon, McCarten et al. 2007, Kieran, Gordon et al. Alabama. 2007). Los pacientes comienzan a perder cabello craneal alrededor de los 10 meses de edad. Sin embargo, con el tiempo, los pacientes pierden el vello corporal y las cejas y progresan a una alopecia casi completa (Rork, Huang et al. 2014). Los pacientes con HGPS también tienen características craneofaciales distintivas, 20 Machine Translated by Google desarrollo de micrognatia, ojos prominentes y nariz picuda (Kieran, Gordon et al. 2007, Domingo, Trujillo et al. 2009). Las venas prominentes del cuero cabelludo de la frente y la cianosis perioral se vuelven evidente, ambos probablemente como resultado de la disminución de la grasa subcutánea (Rork, Huang et al. 2014). Los pacientes también tienen múltiples anomalías dentales, que incluyen tanto la falta de dientes como apiñamiento dental, que puede manifestarse como filas dobles de dientes (Gordon, McCarten et al. 2007, Domingo, Trujillo et al. 2009). Anomalías del oído medio y aberraciones en el canal auditivo también conducir a la pérdida de audición de baja frecuencia en muchos pacientes (Guardiani, Zalewski et al. 2011). HGPS es una "enfermedad de envejecimiento segmentario", ya que están presentes algunas características del envejecimiento normal, mientras que otras características están notablemente ausentes. El hígado, los riñones, los pulmones y el aparato digestivo son normalmente competentes en estos pacientes (Kieran, Gordon et al. 2007, Ullrich y Gordon 2015). Sin embargo, otros tipos de células y tejidos, como los de origen mesenquimatoso, son particularmente susceptible a los defectos celulares inducidos por la progerina, lo que hace que los pacientes con HGPS aprovechar anomalías notables de grasa y huesos (McClintock, Ratner et al. 2007, Merideth, Gordon et al. 2008, Zhang, Lian et al. 2011). Una pérdida profunda de grasa subcutánea es fácilmente evidente en el examen de estos pacientes. Sin embargo, la pérdida de grasa subcutánea provoca otras desafíos más allá de los que son evidentes. Pérdida de grasa en algunas zonas del cuerpo, como los pies, puede provocar molestias y, a menudo, requiere terapias de apoyo (Gordon, Massaro et al. 2014). Las anomalías óseas y articulares son un sello distintivo de HGPS que progresa a un esquelético displasia (Gordon, Gordon et al. 2011). Los problemas óseos incluyen clavículas pequeñas, costillas delgadas y acroosteólisis. Los pacientes exhiben densidad mineral ósea reducida con acentuado desmineralización al final de los huesos largos. La necrosis avascular también está presente, incluso en la cabeza femoral, probablemente como resultado de un compromiso vascular (Cleveland, Gordon et al. 2012). 21 Machine Translated by Google Curiosamente, la incidencia de fracturas entre los pacientes con HGPS no aumenta en comparación con la población general, aunque los pacientes con HGPS son más susceptibles a las fracturas de cráneo. Este es probablemente el resultado de la formación ósea interrumpida en el cráneo. Patente anterior y posterior fontanelas pueden persistir en pacientes de hasta nueve años de edad, y estos pacientes a menudo también tienen suturas craneales ensanchadas y un cráneo delgado (Ullrich y Gordon 2015). Las alteraciones de la piel a menudo se encuentran entre las primeras manifestaciones de HGPS. Aunque Las manifestaciones pueden presentarse con diferentes grados de severidad, las alteraciones típicas incluyen áreas de decoloración, pigmentación punteada y áreas tensas que restringen el movimiento. Cambios esclerodermoides, que le dan a la piel una apariencia de hoyuelos con variaciones pigmentación, aparecen con frecuencia sobre el abdomen y las extremidades inferiores (Rork, Huang et al. Alabama. 2014). Los problemas más significativos en el HGPS, y que en última instancia subyacen a la muerte del paciente, son las complicaciones cardiovasculares. Los pacientes desarrollan severa y progresiva aterosclerosis, que eventualmente conduce a isquemia miocárdica, infarto y accidente cerebrovascular (Stehbens, Wakefield et al. 1999). Las manifestaciones cardíacas incluyen aumento de la poscarga y angina. (Ullrich y Gordon 2015). Sorprendentemente, se estima que el 50% de los niños tienen accidentes cerebrovasculares detectables radiográficamente a la edad de ocho años, y los infartos eran comunes en estudios de imagen de pacientes entre cinco y 10 años de edad (Silvera, Gordon et al. 2013). La mayoría de estos accidentes cerebrovasculares suelen ser clínicamente silenciosos. Esto sugiere que los problemas cardiovasculares están presentes mucho antes del final de la vida y contribuyen tanto a la morbilidad como a la mortalidad. La aterosclerosis que se desarrolla en HGPS tiene algunas diferencias importantes con la envejecimiento normal de la población, aunque la calcificación, la inflamación y la ruptura de la placa son presentes tanto en HGPS como en el envejecimiento normal. Curiosamente, los pacientes con HGPS no desarrollan 22 Machine Translated by Google hipercolesterolemia o aumento de la proteína C reactiva de alta sensibilidad sérica, dos características que a menudo se observan con la enfermedad cardiovascular en la población normal (Stehbens, Wakefield et al. 1999, Oliva, Harten et al. 2010). Además, los buques disponen de una más completa fibrosis en toda la pared del vaso, ya que las arterias y las venas muestran una marcada fibrosis adventicia con un borde denso de colágeno. Este endurecimiento completo de la pared conduce a muchas medidas medibles cambios en la vasculatura. Los pacientes pueden volverse hipertensos, y algunos pacientes también tienen intervalos QT alargados por EKG (Merideth, Gordon et al. 2008, Gerhard-Herman, Smoot et al. 2012). La velocidad de la onda del pulso carótido-femoral se eleva drásticamente, lo que indica un aumento en la rigidez arterial. Los pacientes también tienen paredes vasculares anormalmente ecodensas por ultrasonido, se cree que corresponde a una matriz fibrótica dramáticamente engrosada. En estos pacientes, además como modelos de ratón de la enfermedad, hay un agotamiento sorprendente de las células del músculo liso vascular de la media, incluso en las unidades laminares más externas adyacentes a la adventicia, es decir reemplazado por proteoglicanos y colágeno (Varga, Eriksson et al. 2006, Osorio, Navarro et al. 2011, Gerhard-Herman, Smoot et al. 2012, Villa-Bellosta, Rivera-Torres et al. 2013). This is probablemente debido a la extrema sensibilidad de las células del músculo liso vascular a la expresión de progerina. Las anormalidades vasculares presentes en HGPS causan enfermedad neurológica manifestaciones también. Curiosamente, los pacientes con HGPS tienen una cognición normal y no muestran evidencia de problemas de memoria o cognitivos a menudo asociados con el proceso normal de envejecimiento (Ullrich y Gordon 2015). Este hallazgo potencialmente sorprendente podría explicarse por la observación de que la expresión de lamin A está limitada en el cerebro por miR-9, evitando así expresión significativa de progerina en células y tejidos neuronales (Jung, Coffinier et al. 2012). Por lo tanto, mientras que las células neuronales evitan la muerte directa de la expresión de progerina, muchas HGPS Los pacientes experimentan síntomas neurológicos como dolores de cabeza, debilidad muscular o 23 Machine Translated by Google convulsiones como resultado del flujo sanguíneo deteriorado y vasculatura enferma. Los dolores de cabeza pueden ser solos. o recurrente y, a menudo, adquiere una calidad similar a la de la migraña. Los AINE se pueden usar para tratar dolores de cabeza si ocurren con frecuencia (Ullrich y Gordon 2015). Con tal multitud de síntomas y sistemas de órganos afectados, el tratamiento de la enfermedad es desafiante. Tras el diagnóstico, los médicos caracterizan las manifestaciones específicas del paciente de enfermedad con una variedad de pruebas (Ullrich y Gordon 2015). Algunas manifestaciones pueden ser retrasado con terapias adecuadas. Sin embargo, la enfermedad no tiene cura y ha limitado opciones de tratamiento para mejorar sistémicamente el fenotipo de la enfermedad. 5. Estrategias terapéuticas para HGPS En los últimos años, varias terapias se han mostrado prometedoras en etapas preclínicas para tratamiento de la enfermedad (Figura 1C). Ahora se están iniciando ensayos clínicos con algunos compuestos para determinar su mérito en pacientes humanos. El primero de estos compuestos en alcanzar el éxito en Las células derivadas de pacientes con HGPS in vitro y en modelos de ratones con progeria in vivo han sido FTI, que funcionan al inhibir el procesamiento de la prelamina A para madurar lamina A, o en HGPS, para progerin (Hong, Frost et al. 2006, Yang, Meta et al. 2006, Varela, Pereira et al. 2008, Gordon, Kleinmann et al. 2012). Administración del FTI lonafarnib durante dos años en un ensayo clínico de Los pacientes con HGPS mejoraron los resultados secundarios, como la velocidad de la onda del pulso, la arteria carótida la ecodensidad de la pared y la incidencia de accidentes cerebrovasculares, dolores de cabeza y convulsiones (Gordon, Kleinman et al. 2012, Gordon, Massaro et al. 2014). Sin embargo, el tratamiento sólo prolongó la supervivencia en un estimado de 1,6 años. Como resultado, ahora se están iniciando nuevos ensayos clínicos para determinar si las terapias combinadas podrían mejorar aún más el fenotipo de la enfermedad. Un ensayo en curso incluye dos compuestos adicionales al lonafarnib, la estatina pravastatina y el bisfosfonato 24 Machine Translated by Google zoledronato, con el objetivo de inhibir múltiples pasos en la vía biosintética del farnesilo. Este ensayo es estimado ser para terminado por Julio (https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT00916747?term=Hutchinson Gilford+Enfermedad&rango=2). Además de los inhibidores de la prenilación, otras estrategias terapéuticas han demostrado una se benefician mejorando el fenotipo de las células HGPS y los modelos de progeria en ratones. Estos incluyen inhibidores de la enzima responsable de la carboximetilación de la farnesilcisteína de progerina (Ibrahim, Sayin et al. 2013); rapamicina y sulforafano, compuestos que aumentar el aclaramiento de progerina por autofagia (Cao, Graziotto et al. 2011, Cenni, Capanni et al. 2011, Gabriel, Roedl et al. 2014); el eliminador de ROS N-acetil cisteína, que reduce la cantidad de daño irreparable en el ADN causado por el aumento de la generación de ROS (Pekovic, Gibbs-Seymour et al. 2011, Richards, Muter et al. 2011, Lattanzi, Marmiroli et al. 2012, Sieprath, Darwiche et al. 2012); azul de metileno, un antioxidante dirigido a las mitocondrias (Xiong, Choi et al., 2015); o resveratrol, un potenciador de la actividad desacetilasa SIRT1 que alivia las características progeroides (Liu, Ghosh et al. 2012). Recientemente, un ensayo clínico de fase 1 y 2 se inició para determinar el efecto de la administración combinada de everolimus, un inhibidor de la vía mTOR similar para rapamicina, y lonafarnib (https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02579044?term=Hutchinson Gilford+Enfermedad&rango=1). Se espera que everolimus pueda reducir los niveles de progerina en activando su eliminación y podría hacer sinergia con lonafarnib (Cao, Graziotto et al. 2011). Sin embargo, un estudio comparativo del efecto de tres tratamientos -un FTI, rapamicina o un combinación de zoledronato y pravastatina sobre células madre mesodérmicas derivadas de HGPS Las iPSC dieron resultados variables (Blondel, Jaskowiak et al. 2014). Si bien todos los tratamientos mejoraron 25 2017 Machine Translated by Google morfología nuclear, se observaron diferencias entre los tratamientos en la mejora de otros fenotipos celulares. Además, algunas combinaciones tuvieron efectos citotóxicos. Por lo tanto, se debe tener precaución al diseñar ensayos clínicos para pacientes con HGPS, ya que esto la toxicidad socavará los beneficios. El mejor tratamiento para los pacientes con HGPS sigue siendo una cuestión de activa discusión y controversia. Comprender el espectro completo de los efectos funcionales de los distintos fármacos nos permitirán encontrar estrategias en los próximos años que mejoren la fenotipos dramáticos característicos de HGPS mientras se reduce la toxicidad. Estudios recientes han identificado nuevos compuestos que ejercen un efecto beneficioso en modelos de progeria. Por ejemplo, la remodelina, un inhibidor de la N-acetiltransferasa-10 (NAT10) rescata anomalías morfológicas nucleares y defectos de proliferación. Además, la remodelina aumenta la compactación de la cromatina y mejora la acumulación de ADN daño característico de las células que expresan progerina (Larrieu, Britton et al. 2014). En curso los estudios están monitoreando el efecto de la remodelina en la expresión génica y evaluando su potencial como estrategia terapéutica mediante el uso de modelos de progeria en ratones. Otro conjunto de compuestos prometedores son los retinoides (Swift, Ivanovska et al. 2013). Recientemente se demostró que el promotor del gen LMNA contiene ácido retinoico sensible (L-RARE) y que el tratamiento con todo el ácido transretinoico (ATRA) da como resultado Regulación a la baja de la expresión del gen LMNA . En fibroblastos derivados del paciente HGPS ATRA el tratamiento reduce significativamente la expresión de progerina. Curiosamente, ATRA hace sinergia con rapamicina en la regulación negativa de los niveles de progerina, que a su vez mejora una variedad de fenotipos inducidos por progerina (Pellegrini, Columbaro et al. 2015). Los retinoides también fueron identificado en una evaluación basada en alto contenido y alto rendimiento de una biblioteca de aprobados por la FDA fármacos como una clase de compuestos capaces de revertir los fenotipos celulares de HGPS (Kubben, 26 Machine Translated by Google Brimacombe et al. 2015). Estos resultados subrayan la importancia de probar in vivo la eficacia de retinoides para mejorar los defectos de HGPS sin inducir toxicidad. Además, nuestra reciente Los estudios muestran que la activación de la señalización del receptor de vitamina D por el ligando (1,25ÿ-dihidroxi la unión de vitamina D3) mejora un amplio repertorio de fenotipos de HGPS derivados de pacientes células (Kreienkamp, Croke et al. 2016). Es probable que la terapia combinada sea la mejor estrategia para obtener sinergia entre estos compuestos, al tiempo que reduce la toxicidad debido a la reducción de la dosis de cada compuesto individual. Ensayos preclínicos con estos nuevos compuestos ya sea como Se necesitan agentes o en combinación para determinar su posible aplicabilidad terapéutica. 6. Observaciones finales A pesar de todo lo que se sabe sobre HGPS y los notables avances realizados en entender la enfermedad, queda mucho por aprender. Sólo algunas de las paradojas de este la enfermedad ha sido resuelta. Por ejemplo, fue sorprendente que los pacientes con progeroides no desarrollar cáncer, dada la asociación entre cáncer y envejecimiento. Mientras que algunos originalmente planteó la hipótesis de que la vida útil reducida de HGPS enmascaraba una mayor propensión al cáncer desarrollo en células que expresan progerina, investigaciones recientes indican que la progerina expresión puede en realidad inhibir la transformación celular, lo que explica un riesgo de cáncer normal en estos pacientes (Fernández, Scaffidi et al. 2014). Quedan muchas otras paradojas y preguntas por resolver. apreciado: ¿Qué contribuye a la variación en la vida útil de estos pacientes? Por qué hacer algo los pacientes viven 24 meses y otros 20 años? Qué fenotipos inducidos por la progerina son los responsables en última instancia del compromiso celular inducido por la progerina? Por qué son ¿Algunos tejidos son más susceptibles a la expresión de progerina que otros? ¿Por qué los pacientes de HGPS 27 Machine Translated by Google tan susceptible a la aterosclerosis y las enfermedades cardiovasculares? ¿Qué factores celulares clave podrían ser dirigido para revertir o aliviar la producción de progerina? En la última década se han hecho enormes progresos en la comprensión de esta enfermedad. Él La próxima década representa un kairos para construir sobre estos hallazgos y avanzar en la novela. estrategias terapéuticas para ayudar a estos pacientes. A medida que avanza la investigación, HGPS continúa revelar misterios no apreciados del envejecimiento. HGPS, con todas sus complejidades, ofrece una experiencia única modelo para dilucidar nuevos roles de lamina A/C y progerina en la célula. Conflicto de intereses Todos los autores declaran que no existen conflictos de interés. Expresiones de gratitud Deseamos agradecer a Víctor Carranco por la ayuda con las cifras. Pedimos disculpas a nuestros compañeros. cuyo trabajo no ha sido discutido aquí debido a limitaciones de espacio. El trabajo en el laboratorio SG fue respaldado por NIH RO1 GM094513-01. El trabajo en el laboratorio de megafonía está financiado por el Ministerio de España de Economía y Competitividad [BFU2013-42709P] y el Consejo Regional Europeo Fondo de Desarrollo. RK cuenta con el apoyo de una beca predoctoral de la AHA (16PRE27510016). 28 Machine Translated by Google Referencias Arancio, W., G. Pizzolanti, SI Genovese, M. Pitrone y C. Giordano (2014). "Compromiso epigenético en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford: una mini revisión". Gerontología 60(3): 197-203. Bertrand, AT, K. Chikhaoui, R. Ben Yaou y G. Bonne (2011). "[Laminopatías: un gen, varias enfermedades]". Biol Aujourdhui 205(3): 147-162. Blondel, S., Jaskowiak, Egesipe, Le Corf, Navarro, Cordette, Martinat, Y. Laabi, K. Djabali, A. de Sandre-Giovannoli, N. Levy, M. Peschanski y X. Nissan (2014). "Las células madre pluripotentes inducidas revelan diferencias funcionales entre los fármacos que se investigan actualmente en pacientes con síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Células madre Transl Med 3(4): 510-519. Burke, B. y CL Stewart (2014). "Arquitectura funcional del núcleo de la célula en el desarrollo, el envejecimiento y la enfermedad". Curr Top Dev Biol 109: 1-52. Cao K, Blair CD, Faddah DA, Kieckhaefer JE, Olive M, Erdos MR, Nabel EG y FS Collins (2011). "La disfunción de la progerina y los telómeros colabora para desencadenar la senescencia celular en los fibroblastos humanos normales". J Clin Invest 121(7): 2833-2844. Cao, K., JJ Graziotto, CD Blair, JR Mazzulli, MR Erdos, D. Krainc y FS Collins (2011). "La rapamicina invierte los fenotipos celulares y mejora la eliminación de proteínas mutantes en las células del síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Sci Transl Med 3(89): 89ra58. Cenni, V., C. Capanni, M. Columbaro, M. Ortolani, MR D'Apice, G. Novelli, M. Fini, S. Marmiroli, E. Scarano, NM Maraldi, S. Squarzoni, S. Prencipe y G. Lattanzi (2011). "Degradación autofágica de prelamina A farnesilada como enfoque terapéutico para la progeria ligada a lamina". Eur J Histochem 55(4): e36. Cesarini, E., C. Mozzetta, F. Marullo, F. Gregoretti, A. Gargiulo, M. Columbaro, A. Cortesi, L. Antonelli, S. Di Pelino, S. Squarzoni, D. Palacios, A. Zippo, B. Bodega, G. Oliva y C. Lanzuolo (2015). "Lamin A/C es compatible con la arquitectura de la proteína PcG, manteniendo la represión transcripcional en los genes diana". J Cell Biol 211 (3): 533-551. Chojnowski, A., PF Ong, ES Wong, JS Lim, RA Mutalif, R. Navasankari, B. Dutta, H. Yang, YY Liow, SK Sze, T. Boudier, GD Wright, A. Colman, B. Burke, CL Stewart y O. Dresen (2015). "La progerina reduce la asociación LAP2alpha-telómero en la progeria de HutchinsonGilford". Elife 4. Cleveland, RH, LB Gordon, ME Kleinman, DT Miller, CM Gordon, BD Snyder, A. Nazarian, A. Giobbie-Hurder, D. Neuberg y MW Kieran (2012). "Un estudio prospectivo de manifestaciones radiográficas en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Pediatría Radiol 42(9): 1089-1098. Constantinescu, D., AB Csoka, CS Navara y GP Schatten (2010). "La reparación de DSB defectuosa se correlaciona con una morfología nuclear anormal y mejora con el tratamiento FTI en los fibroblastos del síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Exp Cell Res 316(17): 2747-2759. Constantinescu, D., HL Gray, PJ Sammak, GP Schatten y AB Csoka (2006). "La expresión de Lamin A/C es un marcador de la diferenciación de células madre embrionarias humanas y de ratón". Madre Celdas 24(1): 177-185. Csoka, AB, SB Inglés, CP Simkevich, DG Ginzinger, AJ Butte, GP Schatten, FG Rothman y JM Sedivy (2004). "El perfil de expresión a escala del genoma del síndrome de progeria de Hutchinson Gilford revela una mala regulación transcripcional generalizada que conduce a 29 Machine Translated by Google defectos mesodérmicos/mesenquimatosos y aterosclerosis acelerada". Aging Cell 3(4): 235243. Dahl, KN, P. Scaffidi, MF Islam, AG Yodh, KL Wilson y T. Misteli (2006). "Propiedades estructurales y mecánicas distintas de la lámina nuclear en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Proc Natl Acad Sci USA 103(27): 10271-10276. De Sandre-Giovannoli, A., R. Bernard, P. Cau, C. Navarro, J. Amiel, I. Boccaccio, S. Lyonnet, C. L. Stewart, A. Munnich, M. Le Merrer y N. Levy (2003). "Lamin un truncamiento en la progeria de Hutchinson-Gilford". Ciencia 300 (5628): 2055. Dechat, T., K. Pfleghaar, K. Sengupta, T. Shimi, DK Shumaker, L. Solimando y RD Goldman (2008). "Laminas nucleares: factores principales en la organización estructural y la función del núcleo y la cromatina". Genes Dev 22 (7): 832-853. Dittmer, TA, N. Sahni, N. Kubben, DE Hill, M. Vidal, RC Burgess, V. Roukos y T. Misteli (2014). "Identificación sistemática de interactores patológicos de la lamina A". Mol Biol Cell 25(9): 1493-1510. Domingo, DL, MI Trujillo, SE Council, MA Merideth, LB Gordon, T. Wu, WJ Introne, WA Gahl y TC Hart (2009). "Síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford: fenotipos orales y craneofaciales". Oral Dis 15(3): 187-195. Duband-Goulet, I., S. Woerner, S. Gasparini, W. Attanda, E. Konde, C. Tellier-Lebegue, CT Craescu, A. Gombault, P. Roussel, N. Vadrot, P. Vicart, C. Ostlund, HJ Worman, S. Zinn Justin y B. Buendia (2011). "La localización subcelular de SREBP1 depende de su interacción con la región C-terminal de láminas de tipo A de tipo salvaje y relacionadas con enfermedades." Exp Cell Res 317(20): 2800-2813. Eisch, V., X. Lu, D. Gabriel y K. Djabali (2016). "La progerina afecta el mantenimiento de los cromosomas al agotar CENP-F de los cinetocoros en metafase en los fibroblastos de progeria de Hutchinson-Gilford". Oncotarget. Eriksson, M., WT Brown, LB Gordon, MW Glynn, J. Singer, L. Scott, MR Erdos, CM Robbins, TY Moses, P. Berglund, A. Dutra, E. Pak, S. Durkin, AB Csoka, M. Boehnke, TW Glover y FS Collins (2003). "Las mutaciones puntuales recurrentes de novo en la lamina A causan el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Naturaleza 423 (6937): 293-298. Fernández, P., P. Scaffidi, E. Markert, JH Lee, S. Rane y T. Misteli (2014). "La resistencia a la transformación en un trastorno de envejecimiento prematuro identifica una función protectora de tumores de BRD4". Representante celular 9(1): 248-260. Fong, LG, D. Frost, M. Meta, X. Qiao, SH Yang, C. Coffinier y SG Young (2006). "Un inhibidor de la proteína farnesiltransferasa mejora la enfermedad en un modelo de progeria en ratones". Ciencia 311 (5767): 1621-1623. Fong, LG, JK Ng, J. Lammerding, TA Vickers, M. Meta, N. Cote, B. Gavino, X. Qiao, SY Chang, SR Young, SH Yang, CL Stewart, RT Lee, CF Bennett, MO Bergo y SG Joven (2006). "Prelamin A y lamin A parecen ser prescindibles en la lámina nuclear". J Clin Invest 116(3): 743-752. Gabriel, D., D. Roedl, LB Gordon y K. Djabali (2014). "El sulforafano mejora la eliminación de progerina en los fibroblastos de progeria de Hutchinson-Gilford". Célula de envejecimiento. Gerhard-Herman, M., LB Smoot, N. Wake, MW Kieran, ME Kleinman, DT Miller, A. Schwartzman, A. Giobbie-Hurder, D. Neuberg y LB Gordon (2012). "Mecanismos del envejecimiento vascular prematuro en niños con síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Hipertensión 59(1): 92-97. 30 Machine Translated by Google Gesson, K., P. Rescheneder, MP Skoruppa, A. von Haeseler, T. Dechat y R. Foisner (2016). "Las láminas de tipo A se unen tanto a la heterocromatina como a la eucromatina, esta última regulada por el polipéptido 2 alfa asociado a la lámina". Genoma Res 26 (4): 462-473. Ghosh, S., B. Liu, Y. Wang, Q. Hao y Z. Zhou (2015). "Lamin A es un activador endógeno de SIRT6 y promueve la reparación del ADN mediada por SIRT6". Representante celular 13(7): 1396-1406. Goldman, RD, DK Shumaker, MR Erdos, M. Eriksson, AE Goldman, LB Gordon, Y. Gruenbaum, S. Khuon, M. Méndez, R. Varga y FS Collins (2004). "La acumulación de lámina A mutante provoca cambios progresivos en la arquitectura nuclear en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Proc Natl Acad Sci USA 101(24): 8963-8968. Gonzalo, S. y MA Blasco (2005). "Papel de la familia Rb en la definición epigenética de la cromatina". Ciclo celular 4(6): 752-755. Gonzalo, S. y JC Eissenberg (2016). "Atar cabos sueltos: telómeros, inestabilidad genómica y láminas". Curr Opin Genet Dev 37: 109-118. Gonzalo, S., M. Garcia-Cao, M. F. Fraga, G. Schotta, A. H. Peters, S. E. Cotter, R. Eguia, D. C. Dean, M. Esteller, T. Jenuwein y MA Blasco (2005). "Papel de la familia RB1 en la estabilización de la metilación de histonas en la heterocromatina constitutiva". Nat Cell Biol 7(4): 420-428. Gonzalo, S. y R. Kreienkamp (2015). "Defectos de reparación del ADN e inestabilidad del genoma en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Curr Opin Cell Biol 34: 75-83. Gordon, CM, LB Gordon, BD Snyder, A. Nazarian, N. Quinn, S. Huh, A. Giobbie-Hurder, D. Neuberg, R. Cleveland, M. Kleinman, DT Miller y MW Kieran (2011). "La progeria de Hutchinson Gilford es una displasia esquelética". J Bone Miner Res 26 (7): 1670-1679. Gordon, LB, ME Kleinman, DT Miller, DS Neuberg, A. Giobbie-Hurder, M. Gerhard Herman, LB Smoot, CM Gordon, R. Cleveland, BD Snyder, B. Fligor, WR Bishop, P. Statkevich, A. Regen, A. Sonis, S. Riley, C. Ploski, A. Correia, N. Quinn, NJ Ullrich, A. Nazarian, MG Liang, SY Huh, A. Schwartzman y MW Kieran (2012). "Ensayo clínico de un inhibidor de la farnesiltransferasa en niños con síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Proc Natl Acad Sci USA 109(41): 16666-16671. Gordon, LB, J. Massaro, RB D'Agostino, Sr., SE Campbell, J. Brazier, WT Brown, ME Kleinman y MW Kieran (2014). "Impacto de los inhibidores de la farnesilación en la supervivencia en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Circulación 130(1): 27-34. Gordon, LB, KM McCarten, A. Giobbie-Hurder, JT Machan, SE Campbell, SD Berns y MW Kieran (2007). "Progresión de la enfermedad en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford: impacto en el crecimiento y el desarrollo". Pediatría 120(4): 824-833. Gordon, LB, FG Rothman, C. López-Otin y T. Misteli (2014). "Progeria: un paradigma para la medicina traslacional". Celda 156(3): 400-407. Gruenbaum, Y. y R. Foisner (2015). "Lamins: proteínas de filamentos intermedios nucleares con funciones fundamentales en la mecánica nuclear y la regulación del genoma". Annu Rev Bioquímica 84: 131-164. Gruenbaum, Y. y O. Medalia (2015). "Laminas: la estructura y los complejos proteicos". Curr Opin Cell Biol 32: 7-12. Guardiani, E., C. Zalewski, C. Brewer, M. Merideth, W. Introne, AC Smith, L. Gordon, W. Gahl y HJ Kim (2011). "Manifestaciones otológicas y audiológicas del síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Laringoscopio 121(10): 2250-2255. Hernández, L., KJ Roux, ES Wong, LC Mounkes, R. Mutalif, R. Navasankari, B. Rai, S. Cool, JW Jeong, H. Wang, HS Lee, S. Kozlov, M. Grunert, T. Keeble, CM Jones, MD Meta, SG Young, IO Daar, B. Burke, AO Perantoni y CL Stewart (2010). "Funcional 31 Machine Translated by Google acoplamiento entre la matriz extracelular y la lámina nuclear por señalización Wnt en progeria." Dev Cell 19(3): 413-425. Heyn, H., S. Moran y M. Esteller (2013). "Perfiles de metilación de ADN aberrantes en los trastornos de envejecimiento prematuro Hutchinson-Gilford Progeria y el síndrome de Werner". Epigenética 8(1): 28-33. Ibrahim, MX, VI Sayin, MK Akula, M. Liu, LG Fong, SG Young y MO Bergo (2013). "Apuntar a la metilación de isoprenilcisteína mejora la enfermedad en un modelo de progeria en ratones". Ciencia 340 (6138): 1330-1333. Jung, HJ, C. Coffinier, Y. Choe, AP Beigneux, BS Davies, SH Yang, RH Barnes, 2nd, J. Hong, T. Sun, SJ Pleasure, SG Young y LG Fong (2012). "Regulación de la prelamina A pero no de la lamina C por miR-9, un microARN específico del cerebro". Proc Natl Acad Sci USA 109(7): E423431. Kelley, JB, S. Datta, CJ Snow, M. Chatterjee, L. Ni, A. Spencer, CS Yang, C. Cubenas-Potts, MJ Matunis y BM Paschal (2011). "La lámina nuclear defectuosa en el síndrome de progeria de Hutchinson-gilford interrumpe el gradiente nucleocitoplasmático de Ran e inhibe la localización nuclear de Ubc9". Mol Cell Biol 31(16): 3378-3395. Kieran, MW, L. Gordon y M. Kleinman (2007). "Nuevos enfoques para la progeria". Pediatría 120(4): 834-841. Kreienkamp, R., M. Croke, MA Neumann, G. Bedia-Diaz, S. Graziano, A. Dusso, D. Dorsett, C. Carlberg y S. Gonzalo (2016). "La señalización del receptor de vitamina D mejora los fenotipos celulares del síndrome de progeria de Hutchinson Gilford". Oncotarget. Krishnan, V., MZ Chow, Z. Wang, L. Zhang, B. Liu, X. Liu y Z. Zhou (2011). "La hipoacetilación de la histona H4 lisina 16 está asociada con la reparación defectuosa del ADN y la senescencia prematura en ratones con deficiencia de Zmpste24". Proc Natl Acad Sci USA 108(30): 12325-12330. Kubben, N., KR Brimacombe, M. Donegan, Z. Li y T. Misteli (2015). "Una tubería de detección basada en imágenes de alto contenido para la identificación sistemática de compuestos anti-progeroides". Métodos. Kubben, N., W. Zhang, L. Wang, TC Voss, J. Yang, J. Qu, GH Liu y T. Misteli (2016). "Represión de la vía antioxidante NRF2 en el envejecimiento prematuro". Celda 165(6): 13611374. Kudlow, BA, MN Stanfel, CR Burtner, ED Johnston y BK Kennedy (2008). "Supresión de defectos proliferativos asociados con mutantes de lamina A defectuosos en el procesamiento por hTERT o inactivación de p53". Mol Biol Cell 19(12): 5238-5248. Larrieu, D., S. Britton, M. Demir, R. Rodríguez y SP Jackson (2014). "La inhibición química de NAT10 corrige los defectos de las células laminopáticas". Ciencia 344 (6183): 527-532. Lattanzi, G., S. Marmiroli, A. Facchini y NM Maraldi (2012). "Daño nuclear y estrés oxidativo: nuevas perspectivas para las laminopatías". Eur J Histochem 56(4): e45. Lee, JM, C. Nobumori, Y. Tu, C. Choi, SH Yang, HJ Jung, TA Vickers, F. Rigo, CF Bennett, SG Young y LG Fong (2016). "Modulación del empalme de LMNA como estrategia para tratar enfermedades de prelamina A". J Clin Invest. Liu, B., S. Ghosh, X. Yang, H. Zheng, X. Liu, Z. Wang, G. Jin, B. Zheng, BK Kennedy, Y. Suh, M. Kaeberlein, K. Tryggvason y Z. Zhou (2012). "El resveratrol rescata la disminución de las células madre adultas dependientes de SIRT1 y alivia las características progeroides en la progeria basada en laminopatía". Cell Metab 16(6): 738-750. Liu, B., J. Wang, KM Chan, WM Tjia, W. Deng, X. Guan, JD Huang, KM Li, PY Chau, DJ Chen, D. Pei, AM Pendas, J. Cadinanos, C. Lopez-Otin, HF Tse, C. Hutchison, J. Chen, Y. Cao, 32 Machine Translated by Google KS Cheah, K. Tryggvason y Z. Zhou (2005). "Inestabilidad genómica en el envejecimiento prematuro basado en laminopatía". Nat Med 11(7): 780-785. Liu, B., Z. Wang, S. Ghosh y Z. Zhou (2013). "La remodelación defectuosa de la cromatina mediada por ATM-Kap-1 afecta la reparación del ADN y acelera la senescencia en el modelo de ratón con progeria". Célula de envejecimiento 12 (2): 316-318. Liu, B., Z. Wang, L. Zhang, S. Ghosh, H. Zheng y Z. Zhou (2013). "El agotamiento de la metiltransferasa Suv39h1 mejora la reparación del ADN y prolonga la vida útil en un modelo de ratón con progeria". Nat Commun 4: 1868. Liu, GH, BZ Barkho, S. Ruiz, D. Diep, J. Qu, SL Yang, AD Panopoulos, K. Suzuki, L. Kurian, C. Walsh, J. Thompson, S. Boue, HL Fung, I. Sancho-Martinez, K. Zhang, J. Yates, 3rd y JC Izpisua Belmonte (2011). "Recapitulación del envejecimiento prematuro con iPSC del síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Naturaleza 472 (7342): 221-225. Liu, Y., Y. Wang, AE Rusinol, MS Sinensky, J. Liu, SM Shell y Y. Zou (2008). "Implicación del xeroderma pigmentoso grupo A (XPA) en la progeria derivada de la maduración defectuosa de la prelamina A". Faseb J 22(2): 603-611. Loi, M., V. Cenni, S. Duchi, S. Squarzoni, C. Lopez-Otin, R. Foisner, G. Lattanzi and C. Capanni (2015). "Implicación del factor de barrera a la autointegración (BAF) en los cambios en la organización de la cromatina relacionados con la prelamina A". Oncotarget. Marji, J., SI O'Donoghue, D. McClintock, VP Satagopam, R. Schneider, D. Ratner, HJ Worman, LB Gordon y K. Djabali (2010). "Señalización defectuosa de lamin A-Rb en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford y reversión por inhibición de la farnesiltransferasa". PLoS One 5(6): e11132. McClintock, D., D. Ratner, M. Lokuge, DM Owens, LB Gordon, FS Collins y K. Djabali (2007). "La forma mutante de Lamin A que causa la progeria de Hutchinson-Gilford es un biomarcador del envejecimiento celular en la piel humana". PLoS ONE 2(12): e1269. McCord, RP, A. Nazario-Toole, H. Zhang, PS Chines, Y. Zhan, MR Erdos, FS Collins, J. Dekker y K. Cao (2013). "Alteraciones correlacionadas en la organización del genoma, la metilación de histonas y las interacciones ADN-lamina A/C en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Genoma Res 23(2): 260-269. Merideth, MA, LB Gordon, S. Clauss, V. Sachdev, AC Smith, MB Perry, CC Brewer, C. Zalewski, HJ Kim, B. Solomon, BP Brooks, LH Gerber, ML Turner, DL Domingo, TC Hart, J. Graf, JC Reynolds, A. Gropman, JA Yanovski, M. Gerhard-Herman, FS Collins, EG Nabel, RO Cannon, 3rd, WA Gahl y WJ Introne (2008). "Fenotipo y curso del síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". N Engl J Med 358(6): 592-604. Moiseeva, O., S. Lopes-Paciencia, G. Huot, F. Lessard y G. Ferbeyre (2016). "La farnesilación permanente de mutantes de lamina A vinculados a la progeria afecta su fosforilación en la serina 22 durante la interfase". Envejecimiento (Albany NY) 8(2): 366-381. Moulson, CL, LG Fong, JM Gardner, EA Farber, G. Go, A. Passariello, DK Grange, SG Young y JH Miner (2007). "El aumento de la expresión de progerina asociado con mutaciones inusuales en LMNA provoca síndromes progeroides graves". Hum Mutat 28(9): 882-889. Olive, M., I. Harten, R. Mitchell, JK Beers, K. Djabali, K. Cao, MR Erdos, C. Blair, B. Funke, L. Smoot, M. Gerhard-Herman, JT Machan, R. Kutys, R. Virmani, FS Collins, TN Wight, EG Nabel y LB Gordon (2010). "Patología cardiovascular en la progeria de Hutchinson-Gilford: correlación con la patología vascular del envejecimiento". Arterioscler Thromb Vasc Biol 30(11): 2301-2309. 33 Machine Translated by Google Osorio, F. G., C. L. Navarro, J. Cadinanos, I. C. Lopez-Mejia, P. M. Quiros, C. Bartoli, J. Rivera, J. Tazi, G. Guzman, I. Varela, D. Depetris, F. de Carlos, J. Cobo, V. Andres, A. De Sandre Giovannoli, JM Freije, N. Levy and C. Lopez-Otin (2011). "Terapia dirigida por empalme en un nuevo modelo de ratón de envejecimiento humano acelerado". Sci Transl Med 3(106): 106ra107. Osorio, FG, I. Varela, E. Lara, XS Puente, J. Espada, R. Santoro, JM Freije, MF Fraga and C. Lopez-Otin (2010). "Las alteraciones de la envoltura nuclear generan un patrón epigenético similar al envejecimiento en ratones deficientes en la metaloproteasa Zmpste24". Celda de envejecimiento 9(6): 947-957. Pegoraro, G., N. Kubben, U. Wickert, H. Gohler, K. Hoffmann y T. Misteli (2009). "Defectos de cromatina relacionados con el envejecimiento a través de la pérdida del complejo NURD". Nat Cell Biol 11(10): 12611267. Pekovic, V., I. Gibbs-Seymour, E. Markiewicz, F. Alzoghaibi, AM Benham, R. Edwards, M. Wenhert, T. von Zglinicki y CJ Hutchison (2011). "Los residuos de cisteína conservados en la cola de la lámina A de los mamíferos son esenciales para las respuestas celulares a la generación de ROS". Célula de envejecimiento 10(6): 1067-1079. Pellegrini, C., M. Columbaro, C. Capanni, MR D'Apice, C. Cavallo, M. Murdocca, G. Lattanzi y S. Squarzoni (2015). "El ácido retinoico todo trans y la rapamicina normalizan el fenotipo de fibroblastos de progeria de Hutchinson Gilford". Oncotarget 6(30): 29914-29928. Prokocimer, M., R. Barkan y Y. Gruenbaum (2013). "Síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford a través de la lente de la transcripción". Célula de envejecimiento. Reunert, J., R. Wentzell, M. Walter, S. Jakubiczka, M. Zenker, T. Brune, S. Rust and T. Marquardt (2012). "Progeria neonatal: el aumento de la proporción de progerina a lámina A conduce a la progeria del recién nacido". Eur J Hum Genet 20(9): 933-937. Richards, SA, J. Muter, P. Ritchie, G. Lattanzi y CJ Hutchison (2011). "La acumulación de daño irreparable en el ADN en los fibroblastos de progeria de laminopatía es causada por la generación de ROS y se previene mediante el tratamiento con N-acetilcisteína". Hum Mol Genet 20(20): 3997-4004. Rivera-Torres, J., R. Acin-Perez, P. Cabezas-Sanchez, FG Osorio, C. Gonzalez-Gomez, D. Megias, C. Camara, C. Lopez-Otin, JA Enriquez, JL Luque-Garcia and V. Andres (2013). "Identificación de la disfunción mitocondrial en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford mediante el uso de etiquetado de isótopos estables con aminoácidos en cultivo celular". J Proteómica 91: 466-477. Rodríguez, S. y M. Eriksson (2011). "Alelos de baja y alta expresión del gen LMNA: implicaciones para el desarrollo de la enfermedad de laminopatía". PLoS One 6(9): e25472. Rork, JF, JT Huang, LB Gordon, M. Kleinman, MW Kieran y MG Liang (2014). "Manifestaciones cutáneas iniciales del síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Pediatr Dermatol 31(2): 196-202. Ruiz de Eguino, G., A. Infante, K. Schlangen, AM Aransay, A. Fullaondo, M. Soriano, JM García-Verdugo, AG Martín y CI Rodríguez (2012). "La interacción del factor de transcripción sp1 con la prelamina a acumulada afecta la diferenciación del linaje adiposo en las células madre mesenquimales humanas: papel esencial de sp1 en la integridad de las vesículas lipídicas". Células madre Transl Med 1(4): 309-321. Scaffidi, P. y T. Misteli (2006). "Defectos nucleares dependientes de Lamin A en el envejecimiento humano". Ciencia 312 (5776): 1059-1063. Scaffidi, P. y T. Misteli (2008). "Desregulación dependiente de lamin A de células madre adultas asociadas con el envejecimiento acelerado". Nat Cell Biol 10(4): 452-459. 34 Machine Translated by Google Shumaker, DK, T. Dechat, A. Kohlmaier, SA Adam, MR Bozovsky, MR Erdos, M. Eriksson, AE Goldman, S. Khuon, FS Collins, T. Jenuwein y RD Goldman (2006). "La lámina nuclear mutante A conduce a alteraciones progresivas del control epigenético en el envejecimiento prematuro". Proc Natl Acad Sci USA 103(23): 8703-8708. Sieprath, T., R. Darwiche y WH De Vos (2012). "Laminas como mediadores del estrés oxidativo". Biochem Biophys Res Commun 421(4): 635-639. Silvera, VM, LB Gordon, DB Orbach, SE Campbell, JT Machan y NJ Ullrich (2013). "Características de imagen de la arteriopatía cerebrovascular y accidente cerebrovascular en el síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". AJNR Am J Neuroradiol 34(5): 1091-1097. Smith, ED, BA Kudlow, RL Frock y BK Kennedy (2005). "Laminas nucleares tipo A, progerias y otros trastornos degenerativos". Mech Envejecimiento Dev 126 (4): 447-460. Snider, NT y MB Omary (2014). "Modificaciones postraduccionales de proteínas de filamentos intermedios: mecanismos y funciones". Nat Rev Mol Cell Biol 15(3): 163-177. Stehbens, WE, SJ Wakefield, E. Gilbert-Barness, RE Olson y J. Ackerman (1999). "Características histológicas y ultraestructurales de la aterosclerosis en la progeria". Patología cardiovascular 8(1): 29-39. Swift, J., IL Ivanovska, A. Buxboim, T. Harada, PC Dingal, J. Pinter, JD Pajerowski, KR Spinler, JW Shin, M. Tewari, F. Rehfeldt, DW Speicher y DE Discher (2013). "La lamina A nuclear se escala con la rigidez del tejido y mejora la diferenciación dirigida por la matriz". Ciencia 341 (6149): 1240104. Toth, JI, SH Yang, X. Qiao, AP Beigneux, MH Gelb, CL Moulson, JH Miner, SG Young y LG Fong (2005). "El bloqueo de la proteína farnesiltransferasa mejora la forma nuclear en fibroblastos de humanos con síndromes progeroides". Proc Natl Acad Sci USA 102(36): 12873-12878. Ullrich, Nueva Jersey y LB Gordon (2015). "Síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Handb Clin Neurol 132: 249-264. Varela, I., J. Cadinanos, AM Pendas, A. Gutierrez-Fernandez, AR Folgueras, LM Sanchez, Z. Zhou, FJ Rodriguez, CL Stewart, JA Vega, K. Tryggvason, JM Freije and C. Lopez-Otin ( 2005). "El envejecimiento acelerado en ratones deficientes en la proteasa Zmpste24 está relacionado con la activación de la señalización de p53". Naturaleza 437 (7058): 564-568. Varela, I., S. Pereira, A. P. Ugalde, C. L. Navarro, M. F. Suarez, P. Cau, J. Cadinanos, F. G. Osorio, N. Foray, J. Cobo, F. de Carlos, N. Levy, J. M. Freije and C. Lopez-Otin (2008). "El tratamiento combinado con estatinas y aminobifosfonatos extiende la longevidad en un modelo de ratón de envejecimiento prematuro humano". Nat Med 14(7): 767-772. Varga, R., M. Eriksson, MR Erdos, M. Olive, I. Harten, F. Kolodgie, BC Capell, J. Cheng, D. Faddah, S. Perkins, H. Avallone, H. San, X. Qu, S. Ganesh, LB Gordon, R. Virmani, TN Wight, EG Nabel y FS Collins (2006). "Defectos progresivos de las células del músculo liso vascular en un modelo de ratón del síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". Proc Natl Acad Sci EE. UU. 103(9): 3250-3255. Verstraeten, VL, JY Ji, KS Cummings, RT Lee y J. Lammerding (2008). "Aumento de la mecanosensibilidad y la rigidez nuclear en las células de progeria de Hutchinson-Gilford: efectos de los inhibidores de la farnesiltransferasa". Celda de envejecimiento 7(3): 383-393. Vidak, S. y R. Foisner (2016). "Conocimientos moleculares sobre la enfermedad del envejecimiento prematuro progeria". Histochem Cell Biol 145(4): 401-417. 35 Machine Translated by Google Vidak, S., N. Kubben, T. Dechat y R. Foisner (2015). "La proliferación de células de progeria se ve reforzada por el polipéptido 2 alfa asociado a la lámina (LAP2alpha) a través de la expresión de proteínas de matriz extracelular". Genes Dev 29 (19): 2022-2036. Villa-Bellosta, R., J. Rivera-Torres, FG Osorio, R. Acin-Perez, JA Enriquez, C. Lopez-Otin and V. Andres (2013). "El metabolismo extracelular defectuoso del pirofosfato promueve la calcificación vascular en un modelo de ratón del síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford que mejora con el tratamiento con pirofosfato". Circulación 127(24): 2442-2451. Worman, HJ, LG Fong, A. Muchir y SG Young (2009). "Laminopatías y el largo y extraño viaje desde la biología celular básica hasta la terapia". J Clin Invest 119(7): 1825-1836. Yang, SH, MO Bergo, JI Toth, X. Qiao, Y. Hu, S. Sandoval, M. Meta, P. Bendale, MH Gelb, SG Young y LG Fong (2005). "El bloqueo de la proteína farnesiltransferasa mejora la formación de vesículas nucleares en fibroblastos de ratón con una mutación específica del síndrome de progeria de HutchinsonGilford". Proc Natl Acad Sci USA 102(29): 10291-10296. Yang SH, Meta M, Qiao X, Frost D, Bauch J, Coffinier C, Majumdar S, Bergo MO, SG Young y LG Fong (2006). "Un inhibidor de la farnesiltransferasa mejora los fenotipos de la enfermedad en ratones con una mutación del síndrome de progeria de Hutchinson-Gilford". J Clin Invest 116(8): 2115-2121. Zhang, J., Q. Lian, G. Zhu, F. Zhou, L. Sui, C. Tan, RA Mutalif, R. Navasankari, Y. Zhang, HF Tse, CL Stewart y A. Colman (2011). "Un modelo iPSC humano de Hutchinson Gilford Progeria revela defectos en el músculo liso vascular y en las células madre mesenquimales". Célula madre celular 8(1): 31-45. Zhang, YQ y KD Sarge (2008). "La sumoilación regula la función de la lamina A y se pierde en los mutantes de la lamina A asociados con las miocardiopatías familiares". J Cell Biol 182(1): 35-39. 36 Machine Translated by Google Pies de figura Figura 1. Procesamiento anormal de lamina A en HGPS. (A) La lámina A madura se produce a partir de prelamina A, que se farnesila seguida de recorte y metilación en el extremo C-terminal. Finalmente, la escisión por la proteasa Zmpste24 entre los residuos de aminoácidos 646-647 elimina el extremo C-terminal farnesilado. (B) En pacientes con HGPS, una mutación en el exón 11 activa un sitio de empalme críptico que conduce a la eliminación de 50 residuos de aminoácidos de la proteína precursora, incluido el sitio de escisión final de Zmpste24 y la acumulación de progerina farnesilada. (C) Descripción general de las consecuencias celulares de la expresión de progerina, así como proteínas, pequeño compuestos y procesos que influyen en los niveles de progerina y/o defectos inducidos por progerina. 37 Machine Translated by Google Machine Translated by Google Figura 2. La expresión de progerina altera la organización nuclear y la estabilidad del genoma. Las células de pacientes con HGPS se caracterizan por una serie de alteraciones que incluyen una reducción expresión de componentes de matriz extracelular (ECM), vesículas de envoltura nuclear, agrupamiento de complejos de poros nucleares (NPC), pérdida de heterocromatina periférica y reorganización microtúbulos. La expresión de progerina también afecta la dinámica de la envoltura nuclear proteínas transmembrana (NET), incluida la emerina, y sus interacciones con la cromatina proteínas asociadas, como BAF, factores de transcripción (TF) y modificadores de la cromatina. HGPS Las células tienen niveles más altos de especies reactivas de oxígeno (ROS) y daño en el ADN, mientras que LAP2ÿ está regulado a la baja. 39 Machine Translated by Google Machine Translated by Google Figura 3. Defectos nucleares en células HGPS. Inmunofluorescencia realizada en primaria fibroblastos humanos normales (NF) y fibroblastos derivados del paciente HGPS (HGPS) con anticuerpos reconociendo lamin A (verde, paneles superiores), modificación de histona H3K9me3 (rojo, medio paneles) y ÿH2AX (amarillo, paneles inferiores), un marcador de daño en el ADN. La tinción DAPI fue utilizado para demarcar núcleos (tinción azul en todos los paneles). Observe cómo el paciente HGPS derivó Los fibroblastos exhiben anomalías morfológicas nucleares, niveles reducidos de H3K9me3 y acumulación de niveles basales de daño de ADN no reparado, en comparación con lo normal fibroblastos. 41 Machine Translated by Google Figura 4. Fisiopatología del HGPS. El esquema muestra los síntomas y signos prominentes de HGPS, así como tratamientos potenciales para probar en el futuro para mejorar la fisiopatología de esta devastadora enfermedad. 42