Asignatura: QUÍMICA FARMACÉUTICA II Unidad Curricular: SULFAS Práctica N°2: Valoración de furosemida por método espectrofotométrico 1. Objetivo General Valorar furosemida por método espectrofotométrico 2. Objetivos Específicos - Establecer el porcentaje de principio activo de furosemida, mediante el método espectrofotométrico. Realizar controles físicos de furosemida. Comparar el método de análisis realizado en el laboratorio con el método establecido en la USP 41 de los estados unidos. 3. Fundamento teórico Caracteres generales- Polvo cristalino blanco casi blanco. Funde aproximadamente a 210 ºC, con descomposición. Se disuelve en soluciones diluidas de hidróxidos alcalinos. Soluble en acetona; moderadamente soluble en alcohol; práctica-mente insoluble en agua y cloruro de metileno. Presenta polimorfismo (USP41, 2018). El fármaco furosemida, también conocido por el nombre comercial Lasix®, es un medicamento de la clase de los diuréticos de la alza que actúa en la Asa de Henle, que aumentan de forma intensa la excreción de la orina y sodio por el organismo. Su principal utilización es en la remoción de edema causado por problemas cardiacos, hepáticos o renales (Korolkovas & Burckhalter, 1983). 4. Parte experimental 4.1 Equipos, materiales y reactivos EQUIPOS MATERIALES MEDICAMENTO Balanza Balones aforados Furosemida (100,50 ml) REACTIVOS Estándar Furosemida Espectrofotómetro Pipetas volumétricas UV NaOH 0,1N Desintegrador Pipetas graduadas Agua Friabilizador Embudo HCl 0,1N Durómetro Papel filtro Nitrado de Sodio Vasos de precipitación sulfamato amonio Erlenmeyer naftiletilendiamina de Espátulas 4.2 Procedimiento a. Preparación de reactivos (un grupo de laboratorio horas antes de la hora de laboratorio) Preparación de NaOH 0,1N (1000ml) Si se parte de NaOH al 99% p/p, peso molecular 40 g/mol, pesar 4,1 g de NaOH en un balón de 1000ml que contenga 25ml de agua, agitar hasta disolución finalmente aforar a 1000ml. Preparación de HCl 0,1N (100ml) Si se parte de ácido clorhídrico concentrado al 37%, peso molecular 3,646 g/mol y una densidad 1,19g/mL, colocar 8,28ml en un balón de 1000ml que contenga 500 ml de agua. - b. Uniformidad de masa Pesar el contenido de 20 cápsulas o tabletas. Llenar la tabla expuesta en el anexo 1. c. Preparación del Estándar (duplicado por curso) - Pesar 24 mg de estándar de furosemida en un balón aforado de 100 mL. - Añadir 70 mL de NaOH 0,1N. Esta solución se extrae durante 10 minutos en el baño ultrasónico o agitar hasta disolución y después de enfriar aforar con NaOH 0,1N. - Tomar 2 mL y diluir con con NaOH 0,1N hasta 100 mL. - Determinar las absorbancias a 271nm. - Realizar los cálculos según el Anexo 5 d. Preparación de blanco Determinar las absorbancias a 271nm, utilizando NaOH 0.1M como blanco. e. Valoración (triplicado por grupo de laboratorio) - Pesar el equivalente a 24 mg de furosemida en un balón aforado de 100 mL. Añadir 70 mL de NaOH 0,1N. Esta solución se extrae durante 10 minutos en el baño ultrasónico o agitar hasta disolución y después de enfriar aforar con NaOH 0,1N. Tomar 2 mL y diluir con con NaOH 0,1N hasta 100 mL. Determinar las absorbancias a 271nm. Realizar los cálculos según el Anexo 5 f. Uniformidad de contenido - Determinar la uniformidad de contenido en la forma farmacéutica adquirida, analizando el porcentaje de contenido con respecto al contenido neto ver anexo 2. - Si la dosis ≥25 mg y proporción de Fármaco es ≥25%, se determinara la uniformidad de contenido por regla de tres con la relación del peso neto medio y el promedio de la valoración. - Si la dosis <25 mg o <25% se deberá analizar cada forma farmacéutica. - Verificar en la monografía para la forma farmacéutica analizada la cantidad declarada de principio activo, con los rangos determinar el valor T, con el valor T determinar que formula debemos usar según el caso en el que estemos para determinar el valor de M y la fórmula de AV a usarse ver anexo 3. - Elaborar una tabla de resultados como la expuesta en el anexo 4. g. Controles físicos Determinar desintegración, friabilidad y dureza cuando corresponda, se seguirá el procedimiento descrito en el manual de cada equipo. h. Identificación - Disolver cerca de 5mg en 10 mL de metanol. Transferir 1 mL de la solución a un Erlenmeyer, añadir 10 mL de HCl 0.1N y reflujar durante 15 minutos. Enfriar y añadir 15 mL de NaOH y 5 mL de Nitrado de Sodio, Dejar en reposo la mezclar por 3 minutos, luego añadir 5 mL de sulfamato de amonio (1:200). Mezclar y añadir 5 mL de N-1 naftiletilendiamina, produce un color rojo o rojo violeta. 4.3 Manejo de residuos, Tratamiento y etiquetado Desechos Farmacéuticos: Son aquellos medicamentos caducados, fuera de especificaciones y residuos de sustancias que han sido empleadas en cualquier tipo de procedimiento, dentro de los cuales se incluyen desechos producidos en laboratorios farmacéuticos que no cumplan los estándares de calidad, incluyendo sus empaques. Residuo Tratamiento Etiquetado HCl Diluir con agua desechar N/A en el lavabo NaOH Diluir con agua desechar N/A en el lavabo Cajas y blíster Destruir , eliminar en la N/A basura Polvos sobrantes Ninguno tabletas Moler Cápsulas Vaciar y colocar el contenido y la capsula en desechos sólidos - Llenar registro de ingredientes activos - Colocar en el recipiente etiquetado como residuos sólidos. 4.4 Lecturas adicionales sugeridas Capítulos USP 41 <701> Desintegración <857> Espectroscopia UV <905> Uniformidad de unidades de dosificación 5. Cuestionario a. Consulte en bibliografía un método alternativo para identificación del principio activo analizado. b. Añadir el espectro infrarrojo correspondiente al estándar de Furosemida. 6. Referencias bibliográficas ARCSA. (19 de 05 de 2020). Base de datos ARCSA. Obtenido de https://www.controlsanitario.gob.ec/base-de-datos/ Korolkovas, A., & Burckhalter, J. (1983). Compendio esencial de química farmacéutica. España: REVERTÉ. Laurence L. Brunton, PhD. (2007 undécima edición en español). Goodman & Gilman Las bases farmacológicas de la TERAPÉUTICA. Colombia: McGRAW-HILL INTERAMERICANA EDITORES, S.A. de C. V. León, O. (2001). Como explicar el concepto de interaccion sin estadística. Psicotherma, 159-165. Robles, L. (12 de 07 de 2012). Produccion de compridos por granulación húmeda. Obtenido de Ciencias Farmacologicas: http://www.pharmacologicalsciences.us/gelatincapsules/production-of-tablets-by-wet-granulation.html Rowe, R., Sheskey, P., & Quinn, M. (2009). Handbook of Pharmaceutical Excipients. USA: Pharmaceutical Press and American Pharmacists Association. USP41. (2018). FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS DE AMÉRICA Cuadragésima Primera Revisión. 12601 Twinbrook Parkway, Rockville, MD 20852,Estados Unidos de América: THE UNITED STATES PHARMACOPEIAL CONVENTION. 7. Anexos Anexo 1 Determinación de la uniformidad de masa PESO BRUTO (mg) PESO CAPSULA (mg) PESO (mg) 1 476,8 73,4 403,4 2 458,3 74,7 383,6 3 451,9 71,0 380,9 4 455,0 77,1 377,9 5 447,6 71,5 376,1 6 460,4 71,6 388,8 7 454,8 76,4 378,4 8 452,5 75,3 377,2 9 463,5 74,9 388,6 10 461,1 75,3 385,8 11 469,7 75,3 394,4 12 451,8 76,5 375,3 13 456,0 70,8 385,2 14 459,6 74,6 385,0 15 467,6 74,6 393,0 16 467,5 75,0 392,5 17 469,1 75,1 394,0 18 460,0 73,3 386,7 19 468,7 73,5 395,2 20 464,3 76,4 387,9 MÍNIMO 447,6 70,8 375,3 MÁXIMO 476,8 77,1 403,4 STD 7,55 1,88 7,52 PROMEDIO RSD Cálculo STD =DESVEST(valor1 al valor 20) Cálculo RSD (PROMEDIO/STD*100) PESO NETO Tabletas, tabletas recubiertas = peso de tableta Cápsulas= peso bruto - peso de cápsula Anexo 2 Determinación de Uniformidad de contenido NETO Anexo 3 Cálculo de uniformidad de contenido Anexo 4 Cálculo del contenido uniforme y determinación de AV PESO (mg) NETO %P.A 1 403,4 97,58 2 383,6 92,79 3 380,9 92,14 4 377,9 91,41 5 376,1 90,98 6 388,8 94,05 7 378,4 91,53 8 377,2 91,24 9 388,6 94,00 10 385,8 93,32 X 384,1 92,90 DSt 8,24 1,99 RSD 2,14 2,14 M 98,50 Fórml. AV AV = 98.5-X+k*DSt AV 10,38 C/NC C Anexo 5 Cálculo de la valoración de PA en tabletas 𝑚𝑔 𝑝. 𝑎/𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 = %𝑃𝐴 = 𝐴𝑀 × 𝐶𝑆𝑡 × 𝐹𝐷 × 𝑃𝑃(𝑚𝑔) 𝐴𝑠𝑡 × 𝑚𝑔 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 100% ∗ (𝑚𝑔 𝑝. 𝑎/𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠) 𝐷𝑜𝑠𝑖𝑠𝑚𝑔 𝑚𝑔 𝑝. 𝑎/𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑓𝑎𝑟𝑚𝑎𝑐é𝑢𝑡𝑖𝑐𝑎 = %𝑃𝐴 = 𝐴𝑀 × 𝐶𝑆𝑡 × 𝐹𝐷 × 𝑃𝑃(𝑚𝑔) 𝐴𝑠𝑡 × 𝑚𝑔 𝑃𝐴 100% ∗ (𝑚𝑔 𝑝. 𝑎/𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑓𝑎𝑟𝑚𝑎𝑐é𝑢𝑡𝑖𝑐𝑎) 𝑃𝑃(𝑚𝑔) PP= peso promedio FD= factor de disolución (Aforos/ Alícuotas)
