UCE-FOD-HIDALGO DIEGO

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
CARRERA DE ODONTOLOGÍA
Efecto inhibitorio del extracto de persea americana (semilla de aguacate) a
diferentes tiempos y concentraciones sobre streptococcus mutans.
Trabajo de titulación previo a la obtención del Título de Odontólogo
AUTOR: Hidalgo Muñoz Diego Paul
TUTOR: Dra. Dona Vidale Marina Antonia
Quito, 2021
©DERECHO DE AUTOR
Yo, Hidalgo Muñoz Diego Paul, en calidad de autor y titular de los derechos morales y
patrimoniales del trabajo de titulación “Efecto inhibitorio del extracto de Persea americana
(semilla de aguacate) a diferentes tiempos y concentraciones sobre Streptococcus mutans”,
modalidad Proyecto de Investigación, de conformidad con el Art. 114 del CÓDIGO
ORGÁNICO DE LA ECONOMÍA SOCIAL DE LOS CONOCIMIENTOS, CREATIVIDAD
E INNOVACIÓN, Concedo a favor de la Universidad Central del Ecuador una licencia
gratuita, intransferible y no exclusiva para el uso no comercial de la obra con fines estrictamente
académicos. Conservo a mi favor todos los derechos de autor sobre la obra, establecidos en la
normativa citada.
Así mismo, autorizo a la Universidad Central del Ecuador, para que realice la digitalización y
publicación de este trabajo de titulación en el repositorio virtual, de conformidad a lo dispuesto
en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior.
El autor declara que la obra objeto de la presente autorización es original en su forma de
expresión y no infringe el derecho de autor de terceros, asumiendo la responsabilidad por
cualquier reclamación que pudiera presentarse por esta causa y liberando a la Universidad de
toda responsabilidad.
Firma:
Hidalgo Muñoz Diego Paul
CC. 1716433493
Dirección electrónica: dphidalgo@uce.edu.ec
ii
APROBACIÓN DEL TUTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN
Yo, Dona Vidale Marina Antonia, en mi calidad de tutor del trabajo de titulación
modalidad Proyecto de investigación, elaborado por Hidalgo Muñoz Diego Paul, cuyo título
es: “EFECTO INHIBITORIO DEL EXTRACTO DE PERSEA AMERICANA
(SEMILLA
DE
AGUACATE)
A
DIFERENTES
TIEMPOS
Y
CONCENTRACIONES SOBRE STREPTOCOCCUS MUTANS”, previo a la
obtención de grado de Odontólogo, considero que el mismo reúne los requisitos y méritos
necesarios en el campo metodológico y epistemológico, para ser sometido a la evaluación por parte
del tribunal examinador que se designe por lo que APRUEBO, a fin de que el trabajo investigativo
sea habilitado para continuar con el proceso de titulación determinado por la Universidad Central
del Ecuador. En la ciudad de quito, 10 de mayo de 2021.
Atentamente,
Dra. Dona Vidale Marina Antonia
C.C 1708884422
iii
DEDICATORIA
Primero a Dios, por haberme permitido llegar hasta
aquí, con infinito amor y gratitud
A mis padres Gladys y Jorge, por ser mi eje
principal en cada paso, por su apoyo incondicional,
por inculcarme sus principios, valores y enseñarme
que, aunque sea difícil, con paciencia, perseverancia
y humildad todo es posible.
A mis hermanos Sandra, Pablo, Amparo y Doris por
su cariño, consejos y apoyo que me han brindado en
el trayecto de mi carrera, a mis lindos sobrinos, a mi
tierna abuelita Flerida Marina y a la persona que
complemento toda una familia cariñosa Mishelle mi
gran amor.
iv
AGRADECIMIENTOS
A mi Tutor de Tesis Dra. Marina Dona que junto al Dr.
Wilfrido Palacios supieron guiarme con paciencia en este
arduo trabajo, a los docentes de la Facultad de Odontología
de la Universidad Central del Ecuador, quienes
compartieron sus valiosos conocimientos a lo largo de este
tiempo.
A mi familia y a todas las personas que, de una u otra
manera, me apoyaron en la realización de mi Tesis.
v
ÍNDICE DE CONTENIDOS
©DERECHO DE AUTOR .................................................................................................................. ii
APROBACIÓN DEL TUTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN ................................................ iii
DEDICATORIA ................................................................................................................................ iv
AGRADECIMIENTOS ...................................................................................................................... v
ÍNDICE DE CONTENIDOS…………………………………………………………………………v
LISTA DE GRÁFICOS ................................................................................................................... viii
LISTA DE TABLAS.......................................................................................................................... ix
RESUMEN......................................................................................................................................... xi
ABSTRAC…………………………………………………………………………………………...xi
INTRODUCCIÓN .............................................................................................................................. 1
CAPÍTULO I....................................................................................................................................... 2
1.
PROBLEMA ........................................................................................................................... 2
1.1
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ........................................................................ 2
1.2 JUSTIFICACIÓN.................................................................................................................. 3
1.3
OBJETIVOS.................................................................................................................... 4
1.4
HIPÓTESIS ..................................................................................................................... 5
CAPÍTULO II ..................................................................................................................................... 6
2.
MARCO TEÓRICO ................................................................................................................ 6
Microbiología Oral. ..................................................................................................................... 6
Fitoterapia. ...................................................................................................................................... 7
2.1 Persea americana. .................................................................................................................. 7
Clorhexidina. ................................................................................................................................... 9
3.1 Estructura. ............................................................................................................................. 9
3.2 Mecanismo de acción. ........................................................................................................... 9
3.3 Sustantividad. ........................................................................................................................ 9
3.4 Indicaciones. .......................................................................................................................... 9
3.5 Interacciones........................................................................................................................ 10
3.6 Efectos secundarios. ............................................................................................................ 10
CAPÍTULO III .................................................................................................................................. 12
3.
METODOLOGÍA ................................................................................................................. 12
3.1 Diseño de la investigación................................................................................................... 12
3.2 Población de estudio y muestra ........................................................................................... 12
3.3
Criterios de inclusión y exclusión ................................................................................. 12
3.4
Conceptualización de variables ..................................................................................... 12
vi
3.6 Estandarización ................................................................................................................... 15
3.7 Procedimiento...................................................................................................................... 16
CAPÍTULO IV .................................................................................................................................. 20
Análisis de resultados .................................................................................................................... 20
CAPÍTULO V ................................................................................................................................... 25
DISCUSIÓN ................................................................................................................................. 25
CONCLUSIONES: ....................................................................................................................... 26
RECOMENDACIONES: .............................................................................................................. 27
BIBLIOGRAFÍA: ............................................................................................................................. 28
ANEXOS........................................................................................................................................... 32
vii
LISTA DE GRÁFICOS
Gráfico 1: Proceso de recolección y preparación de la materia prima. ............................... 16
Gráfico 2: Proceso de obtención del extracto acuoso del rallado de la Persea americana a
las tres concentraciones mencionadas. ................................................................................. 17
Gráfico 3: Activación de la cepa ATCC® 25175TM Streptococcus mutans. ...................... 18
Gráfico 4: Siembra de los discos en las cajas Petri con cada una de las concentraciones,
control positivo y control negativo. ...................................................................................... 18
Gráfico 5: Halo de inhibición a las 24 horas. ...................................................................... 18
Gráfico 6: Halo de inhibición a las 48 horas. ...................................................................... 19
Gráfico 7: Halo de inhibición a las 72 horas. ...................................................................... 19
viii
LISTA DE TABLAS
Tabla 1. Halos de inhibición (mm) ...................................................................................... 20
Tabla 2. Resultados de la prueba de normalidad ................................................................. 20
Tabla 3. Resultados test U Mann Whitney .......................................................................... 22
Tabla 4. Sensibilidad frente al Streptococcus Mutans por grupo, (%) ................................ 24
ix
LISTA DE ANEXOS
Anexo
Anexo
Anexo
Anexo
Anexo
Anexo
Anexo
1: Carta de aceptación de tutoría ............................................................................. 32
2: Certificado de idoneidad ética y experiencia del tutor. ....................................... 33
3: Certificado de idoneidad ética y experiencia del investigador ............................ 34
4: Certificado de no conflicto de intereses. ................................................................ 35
5: Declaración de confidencialidad ............................................................................ 36
6: Certificado de antiplagio. .................................................................................... 37
7: Certificado de traducción. ................................................................................... 38
x
TEMA: Efecto inhibitorio del extracto de Persea americana (semilla de aguacate) a
diferentes tiempos y concentraciones sobre Streptococcus mutans
Autor: Hidalgo Muñoz Diego Paul
Tutora: Dra. Dona Vidale Marina Antonia
RESUMEN
El propósito de este trabajo de investigación fue comprobar el efecto inhibitorio del extracto
de Persea americana (semilla de aguacate) en concentraciones del 50%, 75% y 100%, a las
24, 48 y 72 horas sobre Streptococcus mutans, debido a que estudios científicos han
demostrado que la semilla de aguacate contenía flavonoides, taninos y alcaloides que inhiben
el crecimiento bacteriano. Idris et al. en su investigación comprobaron que el extracto de
acetato de etilo de semilla de aguacate resultó efectivo contra microorganismos como
Staphylococcus aureus y Streptococcus pyogenes.
El diseño metodológico de esta
investigación fue de tipo experimental in vitro, analítico, observacional y longitudinal. La
muestra fue de 50 discos de papel filtro blanco, mismos que se distribuyeron de la siguiente
manera: 10 discos para cada concentración del extracto de Persea americana al 50%, 75% y
100%. Además 10 discos para la clorhexidina al 0,12% como control positivo y 10 discos
para el agua destilada utilizado como control negativo; haciendo un total de 5 grupos.
Además, se realizaron tres medidas en tres momentos de valoración a las 24, 48 y 72 horas.
El procedimiento realizado para la obtención del extracto de Persea americana fue a través
de la recolección de la materia prima en la provincia de Manabí en el Cantón El Carmen,
donde se trasladó hasta las instalaciones del Laboratorio de Ciencias de Alimentos de la
Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Laica Eloy Alfaro de Manabí.
PALABRAS CLAVE: STREPTOCOCCUS MUTANS, PERSEA AMERICANA,
CLORHEXIDINA AL 0.12
xi
TITLE: Inhibitory effect of the extract of Persea americana (avocado seed) at different times
and concentrations on Streptococcus mutans.
Author: Hidalgo Muñoz Diego Paul
Tutora: Dra. Dona Vidale Marina Antonia
ABSTRACT
The purpose of this research work was to verify the inhibitory effect of the extract of Persea
americana (avocado seed) in concentrations of 50%, 75% and 100%, at 24, 48 and 72 hours
on Streptococcus mutans, due to the fact that studies Scientists have shown that avocado seed
contained flavonoids, tannins, and alkaloids that inhibit bacterial growth. Idris et al. In their
research, they verified that the avocado seed ethyl acetate extract was effective against
microorganisms such as Staphylococcus aureus and Streptococcus pyogenes. The
methodological design of this research was experimental in vitro, analytical, observational
and longitudinal. The sample consisted of 50 white filter paper discs, which were distributed
as follows: 10 discs for each concentration of the Persea americana extract at 50%, 75% and
100%. In addition, 10 discs for 0.12% chlorhexidine as positive control and 10 discs for
distilled water used as negative control; making a total of 5 groups. In addition, three
measurements were made at three evaluation moments at 24, 48 and 72 hours. The procedure
carried out to obtain the extract of Persea americana was through the collection of the raw
material in the province of Manabí in the Canton El Carmen, where it was transferred to the
facilities of the Laboratory of Food Sciences of the Faculty of Agricultural Sciences from the
Eloy Alfaro Lay University of Manabí.
KEY WORDS: STREPTOCOCCUS MUTANS, PERSEA AMERICANA, CHLORHEXIDINE
0.12
xii
INTRODUCCIÓN
El microorganismo que se caracteriza por ser el principal colonizador de las piezas dentarias
en su superficie es Streptococcus mutans.(1) Este microrganismo es el principal causante del
desarrollo de caries dentales así como de placa bacteriana, hay que tener en cuenta que esta
no es dañina siempre y cuando no sea colonizada por otros microorganismos que son
causantes de producir toxinas, dando como resultado caries y enfermedad periodontal. (2)
La caries dental se caracteriza por ser de etiología multifactorial, es una patología de origen
infeccioso que produce una destrucción progresiva de las piezas dentales, afectando sus
tejidos duros. Se da como resultado de una interacción entre el huésped, las bacterias que se
encuentran en el biofilm dental, y una dieta rica en carbohidratos.
Clorhexidina al 0.12% ha sido el enjuague bucal mayormente utilizado ya que cumple con el
objetivo de controlar químicamente la placa bacteriana, hay que tener en cuenta que este a
pesar de sus ventajas, puede causar muchos efectos adversos, es por ello que la población
decide consumir productos de origen natural, es así que se da la necesidad de buscar
alternativas naturales con el fin de mejorar la salud bucal de las personas.
Debido a que la mayoría de las personas optan por el uso de productos de origen natural,
como consecuencia de los efectos adversos que se dan en los medicamentos de origen
sintético además de sus altos costos, se da el uso de las plantas medicinales como principal
alternativa. (3)
En los últimos años se han realizado investigaciones con el fin de encontrar sustancias
naturales que presenten propiedades farmacológicas. La presencia de propiedades
terapéuticas se ha encontrado en diferentes plantas basándose en sus principios activos y su
actividad biológica. (3)
En este contexto es que se ha estudiado el extracto de Persea americana (semilla de aguacate),
el aceite esencial de esta planta ha sido investigada por presentar efectividad antibacteriaa.
Sus hojas, frutos, semillas y corteza han demostrado poseer diversas actividades
farmacológicas (4), en los estudios fitoquímicos se ha tenido como resultado que las semillas
de aguacate poseen metabolitos secundarios como flavonoides, taninos, terpenoides,
alcaloides y saponinas que representan los componentes activos antibacterianos. (5)
1
CAPÍTULO I
1. PROBLEMA
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Uno de los principales problemas de salud pública a nivel mundial son las caries dentales,
esta enfermedad que se caracteriza por la destrucción de las piezas dentales es de origen
infeccioso y se da por la acción de las bacterias. Se va a producir en los tejidos duros del
diente una descomposición molecular como resultado de un proceso histoquímico y
bacteriano que lleva a una descalcificación y disolución de los materiales inorgánicos y a su
parte orgánica. La caries al ser de etiología multifactorial causada principalmente por tres
factores; el tiempo, huésped, dieta y microorganismos. Además, factores que colaboran para
que se produzca son; estrés, cultura, etnia, nivel socioeconómico, entre otros.
La presencia de Streptococcus mutans en la saliva es el principal causante de caries dental,
al encontrarse carbohidratos que producen ácidos el microorganismo aprovecha y produce la
desmineralización del esmalte. Es así que este microorganismo es considerado como un
factor de riesgo para la salud bucal del paciente. Es así que se da la importancia de buscar
antimicrobianos que sean específicos para la disminución de esta bacteria y evitar el riesgo
cariogénico.
Formulación de la pregunta de investigación:
¿Cuál es el efecto inhibitorio in vitro de extracto de Persea americana (semilla de aguacate)
frente a cepas de Streptococcus mutans ATCC 35668?
2
1.2 JUSTIFICACIÓN
Al no tener conocimiento de si el extracto de persea americana tiene la capacidad de inhibir
o no a Streptococcus mutans, se realizó este estudio, respaldado por Avilés 2018, quien
menciona que la sangre de drago inhibe el Streptococcus mutans. De esta manera es que se
crea la necesidad de encontrar el efecto inhibitorio de Streptococcus mutans, buscado
alternativas para mejorar los tratamientos en enfermedades bucodentales.
Teniendo una población de al menos el 80% que se basa en medicinas tradicionales con el
fin de aliviar o curar su enfermedad, incrementa la necesidad de la presente investigación, la
cual tiene como principal objetivo encontrar los principios activos y sus propiedades
terapéuticas las cuales se las aplicara frente a microorganismos. (8,9)
Muchas personas utilizan las plantas medicinales, así como sus extractos, su principal
elección son productos de origen natural ya que los medicamentos sintéticos muestran tener
diversos efectos secundarios, además de presentar un alto costo. (8)
El enjuague de clorhexidina al 0.12% ha sido el más utilizado para controlar químicamente
el biofilm de la cavidad bucal, pero al presentar muchos efectos adversos es que la terapia
con el extracto de Persea americana se presenta como una alternativa. (10) A partir de este
estudio se puede presentar más investigaciones con el fin de encontrar sustancias para el
cuidado bucal.
Las conclusiones a las que se pretende llegar es comprobar que tan efectivo puede ser para
inhibir al Streptococcus mutans, como lo fue la sangre de drago, según Avilés 2018. Los
resultados que obtendremos de este estudio se presentarán a la comunidad académica y
científica en caso de que sea positivo.
3
1.3 OBJETIVOS
1.3.1 Objetivo general
Comprobar el efecto inhibitorio del extracto de Persea americana (semilla de aguacate) al
50%, 75% y 100% de concentración a 24, 48 y 72 horas sobre la cepa de Streptococcus
mutans, teniendo en cuenta como control positivo la clorhexidina al 0,12% y como control
negativo, el agua destilada.
1.3.2 Objetivos específicos
1) Comprobar la efectividad antibacteriana del extracto de Persea americana (semilla de
aguacate) al 50%, 75% y 100% de concentración sobre cepas de Streptococcus
mutans.
2) Comprobar la efectividad antibacteriana del extracto de Persea americana (semilla de
aguacate) a las 24, 48, y 72 horas sobre cepas de Streptococcus mutans.
3) Comparar los halos de inhibición resultantes del extracto de Persea americana con los
obtenidos de los discos impregnados con Clorhexidina al 0,12% sobre cepas de
Streptococcus mutans.
4
1.4 HIPÓTESIS
1.4.1 Hipótesis de investigación, H1
El extracto de Persea americana (semilla de aguacate) al 50%, 75%, 100% y a las 24, 48 y
72 horas presentará igual o mayor efecto inhibitorio que la Clorhexidina al 0.12% como
control positivo, sobre Streptococcus Mutans.
1.4.1 Hipótesis Nula, H0
El extracto de Persea americana (semilla de aguacate) al 50%, 75%, 100% y a las 24, 48 y
72 horas presentará igual o menor efecto inhibitorio que la Clorhexidina al 0.12% como
control positivo, sobre Streptococcus Mutans.
5
CAPÍTULO II
2. MARCO TEÓRICO
Microbiología Oral.
Los microorganismos que se encuentran en la cavidad oral incluyen bacterias, arqueas,
hongos, protozoos y virus, siento así la microbiota oral una de las más diversas del cuerpo
humano refiriéndose a su composición. (11)
Hay que tener en cuenta que, en las superficies del diente, la lengua, el surco gingival va a
existir la formación de una biopelicula denominada placa. Los microorganismos encontrados
ahí no se adhieren directamente al diente, sin embargo, sobre este se forma una película de
proteínas salivares la cual funciona como medio de adhesión de microorganismos. (11)(12)
Para que los microorganismos sobrevivan tienen que formar unas comunidades llamadas
biopelículas, las cuales se van a ubicar en diferentes áreas de la cavidad bucal y se clasifican
de acuerdo a su localización; placa dental supragingival y placa subgingival. (11)
1.1 Streptococcus mutans.
La caries dental es la enfermedad infecciosa que más afecta a la población, es un proceso que
se caracteriza por la desmineralización y remineralización que a través del tiempo puede
producir una destrucción del diente, debido a la perdida de minerales. Diversas bacterias van
a intervenir en la formación de la placa bacteriana. Algunos de los microorganismos
encontrados en la caries dental son estreptococos del grupo mutans, Lactobacillus
spp y Actinomyces spp, teniendo como el principal causante a Streptococcus mutans. El
desequilibrio existente en las poblaciones de bacterias encontradas en el biofim son causantes
de caries y enfermedad periodontal. (13)
1.1.1 Morfología y características en cultivo.
Streptococcus es una bacteria gram positiva, la cual puede producir el cambio de pH 7 a pH
4.2 en un tiempo de 24 horas. Esta bacteria se presenta en forma de cadenas, y no es móvil.
Se caracteriza por ser un fermentador de lactosa, manitol, glucosa, insulina, dando como
resultado la producción de ácido. Su hábitat es la cavidad oral, tiene propiedades biológicas,
inmunológicas y genéticas. Se caracterizan por adherirse en las diferentes superficies de los
dientes y ser causantes de caries dental. (14)
1.1.2 Transmisión, Colonización y estabilidad de Streptococcus mutans en cavidad oral.
Microorganismos como los estreptococos del grupo mutans son los implicados
6
principalmente en las caries dentales. Para que se produzca la infección es importante que se
de la colonización de un patógeno. Es de gran importancia estudiar la capacidad de virulencia
de este microorganismo, así como la que tiene para sobrevivir en ambientes con condiciones
diferentes. Es parte fundamental el análisis de su correlación con la biodiversidad para
identificar su capacidad de colonización del individuo. (12,15,16)
1.1.2 Adherencia de Streptococcus mutans y desarrollo inicial de la caries.
Investigaciones realizadas han indicado que existe heterogeneidad genética, serológica y
bioquímica del microorganismo Streptococcus mutans. Este microorganismo presenta
diferentes especies las cuales son causantes de heterogeneidad debido a sus enzimas. Al
existir procedimiento como la serotipificación se puede determinar diferentes grupos y tipos
de streptococcus. (17)
Fitoterapia.
Con fines terapéuticos se utiliza las plantas medicinales a lo cual se lo ha denominado
fitoterapia, con el fin de diferenciarlas de la medicina convencional que es la forma actual de
curar las patologías. (18,19)
Como principal característica de la fitoterapia es el uso de matrices vegetales, siendo la
diferencia de la medicina convencional. Se puede utilizar tanto partes de la planta como es
sus hojas, raíces, etc., así como también la planta entera o por otro lado los productos de la
misma, que se obtienen mediante diferentes procedimientos teniendo como resultado
extractos de las mismas. Lo importante es que se encuentran diferentes compuestos en cada
parte de las plantas, compuestos que son de naturaleza química llamados fitocomplejos. (20)
2.1 Persea americana.
2.1.1 Descripción.
Árbol que se caracteriza por tener un tronco recto, corto y con corteza rugosa, hojas verdes
que forman un ramaje denso, este árbol puede llegar hasta 15 metros de altura. Produce un
fruto de color variable y con forma esférica de cascara gruesa. (21)
2.1.2 Composición química.
Persea americana, está compuesta por diferentes metabolitos como es alcanoides, y otros
derivados que contienen glicósidos, anillo de gurano, terpenoides, flavonoides y cumarinas.
(22)
7
2.1.3 Farmacodinamia.
Cada una de las partes de esta planta han sido investigadas con el fin de encontrar fines
terapéuticos, se ha puesto mayor interés en el aceite esencial, las hojas y el fruto (teniendo
en cuenta las partes como es la semilla, el epiarpio), se ha tenido como resultado de
investigaciones que el aceite esencial de Persea presenta propiedades antibacterianas, como
emoliente e hipocolesteremiante se ha descrito al aceite fijo. Es importante tener el
conocimiento de que esta planta ha sido adoptada por diversos países y no solo en su país de
origen, siendo utilizada en sus diferentes partes por sus múltiples propiedades. (23)
2.1.4 Propiedades medicinales.
Esta planta presente diversidad de metabolitos, siendo esta una de las principales causas de
su utilización, diversos estudios señalan la actividad farmacológica de esta especie teniendo
en cuenta que se encuentra tanto en sus hojas, frutos, semilla y corteza. (4)
La variedad existente de esta planta ha demostrado que existen componentes activos
similares en sus propiedades, sin embargo, existen componentes que se los puede aislar,
activos más específicos. Es así que existen similitudes en cuanto se refiere a las variedades
de extractos, en sus propiedades farmacológicas. (4)
2.1.5 Propiedades antimicrobianas.
En un estudio realizado con el fin de identificar las propiedades del aguacate mexicano, ya
que ha presentado un amplio uso en la medicina tradicional, se obtuvo como resultado que el
mismo presenta un péptido antimicrobiano el cual afecto al microorganismo Streptococcus
aureus al ser aplicado a partir de 50g/ml de la totalidad del péptido antimicrobiano, y
aumentando su efectividad al ser aplicado a 100g/ml. Sin embargo, este no presenta efectos
antibacterianos sobre algunos microorganismos como es el caso de Cándida albicans. Gracias
a estos resultados se considera que el péptido antimicrobiao puede ser un importante factor
para combatir los patógenos. (24)
Chia y Dykes (25), también realizaron un estudio en el que demostraron la efectividad y
propiedades antimicrobianas de esta planta. Ellos estudiaron los extractos metanólicos de la
semilla frente a diferentes bacterias. Se demostró la efectividad de este extracto frente a
Salmonella enteriditis, Citrobacter freundii, Pseudomonas aeruginosa y Enterobacter
acrogenes
8
Clorhexidina.
3.1 Estructura.
La clorhexidina es un compuesto cuyo pH es mayor a 3,5, se presenta como una base
dicatiónica, además presenta dos cargas positivas en sus extremos, dando como resultado que
esta sea interactiva con los aniones. (26)
3.2 Mecanismo de acción.
Tiene diversos mecanismos de acción en el que se encuentra principalmente el evitar que se
forme una nueva película adquirida, lo cual se da mediante la reducción de proteínas salivares
que se van a encontrar en las superficies dentales, también se encuentra implicados sulfatos,
carboxilos y fosfatos, los cuales van a ser bloqueados por este compuesto (27–29). A la
película adquirida que se encuentra en la superficie dental no se le van a unir mayor cantidad
de bacterias, de igual forma interviene en la desorganización de la placa bacteriana
(26,28,30,31). La desorganización de la placa bacteriana se da gracias a que la clorhexidina
desplaza el calcio, y de esta forma se impide la unión de estas. (28)
3.3 Sustantividad.
Aproximadamente durante 24 horas se ha reportado la clorhexidina activa en concentraciones
bajas, siento mayormente efectiva y evitando que las bacterias colonicen la cavidad oral
durante un tiempo efectivo de 8-12 horas. (30–32)
Tiene la capacidad de absorberse de forma rápida por la superficie de la bacteria lo cual nos
indica su alta sustantividad, además de factores que ayudan como es ser ligeramente alcalino
y su pH neutro. Este se une a las diferentes partes del diente, a la placa formada y sus bacterias
que la componen y a la película adquirida, una vez unida se va a liberar gradualmente,
dañando la estructura de la bacteria y evitando que esta sobreviva. (30–32)
La molécula de clorhexidina es liberada gracias a los iones de calcio que presentan las
glándulas salivales, estas van a fijarse en las mucosas mediante la capa de mucina. (30–32)
3.4 Indicaciones.
1. Control mecánico del biofilm oral.
2. Prevención y tratamiendo de diferentes enfermedades orales.
3. Ayuda a controlar los microorganismos cuando se realiza el raspado y alisado
radicular.
4. Pacientes que necesitan cirugías, antes y después de realizarla.
9
5. Pacientes que presentar riesgo de caries.
6. Ayuda a reducir el riesgo de alveolitis posterior a una exodoncia.
7. Minimiza el riesgo de infecciones y evita complicaciones.
8. Previo o durante la profilaxis en clínica, reduce significativamente la inflamación y
el sangrado.
9. Pacientes inmunodeprimidos, que se encuentran en tratamientos de radioterapia o
quimioterapia.
10. Ayuda en la disminución de las ulceras orales.
11. Pacientes con problemas de limitación en su higiene oral.
12. Pacientes con ortodoncia, mejora la salud y la disminución de placa dental.
13. Para tratar la halitosis oral. (33–35).
3.5 Interacciones.
La clorhexidina puede sufrir una inactivación como resultado de una asocioacion con floruro
sódico, o puede inactivarse al presentar una formulación galénica inadecuada, esto puede ser
parcial o total. (34,36–38)
El lauril sulfato sódico ha presentado tener gran interacción con la clorhexidina, es necesario
e importante esperar 30 minutos antes de la aplicación. (39,40)
3.6 Efectos secundarios.
Las interacciones de la clorhexidina con algunos componentes pueden crear pigmentaciones
de color marrón en las piezas dentarias, las mismas pueden también colocarse en
restauraciones o incluso en mucosas, se ha visto mayormente en el dorso de la lengua, sin
embargo, también hay que considerar que la concentración y la dosis de la misma puede ser
causante de estas pigmentaciones. Por otro lado, las pigmentaciones no son capaces de ir mas
allá de la superficie por lo cual con una profilaxis se logra la completa limpieza de las mismas.
Al encontrar estas pigmentaciones nos indican que el paciente está cumpliendo con el
tratamiento correctamente. (37)
Otro efecto que presenta un problema y ha sido encontrado frecuentemente es la alteración
del gusto del paciente, esto se puede evitar en parte si posterior al enjuague con clorhexidina
se utiliza agua para un enjuague bucal de la boca, es importante señalar que estos efectos
desaparecen totalmente una vez terminado el tratamiento con este compuesto.
10
Se ha encontrado de igual forma irritación en las mucosas o incluso descamaciones, también
en algunos pacientes que han presentado aumento de cálculo supragingivales, hay que tener
en cuenta que esto también depende de los hábitos de cada individuo. Estos cálculos son de
fácil eliminación y no representan un gran problema, de igual forma las afecciones bucales
desaparecerán una vez se complete el tratamiento. (37,41)
11
CAPÍTULO III
3. METODOLOGÍA
3.1 Diseño de la investigación
Experimental: Ya que tiene como propósito descubrir una situación en particular.
In vitro: El experimento fue realizado en un ambiente controlado fuera del organismo, en un
laboratorio con el seguimiento de las normas de bioseguridad.
Comparativo: se comparó el efecto de extracto de Persea americana (semilla de aguacate)
en tres concentraciones diferentes y clorhexidina al 0,12% sobre las cepas de Streptococcus
mutas.
3.2 Población de estudio y muestra
La muestra elegida fue no probabilística y por un muestreo a conveniencia conformada por
50 unidades experimentales (discos de papel), basándose en la metodología empleada en los
estudios de Avilés y cols. Se aplicó la técnica microbiológica de difusión en disco por medio
de halos de inhibición de la cepa de Streptococcus mutans (ATCC 35668), utilizando
concentraciones al 50%, 75% y 100% del extracto Persea americana.
3.3 Criterios de inclusión y exclusión
3.3.1
Criterios de inclusión

Cepas de Streptococcus mutans no contaminadas.

Cajas Petri con el caldo de cultivo agar Muller Hinton que fueron sometidas a proceso de
esterilización.

Cajas Petri con una siembra adecuada de Streptococcus Mutans en contacto con el
extracto de Persea americana.

Cajas Petri que después del proceso de incubación no presenten contaminación por otros
microorganismos.
3.3.2 Criterios de exclusión:

Cajas Petri que durante el procedimiento se rompan.

Cajas Petri que durante el procedimiento presenten algún tipo de daño.

Cajas Petri o discos que pueden contaminarse accidentalmente.
3.4 Conceptualización de variables
3.4.1 Variable independiente
12

Extracto de Persea americana (semilla de aguacate)
Sustancia que es de origen vegetal y se obtiene mediante las semillas secas de Persea
americana, siguiendo un proceso de maceración.
3.4.2 Variable dependiente

Efecto inhibitorio
Capacidad de eliminar e inhibir el crecimiento y desarrollo de bacterias, mediante ciertos
agentes, sin provocar daño en el organismo que se encuentra infectado.
3.4.3 Variable interviniente

Tiempo
Intervalo de tiempo en el cual serán medidos los halos de inhibición, resultado del extracto
de Persea americana (semilla de aguacate).
3.4.4 Control positivo

Clorhexidina al 0.12%
Sustancia que evita el crecimiento bacteriano en la cavidad oral, gracias a su acción
bactericida, siendo clave para el control del biofilm.
3.4.5 Control negativo

Suero fisiológico
Solución salina esterilizada.
13
3.5 Definición operacional de variables
Variable
Efecto inhibitorio.
Extracto de semilla de
aguacate (Persea
americana)
Tiempo
Clorhexidina al 0,12%
Suero fisiológico
Definición Operacional
Capacidad de eliminar e inhibir el
crecimiento y desarrollo de bacterias,
mediante ciertos agentes, sin provocar
daño en el organismo que se encuentra
infectado.
Sustancia que es de origen vegetal y se
obtiene mediante las semillas secas de
Persea americana, siguiendo un proceso
de maceración.
Intervalo de tiempo en el cual serán
medidos los halos de inhibición,
resultado del extracto de Persea
americana (semilla de aguacate).
Sustancia que evita el crecimiento
bacteriano en la cavidad oral, gracias a
su acción bactericida, siendo clave para
el control del biofilm.
Solución salina esterilizada.
Tipo
Dependiente
Clasificación
Cuantitativa
continua
Indicador Categórico
Nula (-) <8mm
Sensible (+)9-14mm
Muy sensible (++)15-19mm
Sumamente sensible
(+++)≥20mm
Escalas de
Medición
1
2
3
4
Independiente
Cuantitativa
discreta
Concentración
50%
75%
100%
1
2
3
Interviniente
Cuantitativa
discreta
24 horas
48 horas
72 horas
1
2
3
Nula (-) <8mm
Sensible (+)9-14mm
Muy sensible (++)15-19mm
Sumamente sensible
(+++)≥20mm
Nula (-) <8mm
Sensible (+)9-14mm
Muy sensible (++)15-19mm
Sumamente sensible
(+++)≥20mm
1
2
3
Control positivo
Control
negativo
14
Cuantitativa
continua
Cuantitativa
continua
4
1
2
3
4
3.6 Estandarización
El proceso experimental fue desarrollado exclusivamente por el investigador, quien estará
presente en todo el proceso de la investigación con guía de la Dra. Marina Dona, Tutora de
la tesis, docente de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecuador, quien
acondicionó y preparó al investigador.
Para este estudio fue utilizada una muestra no probabilística por conveniencia ya que los
elementos cumplieron tanto con los criterios de inclusión y exclusión.
Se determinó el diámetro de los halos de inhibición utilizando una regla milimetrada con
calibración de fábrica. Esto se efectuó por el investigador, quien fue guiado y capacitado por
la tutora de tesis, así como por el personal encargado del Laboratorio de Ciencias de
Alimentos de la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Laica Eloy Alfaro de
Manabí, en donde se realizó la presente investigación, con los permisos correspondientes.
Por lo tanto, el presente estudio fue intraobservador e interobservador.
Fue necesario la obtención del extracto de semilla de aguacate al 50%, 75% y 100% de
concentración, para lo cual se adquirieron los frutos, posterior a eso se realizó el rallado y
secado de las semillas. El proceso de elaboración del extracto se hizo mediante el método de
destilación y fue llevado a cabo en la Facultad de Ciencias Agropecuarias de la Universidad
Laica Eloy Alfaro de Manabí por alguien preparado para realizarlo.
Las cepas de Streptococcus mutans se obtuvieron a través de la empresa importadora
MEDIBAC. La activación de la misma se llevó a cabo en la Facultad de Ciencias
Agropecuarias de la Universidad Laica Eloy Alfaro de Manabí, todo el procedimiento de
activación y posterior incubación de las placas se realizó dentro de la cámara de flujo laminar,
siguiendo las indicaciones del proveedor.
Los datos fueron recogidos y codificados para ser almacenados en una tabla de recopilación
en Excel para posterior análisis estadístico en el software SPSS.
15
3.7 Procedimiento
Gráfico 1: Proceso de recolección y preparación de la materia prima.
La materia prima fue recolectada en la provincia de Manabí en el Cantón El Carmen, donde
se trasladó hasta las instalaciones del Laboratorio de Ciencias de Alimentos de la Facultad
de Ciencias Agropecuarias de la Universidad Laica Eloy Alfaro de Manabí. Un total de 12
kilogramos de semilla de Persea americana. Una vez en el laboratorio, se procedió a lavar,
desinfectar y secar a 70ºC. Para la obtención del extracto se procedió a rallar y luego a secar
a temperaturas de 45ºC y 50ºC, posteriormente se procedió a obtener el extracto acuoso a
50%, 75% y 100% de concentración.
16
Gráfico 2: Proceso de obtención del extracto acuoso del rallado de la Persea americana a las tres
concentraciones mencionadas.
Se utilizó un equipo de destilación certificado con (Norma ISO/IEC 17025. Requisito para
laboratorios de ensayo y calibración) en el que se mantuvo en una temperatura de 25 º C a
30 º C con la finalidad de evitar pérdidas de extractos esenciales por volatilización. Se
realizó tres destilaciones, cada una con una duración de 3h, se utilizó 5 kg de Persea rallada
para la concentración del 100%, 4kg de Persea rallada para la concentración del 75% y 3kg
de Persea rallada para el 50% de concentración.
La activación de la cepa de Streptococcus mutans se realizó en el interior de la cámara de
flujo laminar siguiendo las indicaciones del proveedor y cultivada en una infusión nutritiva
de caldo Tripticasa Soya Caldo (TSC) y además en Agar Mueller Hinton sangre, incubadas
por 24 horas en aerobiosis a 37°C, con una concentración ajustada a un nivel estándar de
McFarland del 0,5 (1,5x108 UFC/ml).
La siembra de la bacteria se realizó con un hisopo estéril, el cual fue sumergido en el tubo de
ensayo con la muestra y presionado contra la pared del mismo para remover los excesos, se
realizó la siembra en tres direcciones diferentes para lograr distribuir la bacteria en toda la
superficie del agar
Con el fin de determinar el efecto inhibitorio del extracto de Persea americana, se utilizaron
30 discos de papel filtro estériles de 6mm de diámetro, embebidos con las diluciones del
extracto (50, 75 y 100%) mediante una pipeta con una cantidad 20 µL en cada disco. Posterior
a ello se colocó los discos en cada caja Petri. Además, se realizó el control positivo con
17
clorhexidina al 0,12% y el control negativo con agua destilada.
Los controles fueron colocados con la finalidad de diferenciar el tamaño de los halos
inhibitorios y diferenciar la existencia de inhibición. Finalmente, las placas fueron
trasladadas a una jarra GasPak, para dar condiciones de anaerobiosis, y así lograr una
adecuada incubación de los microorganismos.
Gráfico 3: Activación de la cepa ATCC® 25175TM Streptococcus mutans.
Gráfico 4: Siembra de los discos en las cajas Petri con cada una de las concentraciones, control
positivo y control negativo.
Gráfico 5: Halo de inhibición a las 24 horas.
18
Gráfico 6: Halo de inhibición a las 48 horas.
Gráfico 7: Halo de inhibición a las 72 horas.
19
CAPÍTULO IV
Análisis de resultados
En el presente estudio se comprobó el efecto inhibitorio del aceite esencial de Persea
americana al 50, 75 y 100% de concentración a las 24, 48 y 72 horas sobre la cepa de
Streptococcus Mutans, teniendo en cuenta como control positivo la Clorhexidina al 0.12% y
como control negativo el agua destilada. Los resultados de la medida del halo de inhibición
fueron obtenidos del experimento en el Laboratorio de Ciencias de Alimentos, de la Facultad
de Ciencias Agropecuarias, Universidad Laica Eloy Alfaro de Manabí (ULEAM).
Tabla 1. Halos de inhibición (mm)
# de
disc
o
Tie
mp
D1
D2
D3
D4
D5
D6
D7
D8
D9
D10
50%
24
H
8
8
8
8
9
8
8
9
8
9
75%
Clorhexidina
al 0.12%
100%
agua destilada
48
H
10
10
11
12
11
10
72
H
12
11
11
12
11
12
24
H
13
13
13
13
13
13
48
H
14
13
13
13
14
13
72
H
18
17
18
17
17
17
24
H
16
15
16
15
15
15
48
H
20
19
19
19
19
19
72
H
24
22
23
22
24
23
24
H
21
21
21
22
20
20
48
H
21
21
21
21
21
21
72
H
21
21
21
21
21
21
11
10
11
10
11
12
11
12
13
13
13
13
13
14
13
14
17
18
17
18
15
16
15
16
20
19
19
20
23
24
23
24
20
20
20
20
21
21
21
21
21
21
21
21
24
H
5
5
5
5
5
5
5
48
H
5
5
5
5
5
5
5
72
H
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
Elaborado por: Diego Hidalgo y Marina Dona
Tabla 2. Resultados de la prueba de normalidad
GRUPO
Persea
americana50%
(24h)
Persea
americana50%
(48h)
Kolmogorov-Smirnova
Estadístic
o
Gl
Sig.
0,021
10
0,000
0,021
10
0,000
20
Shapiro-Wilk
Estadístic
o
Gl
0,021
10
0,021
10
Sig.
0,021
0,021
Persea
americana50%
(72h)
Persea
americana75%
(24h)
Persea
americana75%
(48h)
Persea
americana75%
(72h)
Persea
americana100
% (24h)
Persea
americana100
% (48h)
Persea
americana100
% (72h)
Clorhexidina al
0.12% (24h)
0,021
10
0,000
0,021
10
0,021
0,013
10
0,000
0,013
10
0,012
0,013
10
0,004
0,013
10
0,012
0,013
10
0,004
0,013
10
0,012
0,009
10
0,009
0,009
10
0,008
0,009
10
0,009
0,008
10
0,008
0,009
10
0,009
0,008
10
0,008
0,010
10
0,010
0,008
10
0,010
Clorhexidina al
0.12% (48h)
0,010
10
0,010
0,011
10
0,010
Clorhexidina al
0.12% (72h)
0,010
10
0,010
0,011
10
0,010
Agua destilada
(24h)
0,500
10
0,500
0,500
10
0,500
Agua destilada
(48h)
0,500
10
0,500
0,500
10
0,500
Agua destilada
(72h)
0,500
10
0,500
0,500
10
0,500
Elaborado por: Diego Hidalgo y Marina Dona
Se observó que tanto para la prueba de Kolmogorov con corrección de Lilliefors (n <50) o
con la prueba de Shapiro Wilks, los datos referidos al halo de inhibición se ajustaron a la
distribución normal (p<0,05) en todos los grupos, incluso en algunos grupos los valores
fueron constantes entre los dos estadísticos (Persea americanaa las tres concentraciones y
control tanto negativo como positivo), por lo que fue necesario emplear la estadística no
21
paramétrica para el análisis inferencial.
En las dos pruebas se pudo demostrar que se cumple la hipótesis de investigación. Que existe
un alto nivel de inhibición del extracto acuoso de Persea americana en las tres
concentraciones y a los tres tiempos se logra tener un efecto inhibitorio, entre muy sensible
y super sensible, según la escala de Duraffourd.
ESTATUS
Sensibilidad nula (-)
Sensible (+)
Muy sensible (++)
Sumamente sensible (+++)
MEDIDAS EN MM
< 8 mm
>8mm ≤14mm
>14-20mm
>20mm
Como Podemos identificar, el extracto al 75 y 100% supera los 14 mm, por lo tanto, es muy
sensible y sumamente sensible, inclusive supera al Gold Estándar, que llega a 21mm.
Tabla 3. Resultados test U Mann Whitney
Pers
ea
50%
(48h
)
Persea
a 50%
(24h)
Persea
a 50%
(48h)
Persea
a 50%
(72h)
Persea
a 75%
(24h)
Persea
a 75%
(48h)
Persea
a 75%
(72h)
Persea
a 100%
(24h)
Pers
ea a
50
%
(72
h)
0,21 0,21
Pers
ea a
75%
(24h
)
Pers
ea a
75%
(48h
)
Pers
ea a
75%
(72h
)
Perse
aa
100
%
(24h)
Perse
aa
100
%
(48h)
Perse
aa
100
%
(72h)
Cl
0.12
%
(24h
)
Cl
0.12
%
(48h
)
Cl
0.12
%
(72h
)
0,22
0,13
0,11
0,08
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,21
0,23
0,14
0,11
0,08
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,21
0,12
0,10
0,08
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,12
0,10
0,08
0,02
0,02
0,00
0,00
0,00
0,10
0,08
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,08
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,37
0,27
0,00
0,00
0,00
22
Persea
a 100%
(48h)
Persea
a 100%
(72h)
Clorhex
idina al
0.12%
(24h)
Clorhex
idina al
0.12%
M
(48h)
Clorhex
idina al
0.12%
M
(72h)
0,02
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
Elaborado por: Diego Hidalgo y Marina Dona
Partiendo del hecho de que se considera diferencia significativa cuando la significancia
p<0,05, puede inferirse que el Persea americana al 50% difiere en sus resultados con el Persea
americana al 75% y 100% y presenta diferencia respecto al Persea americana al 100% y con
el control positivo. En conclusión, el Persea americana al 75% difiere en su capacidad
inhibitoria respecto al Persea americana al 100% y al control positivo. El Persea americana
al 100% difiere significativamente superando incluso al Gold Estándar, respecto al control
positivo. Así mismo, es evidente que, pese a las diferencias numéricas, dicha diferencia no
es significativa al variar el tiempo (para una misma concentración), es decir la capacidad
inhibitoria puede considerarse como estable desde el 50% de concentración.
En base a la evidencia estadística, se determinó que la capacidad inhibitoria es importante
frente a Streptococcus Mutans, para el extracto de Persea americana al 100%, aunque ésta es
mayor respecto al control positivo.
23
Tabla 4. Sensibilidad frente al Streptococcus Mutans por grupo, (%)
VALORACIÓN
Muy
Sensible
sensible
60%
Grupo
Nula
Persea a 50%
70,0%
(24h)
Persea a 50%
70,0%
60%
(48h)
Persea a 50%
70,0%
60%
(72h)
Persea a 75%
(24h)
Persea a 75%
(48h)
Persea a 75%
(72h)
Persea a
100% (24h)
Persea a
100% (48h)
Persea a
100% (72h)
Cl al 0.12%
(24h)
Cl al 0.12%
(48h)
Cl al 0.12%
(72h)
Elaborado por: Diego Hidalgo y Marina Dona
24
Sumamente
sensible
90%
90%
90%
97%
99%
97%
99%
97%
99%
95%
95%
95%
CAPÍTULO V
DISCUSIÓN
El uso de plantas medicinales representa una gran importancia en la medicina tradicional. El
conocimiento de ciertas especies aun es desconocido, dando la importancia de investigar los
recursos naturales, teniendo en cuenta requerimientos técnicos que en la actualidad se exige.
Así se logrará determinar los principios activos de las plantas medicinales y estudiar su
actividad. En el área de la salud dental algunas plantas medicinales son utilizadas en diversas
formulaciones farmacéuticas como es los enjuagues bucales, colutorios, soluciones tópicas,
pasta dental, entre otros. Hay que tener en cuenta que los beneficios son mejores tanto en el
sentido terapéutico como económico. (3)
Anggriana y cols (7), demostraron que extracto de semilla de aguacate tenía una capacidad
de inhibición muy fuerte contra Streptococcus mutans, en su estudio el diámetro medio de la
zona de inhibición del extracto de semilla de aguacate fue de 21,8 mm, demostrando su
efectividad antibacteriana. En el presente estudio la inhibición máxima lograda con el
extracto fue de 24 mm de diámetro, incluso superando al Gold estándar que fue la
clorhexidina al 0.12% la cual logro 21 mm de diámetro en su halo de inhibición.
En un estudio realizado por Nahak y cols (42), compararon la efectividad antibacteriana del
extracto de etanol de hoja de beluntas (Pluchea indica L) frente a hoja de aguacate (Molino
Persea americana), demostrando que extracto de etanol de hoja de aguacate al 50% mostró
efectividad con un nivel de significancia de 11.13 sobre Streptococcus mutans, sin embargo,
extracto de etanol de hoja de beluntas resulto ser más eficaz que otros materiales de prueba
con un 11.13 de significancia al 25%.
Resultando la importancia de extractos de plantas medicinales en el uso como un ingrediente
de enjuague bucal antiséptico, con el fin de inhibir el crecimiento de placa en los dientes, sin
el riesgo de efectos secundarios.
25
CONCLUSIONES:
1. El extracto de persea amerinaca (semilla de aguacate) a la concentración del 100%
presentó un efecto inhibitorio in vitro sobre Streptococcus mutans, produciendo un halo
de inhibición de 24 mm a las 72 horas.
2. El extracto de persea amerinaca (semilla de aguacate) a la concentración del 75%
presentó un efecto inhibitorio in vitro menor a la concentración del 100% sobre
Streptococcus mutans, produciendo un halo de inhibición promedio de 18mm a las 72
horas.
3. El extracto de persea amerinaca (semilla de aguacate) a la concentración del 50%
presento un efecto inhibitorio in vitro menor a la concentración del 75% sobre
Streptococcus mutans, produciendo un halo de inhibición promedio de 12mm a las 72
horas.
4. La clorhexidina al 0.12% presentó un efecto inhibitorio in vitro sobre Streptococcus
mutans, produciendo un halo de inhibición promedio de 21mm.
5. El Streptococcus mutans demostró ser sensible in vitro al extracto de persea americana
(semilla de aguacate) en concentraciones del 50, 75 y 100%, sin embargo, se observó que
el microorganismo presenta mayor sensibilidad al 100% transcurridas las 72 horas,
incluso superando al Gold estándar que es la clorhexidina al 0.12%.
26
RECOMENDACIONES:
1. Evaluar el efecto inhibitorio del extracto de persea americana (semilla de aguacate) frente
a bacterias periodontopatógenas como Porphyromona gingivalis.
2. Realizar estudios “in vivo” que evalúen el comportamiento del extracto de persea
americana (semilla de aguacate) en la cavidad oral y los posibles efectos secundarios que
puedan afectar a los tejidos orales.
3. Determinar la concentración mínima inhibitoria (CIM) del extracto de persea americana
(semilla de aguacate) y la concentración mínima bactericida (CMB) frente a
Streptococcus mutans.
27
BIBLIOGRAFÍA:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
KÖHLER B, PETTERSSON B ‐M, BRATTHALL D. Streptococcus mutans in plaque
and saliva and the development of caries. Eur J Oral Sci [Internet]. 1981 [cited 2021
Feb 16];89(1):19–25. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6940227/
EMILSON CG, BOWEN WH, ROBRISH SA, KEMP CW. Effect of the antibacterial
agents octenidine and chlorhexidine on the plaque flora in primates. Eur J Oral Sci
[Internet]. 1981 [cited 2021 Feb 16];89(5):384–92. Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6952538/
María MQ, Cotos RC. MEDICINE PLANTS USED IN ODONTOLOGY (PART I) *
María Rosario Calixto Cotos. Vol. 3, Kiru. 2006.
Dabas D, Shegog R, Ziegler G, Lambert J. Avocado (Persea americana) Seed as a
Source of Bioactive Phytochemicals. Curr Pharm Des [Internet]. 2013 Sep 9 [cited
2021
Feb
16];19(34):6133–40.
Available
from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23448442/
Jiménez-Arellanes A, Luna-Herrera J, Ruiz-Nicolás R, Cornejo-Garrido J, Tapia A,
Yépez-Mulia L. Antiprotozoal and antimycobacterial activities of Persea americana
seeds. BMC Complement Altern Med. 2013;13.
Idris S, Ndukwe G, Gimba C. Preliminary phytochemical screening and antimicrobial
activity of seed extracts of Persea americana (avocado pear). Bayero J Pure Appl Sci
[Internet]. 2010 Aug 26 [cited 2021 Jun 10];2(1):173–6. Available from:
https://www.ajol.info/index.php/bajopas/article/view/58538
Bujung AH, Homenta H, Khoman JA. Inhibición del extracto de semilla de aguacate
( Persea americana Molino.) contra el crecimiento Streptococcus mutans. 2018;5.
EDUARDO RENÉ LAGOS LA ROSA. Determinación de la actividad antibacteriana
in vitro del aceite esencial Thymus vulgaris L “Tomillo” frente a Porphyromonas
gingivalis ATCC 33277 causante de gingivitis [Internet]. [cited 2021 Mar 12].
Available from: https://1library.co/document/yevjxerz-determinacion-actividadantibacteriana-esencial-tomillo-porphyromonas-gingivalis-gingivitis.html
Benalcázar ALC, Marina Alejandra Cabrera Árias, Ibarra MCB. Efecto antibacteriano
del extracto etanólico del botoncillo (ACMELLA REPENS) sobrePorphyromona
gingivalis: Estudio in Vitro [Internet]. [cited 2021 Mar 12]. Available from:
https://es.scribd.com/document/411529735/117-365-1-PB
Luque CAE. Propiedades y uso de la clorhexidina en el tratamiento periodontal no
quirúrgico y quirúrgico [Internet]. [cited 2021 Mar 12]. Available from:
https://www.researchgate.net/publication/336239596_Propiedades_y_uso_de_la_clo
rhexidina_en_el_tratamiento_periodontal_no_quirurgico_y_quirurgico
M.D. Ferrer García, A. López López, A. Camelo-Castillo, A. Simón-Soro AM. La
microbiota oral [Internet]. 2016 [cited 2021 Feb 16]. p. 7. Available from:
https://www.researchgate.net/publication/315812028_La_microbiota_oral
Nadell CD, Xavier JB, Levin SA, Foster KR. The evolution of quorum sensing in
bacterial biofilms. PLoS Biol [Internet]. 2008 Jan [cited 2021 Feb 16];6(1):0171–9.
Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18232735/
M, ESCRIBANO P, MATESANZ A B. Pasado, presente y futuro de la microbiología
de la periodontitis [Internet]. 2005 [cited 2021 Feb 16]. p. 79–87. Available from:
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1699-65852005000200004
Hamada S, Slade HD. Biology, immunology, and cariogenicity of Streptococcus
28
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
mutans [Internet]. Vol. 44, Microbiological Reviews. American Society for
Microbiology (ASM); 1980 [cited 2021 Feb 16]. p. 331–84. Available from:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC373181/
Cvitkovitch DG, Li Y-H, Ellen RP. Quorum sensing and biofilm formation in
Streptococcal infections. J Clin Invest [Internet]. 2003 Dec 1 [cited 2021 Feb
16];112(11):1626–32. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14660736/
Rojas-Sánchez, Fátima. ALGUNAS CONSIDERACIONES SOBRE CARIES
DENTAL, FLUORUROS, SU METABOLISMO Y MECANISMOS DE ACCIÓN.
Acta Odontológica Venez [Internet]. 2013 [cited 2021 Feb 16];46(4). Available from:
http://saber.ucv.ve/ojs/index.php/rev_aov/article/view/4424
Juan Carlos Ojeda-Garcés, Eliana Oviedo-García LAS. Streptococcus mutans and
dental caries [Internet]. 2013 [cited 2021 Feb 16]. Available from:
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120971X2013000100005
Bodeker G, Kronenberg F. A public health agenda for traditional, complementary, and
alternative medicine [Internet]. Vol. 92, American Journal of Public Health. American
Public Health Association Inc.; 2002 [cited 2021 Feb 16]. p. 1582–91. Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12356597/
Avello M, Cisternas I. Fitoterapia, sus orígenes, características y situación en Chile.
Vol. 138, Artículo de revisión rev Med chile. 2010.
Hoffmann -Cristina Farga Jorge Lastra -Esteban Veghazi A, Fundación Claudio Gay
E. PLANTAS MEDICINALES DE USO COMÚN EN CHILE.
Jorge Silva. Monografía del aguacate sagarpa [Internet]. [cited 2021 Feb 16].
Available
from:
https://www.academia.edu/30187106/Monografía_del_aguacate_sagarpa
Yasir M, Das S, Kharya M. The phytochemical and pharmacological profile of persea
americana Mill [Internet]. Vol. 4, Pharmacognosy Reviews. Pharmacogn Rev; 2010
[cited
2021
Feb
16].
p.
77–84.
Available
from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22228945/
MHT. Palto Persea americana Mill [Internet]. [cited 2021 Feb 16]. Available from:
http://www.arboretum.ufm.edu/arboles/images/Persea_americana_2.jpgUnaabejasob
reunaflor.http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Persea_americana_flowers_3.JPG
Guzmán-Rodríguez JJ, López-Gómez R, Suárez-Rodríguez LM, Salgado-Garciglia R,
Rodríguez-Zapata LC, Ochoa-Zarzosa A, et al. Antibacterial activity of defensin
PaDef from avocado fruit (Persea americana var. drymifolia) expressed in endothelial
cells against escherichia coli and staphylococcus aureus. Biomed Res Int [Internet].
2013 [cited 2021 Feb 16];2013. Available from: /pmc/articles/PMC3844270/
Raymond Chia TW, Dykes GA. Antimicrobial activity of crude epicarp and seed
extracts from mature avocado fruit (Persea americana) of three cultivars. Pharm Biol
[Internet]. 2010 Jul [cited 2021 Feb 16];48(7):753–6. Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20645772/
Fardal O, Turnbull RS. A review of the literature on use of chlorhexidine in dentistry.
[Internet]. Vol. 112, Journal of the American Dental Association (1939). J Am Dent
Assoc; 1986 [cited 2021 Feb 16]. p. 863–9. Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2940282/
Rolla G, Melsen B. On the mechanism of the plaque inhibition by chlorhexidine. J
Dent Res. 1975;54(Spec B):57–62.
29
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.
39.
40.
41.
Greenstein G, Berman C, Jaffin R. Chlorhexidine: An Adjunct to Periodontal Therapy.
J Periodontol [Internet]. 1986 Jun 1 [cited 2021 Feb 16];57(6):370–7. Available from:
http://doi.wiley.com/10.1902/jop.1986.57.6.370
Lang NP, Brecx MC. Chlorhexidine digluconate–an agent for chemical plaque control
and prevention of gingival inflammation. J Periodontal Res. 1986;21:74–89.
Case DE. Safety of Hibitane I. Laboratory experiments. J Clin Periodontol [Internet].
1977
[cited
2021
Feb
16];4(5):66–72.
Available
from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/275278/
Yankell SL, Moreno OM, Saffir AJ, Lowary RL, Gold W. Basic Biological Sciences:
Effects of Chlorhexidine and Four Antimicrobial Compounds on Plaque, Gingivitis,
and Staining in Beagle Dogs. J Dent Res [Internet]. 1982 [cited 2021 Feb
16];61(9):1089–93. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6763045/
Bonesvoll P, Lökken P, Rölla G, Paus PN. Retention of chlorhexidine in the human
oral cavity after mouth rinses. Arch Oral Biol [Internet]. 1974 [cited 2021 Feb
16];19(3):209–12. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/4525807/
Chlorhexidine (CHX) | Perio Expertise [Internet]. [cited 2021 Feb 16]. Available from:
https://www.perioexpertise.co.uk/chlorhexidine-chx/
BASCONES A y M. Antisépticos orales: Revisión de la literatura y perspectiva actual
[Internet].
2006
[cited
2021
Feb
16].
Available
from:
http://scielo.isciii.es/scielo.php?pid=S169965852006000100004&script=sci_abstract&tlng=es
van den Broek AMWT, Feenstra L, de Baat C. A review of the current literature on
aetiology and measurement methods of halitosis [Internet]. Vol. 35, Journal of
Dentistry. J Dent; 2007 [cited 2021 Feb 16]. p. 627–35. Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17555859/
Mendieta C, Vallcorba N, Binney A, Addy M. Comparison of 2 chlorhexidine
mouthwashes on plaque regrowth in vivo and dietary staining in vitro. J Clin
Periodontol [Internet]. 1994 Apr 1 [cited 2021 Feb 16];21(4):296–300. Available
from: http://doi.wiley.com/10.1111/j.1600-051X.1994.tb00321.x
Quirynen M, Avontroodt P, Peeters W, Pauwels M, Coucke W, van Steenberghe D.
Effect of different chlorhexidine formulations in mouthrinses on de novo plaque
formation. J Clin Periodontol [Internet]. 2001 Dec [cited 2021 Feb 16];28(12):1127–
36. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11737510/
de Freitas CS, Diniz HF, Gomes JB, Sinisterra RD, Cortés ME. Evaluation of the
substantivity of chlorhexidine in association with sodium fluoride in vitro. Pesqui
Odontol Bras [Internet]. 2003 [cited 2021 Feb 16];17(1):78–81. Available from:
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S151774912003000100015&lng=en&nrm=iso&tlng=en
Barkvoll P, Rølla G, Svendsen AK. Interaction between chlorhexidine digluconate and
sodium lauryl sulfate in vivo. J Clin Periodontol [Internet]. 1989 [cited 2021 Feb
16];16(9):593–5. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2794095/
Van Strydonck DAC, Demoor P, Timmerman MF, Van Der Velden U, Van Der
Weijden GA. The anti-plaque efficacy of a chlorhexidine mouthrinse used in
combination with toothbrushing with dentifrice. J Clin Periodontol [Internet]. 2004
Aug
[cited
2021
Feb
16];31(8):691–5.
Available
from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15257749/
Gjermo P, Bonesvoll P, Rölla G. Relationship between plaque-inhibiting effect and
30
42.
retention of chlorhexidine in the human oral cavity. Arch Oral Biol [Internet]. 1974
[cited
2021
Feb
16];19(11):1031–4.
Available
from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/4531857/
Nahak MM, Tedjasulaksana R, Sumerti NN. Ability difference of Beluntas Leaf
(Pluchea indica L) ethanol extract and avocado leaf (Persea americana Mill) ethanol
extract in Inhibiting caries-causing Streptococcus mutans Bacteria Growth. Bali Med
J. 2017 Sep 6;6(3).
31
ANEXOS
Anexo 1: Carta de aceptación de tutoría
ACEPTACIÓN DE TUTORÍA(A2A)
Quito, DM 11/01/21
Yo, Dra. Marina Antonia Dona Vidale, Docente de la Facultad de Odontología, una vez que he revisado
el tema propuesto como proyecto de investigación de grado titulado: Efecto inhibitorio del extracto de
Persea americana (semilla de aguacate) a diferentes tiempos y concentraciones sobre Streptococcus
mutans.
PERTENECIENTE
AL
ÁREA
DE
CONOCIMIENTO:
Periodoncia
LÍNEA
DE
INVESTIGACIÓN: Microbiología del periodonto, del estudiante: HIDALGO MUÑOZ DIEGO PAUL
CI: 1716433493 me comprometo legalmente y asumo la responsabilidad de tutorear este proyecto de tesis,
en todos sus aspectos: científico, ético, metodológico, semántico, estadístico y pertinente, el mismo que
tendrá aporte investigativo adecuado a la carrera, que ha sido revisado en el banco de tesis y no tiene
similitud a otros temas anteriormente presentados, al final del proceso se entregará el certificado del
programa antiplagio, y un certificado de culminación de la investigación, de manera que el estudiante
podrá continuar con su trámite administrativo correspondiente.
………………………………………..
…………………………………………………
TUTOR
ESTUDIANTE
DRA: Dona Marina
SR: Hidalgo Diego
CI. 1708884422
CI. 1716433493
32
ANEXO 2: Certificado de idoneidad ética y experiencia del tutor.
CERTIFICADO DE IDONEIDAD ÉTICA Y EXPERIENCIA DEL TUTOR
Yo Dra. Marina Antonia Dona Vidale con C.I: 1708884422 tutora del proyecto de
investigación EFECTO INHIBITORIO DEL EXTRACTO DE PERSEA
AMERICANA (SEMILLA DE AGUACATE) A DIFERENTES TIEMPOS Y
CONCENTRACIONES SOBRE STREPTOCOCCUS MUTANS., declaro tener
experiencia en proyectos de investigación en virtud de poseer título de cuarto nivel en
periodoncia y además de ser docente de la Facultad de Odontología dela Universidad
Central del Ecuador, para supervisar y aportar de manera científica y desinteresada al
presente proyecto de investigación.
Atentamente
Marina Antonia Dona
Vidale
C.I: 1708884422
TUTORA
33
Anexo 3: Certificado de idoneidad ética y experiencia del investigador
CERTIFICADO DE IDONEIDAD ÉTICA Y EXPERIENCIA DEL INVESTIGADOR
Yo Hidalgo Muñoz Diego Paul con C.I: 1716433493 egresado de la Facultad de
Odontología, autor del proyecto de investigación EFECTO INHIBITORIO DEL
EXTRACTO DE PERSEA AMERICANA (SEMILLA DE AGUACATE) A
DIFERENTES
TIEMPOS
Y
CONCENTRACIONES
SOBRE
STREPTOCOCCUS
MUTANS., declaro que esta es la primera vez que realizo este tipo de estudios,pero
tengo el conocimiento teórico que he recibido durante la carrera, además me he
preparado con artículos científicos y libros como para poder llevar a cabola siguiente
investigación.
Atentamente
Hidalgo Muñoz Diego Paul
C.I: 1716433493
INVESTIGADOR
34
Anexo 4: Certificado de no conflicto de intereses.
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
SUBCOMITÉ DE ÉTICA DE INVESTIGACIÓN EN SERES HUMANOS
Aprobado por MSP: Of. N°MSP-VGVS-2017-0955-O /21-11-2017
CERTIFICADO DE NO CONFLICTO DE INTERESES
Nosotros, MARINA ANTONIA DONA VIDALE Y DIEGO PAUL HIDALGO MUÑOZ, en
nuestra calidad de Investigadores del estudio: Efecto inhibitorio del extracto de Persea
americana (semilla de aguacate) a diferentes tiempos y concentraciones sobre Streptococcus
mutans., dejamos expresa constancia de que no tenemos conflicto de intereses antes, durante y
después de la ejecución del proyecto.
Además, somos conscientes de las implicaciones legales de la firma del presente certificado.
En fe y constancia de aceptación de esta afirmación, firmamos como investigadores del presente
estudio.
Quito, 23 de marzo del 2021
EQUIPO DE INVESTIGACIÓN
APELLIDOS Y NOMBRES
POSICIÓN EN EL
ESTUDIO
CÉDULA IDENTIDAD
TUTORA
DONA VIDALE
MARINA ANTONIA
HIDALGO MUÑOZ
DIEGO PAUL
1708884422
ESTUDIANTE
INVESTIGADOR
1716433493
35
FIRMA
Anexo 5: Declaración de confidencialidad
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR SUBCOMITÉ DE ÉTICA
DE INVESTIGACIÓN EN SERES HUMANOS
Aprobado por MSP: Of. N°MSP-VGVS-2017-0955-O /21-11-2017
DECLARACIÓN DE CONFIDENCIALIDAD
Nosotros, , MARINA ANTONIA DONA VIDALE Y DIEGO PAUL HIDALGO MUÑOZ, en
nuestra calidad de Investigadores del estudio: Efecto inhibitorio del extracto de Persea americana (semilla de
aguacate) a diferentes tiempos y concentraciones sobre Streptococcus mutans., dejamos expresa constancia
de que hemos proporcionado de manera veraz y fidedigna toda la información referente a la presente
investigación en la obtención del consentimiento informado y que utilizaremos los datos e información que
recolectaremos para la misma; así como, cualquier resultado que se obtenga de la investigación será utilizada
EXCLUSIVAMENTE para fines académicos, de acuerdo con la descripción de confidencialidad del
protocolo.
Además, somos conscientes de las implicaciones legales de la utilización de los datos, información y
resultados recolectados o producidos por esta investigación, con cualquier otra finalidad que no sea la
estrictamente académica y sin el consentimiento informado de los pacientes participantes.
En fe y constancia de aceptación de estos términos, firmamos como investigadores del presente estudio.
Ciudad de Quito, 23 de marzo del
2021
EQUIPO DE INVESTIGACIÓN
APELLIDOS Y NOMBRES
POSICIÓN EN EL
ESTUDIO
CÉDULA IDENTIDAD
TUTORA
DONA VIDALE
MARINA ANTONIA
HIDALGO MUÑOZ
DIEGO PAUL
1708884422
ESTUDIANTE
INVESTIGADOR
1716433493
36
FIRMA
Anexo 6: Certificado de antiplagio.
37
Anexo 7: Certificado de traducción.
38