PCR - OIE

Informes de los Laboratorios de
Referencia de la OIE
Actividades del año 2010
Enfermedad (o tema) para la(el) cual
es designado laboratorio de referencia
de la OIE:
Dirección del laboratorio:
Fiebre Aftosa
Av. Fleming 1653, CP 1640, Martínez,
Provincia De Buenos Aires
REPUBLICA ARGENTINA
Tel.:
(+54-11) 4836.1995
Fax:
(+54-11) 4836.1995
Dirección de correo electrónico:
emaradei@senasa.gov.ar , emaradei@yahoo.com ,
Sitio web:
Nombre del Jefe de laboratorio
(responsable oficial):
Nombre del experto de referencia
de la OIE:
www.senasa.gov.ar
Jorge Rodriguez Toledo
Eduardo D. Maradei
Nombre del redactor de este informe
(si diferente del anterior):
Informes anuales de los Laboratorios de referencia y Centros colaboradores de la OIE, 2010
1
Fiebre aftosa
Parte I: Resumen de las actividades generales
relacionadas con la enfermedad
1.
2.
Prueba(s) usada(s) o disponible(s) en su laboratorio para la enfermedad o tema especificados
Prueba
Para
Especificidad
Total
Cultivo cellular
Aislamiento viral
Tipo
129
ELISA Sandwich indirecto
Antígeno
Tipo
280
Fijación de complemento 50%
Antígeno
Tipo
1848
Virus Neutralización (VN)
Anticuerpo
Tipo
414
ELISA Fase Liquida
Anticuerpo
Tipo
60.683
ELISA 3 ABC
Anticuerpo
Grupo
37.304
Western blott (EITB)
Anticuerpo
Grupo
1.002
Inmunodifusión en agar (IDGA)
Anticuerpo
Grupo
1.605
ELISA Tipificación monoclonal
Antígeno
Tipo
42
PCR
Ácido nucleico
Grupo 3D
20
PCR
Ácido nucleico
VP1
23
Secuenciacion Viral
Ácido nucleico
Análisis de secuencia
nucleotídica
11
Producción y distribución de reactivos de diagnóstico
Cantidad
producidad
(en ml)
Tipo de reactivo
Cantidad suministrada a
nivel nacional (en ml)
(incluso para uso propio)
Cantidad
suministrada a
otros países
(en ml)
Suero hiperinmune de referencia de cobayo O1
Campos, A24 Cruzeiro, A Arg 2001 y C3 Indaial
-
76
36
Complemento
1505
1200
–
Hemolisina
285
255
5
Suero Bovino A24 Cruzerio 30 DPV
700
200
–
Suero Bovino A Arg 2001 30 DPV
700
200
–
Suero Bovino A24 Cruzerio+ AArg 2001 30 DPV
1400
400
–
Suero Bovino O1 Campos 30DPV
1300
400
–
Suero Bovino O1 Ecuador 30DPV
650
–
–
Suero Bovino O1 Ecuador 30 DPRV
650
–
–
Suero Bovino O1 Campos 18 DPI
3200
–
–
Suero Bovino Tipo 0 18 DPI
4.950
–
–
Suspensión viral para prueba de desafío viral en
bovinos para control de vacuna antiaftosa
200
150
–
Suspensión viral para pruebas de desafío viral en
bovinos para experiencias de vaccine matching
653
550
–
Suspensión viral inactivada con BEI A87, O1
Corrientes, O1 Taiwán, O1 Ecuador-46.
5200
4.700
–
Referencias: DPV: días post vacunación; DVRV: días post revacunación; DPI: días post infección
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Informes anuales de los Laboratorios de referencia y Centros colaboradores de la OIE, 2010
Fiebre aftosa
Parte II: Actividades específicamente relacionadas con el mandato
de los Laboratorios de referencia de la OIE
3.
Armonización y normalización internacional de los métodos para las pruebas de diagnóstico o
la producción y evaluación de vacunas
Participación de Ensayos Internacionales en Anillo organizado por otros laboratorios:
Laboratorio
Organizador
Ámbito de investigación
Nivel de
participación
Estado del
Interlaboratorio
PANAFTOSA
ELISA 3ABC/EITB
Regional
Finalizado
Institute Animal
Health Pirbright (UK)
Viruneutralización bidimensional
para cálculo del valor r1.
Global
En curso
Organización de Ensayos Internacionales en anillo:
No se ha organizado ningún interlaboratorio.
Organización y/o participación de evaluaciones interlaboratorio:
No se ha participado ni organizado ninguna evaluación de interlaboratorio.
Cooperación internacional sobre los métodos de armonización de la producción y control de calidad de
las vacunas:
Se realizó el control de calidad tanto de las vacunas antiaftosa y antígenos que se utilizan en Argentina como
de las exportaciones a Bolivia, Brasil, Paraguay, Uruguay, Venezuela y Taiwán:
-
4.
Vacunas antiaftosa de uso local: 87.581.590 dosis
Vacunas antiaftosa de exportación: 57.746.475 dosis
Antígenos de exportación: 1.440 litros
Preparación y suministro de estándares internacionales de referencia para las pruebas de
diagnóstico o las vacunas
Material estándar reconocido oficialmente por la OIE
Por el momento el laboratorio no cuenta con material estándar de referencia reconocido por la OIE.
Material de Referencia suministrado:
5.
Material de referencia
Cantidad suministrada
Organismo/institución receptora
Cepa de Virus de Referencia
para producción y control de
Vacunas A Arg 2001
10 crioviales x 1 ml
Laboratorio
Productor de vacunas
Destino
Investigación y desarrollo de nuevos procedimientos de diagnóstico y control
Como se ha descripto en el informe anual a la OIE del año 2009, el Laboratorio de Referencia del SENASA
integra la Red Interinstitucional para Investigación y Desarrollo en Fiebre Aftosa (RIIDFA) de Argentina con
quien realiza trabajos en cooperación. Se sigue desarrollando el Proyecto para Áreas Estratégicas (PAE) 2007:
“Acciones coordinadas de investigación y desarrollo en fiebre aftosa para asegurar el estatus de país libre de la
enfermedad” financiado por la Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica
Este PAE-2007 está conformado por 14 proyectos de investigación, de los cuales el Laboratorio de Referencia
para Fiebre Aftosa de SENASA, participa en los siguientes proyectos:
Informes anuales de los Laboratorios de referencia y Centros colaboradores de la OIE, 2010
3
Fiebre aftosa
PID-PAE 2007-74: Desarrollo y optimización de métodos de control alternativos de calidad y eficacia de vacuna
antiaftosa.
PID-PAE 2007-87: Evaluación de la protección cruzada de cepas vacunales del VFA frente a cepas heterólogas en
bovinos
PICT-PAE 2007-67: Cuantificación de la transmisión del virus de fiebre aftosa en bovinos no vacunados y
bovinos vacunados.
PICT-PAE 2007-13: Desarrollo de métodos de PCR en tiempo real para el diagnóstico rápido del VFA.
PFDT-202: Programa de Capacitación en Bioseguridad
PICT-PAE 2007-33: Estudio de la evolución molecular del VFA utilizando el brote Argentino correspondiente a la
cepa A Argentina 2001 como modelo.
PICT-PAE 2007-73: Desarrollo y escalado de producción de reactivos de diagnóstico para la evaluación del VFA
y sus anticuerpos.
Todos estos proyectos de investigación se encuentran en diferentes etapas de desarrollo, avanzando según las
metas propuestas y con resultados todavía parciales.
6.
Recopilación, análisis y difusión de datos epizootiológicos concernientes a la lucha
internacional contra las enfermedades
Informes sobre situación sanitaria Internacional
País y Tema al que se refiere el
Informe
República del Ecuador-Muestras de
epitelio bovino provenientes de focos
de Fiebre Aftosa. Año 2010
Fecha de
notificación al país
involucrado
Lugar de la
Reunión
Escrito: Informe Preliminar
de resultados de laboratorio
Septiembre 2010
–
Escrito: Informe de los
resultados de la Prueba de
desafío viral en bovinos
Noviembre 2010
–
Presentación oral de
resultados y propuestas.
Diciembre 2010
QuitoEcuador
Tipo de Informe
Notificaciones enviadas a la OIE
Fecha de la
notificación
Diciembre
2010
4
Tipo de
Notificación
Tema de la
Notificación
Resultado
Carta dirigida al
Director
General de la
OIE
Muestras de
epitelio bovino
provenientes de
focos de Fiebre
Aftosa. Año 2010Ecuador
Virus ailados: serotipo O, topotipo euro-sudamericano.
Resultados de las pruebas de vaccine matching tanto in vitro
como in vivo indican que la cepa O1 Ecuador es diferente de
la cepa vacunal O1 Campos, las pruebas de desafío viral en
bovinos (Golden standard) indican que las vacunas en uso
con la Cepa O1 Campos no protegen adecuadamente los
animales que han recibido una o dos dosis de vacunas.
Informes anuales de los Laboratorios de referencia y Centros colaboradores de la OIE, 2010
Fiebre aftosa
Informes anuales de los Laboratorios de referencia y Centros colaboradores de la OIE, 2010
5
Fiebre aftosa
7.
8.
Suministro de asesoramiento experto a la OIE o a los Miembros de la OIE
Nombre de la Misión
Participantes
Lugar
Fecha
Auditoría Bioseguridad a Laboratorio Merial
Merial, Saude Animal
Comisión de Bioseguridad
de SENASA
Brasil
29 al 31 de
marzo
Auditoría Producción De Vacuna Antiaftosa A
Merial, Saude Animal
Expertos producción vacuna
SENASA
Brasil
8 al 10 de junio
2010
Misión Técnica Exploratoria a la República
Islámica De Pakistán-Fo.Ar (Convenio Inta-Parc)
PARC-INTA-SENASA
Pakistán
18 al 30 de
noviembre
Suministro de formación científica y técnica al personal de otros Miembros de la OIE
Se brindo un entrenamiento en servicio a un profesional del Laboratorio de Salud Animal de la República de
Ecuador, en temas de aislamiento viral, tipificación, caracterización, PCR y pruebas de vaccine matching.
- Proyecto de Hermanamiento:
“Proyecto De Hermanamiento para el Fortalecimiento del Laboratorio del Servicio Nacional de Calidad y Sanidad
Animal (SENACSA) Paraguay” en control de Vacuna Antiaftosa
Taller Inaugural: se llevó a cabo la inauguración oficial del proyecto en la ciudad de Asunción, Paraguay,
mediante un taller durante los días 29 de noviembre al 3 de diciembre de 2010.
Este proyecto continuara durante los años 2011 y 2012.
9.
Suministro de servicios para las pruebas de diagnóstico a otros Miembros de la OIE
Se recibieron once muestras de epitelio bovino provenientes de brotes de Fiebre Aftosa de la República de
Ecuador, con diagnóstico previo de Fiebre Aftosa tipo O, anticomplementario, o negativo por Fijación de
Complemento de Complemento.
Las pruebas diagnósticas realizadas a dichas muestras incluyeron aislamiento viral, tipificación (serotipo O),
caracterización por anticuerpos monoclonales, PCR, Secuenciamiento y pruebas de vaccine matching por
virusneutralización bidimensional y prueba de protección a la generalización podal en bovinos primo y
revacunados. Los resultados fueron notificados a la OIE como se describe en el punto 6 de este informe.
10. Organización de reuniones científicas internacionales en nombre de la OIE o de otros
organismos internacionales
“Alternativas prácticas para reducir el uso de animales en pruebas de control de calidad de biológicos veterinarios
en las Américas” Martínez, Provincia de Buenos aires, Argentina. 18 y 19 de febrero
11. Participación en estudios científicos internacionales colaborativos
Proyecto Coordinado de Investigación (CPR Nº16050) con la Agencia Internacional de Energía Atómica: “El
Control de la Fiebre Aftosa” Este proyecto tiene una duración de tres años, renovable anualmente y ha comenzado
en marzo del corriente año.

Participación en el Proyecto Colaborativo (UE): FP7KBBE-2008 1: 7º Programa de Marco de Trabajo:
“Desarrollo, mejoramiento y complementación en el ahorro de uso de animales en las estrategias para el control de
vacunas en regiones libres y endémicas” (FMD-DISCONVAC).
6
Informes anuales de los Laboratorios de referencia y Centros colaboradores de la OIE, 2010
Fiebre aftosa
“Development, enhancement and complementation of animal-sparing, foot-and-mouth disease vaccine-base
control strategies for free and endemic regions” (FMD-DISCONVAC).
Se participa en los siguientes paquetes de trabajo (WP):
WP2: Reducción y refinamiento de los test in vivo por métodos in vitro para control de calidad de vacunas
WP3: Determinación y mejoramiento de la protección heteróloga conferida por vacunas antiaftosas.
WP4: Desarrollo de vacunas y alternativos (antivirales) con rápida respuesta humoral y basados en métodos de
producción más seguros.
12. Publicación y difusión de información concerniente al trabajo de la OIE (incluidas una lista de
las publicaciones científicas, las actividades de publicación por internet, las presentaciones en
conferencias internacionales)

Presentaciones en conferencias y reuniones internacionales
Reunión/conferencia
Titulo de la presentacion
Fecha
Lugar
Open Session of the EuFMD
Standing Technical
Committee; The Global
Control of FMD Tools, Ideas
and Ideals.
Temporal, spatial, and
phylogenetic assessment of fullsequenced serotype A foot and
mouth disease viruses from
Argentina, 2001
Induction of early specific local
immune responses in the
respiratory tract of fmd-infected
cattle
28 de septiembre al 1ºoctubre
VienaAustria
OIE/FAO FMD Reference
Laboratories Network Annual
Meeting
OIE Reference LaboratoryDILAB-SENASA
4 al 6 de Octubre

PirbrightInglaterra
Publicaciones científicas en revistas con examen por pares.
“Confidence in indirect assessment of foot-and-mouth disease vaccine potency and vaccine matching carried out
by liquid phase ELISA and virus neutralization tests. Vaccine(28)2010 6235-6241. Blanca Robiolo, José La Torre,
Eduardo Maradei, Claudia Perez Beascoechea, Alejandro Perez, Cristina Seki, Eliana Smitsaart, Norberto
Fondevila, Eduardo Palma, Nesya Goris.

Otras comunicaciones
–
13. Inscripción de kits de diagnóstico en el Registro de la OIE
i)
¿Participó usted en grupos de expertos para validar kits candidatos a la inscripción en el
Registro de la OIE? Si la respuesta es positiva, ¿para qué kits?
No se ha participado
ii)
¿Presentó usted la candidatura de kits para inscripción en el Registro de la OIE? Si la
respuesta es positiva, ¿qué kits?
No se ha presentado ninguna candidatura para inscripción de Kits.
Informes anuales de los Laboratorios de referencia y Centros colaboradores de la OIE, 2010
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Fiebre aftosa
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