1) Consiste en suspender el crecimiento de unas cuantas células del cultivo que se quiere conservar. 2) Preservar la pureza genética del cultivo sin pérdida de ninguna de sus propiedades. ¿Que son las técnicas de conservación de microorganismos? 3) Preservar los niveles de su productividad inicial. 4) Lograr que el cultivo pueda ser trasportando y manejado con facilidad. Esto puede ser un factor esencial en la selección de un método de preservación. 5) Los métodos de conservación para microorganismos se agrupan atendiendo a los factores tiempo y características fisiológicas de la cepa en tres grandes grupos, métodos a largo plazo, métodos a corto plazo y métodos alternativos. ▪ La congelación es uno de los métodos de mantenimiento más utilizados, porque se logran los periodos de conservación más largos. En el proceso de congelación, lo más importante es controlar la velocidad de disminución de la temperatura, porque, si es muy lenta, los cristales que se forman a partir del líquido contenido en las células serán muy grandes y pueden romper la membrana celular. ▪ Congelación Ordinaria: Durante la congelación ordinaria se mantienen temperaturas de -5 a -20°C; en este intervalo, los microorganismos permanecen viables (es decir, una vez descongelados, los microorganismos conservan todas sus funciones y características) por uno o dos años. ▪ Congelación Ultrafría: El cultivo por congelar se recoge directamente por centrifugación de una suspensión de microorganismos, o se prepara raspando muestra de la suspensión en un tubo con las condiciones adecuadas para su crecimiento. Luego, el cultivo se suspende en un medio con glicerol o DMSO. La congelación ultrafría se efectúa en congeladores mecánicos, a temperaturas entre -50 y -80°C. • Congelación con nitrógeno líquido: El método de conservación por congelación más recomendado es el que utiliza nitrógeno líquido, porque se logran temperaturas de -150 a -196°C. La velocidad de congelación debe ser 1 a 2°C/min hasta alcanzar una 17 temperatura de -30°C, luego 1°C/min hasta -56°C. Después, se colocan las muestras directamente en nitrógeno líquido para acelerar el proceso de congelación. ▪ La liofilización está considerada como el método más adecuado para la preservación de microorganismos. La ventaja es que la mayoría de los organismos sobreviven al secado y el cultivo es fácilmente mantenido aún a temperatura ambiente sin pérdida significativa de viabilidad. La liofilización es apropiada para la conservación de la mayoría de las bacterias, encontrándose que las Grampositivas sobreviven mejor que las Gram-negativas cuando se las liofiliza y mantiene en condiciones similares. ▪ La criopreservación tiene como objetivo el mantenimiento funcionabilidad bajas. de la viabilidad y celular a temperaturas ▪ Es una técnica que permite mantener a muy bajas temperaturas (<-130° C), a cualquier conjunto biológico de células por tiempo indefinido, creando las condiciones necesarias para que conserven la capacidad de sobrevivir después de la descongelación ▪ Los microorganismos se mantienen activos y en crecimiento en medios adecuados a una temperatura especifica ▪ La resiembra periódica es una técnica que permite la supervivencia de los cultivos en cortos períodos de tiempo ▪ se reconoce como un método de conservación a corto plazo ▪ Se basa en transferir el cultivo del medio seco a uno fresco proporcionándole las condiciones óptimas de crecimiento ▪ Tanto el glicerol como el DMSO son crioprotectores utilizados para la conservación de células o tejidos biológicos a bajas temperaturas. ▪ La elección entre glicerol y DMSO dependerá del tipo de células o tejidos que se deseen preservar y de los protocolos específicos de conservación utilizados en el laboratorio. ▪ Es una técnica efectiva para conservar microorganismos, ya que permite una larga vida útil y una recuperación rápida y sencilla de las muestras cuando sea necesario. Es especialmente útil para microorganismos que son sensibles a la congelación convencional o que no sobreviven bien en otros métodos de conservación. ▪ Esta técnica implica eliminar el agua de la muestra, lo que evita la proliferación de microorganismos y preserva su viabilidad a largo plazo. ▪ 1. Congelación: Los microorganismos se congelan rápidamente a temperaturas muy bajas para formar hielo. ▪ 2. Deshidratación: La muestra congelada se somete a un vacío, y el hielo presente se sublima directamente del estado sólido al gaseoso, sin pasar por el estado líquido. Esto elimina el agua de la muestra sin dañar las células o estructuras biológicas. ▪ 3. Sellado y almacenamiento: Una vez que la muestra está deshidratada, se sella herméticamente para evitar la reintroducción de humedad. Luego, se almacena en condiciones secas y refrigeradas o en un congelador, lo que ayuda a mantener la viabilidad de los microorganismos a largo plazo. • Castro G, Hernández JT, Aquino C. Manual sobre conservación de microorganismos. México: Instituto Politécnico Nacional. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas. 2000:21 • Floccari M. Métodos de conservación de cultivos bacterianos. Rev Arg Microbiol. 1998; 30:42-51. • Woods EJ, Benson JD, Agca Y, Critser JK. (2004). Fundamental cryobiology of reproductive cells and tissues.criobiology. • García MD, Uruburu F.(2000). La conservación de cepas microbianas . Act SEM. • ¿Cómo se utiliza actualmente la criopreservación? (Dakota del Norte). https://www.tomorrow.bio/es/post/usos-actuales-criopreservacion
