MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General _ Catálogo 1047 ___________________________________________________ CALDO UREA USO Se emplea para la diferenciación de bacterias por medio de la utilización de la urea como única fuente de carbono. PRINCIPIO La enzima ureasa hidroliza la urea en amoníaco y anhidrido carbónico, ante la variación de pH por la alcalinización, el indicador rojo de fenol, vira de amarillo claro a ligeremente rosado o rosa mexicano. Se utiliza solamente para la detección de la actividad de la ureasa en especies del género Proteus que dan la prueba positiva después de una incubación de 8 h. Si los nutrientes suministrados por el extracto de levadura se consumen antes de que la bacteria muestre un crecimiento aceptable no podrá determinarse con exactitud su capacidad de hidrolizar la urea. Si un microorganismo es capaz de hidrolizar la urea, pero no de utilizar el amoníaco como fuente de nitrógeno, no se produce crecimiento y es posible observar un resultado falso negativo. No se recomienda para las bacterias con reacción de ureasa retardada. Sembrar el medio de cultivo con el cultivo puro de ensayo. Incubar 24 – 48 h a 35ºC. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA Extracto de levadura Fosfato monopotásico Fosfato disódico 0.10 9.10 9.50 Rojo de fenol Urea 0.01 20.0 pH 6.8 ± 0.2 PREPARACION Rehidratar 3.87 g del medio en 100 ml de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Cuando se ha disuelto, esterilizar por filtración. Distribuir en tubos de ensayo en volúmenes de 0.5 a 2 ml. Es posible usar cantidades mayores, pero las reacciones son más lentas. Se puede esterilizar en autoclave de 5 a 8 libras de presión durante 15 minutos. ES IMPORTANTE PROTEGERLO DE LA LUZ. Conservar en refrigeración de 2º a 8º C. CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO Escherichia coli Salmonella typhimurium Proteus vulgaris Proteus mirabilis Shigella flexneri Enterobacter aerogenes CEPA ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC ATCC CRECIMIENTO HIROLISIS DE UREA + + - 25922 14028 8427 12453 12022 o 9199 13048 BIBLIOGRAFIA Rustigian and Stuart Proc..Soc. Exp. Biol, and Med. 47 : 109, 1941 Stuart Van Straum Rustigian, 5 Bact. 48 : 437, 1945 Gordon and Mhin J. Gen. Microbiol. 21 : 736, 1959 Goldsmith and Latliel. Applied Microbiology 3 : 195, 1955 Norma Técnica No. 184 SSA. Diario Oficial. Agosto 1987 PRESENTACION No.Cat. 1047 1047-E 1047-A Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g Deshidratado 450 g No. Cat. 1047-B 1047-TC 1047-TCP Deshidratado 100 g Preparado tubo 13x100 mm individual Preparado paquete con 10 tubos DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3