MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General _ Catálogo 1053 ___________________________________________________ MEDIO MR-VP USO Para la diferenciación bioquímica de bacterias del grupo Escherichia-Enterobacter. PRINCIPIO Algunas bacterias utilizan glucosa con formación de una gran cantidad de ácido descendiendo el pH del medio a menos de 4.4, otras bacterias producen menos ácido modificándolo en menor medida.. Esta variación puede ponerse de manifiesto a través del Rojo de metilo, que presenta color amarillo por arriba de pH 5.0 y sólo presenta color rojo cuando el pH es menor de 4.4. A partir de la glucosa, numerosos microorganismos forman acetilmetil-carbinol, 2,3-butandiol o diacetilo. La demostración de estos productos metabólicos se pone de manifiesto con reactivo de sulfato de cobre. Inocular 2 tubos de Caldo MR-VP con el cultivo puro objeto de investigación. Incubar hasta 4 días a 35ºC. Posteriormente realizar los siguientes ensayos: Prueba de Rojo de Metilo: A 5 ml de medio de cultivo incubado 4 días a 35ºC, agregar 5 gotas de solución indicadora (disolver 0.1 g de rojo de metilo en 300 ml de alcohol al 95% y aforar a 500 ml con agua destilada). Reacción positiva: Color rojo bien definido. Reacción negativa: Color amarillo. Prueba de Voges-Proskauer: A 5 ml de cultivo incubado 24 a 48 h, agregar 5 ml de solución de sulfato de cobre y amonio según Leifson (disolver 1 g de sulfato de cobre en 40 ml de amoníaco concentrado y agregar 690 ml de hidróxido de potasio al 10%). Reacción positiva: Aparición en 20 minutos de un color rojo indica la presencia de acetilmetil-carbinol. Reacción negativa: Ausencia de color. Dextrosa Fosfato dipotásico Peptona especial FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA 5.0 5.0 7.0 pH 6.9 ± 0.2 PREPARACION Rehidratar 17 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Distribuir en tubos de ensayo. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos. Conservar en refrigeración de 2º a 8ºC. CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO Escherichia coli Enterobacter aerogenes Klebsiella pneumoniae Serratia marcescens Salmonella typhimurium CEPA ATCC 25922 ATCC 13048 ATCC 13883 ATCC 14756 ATCC 14080 RESULTADO Rojo de metilo Voges-Proskauer + + + + + - DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3 MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General _ Catálogo 1053 ___________________________________________________ BIBLIOGRAFIA Clark and Lubs, J. Inf. Dis. 17 : 160, 1955 Edwards and Ewing. Identif. of Enterobacteriaceae. Burgess Publ. Co. Minneapolis, Minn., 1962 Norma Técnica No. 168 SSA. Diario Oficial. Julio 1987 PRESENTACION No. Cat. 1053 1053-E 1053-A Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g Deshidratado 450 g No. Cat. 1053-B 1053-TC 1053-TCP Deshidratado 100 g Preparado tubo 13x100 mm individual Preparado paquete con 10 tubos DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3