B0214805 B0214806 Ureasa Medio para la Prueba Uso Medio utilizado para la identificación de microorganismos en base a la actividad ureásica. Es particularmente útil para diferenciar Proteus spp. de otros miembros de la familia Enterobacteriaceae. Fundamento Este medio de cultivo, formulado por Rustigian y Stuart, presenta bajo contenido de nutrientes y alta capacidad buffer. El extracto de levadura es la única fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y cofactores, y aporta los nutrientes esenciales para el desarrollo bacteriano. Las sales de fosfatos constituyen el sistema buffer, el rojo de fenol es el indicador de pH y la urea es el sustrato de la enzima ureasa. Aquellas bacterias que poseen la enzima ureasa, pueden utilizar el nitrogeno proveniente de la urea, la hidrolizan, liberando amoníaco y dióxido de carbono. Estos productos metabólicos alcalinizan el medio, haciendo virar el indicador rojo fenol del amarillo al rojo. Se recomienda su uso para diferenciar Proteus spp. de otros géneros que hidrolizan lentamente o no hidrolizan la urea. Para organismos que hidrolizan la urea lentamente, es recomendable usar el medio de Christensen (Christensen Urea Agar Base ). Contenido y composición Código B0214805: envase x 100 g. Código B0214806: envase x 500 g. FÓRMULA (en gramos por litro) Instrucciones Suspender 3, 87 g del polvo en 100 ml de agua purificada. Mezclar y disolver sin calentar. Esterilizar mediante filtración por membrana. Distribuir en tubos estériles el volumen apropiado. Características del producto Medio de cultivo deshidratado: color amarillo anaranjado, apelmazado, libre deslizamiento. Medio de cultivo preparado: color amarillo. Almacenamiento Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC. Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC. Procedimiento Siembra Sembrar un inóculo denso a partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio. Incubación En aerobiosis, a 35-37 ºC durante 24 horas. Para aquellos microorganismos que hidrolizan lentamente la urea, incubar hasta 72 horas. Interpretación de los resultados Microorganismos que hidrolizan la urea: el medio de cultivo es de color rosado-rojizo. Microorganismos que no hidrolizan la urea: el medio de cultivo permanece de color amarillo. Extracto de levadura............................................................................................ 0.1. Urea................................................................................................................................................20.0. Fosfato monopotásico.......................................................................................... 9.1. Fosfato disódico............................................................................................................. 9.5. Rojo fenol...........................................................................................................................0.01. pH final: 6.8 ± 0.2 HOJA 1 DE 2 Ureasa Medio para la prueba Control de Calidad Microorganismos Hidrólisis de Urea Color del medio + Rojo rosado + lento Rojo rosado - Amarillo - Amarillo Proteus mirabilis ATCC 43071 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Escherichia coli ATCC 25922 Salmonella typhimurium ATCC 14028 RESULTADO Medio sin inocular CONTROL DE ESTERILIDAD Sin cambios Limitaciones -La gran capacidad buffer de este medio de cultivo, puede enmascarar la actividad ureásica en bacterias que hidrolizan lentamente la urea (especies de Klebsiella, Citrobacter y Enterobacter) llevando así a resultados falsos negativos. -No calentar o sobrecalentar el medio de cultivo porque la urea se descompone fácilmente. Materiales necesarios no provistos Equipos y material de laboratorio, microorganismos para control de calidad, reactivos y medios de cultivo adicionales según requerimiento. sivo. - No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado. - No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento. - Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto. - Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y manipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad establecidas por el laboratorio. - Las características del producto pueden alterarse si no se conserva apropiadamente. - Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del mismo según reglamentaciones vigentes. Referencias - Christensen. 1946. J. Bacteriol. 52:461. - MacFaddin. 1985. Media for isolation-cultivation-identificationmaintenance of medical bacteria, volume 1. Williams & Wilkins, Baltimore, Md. - Murray P.R., Baron, Pfaller, Tenover and Yolken. 1999. Manual of clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. - MacFaddin. 2000. Biochemical tests for identification of medical bacteria, 3rd ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, Md. Indicaciones al consumidor Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento. Conservar el producto según las indicaciones del rótulo. 02/2010 - REV .00 Precauciones - Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclu- SÍMBOLOS UTILIZADOS DIAGNÓSTICO IN VITRO CÓDIGO Nº ELABORADOR LABORATORIOS BRITANIA S.A. LOS PATOS 2175 (C1283ABI) CABA - ARGENTINA TEL/FAX 54 11 4306 0041 ESTÉRIL Nº DE DETERMINACIÓNES LOTE Nº FECHA DE VENCIMIENTO LÍMITE DE TEMPERATURA INSTRUCCIONES DE USO HOJA 2 DE 2