Correlación entre la prueba enzimática BANA y la profundidad de

Resumen: M-074
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2006
Correlación entre la prueba enzimática BANA y la profundidad de sondaje
en la práctica periodontal clínica.
Acuña, Miguel J. - Monzón, Javier E. - Caramello, Carlos R. - Díez, Ricardo
Facultad de Odontología - UNNE.
Avenida Libertad 5450. 3400 Corrientes. Argentina.
odontoacuna@gmail.com
ANTECEDENTES
El sondeo Periodontal es uno de los métodos más usados en la periodontología clínica para valorar clínicamente la
destrucción del tejido conectivo en la periodontítis. El aumento de la profundidad al sondeo y la perdida de inserción
clínica son patognomónicos de la enfermedad Periodontal.1, 2
Actualmente se cuentan con procedimientos modernos como los métodos enzimáticos para la identificación bacteriana
(prueba de hidrólisis B.A.N.A.). estos fueron desarrollados a partir del perfil enzimático de los microorganismos
anaerobios presentes en el proceso de actividad de la enfermedad periodontal.
Estos microorganismos para poder utilizar proteínas y péptidos como fuentes de energía forman enzimas capaces de
degradarlos. Algunos de ellos poseen una enzima semejante a la tripsina capaz de hidrolizar sustratos que tengan
arginina ligada a un cromóforo.
Las bacterias anaerobias que liberan una cantidad significante de enzimas semejantes a tripsina son las bacterias
Phorphyromonas gingivalis, Bacteroides Forcytus y Treponema dentícola. Cuando las muestras de placa subgingival
contienen estos patógenos, al ser puesta en contacto e incubada con el sustrato sintético N-&-bencil-DL-arginina-2naftilamida (B.A.N.A), ligado a un cromóforo ocurre una reacción coloreada que puede ser fácilmente identificable.
La prueba de hidrólisis B.A.N.A.; consiste en aprovechar la síntesis de una enzima tripsinoide producida por tres
patógenos posibles: Phorphyromonas gingivalis, Bacteroides Forcytus y Treponema dentícola. Esta enzima no solo
degrada las proteínas de la matriz extracelular del huésped, sino que también es capaz de hidrolizar el péptido sintético
N-&-bencil-DL-arginina-2-naftilamida, o B.A.N.A. Este péptido es incoloro, pero su hidrólisis libera el cromóforo,
beta-naftilamida. El mismo posee dos fases, una líquida y una sólida o tarjeta radioactiva Perioscan.
El test comenzó a ser utilizado a partir de 1982 cuando se usaban reactivos en forma líquida. Mas allá que el test fuera
de bajo costo, los resultados demandaban aproximadamente 18 horas para su lectura.
En 1989 se empezó a utilizar el test BANA en forma sólida. Este era más práctico y sus resultados se obtenían en 15
minutos, denominándose Tarjeta Radioactiva Perioscan. 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10
El objetivo de este trabajo es relacionar a la prueba enzimática BANA con la profundidad de sondaje en la práctica
periodontal clínica.
MATERIALES Y METODOS
Para este estudio se trabajo con pacientes que acudieron al sector de Clínicas, Servicio de Urgencias y Derivación de
Pacientes de la Facultad de Odontología dependiente de la Universidad Nacional del Nordeste. Se realizó el muestreo
en un total de 21 pacientes, cuyo criterio de inclusión fue tener un rango entre 20 (veinte) a 70 (setenta) años de edad y
de ambos sexos, que los mismos no hayan recibido tratamiento periodontal anterior, no hayan utilizado antibióticos o
cualquier otra medicación durante los seis meses anteriores a la consulta y que no presentaran compromiso sistémico o
tratamiento con aparatología fija ortodóntica.
Se confeccionó la historia clínica médica y dental y un examen periodontal a cada uno de los pacientes. Se evaluaron
todas las piezas dentarias presentes en boca y se tomo una pieza dentaria determinada en cada uno de los pacientes,
evaluando la profundidad del surco gingival en las cuatro superficies v, p/l, m y d de cada una de las piezas dentarias
elegidas utilizando el sondeo Periodontal como método de diagnóstico convencional, y la prueba hidrólisis BANA
como método de diagnostico no convencional.
El criterio clínico para la determinación del área para la colección del material para la hidrólisis B.A.N.A. fue la
superficie con la bolsa más profunda de cada diente.
Luego se procedió a la aplicación del test BANA con las tarjetas reactivas suministradas por Ora-tec Corp. (E.E.U.U.).
a cada uno de los pacientes.
Pasos:
Toma de muestras:
1) Se tomó una tira reactiva del Test BANA anotando la fecha y el diente de donde se efectuaría la toma de la
muestra de la placa bacteriana.
2) Se efectuó la remoción de la placa supragingival (en el caso que tuviera) previa a la toma de la muestra
definitiva. Posteriormente se extrajeron muestras de placa subgingival en los sitios de mayor profundidad de
las bolsas periodontales con curetas Gracey 5/6.
3) Se colocó la muestra de placa subgingival extraída en la parte inferior de la tira del Test BANA.
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Incubación de las muestras:
1) Se humedeció con agua destilada la parte superior del Test usando una torunda de algodón estéril.
2) Se pusieron en contacto ambos extremos de la tira reactiva colocándose en la incubadora del BANA.
Las muestras de placa bacteriana se incubaron a 55° C durante 15 minutos. Correspondiente al nivel Nº 3 de la
incubadora.
3) La incubadora comienza a funcionar cuando la luz se enciende y finaliza cuando esta se apaga. Esto determina
cuando empieza y termina la incubación de la tira.
4) Al finalizar se separaron los extremos de las tiras y se procedió a la lectura de las mismas.
Los resultados fueron leídos usando la matriz reactiva según W. Löesche.11
Positivo: Cambio de color al azul fuerte. Ligero Positivo: cambio de color azul débil. Negativo: Sin cambio
de color.
A mayor intensidad del color cuando la muestra es positiva, mayor será la cantidad de colonias bacterianas
presentes en la placa bacteriana muestreada.
DISCUSION DE RESULTADOS
En un total de 42 sitios examinados los sondajes periodontales demostraron un predominio de bolsas de 3 milímetros de
profundidad. 32 sitios correspondieron a profundidades de 3 milímetros, y 10 sitios correspondieron a profundidades de
2 milímetros.
La prueba hidrólisis BANA (método riesgo periodontal) dio como resultado en 32 sitios examinados con una
profundidad de sondaje de 3 milímetros una reacción del tipo (débil positivo), y 10 sitios examinados con una
profundidad de sondaje de 2 milímetros una reacción del tipo (negativa).
Mediante los resultados obtenidos pudimos establecer que a profundidades de 3 mms. Presentan una reacción BANA
del tipo de débil positivo constituyendo de esta manera un riesgo moderado de enfermedad Periodontal.12
La reacción débil positivo de la prueba enzimática BANA se manifiesta como un color azul pálido sobre un área muy
pequeña o sobre el área total de contacto con la placa. El significado de esta intensidad de color en un paciente libre de
síntomas clínicos de enfermedad Periodontal, indica la presencia de bacterias patógenas en un rango de 100.000 a
500.000 anaerobios en el sitio de la toma de la muestra, esto determina que el paciente presenta un riesgo mediano de
enfermedad Periodontal.
Los resultados obtenidos de la relación de la prueba enzimática BANA y el sondeo Periodontal demuestra el valor que
representa la inclusión de las Técnicas de Diagnósticos no Convencionales como la prueba de hidrólisis B.A.N.A. (N&-bencil-DL-arginina-2-naftilamida) al examen clínico Periodontal debido a la necesidad que se le presenta al
Odontólogo para realizar un diagnostico precoz de esta enfermedad, causa principal de la perdida de piezas dentarias,
las técnicas de diagnóstico tradicionales o convencionales como el sondeo Periodontal no dan una información eficaz
acerca de la misma si no mas bien objetiva, y consecuentemente se hace muy difícil diagnosticar clínicamente su
actividad y realizar un tratamiento apropiado en el momento oportuno.13
CONCLUSIONES
En base a los resultados expuestos, consideramos la prueba enzimática BANA como una herramienta efectiva en el
diagnóstico precoz de enfermedades periodontales y creemos conveniente su aplicación en la práctica clínica
periodontal.
BIBLIOGRAFIA
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12) Grisi MFM, Novaes AB, Ito IY, Salvador SL. (1998). Relationship between clinical probing depth and
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13) Acuña, Miguel; Monzón, Javier; Caramello, Carlos R.; Diez, Ricardo. (2006). Estudio comparativo entre la
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